卵巢癌原位移植-转移动物模型的建立

卵巢癌具有早期可发生盆腔、腹腔内种植转移或淋巴结转移的特点，不仅是病人死亡的主要原因，也是临床治疗的难题，卵巢癌转移动物模型将是研究卵巢癌转移的生物学行为和进行实验治疗的重要工具。常用的裸鼠皮下移植瘤模型和腹水瘤模型因与人卵巢癌自然生物学过程存在差距，在实际应用中受到限制。近年，人们发现如能将人肿瘤组织移植到受体动物的对应组织或器官(即原位移植)，     

构建卵巢上皮性癌原位移植瘤动物模型的新方法

构建卵巢上皮性癌（卵巢癌）的动物模型方法包括：裸鼠皮下移植瘤模型，腹腔移植瘤模型，裸鼠网膜移植瘤模型，原位移植-转移瘤模型等。原位移植因为可以提供给被移植物类似于人体的微环境所以有广阔的应用前景。目前的原位移植技术主要是用细胞株构建裸鼠皮下移植瘤作为供瘤体，切成小块后在解剖显微镜下打开卵巢的包膜，将组织块植入卵巢实质。该技术只能间接反应卵巢癌细胞株的特点；此外难度高，需要解剖显微镜等特殊仪器。本研究在实验过程中巧妙地使用了一种新方法，将细胞悬液直接注射到小鼠的卵巢实质内，成功地建立了糖尿病合并重症联合免疫缺陷（NOD／SCID）小鼠卵巢癌模型，现报道如下。     

大鼠卵巢肿瘤模型的建立与初步观察

卵巢癌恶性程度高,就诊时大部分患者已届晚期,为了研究卵巢癌的发生发展及生物学特性,尤其是早期变化,需要建立相应的动物模型。我们采用ＤＭＢＡ埋线法成功地建立了大鼠卵巢肿瘤模型,并初步观察了大鼠卵巢肿瘤的病理形态特征。1 材料与方法1.1 实验材料 致癌剂二甲基苯蒽,购自Sigma公司。Wistar大鼠,雌性,6～８周龄,体重60～１００mg。1.2 诱癌模型的方法 ①含致癌剂棉线的制备：二甲基苯蒽加温融化后将棉线浸入药液内,计算每根棉线的含药量为0.2mg;②给药方法：乙醚麻醉动物,于下腹正中切开腹壁约2cm,暴露卵巢后将含药棉线…     

人卵巢癌裸鼠原位移植瘤模型的建立及其生物学特性研究

随着肿瘤实验动物学的发展，人们对肿瘤模型的仿真性日益重视。人肿瘤原位移植瘤模型可以客观地再现人类肿瘤的临床发展过程，自然模拟肿瘤在人体内的浸润和转移过程。我们利用卵巢癌细胞株SW626成功地建立了人卵巢癌裸鼠的原位移植瘤模型，并对其生物学特性进行了研究，现报道如下。     

顺铂耐药卵巢癌细胞鼠肾包膜下动物模型的建立及其临床意义

目的 :建立顺铂耐药卵巢癌细胞鼠肾包膜下动物模型 ,探讨其临床意义。方法 :采取肾包膜下纤维蛋白细胞凝块移植法 ,用环磷酰胺免疫抑制小鼠建立顺铂耐药卵巢癌模型。结果 :移植后 7d肿瘤体积明显增大 ,顺铂耐受细胞组与非耐受细胞组体积无明显差异 (P >0 .0 5) ;移植后细胞形态学特征无改变 ;在用顺铂治疗后 ,耐药细胞组肿瘤体积较非耐药细胞组体积大 (P <0 .0 5)。结论 :该动物模型可作为短期体内实验模型 ,能保持细胞的耐药性     

卵巢癌动物模型研究进展

卵巢癌是女性最常见的妇科恶性肿瘤之一,卵巢癌动物模型包括:自发瘤模型、异种移植瘤模型、化学药物诱导肿瘤模型以及基因工程改造模型等。随着基因工程小鼠(GEM)、同基因型肿瘤模型、异种移植瘤模型以及活体动物体内成像技术的应用,使得这一类临床前研究变得更加完善。卵巢癌动物模型的建立有助于更好地探索卵巢癌的本质,探讨卵巢癌的发生、发展规律及探索新的、有效的卵巢癌治疗方案。     

卵巢癌淋巴结定向转移裸鼠动物模型的建立

目的:在裸鼠体内建立人卵巢癌定向淋巴道转移动物模型。方法:将卵巢癌细胞株SKOV3移植于裸鼠爪垫下,待裸鼠卵巢癌发生转移时,取其淋巴结转移灶癌细胞再次移植裸鼠爪垫下传代,反复传3代。结果:SKOV3卵巢癌细胞在裸鼠体内传3代后,各代裸鼠的淋巴结转移率一直稳定,且转移途径较为单一;各代癌细胞的体内外增殖能力不断增强。结论:成功建立了人卵巢癌定向高淋巴道转移模型。     

建立去势雌性裸小鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤动物模型的探讨

目的:探讨全身外照射对建立切除卵巢后雌性裸小鼠子宫内膜癌皮下移植瘤模型成瘤率的影响。方法:将切除卵巢后1周的裸小鼠随机分为两组,一组全身外照射(4 Gy)3 h后皮下注射子宫内膜癌细胞悬液,另一组未予照射同时间皮下注射子宫内膜癌细胞悬液,观察裸小鼠体质量变化、存活情况和肿瘤的生长情况,测量肿瘤径线并计算体积。结果:2组成瘤率100%;各组肿瘤体积差异无统计学意义(P>0.05),但存活率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:全身外照射不影响切除卵巢的裸小鼠的成瘤率,但增加裸小鼠的死亡率。     

三种人卵巢癌动物模型的生物学特性比较

目的:建立人卵巢癌裸小鼠皮下移植瘤,腹水瘤和原位移植瘤模型,观察比较其生物学特性,为卵巢癌的理论研究和选择临床模型选择提供参考。方法:利用卵巢癌细胞株SW626先制备裸小鼠皮下移植瘤模型,再将瘤组织条植入裸小鼠一侧卵巢内,建立人卵巢癌的原位移植模型,将该细胞悬液注入小鼠腹腔建立腹水瘤模型。用组织病理学,电镜和流式细胞仪DNA含量及染色体核型分析鉴定模型,并比较3种模型在生物学特性上的差异。结果:3种模型的瘤细胞与细胞株在形态和结构上一致,腹水瘤模型自然生存率明显短于其它两种模型,后两者无明显差异。在生物学特性上各具特点,其中原位移植瘤模型中肿瘤的生长和转移完全模拟人卵巢癌的临床过程。结论:3种模型从不同层面展现了人卵巢癌的生物学特点,其中原位移植瘤模型是研究卵巢癌的转移基础和评定抗癌药物药效更客现的模型。     

人源性卵巢癌异体移植模型的研究进展

卵巢癌是致死率最高的女性生殖系统恶性肿瘤,至今其复发转移机制不明,预后未获改善。构建理想的临床前模型有助于开展肿瘤复发转移相关机制的研究。人源性异体移植模型的出现,提供了一种高保真性的研究用临床前模型,目前已初步应用于乳腺癌、肺癌、结肠癌等相关研究,取得了良好实验结果。在卵巢癌方面,该模型的研究刚刚起步。通过对已有文献的检索发现,该模型可以较好地复制原发肿瘤的生物学特点,保留原发肿瘤的异质性。但是,在应用中仍存在一定问题亟需解决,如成瘤率不一致、组织来源有限以及缺乏有效的质量控制标准等问题。现就其研究及应用现状作一综述。     

40岁以下妇女卵巢上皮性癌的临床及病理学特点

目的：了解年龄小于４０岁妇女卵巢上皮性癌在临床及病理学方面的特点。方法：１９７８年１月至１９９２年１２月在我院诊治的年龄小于４０岁卵巢上皮性癌患者共５４例，选择与每一例同期手术、年龄大于４０岁卵巢上皮性癌５４例作为对照组，用ＳＰＳＳ及ＳＵＲＶＡＬ分析软件对两组临床及病理学资料进行对照分析。结果：年龄小于４０岁患者中，因偶然发现盆腹腔包块就诊者（４６．３％）多于对照组（２７．８％），而因出现症状就诊者（５３．７％）少于对照组（７２．２％），其早期诊断率（６１．１％）、肿瘤单侧发生率（６８．５％）、肿瘤最大径线均值（１３．６ｃｍ）、肿瘤分化程度（高分化占５０．０％）以及达到理想肿瘤细胞减灭术者均高于对照组。两组组织学类型及化疗情况相似。单因素分析，年龄小于４０岁患者预后好，其２年及５年生存率分别为６９．８％和５０．２％，８例保留健侧卵巢者均无复发。多因素分析显示年龄对预后无影响。结论：年龄小于４０岁患者的卵巢上皮性癌其分期较早，恶性程度较低，预后较好，部分患者手术时可保留卵巢功能。     

子宫内膜癌卵巢转移危险因素及保留卵巢的可行性探讨

目的:探讨子宫内膜癌卵巢转移的高危因素及术中保留卵巢的可行性。方法:回顾性分析1999年1月至2003年12月在四川大学华西第二医院首诊并行手术治疗的388例子宫内膜癌患者的临床病理资料。结果:26例(6.7%)发生卵巢转移,其中15例(57.7%)为隐性转移。多因素分析预测子宫内膜癌卵巢转移的独立危险因素,按危险强度排列为盆腔淋巴结转移、宫颈侵犯、肌层浸润深度、病理分级;卵巢大小、腹腔内转移是卵巢隐性转移的独立危险因素。结论:子宫内膜癌患者保留卵巢应审慎,应警惕隐性卵巢转移发生的可能。     

卵巢上皮性癌淋巴道定向高转移细胞系的建立及其生物学特性的鉴定

目的筛选卵巢上皮性癌（卵巢癌）淋巴道定向高转移恶性肿瘤细胞亚群,并对其生物学特性进行鉴定。方法将卵巢癌细胞株SKOV3细胞接种于裸鼠爪垫皮下,待植入细胞在裸鼠体内成瘤并发生转移时,取其淋巴结转移灶中癌细胞再次接种于裸鼠爪垫皮下传代,每代均取出淋巴结转移灶中癌细胞进行培养,通过单细胞分离（克隆）培养或局部淋巴结转移灶筛选的方法建立连续传代细胞系,重复传3代后,通过裸鼠接种实验观察各代裸鼠的淋巴结转移率。利用细胞生长曲线、HE染色、染色体分析、流式细胞分析、裸鼠接种、免疫组化等方法鉴定各代细胞的生物学特性。结果所建立的连续传代1～3代的细胞系,分别命名为SKOV3-PM1、SKOV3-PM2和SKOV3-PM3细胞,癌细胞在裸鼠体内传3代后,裸鼠的淋巴结转移率为100％（10／10）,原代SKOV3细胞的淋巴结转移率为10％（1／10）,两者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;SKOV3-PM3细胞形成的淋巴结转移灶的数目（26／10）较SKOV3细胞多（1／10,P〈0．01）;且转移灶多位于淋巴结。细胞染色体分析显示,SKOV3细胞染色体数目大多数分布在83～89条,SKOV3-PM3细胞染色体数目大多数分布在91～105条。SKOV3与SKOV3-PM3细胞染色体数目比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;转移灶中上皮膜抗原（EMA）表达呈阳性,证实转移细胞株保持着卵巢癌细胞的生物学特性;SKOV3-PM3细胞倍增时间为22．7h,SKOV3细胞为49．6h,两者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。流式细胞分析显示,SKOV3-PMl、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3细胞的淋巴结转移灶中癌细胞的DNA合成期和分裂期细胞的比例分别为24．2％、29,4％和36．7％,明显高于SKOV3细胞的21．5％（P〈0．05）。结论本研究成功建立了卵巢癌淋巴道定向高转移细胞系,为研究卵巢癌的淋巴结浸润转移的发病机制提供了良好的实验材料。     

卵巢正常大小的原发性卵巢上皮性癌综合征的临床特点与预后影响因素

目的　探讨卵巢正常大小的原发性卵巢上皮性癌综合征的临床特点及预后因素。方法　对 10例患者的病例资料采用回顾性分析方法。结果　本病多发生于 5 0岁以上 ,占 80 % ;以腹胀、食欲差为首发症状 ,占 90 % ;就诊晚 ,易误诊 ,误诊率 40 % ;卵巢均正常大小 ,盆腹腔有广泛种植 ,局部聚集成块 ,占 70 % ;术后残留灶直径 <2 .0cm患者的生存时间高于术后残留灶直径≥ 2 .0cm者 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。化学治疗疗程数≥ 6个者生存时间明显高于疗程数 <6个者 (P <0 .0 5 )。本组患者中位生存时间 2 0个月 ,2年存活率 5 0 % ;3年存活率 30 % ;5年存活率 2 0 %。结论　术后残留灶大小可能是影响卵巢正常大小的原发性卵巢上皮性癌综合征患者预后的重要因素。术后系统化学治疗疗效显著     

膈肌病灶切除术在晚期卵巢癌患者处理中的价值

卵巢癌是致死率最高的妇科恶性肿瘤,由于缺乏早期诊断手段,往往发现时已为晚期。手术是治疗卵巢癌的主要方法,理想的卵巢肿瘤细胞减灭术是影响患者生存率的独立因素。晚期卵巢癌通常累及上腹腔,膈肌转移更是很常见,发生率约为18%～42%,而这个部位的转移也很难处理,常导致不理想的肿瘤细胞减灭术,降低患者生存率,影响预后。随着手术技巧的提高,近年来卵巢癌的膈肌病灶切除术得到一定的发展,膈肌转移病灶不是满意的卵巢肿瘤细胞减灭术的障碍,膈肌病灶切除术是减瘤术必要的手术步骤。综述膈肌病灶切除术在卵巢癌肿瘤细胞减灭术中的应用。     

微小RNA与卵巢癌研究进展

微小RNA(micro RNA,mi RNA)是一组存在于真核生物中的长度约21~23个核苷酸的内源性非编码小分子RNA,参与基因转录后水平的调控,在细胞增殖、分化和凋亡中起着非常重要的作用。越来越多的研究表明,mi RNA表达水平的改变与多种人类恶性肿瘤的发病和进展有关,如结直肠癌、宫颈癌、卵巢癌等。mi RNA在卵巢癌中异常表达,与其发生、发展、转移、耐药和预后密切相关,有望成为卵巢癌的早期诊断和预后的标记物,并为化疗耐药分析和个性化治疗提供新的临床思路。现就目前研究最多的mi R-200家族,let-7家族及mi R-199a在卵巢癌中的作用进行综述。     

雌激素在上皮性卵巢癌进展中的作用

雌激素在卵巢癌进展中可能起着重要作用,但对其作用尚存在争议,这可能与雌激素受体类型有关。雌激素受体本身是有功能的,并能产生侵袭性。雌激素受体α的表达与卵巢癌分级、无进展生存期和病因特异性生存率相关。雌激素受体β的表达与淋巴结转移状态相关。血管发生是形成新生血管的过程,对于肿瘤生长、侵袭和转移至关重要。雌激素可能通过雌激素受体通路促进血管生成,从而在卵巢癌进展中发挥作用。     

卵巢上皮性癌淋巴结转移相关差异表达蛋白内质网氨基肽酶1的表达及意义

目的 从基因转录及蛋白表达的水平检测内质网氨基肽酶1(ERAP1)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞、组织中的表达,探讨其与卵巢癌转移的关系.方法 应用实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法检测在卵巢癌淋巴结非定向转移细胞系(SKOV3)与淋巴结定向高转移细胞系(SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4)中ERAP1 mRNA和蛋白的表达情况;并应用免疫组化方法在人卵巢癌原发灶与相应的淋巴结转移灶、裸鼠卵巢癌移植瘤原发灶与相应的淋巴结转移灶中对ERAP1的蛋白表达进行验证.结果 SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4细胞中ERAP1 mRNA和蛋白的表达呈下降趋势(分别为0.118±0.012、0.031±0.003、0.028±0.003、0.016±0.005;0.91±0.33、0.09±0.03、0.10±0.04、0.05±0.04),其中,SKOV3细胞中ERAP1 mRNA和蛋白的表达显著高于SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4细胞,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).ERAP1蛋白在人卵巢痛原发灶(184±14)和相应的淋巴结转移灶、裸鼠卵巢癌移植瘤原发灶(143±22)和相应的淋巴结转移灶(97±12)中的表达均呈下降趋势,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 卵巢癌中ERAP1表达的下降或缺失与淋巴结转移有关.