应用免疫磁珠分离成人骨髓中STRO-1阳性细胞

目的:利用免疫磁珠分离成人骨髓中STRO-1 阳性细胞,获得同质性骨髓基质干细胞。方法:实验于2004-06/2005-06在东南大学修复重建外科研究所实验室完成。采集正常自愿献髓者骨髓,淋巴细胞分离液体离心纯化分离后利用免疫磁珠分离出STRO-1 细胞,研究其生长曲线、体外扩增能力、集落形成能力、细胞表型、细胞周期、成骨能力。结果:①利用免疫磁珠可从成人骨髓中获取STRO-1 细胞。经体外培养发现STRO-1 细胞贴壁生长,相差显微镜下STRO-1 细胞呈成纤维细胞梭形外观。②生长曲线可分为细胞生长延滞期、对数生长期及稳定期,细胞倍增时间为57h。③STRO-1 细胞可以在体外扩增12周左右,形成的成纤维细胞集落数、处于细胞分裂期的细胞数、扩增倍数均低于传统分离方法得到的骨髓基质干细胞。④经流式细胞仪检测,STRO-1 细胞稳定地表达CD29,CD44,CD105,不表达造血细胞系的表面标记CD14,CD34,CD45,HLA-DR。⑤经成骨培养发现STRO-1 的骨髓基质干细胞具有很强的成骨分化能力。结论:利用免疫磁珠能够从成人骨髓中快速分离、纯化骨髓基质干细胞,且具有高效、灵敏、对骨髓基质干细胞活性影响小的优点。     

免疫磁珠法分离纯化骨髓间充质干细胞及向神经细胞定向分化

目的:利用免疫磁珠法分离成人骨髓神经生长因子受体阳性细胞,获得同质性骨髓间充质干细胞,并向神经细胞诱导分化。方法:实验于2005-01/08在吉林大学第一医院中心实验室完成。①骨髓来源于正常成人献髓者,由解放军三零七医院骨髓库提供。采用Percoll密度梯度离心法分离收集骨髓单个核细胞,分别进行常规贴壁分离及免疫磁珠分离。②常规贴壁分离法是将2×107骨髓单个核细胞接种于添加骨髓间充质干细胞培养液的25cm2培养瓶中孵育,48h后除去未贴壁细胞,更换新鲜培养液,待细胞生长至90%融合时消化传代。③免疫磁珠分离法是将骨髓单个核细胞先后与鼠抗人神经生长因子受体单克隆抗体、羊抗鼠IgG免疫磁珠4℃反应15min,然后将细胞放入分离系统的细胞分离柱内,经免疫磁珠标记的骨髓单个核细胞(神经生长因子受体阳性部分)由于磁场作用滞留于分离柱中。移走磁场后,冲洗分离柱即得到神经生长因子受体阳性细胞。④分别检测神经生长因子受体阳性细胞和常规贴壁培养所获骨髓间充质干细胞体外扩增和集落形成能力,分析其细胞表型和细胞周期,并将骨髓间充质干细胞向神经细胞诱导分化。结果:①平均在每百个骨髓单个核细胞中有(2.6±1.2)个神经生长因子受体阳性细胞存在。经过免疫磁珠分离获得的神经生长因子受体阳性细胞数占骨髓单个核细胞总数的(0.57±0.31)%,纯度为(90.6±5.1)%。②神经生长因子受体阳性细胞培养4周后,神经生长因子受体、CD34、HLA-DR、CD133、CD105阳性率分别为(35.5±5.9)%,(2.3±1.7)%,(2.6±2.3)%,(1.4±1.1)%,(89.8±12.8)%。③经免疫磁珠分离获得的1×106个神经生长因子受体阳性细胞平均可以形成3100个集落,而接种同样数目的骨髓单个核细胞平均只能形成56个成纤维细胞集落。④神经生长因子受体阳性细胞可以在体外扩增10周,其扩增倍数较常规贴壁法纯化骨髓间充质干细胞平均高出2～3个数量级。⑤培养4周后,免疫磁珠法分离的骨髓间充质干细胞中处于分裂期的细胞比例高于常规贴壁法(12.37%,9.71%,P<0.05)。⑥诱导后5h,约60%细胞变成双极形、多极形和锥形,出现类似神经元细胞的形态,并可见多数细胞相互交织成网络结构。⑦经诱导分化后的骨髓间充质干细胞微管蛋白生物素单克隆抗体TuJ-1表达明显增强,无神经胶质纤维酸性蛋白表达。结论:①利用免疫磁珠分离骨髓神经生长因子受体阳性细胞可以获得同质性原始骨髓间充质干细胞。②免疫磁珠分离的神经生长因子受体阳性细胞较常规贴壁分离获得的骨髓间充质干细胞具备更强的增殖能力和成神经分化潜能。     

免疫磁珠法分离成人骨髓来源神经干细胞的生物学特征

背景:骨髓间充质干细胞在一定条件下可分化成为多种结缔组织细胞,也可分化成神经系统的神经元和神经胶质细胞.目的:观察采用免疫磁珠法分离成人骨髓来源神经干细胞的生物学特征.设计、时间及地点:以患者自身骨髓组织为观察对象的实验,于2003-03/2007-06在菏泽市立医院检验科完成.材料:骨髓组织来自菏泽市立医院神经内科住院的中风、老年性痴呆、帕金森病、脑缺血等神经系统疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特异性抗体与骨髓组织中神经干细胞抗原相结合,在磁场作用下使结合磁珠与其他细胞分离,从而获得神经干细胞,再将所分离的纯化神经干细胞接种到含体积分数为0.20胎牛血清的Eagles MEM培养液,再在培养基中加入碱性成纤维因子和表皮生长因子进行原代培养.主要观察指标:采用免疫组织化学染色与免疫荧光染色鉴定细胞,并采用流式细胞术测定细胞DNA含量.结果:在相差显微镜下观察培养的神经干细胞,细胞形态丰满,胞核及核仁清晰可见,神经突起粗大,网络稠密.免疫组织化学和免疫荧光染色显示,细胞神经元特异性烯醇化酶、神经蛋白、胶质纤维酸性蛋白酶、微管相关蛋白为阳性.传代后的细胞用流式细胞术测定DNA含量为正常二倍体,无诱发突变.结论:利用免疫磁珠表面的特异性抗体与骨髓组织中神经干细胞抗原相结合方法从成人骨髓分离出神经干细胞,在神经化学和形态上已具备神经细胞的特征.     

免疫磁珠法分离成人骨髓来源神经千细胞的生物学特征

背景：骨髓间充质干细胞在一定条件下可分化成为多种结缔组织细胞，也可分化成神经系统的神经元和神经胶质细胞。 目的：观察采用免疫磁珠法分离成人骨髓来源神经干细胞的生物学特征。 设计、时间及地点：以患者自身骨髓组织为观察对象的实验，于2003—03／2007-06在菏泽市立医院检验科完成。 材料：骨髓组织来自菏泽市立医院神经内科住院的中风、老年性痴呆、帕金森病、脑缺血等神经系统疾病患者。 方法：利用免疫磁珠表面的特异性抗体与骨髓组织中神经干细胞抗原相结合，在磁场作用下使结合磁珠与其他细胞分离，从而获得神经干细胞，再将所分离的纯化神经干细胞接种到含体积分数为0．20胎牛血清的Eagles MEM培养液，再在培养基中加入碱性成纤维因子和表皮生长因子进行原代培养。 主要观察指标：采用免疫组织化学染色与免疫荧光染色鉴定细胞，并采用流式细胞术测定细胞DNA含量。 结果：在相差显微镜下观察培养的神经干细胞，细胞形态丰满，胞核及核仁清晰可见，神经突起粗大，网络稠密。免疫组织化学和免疫荧光染色显示，细胞神经元特异性烯醇化酶、神经蛋白、胶质纤维酸性蛋白酶、微管相关蛋白为阳性。传代后的细胞用流式细胞术测定DNA含量为正常二倍体，无诱发突变。 结论：利用免疫磁珠表面的特异性抗体与骨髓组织中神经干细胞抗原相结合方法从成人骨髓分离出神经干细胞，在神经化学和形态上已具备神经细胞的特征。     

免疫磁珠分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kil^＋lin^-

目的:利用免疫磁性细胞分选系统分离纯化骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-。方法:实验于2006-07/08在南方医科大学实验动物中心完成。6～8周龄的SPF级纯系BALB/C雄性小鼠10只,体质量18～20g。收集小鼠股骨骨髓细胞,利用免疫磁性细胞分选系统,通过两步法分选纯化c-Kit lin-:将获取的lin-细胞悬液8℃条件下1500r/min离心10min,弃上清,按80μL/107加入Buffer重悬细胞。按20μL/107加生物素抗体磁珠,混匀,4℃冰箱孵育15min,按1mL/107加入Buffer洗细胞1次,8℃条件下1500r/min离心10min,弃上清,按500μL/108加入Buffer重悬细胞。Buffer500μL润MS柱,悬液过柱后,Buffer500μL/次洗柱3次,柱子脱离磁场,加1mLBuffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit lin-细胞,收集到c-kit lin-细胞,细胞计数。取2.0×106个细胞分成10等份,流式细胞仪分析c-Kit lin-细胞纯度,计算回收率,评估纯化效率,苔盼兰染色检测纯化前后的细胞活力。计算活细胞的百分率。细胞纯度和细胞回收率的计算:细胞纯度=分离产物中的阳性细胞数/分离细胞的总细胞数×100%,细胞回收率=分离产物中的阳性细胞数/起始标本阳性细胞总数×100%。结果:10只小鼠均进入结果分析。利用免疫磁性细胞分选系统分选出的骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-细胞纯度和回收率分别为(77.98±2.34)%,75.40%,纯化前后细胞活力不受影响。结论:免疫磁性细胞分选系统能有效分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-,纯度和回收率高,且不影响细胞活力。     

骨髓间充质干细胞体外分离培养及其生物学特性的初步研究

目的建立成人骨髓间充质干细胞（MSCs）体外培养和扩增的方法，探讨其生物学特性，建立稳定的MSCs体外培养扩增体系。方法取正常成人骨髓5ml，用Pereoll分离液（密度1．073g／ml）经密度梯度离心法分离得到单个核细胞，以2×10^5个细胞／cm^2的密度接种于含10％新生牛血清的LG-DMEM培养液。经培养、扩增后，应用倒置相差显微镜观察其形态，MTT法测定生长曲线，流式细胞仪行细胞表面抗原及细胞周期的检测，并在透射电镜下观察其超微结构。结果培养扩增获取的成人骨髓MSCs形态均一，为梭形或纺锤形的成纤维细胞样外观，生长曲线示其增殖能力强。流式细胞仪检测显示有90％以上的细胞处于G0／G1期，表面标记物中CD44表达阳性，而造血细胞表面标志CD3、CD4、CD7、CD13、CD14、CD15、CD19、CD22、CD33、CD34、CD45和与移植排斥发生密切相关的HLA—DR表迭阴性。超微结构显示细胞内有丰富的粗面内质网，细胞器发达。结论所建立的分离和培养方法可获取骨髓粘附细胞中一组独特的细胞群，具有MSCs的生物学特性，可作为组织工程中的种子细胞。     

非诱导条件下犬骨髓基质干细胞的生物特性

背景：种子细胞的研究是组织工程众多研究领域中最重要的基础环节，骨髓基质干细胞以其诸多优点。成为理想的骨组织工程的种子细胞。 目的：观察骨髓基质干细胞在体外培养的生长特点和非诱导条件下的成骨特性。 设计：单一样本实验。单位：福建医科大学附属口腔医院种植中心。 材料：实验于2003-05／12在福建医科大学附属口腔医院中心实验室完成。骨髓基质干细胞来自4只1岁龄的杂交犬的原代～第3代传代细胞。 方法：无菌条件下在杂交犬两侧股骨大转子部做骨髓穿刺，抽取5mL肝素抗凝的骨髓，加入到含有50mL含双抗Dulbeeco’s改良的Eagle＇s培养液的离心管中分离单个核细胞，进行首次提纯获取骨髓基质干细胞单细胞，置培养箱中培养传代，培养48h后，吸除培养液，以后每3天换液1次。继续传代。采用倒置相差显微镜及苏木精一伊红染色观察骨髓基质干细胞形态；每天进行细胞计数，测定倍增时间，绘生长曲线；用钙钴法检测碱性磷酸酶；用茜素红法染色观察钙化结节生长情况。 主要观察指标：①犬骨髓基质干细胞光镜结构。②犬骨髓基质干细胞生长曲线。③成骨分化指标碱性磷酸酶及钙化结节的观察。 结果：①形态学观察表明，骨髓基质干细胞贴壁细胞呈集落生长。有成纤维样细胞外观，未加入成骨诱导剂，细胞形态发生变化。②碱性磷酸酶表达原代细胞呈强阳性，第1代细胞呈阳性，第2，3代细胞呈弱阳性。③钙沉积出现，原代细胞染色强于传代细胞。 结论：①骨髓基质干细胞在体外培养能大量扩增，具有自然向成骨细胞分化的能力，是骨组织工程理想的种子细胞。②3代内扩增的骨髓基质干细胞有成骨活性，但原代细胞传代活性优于传代后细胞。     

美国科学家利用成人骨髓干细胞构建组织工程血管

美国布法罗大学工程和应用科学学院成功用成人骨髓干细胞完成构建组织工程血管，有望成为冠状动脉搭桥手术或其他血管移植手术的血管来源。相关研究报道发表在新出版的《心血管研究》杂志上。该研究展示了利用患者干细胞最终培养出组织工程血管的潜力，这将有望取代现在常用的利用患者静脉移植方式进行冠状动脉搭桥手术。     

免疫磁珠分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit~+lin~-

目的：利用免疫磁性细胞分选系统分离纯化骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit^＋lin^-。方法：实验于2006—07／08在南方医科大学实验动物中心完成。6～8周龄的SPF级纯系BALB，C雄性小鼠10只，体质量18～20g。收集小鼠股骨骨髓细胞，利用免疫磁性细胞分选系统，通过两步法分选纯化c-Kit^＋lin^-：将获取的lin^-细胞悬液8℃条件下1500r/min离心10min，弃上清，按80μL/10^7加入Buffer重悬细胞。按20μL/10^7加生物素抗体磁珠，混匀，4℃冰箱孵育15min，按1 mL/10^7加入Buffer洗细胞1次，8℃条件下1500r/min离心10min，弃上清，按500μL/10^8加入Buffer重悬细胞。Buffer 500μL润MS柱，悬液过柱后，Buffer 500μL/次洗柱3次，柱子脱离磁场，加1mL Buffer，用配套柱塞推出柱中的c-Kit^＋lin^-细胞，收集到c-kit^＋lin-细胞，细胞计数。取2．0x108个细胞分成10等份，流式细胞仪分析c-Kit^＋lin^-细胞纯度，计算回收率，评估纯化效率，苔盼兰染色检测纯化前后的细胞活力。计算活细胞的百分率。细胞纯度和细胞回收率的计算：细胞纯度：分离产物中的阳性细胞数，分离细胞的总细胞数×100％，细胞回收率：分离产物中的阳性细胞数，起始标本阳性细胞总数×100％。结果：10只小鼠均进入结果分析。利用免疫磁性细胞分选系统分选出的骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit^＋lin^-细胞纯度和回收率分别为（77．98±2．34）％，75．40％，纯化前后细胞活力不受影响。结论：免疫磁性细胞分选系统能有效分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit^＋lin^-，纯度和回收率高，且不影响细胞活力.     

Design of large-scale separation systems for positive and negative immunomagnetic selection of cells using superparamagnetic microspheres.

The ex vivo selective separation of cells from bone marrow and peripheral blood stem cell preparations is increasingly used as an adjunct to hematopoietic rescue following high-dose therapy for refractory cancer. Immunomagnetic separation, in which the target cells are identified using monoclonal antibodies and separated by attachment to paramagnetic particles and passage through a magnetic field, is widely used for both negative and positive cell selection. In this paper, we discuss the factors that should be considered when developing a magnetic separation device for purging tumor cells and selecting stem cells from bone marrow using superparamagnetic microspheres.     

Multilineage potential of STRO-1+ rat dental pulp cells in vitro

The aim of the current study was to determine whether STRO-1 selection is an effective approach for purifying rat dental pulp stem cells, and especially whether such selection is beneficial on the multilineage differentiation capacity, i.e. whether selection will account for a higher rate of differentiation or lesser variability. In this study, two cell populations (STRO-1(+) and non-sorted cells) were cultured under conditions promoting neurogenic, adipogenic, myogenic and chondrogenic differentiation. Results of light microscopy, histochemistry, and immunohistochemistry showed that STRO-1(+) cells were capable of advancing into all four differentiation pathways under the influence of inductive media. Quantitative PCR and statistical analysis on specific differentiation markers confirmed that there were significant upregulations in STRO-1(+) cells compared to the other populations, during induction culture. On the basis of our results, we concluded that: (a) rat STRO-1(+) dental pulp stem cells are capable of differentiating towards multilineage cell types, including neural cells, adipocytes, myocytes and chondrocytes; (b) the STRO-1(+) population has a more defined multilineage potential compared to non-sorted cells, probably because of its more homogeneous nature. .     

The odontogenic potential of STRO-1 sorted rat dental pulp stem cells in vitro

The presence of heterogeneous cell populations in dental pulp may count for the considerable variation in the outcome of in vitro and in vivo experiments. Here, we intended to determine whether a minor cell sub-population of high proliferation and odontogenic potential existed among a larger compartment of perhaps more committed progenitors. In this study, the STRO-1 antigen, defining a mesenchymal stem cell or progenitor subpopulation, was used for separating rat dental pulp cells with fluorescence-activated cell sorting (FACS). Subsequently, the STRO-1 positive cells were tested for their ability to differentiate towards an odontoblast-like phenotype. Three cell populations (STRO-1 positive, STRO-1 negative, and non-sorted cells) were cultured in odontogenic medium containing dexamethasone and beta-glycerophosphate. Cultures were analyzed by light- and scanning electron microscopy (SEM), and assessed for proliferation, ALP activity, and calcium content. Results showed that the STRO-1 positive cell population was able to differentiate into the odontoblast phenotype, similar to the non-sorted population. The negative cells however showed a fibroblast-like phenotype. SEM and real-time PCR confirmed such results. In conclusion, the STRO-1 selection proved applicable for rat-derived material, to obtain a cell population which is more homogeneous. This positive cell fraction was capable of differentiating into the odontogenic pathway, whereas the negative fraction was not. However, the effect was not always advantageous, when compared to non-sorted cells.     

成体骨髓细胞向神经细胞转化的特征

体外诱导骨髓基质干细胞分化为神经细胞已经成为神经科学研究的热点之一.目前在某些实验条件下,组织特异性的干细胞在组织和器官中能衍生为各种细胞谱系.已经有撤道称骨髓基质细胞能衍生为骨骼细胞、胃贲门细胞、椭圆形肝细胞、神经胶质细胞和神经元样细胞.因此,通过资料研究分析出生后的骨髓细胞被诱导增殖进而分化为神经胶质细胞和神经元细胞,对其转化的特征作出探讨.     

应用免疫磁珠负选法分离与纯化小鼠骨髓间充质干细胞

目的：拟建立体外分离纯化小鼠骨髓间充质干细胞的新方法，从而得到高纯度的骨髓间充质干细胞。 方法：实验于2002—09／2005-03在解放军第二军医大学附属长海医院烧伤科实验室完成。①选取清洁级7d龄FVB／N小鼠15只，利用免疫磁珠法（CD11b负选）从小鼠的骨髓细胞中分离纯化骨髓间充质干细胞：颈椎脱臼处死后无菌条件下取出小鼠双侧股骨，消毒离断后去除上清及脂肪层，吹打成单细胞悬液后接种于培养基中。贴壁细胞达到90％左右融合后，用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸进行消化，将悬浮的细胞与CD11b抗体避光反应2min。移入已预置入磁场的LD管，不加压通过，收集管中的细胞成分，用培养基重悬并吹打成单细胞悬液后以1×10^9L^-1-2×10^9L^-1的密度接种于培养基中培养。②培养传代后流式细胞仪检测细胞周期、表面标记物，并利用诱导剂观察其定向诱导为脂肪细胞和成骨细胞的能力。 结果：①细胞形态学观察：免疫磁珠法获得的细胞几乎无圆形细胞夹杂。贴壁率高。形态单一呈典型成纤维样、漩涡状生长。体外增殖迅速。②细胞生长曲线绘制情况：细胞贴壁后一两天为细胞生长缓滞期，之后进入对数增长期，六七天后进入平台期。③细胞周期分析结果：G0／G1期细胞约86％，S＋G2＋M期约14％。④细胞袭面标记物检测结果：第3代骨髓间充质干细胞3％表达CD45，68．7％表达CD29，3％表达CD34，89．6％表达CD105。⑤骨髓间充质干细胞向脂肪细胞与成骨细胞定向分化情况：在地塞米松、1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤、吲哚美辛等诱导剂作用下，脂肪细胞＋成骨细胞诱导组细胞第5天开始油红O染色显示细胞核呈蓝色，细胞内脂滴呈橙色；在β-甘油磷酸钠、2-磷酸-抗坏血酸等诱导剂的作用下，第10天开始AKP染色显示细胞内有致密颗粒形成，Von Kossa染色显?     

应用免疫磁珠负选法分离与纯化小鼠骨髓间充质干细胞

目的:拟建立体外分离纯化小鼠骨髓间充质干细胞的新方法,从而得到高纯度的骨髓间充质干细胞。方法:实验于2002-09/2005-03在解放军第二军医大学附属长海医院烧伤科实验室完成。①选取清洁级7d龄FVB/N小鼠15只,利用免疫磁珠法(CD11b负选)从小鼠的骨髓细胞中分离纯化骨髓间充质干细胞:颈椎脱臼处死后无菌条件下取出小鼠双侧股骨,消毒离断后去除上清及脂肪层,吹打成单细胞悬液后接种于培养基中。贴壁细胞达到90%左右融合后,用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸进行消化,将悬浮的细胞与CD11b抗体避光反应2min,移入已预置入磁场的LD管,不加压通过,收集管中的细胞成分,用培养基重悬并吹打成单细胞悬液后以1×109L-1～2×109L-1的密度接种于培养基中培养。②培养传代后流式细胞仪检测细胞周期、表面标记物,并利用诱导剂观察其定向诱导为脂肪细胞和成骨细胞的能力。结果:①细胞形态学观察:免疫磁珠法获得的细胞几乎无圆形细胞夹杂,贴壁率高,形态单一呈典型成纤维样、漩涡状生长,体外增殖迅速。②细胞生长曲线绘制情况:细胞贴壁后一两天为细胞生长缓滞期,之后进入对数增长期,六七天后进入平台期。③细胞周期分析结果:G0/G1期细胞约86%,S G2 M期约14%。④细胞表面标记物检测结果:第3代骨髓间充质干细胞3%表达CD45,68.7%表达CD29,3%表达CD34,89.6%表达CD105。⑤骨髓间充质干细胞向脂肪细胞与成骨细胞定向分化情况:在地塞米松、1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤、吲哚美辛等诱导剂作用下,脂肪细胞 成骨细胞诱导组细胞第5天开始油红O染色显示细胞核呈蓝色,细胞内脂滴呈橙色;在β-甘油磷酸钠、2-磷酸-抗坏血酸等诱导剂的作用下,第10天开始AKP染色显示细胞内有致密颗粒形成,VonKossa染色显示钙盐沉积。结论:本实验通过免疫磁珠法(CD11b负选)成功地从FVB/N小鼠骨髓细胞中分离纯化出骨髓间充质干细胞。根据表面标记物的检测结果提示该法获得的细胞纯度高、周期性慢、多分化潜能,符合干细胞特性。     

巢蛋白免疫阳性细胞在成人胰腺中的分布

目的：研究巢蛋白免疫阳性细胞在正常成人胰腺组织中的分布。方法：应用巢蛋白抗体免疫组织化学ABC法。结果：在胰腺组织中，最强的染色见于胰岛，巢蛋白阳性细胞散在分布于胰岛区，细胞呈立方形，细胞核为圆形或卵圆形，棕黄色主要位于靠近细胞核的胞浆内。胰腺外分泌部未见明确的巢蛋白阳性细胞。结论：正常成人胰腺组织中存在着巢蛋白阳性细胞，此种细胞主要分布于胰岛内。