银杏叶提取物对蛛网膜下腔出血后氧自由基损伤的缓解效应

目的：观察银杏叶提取物对蛛网膜下腔出血后氧自由基代谢的影响及该影响是否存在剂量依赖性。方法：①实验于2003—05／12在泰山医学院脑微循环实验室和附属医院中心实验室完成。选用Wistar大鼠54只。将动物随机分为5组：对照组（6只）、模型组（12只）、溶媒组（12只）、银杏叶提取物100mg／kg组（12只）和银杏叶提取物200mg／kg组（12只）。②股动脉采血后经冻-溶制各自体动脉血溶血物并注入大鼠枕大池制作蛛网膜下腔出血模型（除对照组外其余4组均造模）。③对照组：用0.3mL生理盐水代替动脉血溶血物行脑池注射；模型组：蛛网膜下腔出血造模后不给予干预；溶媒组：腹腔注射等体积含tween80的生理盐水；银杏叶提取物100mg／kg和银杏叶提取物200mg／kg组：在脑池注入自体动脉血溶血物开始前30min分别按100mg／kg和200mg／kg（首次剂量）腹腔注射银杏叶提取物溶液（为棕黄色粉末，由上海绿源制药有限公司提供，含银杏苦内酯≥6％，银杏黄酮≥24％。银杏叶提取物溶液在临用前新鲜配制。在银杏叶提取物粉剂中加入适量tween80溶液，研磨后，加入生理盐水使之成3％和6％的溶液），以后每天以上述半量重复2次；以上干预至各标本获取点前12h为止。④于造模后24h和72h按照购于南京建成生物工程研究所试剂盒说明书操作测定各组大鼠脑组织匀浆中超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量。⑤计量资料差异比较采用方差分析。结果：大鼠54只均进入结果分析。①脑组织超氧化物歧化酶活性：模型组和溶媒组于造模后24和72h明显低于对照组（P〈0．01）；银杏叶提取物100和200mg／kg组于造模后24和72h明显高于模型组（P〈0．01）；银杏叶提取物100与200mg／kg组间差异不明显。（2）脑组织丙二醛含量：模型组和溶媒组于造模后24和72h明显高于对照组（P〈0．01）；银杏叶提取物100和200mg／kg组于造模后24和72h明显低于模型组（P（0．05-0．01）；银杏叶提取物100与200mg／kg组间差异不明显。结论：银杏叶提取物能够有效减轻蛛网膜下腔出血后氧自由基连锁反应所致脑损伤，且不存在明显剂量依赖性。     

银杏叶提取物及银杏总内酯对帕金森病大鼠黑质神经元损伤的保护作用

目的:观察银杏叶提取物及银杏总内酯预防和治疗帕金森病模型大鼠黑质细胞损伤的作用。方法:实验于2004-07在锦州医学院动物实验室完成。选用健康成年SD雄性大鼠80只。①预防性用药实验:选取40只大鼠,随机分为5组,每组8只:银杏叶提取物预防组,按100mg/kg剂量灌胃银杏叶提取物溶液(含黄酮24%,银杏内酯6%,由北京第四制药厂提供,生产批号0310469,5mL/支),银杏总内酯高剂量预防组,按12mg/kg剂量给予银杏总内酯溶液(首都医科大学药物研究所提供,生产批号2003196,2mg/支),银杏总内酯低剂量预防组,按6mg/kg剂量给予银杏总内酯溶液,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。给药1次/d,连续14d,最末次给药1h后,模型组和用药组通过6-羟基多巴脑立体定向注射术建立帕金森病大鼠模型。②治疗性用药实验:于另40只大鼠中选用8只为对照组(灌胃等体积生理盐水)。将其余32只造成帕金森病模型,均造模成功。随机分为4组,每组8只:银杏叶提取物治疗组(按100mg/kg剂量灌胃银杏叶提取物溶液),银杏总内酯高剂量治疗组(按12mg/kg剂量给予银杏总内酯溶液),银杏总内酯低剂量治疗组(按6mg/kg剂量给予银杏总内酯溶液),模型组(灌胃等体积生理盐水)。给药1次/d,连续14d。③预防性给药组于造模后,治疗性给药组于给药14d后将各组大鼠断头取脑,分离双侧纹状体,采用高压液相色谱仪紫外检测器测定多巴胺浓度;严格按购于南京建成生物研究所的试剂盒说明对右侧黑质超氧化物歧化酶、丙二醛含量进行检测。④计量资料差异比较采用t检验。结果:大鼠80只均进入结果分析。①多巴胺含量:银杏叶提取物预防组和银杏总内酯高、低剂量预防组和对照组大鼠患侧纹状体明显高于模型组(P<0.05～0.01);各组健侧纹状体差异不明显(P>0.05);银杏总内酯高剂量治疗组帕金森大鼠患侧纹状体明显高于模型组(P<0.05),对照组大鼠患侧纹状体明显高于模型组(P<0.01);各组健侧纹状体差异不明显(P>0.05)。②右侧黑质丙二醛含量:各用药预防组和各用药治疗组及对照组明显低于模型组(P<0.05)。③右侧黑质超氧化物歧化酶活力:各用药预防组和各用药治疗组及对照组明显高于模型组(P<0.05)。结论:银杏叶提取物及银杏总内酯可以预防和对抗6-羟基多巴造成的黑质多巴胺能神经元损伤。     

银杏叶提取物改善学习记忆障碍老龄大鼠痴呆模型的作用途径

背景近年研究显示,银杏叶提取物是一种天然的自由基清除剂,可保护机体免受自由基引起的损害,改善脑循环障碍和神经元的功能,而关于银杏叶提取物对认知功能等高级神经功能活动影响的实验或临床研究相对滞后.目的探讨银杏叶提取物对中枢神经系统高级功能活动的作用,为临床应用银杏叶提取物治疗认知功能障碍提供实验依据.设计随机对照实验.单位华中科技大学同济医学院附属精神病医院老年科,华中科技大学同济医学院病理生理教研室,华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科.材料实验于2002-06在华中科技大学同济医学院基础部完成.选择Wistar大鼠40只,随机分为5组正常老龄对照组、模型组、银杏叶提取物75 mg/kg组、银杏叶提取物150 m/kg组,银杏叶提取物500 mg/kg组,每组8只.方法采用东莨菪碱致老龄大鼠学习记忆障碍的拟老年性痴呆动物模型,其中正常老龄对照组和模型组以相同体积的生理盐水灌胃,银杏叶提取物各组分别按75,150,500 mg/kg银杏叶提取物灌胃,50～400g/次,单次连续给药5 d,于第6天测试水迷宫及避暗试验,测试期间停止灌药,以水迷宫和避暗实验等学习记忆行为训练及生化检测方法,观察用药前后动物学习记忆行为和脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量的变化.主要观察指标①各组大鼠游迷宫所需时间.②各组大鼠游迷宫错误次数.③各组大鼠避暗试验所需时间及错误次数.④各组大鼠脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量.结果银杏叶提取物150 mg/kg组中除1只大鼠不明原因死亡外,银杏叶提取物75,500 mg/kg组各有1只大鼠在灌胃时逃走,最终进入结果分析大鼠为37只.①银杏叶提取物各剂量组造模大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数均明显少于模型组(P＜0.05或P＜0.01),模型组大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数明显高于正常老龄对照组(P＜0.01).②银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组大鼠为达到暗环境被动回避试验内容,学习过程明显短于模型组[(156.78±25.97),(172.66±13.56),(198.54±17.12),(208.34±28.56)s,P＜0.05或P＜0.01].模型组学习时间较正常老年对照组显著延长[(208.46±28.56),(127.46±11.03)s,P＜0.01];银杏叶提取物500,150,75 m/kg组发生电击的错误次数也明显少于模型组[(3.41±0.26),(6.97±0.35),(7.23±0.62),(8.38±0.92)次,P＜0.01],银杏叶提取物500mg/kg组电击次数显著少于150mg/kg组(P＜0.01),150mg/kg组明显少于75mg/kg组(P＜0.05).③银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组造模大鼠海马乙酰胆碱含量明显高于模型组[(421.89±36.32),(387.45±32.76),(380.17±41.25),(36528±11.42)mg/g,P＜0.05或P＜0.01],而银杏叶提取物500 mg/kg组的海马乙酰胆碱含量显著高于银杏叶提取物150,75 mg/kg组(P＜0.01).另外,与正常老龄对照组比较,东莨菪碱致学习记忆障碍模型组大鼠海马脑区的蛋白质含量显著降低[(41.75±3.82),(95.13±6.34)mg/kg,P＜0.01],在给予银杏叶提取物后,造模后的实验大鼠海马脑区蛋白质含量虽有所增加,但差异无显著性意义(P＞0.05).结论银杏叶提取物呈剂量依赖性显著改善实验动物的学习记忆能力,并显著增加海马脑区乙酰胆碱含量.     

银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤的保护作用

目的:探讨以黄酮类和内酯类化合物为主要成分的具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、减少炎性介质生成和保护脑缺血再灌注损伤等多种药理作用的银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤模型的保护作用。方法:实验于2004-10/2005-06在潍坊医学院麻醉学研究室进行,选取健康家兔36只,随机分为对照组、模型组、银杏叶提取物干预组,每组12只。除对照组外,其余动物以“Wiggers改良法”制备家兔急性失血性休克肺损伤模型:模型组,低血压60min后,经静脉回输失血和等量乳酸林格氏液,在30min内进行复苏;银杏叶提取物组,建立休克模型后,由静脉回输失血和等量林格氏液(内含银杏叶提取物25mg/kg,银杏叶提取物由潍坊医学院应用药理学实验室提取,加生理盐水配制成25g/L的乳剂)进行复苏;对照组,仅分离股动静脉,静脉输入等量乳酸林格氏液。分别于休克前、复苏成功时、治疗1h、2h取动脉血1.0mL,放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α含量。复苏2h末,迅速处死各组动物取肺组织,计算肺组织的含水率[(湿质量-干质量)/湿质量×100%]。免疫组化法检测缺血肺组织核因子κB阳性细胞率并进行光镜病理观察。结果:实验动物健康家兔36只全部进入结果分析。①模型组、银杏叶提取物组急性失血性休克复苏成功率分别为66.7%(8/12只)、75.0%(9/12只),无明显差异(P>0.05)。对照组无死亡病例。②复苏后,模型组与银杏叶提取物组肺组织的含水率均较对照组升高,且模型组升高程度明显高于银杏叶提取物组[(83.59±3.09),(76.37±3.45),(72.26±3.14);F=31.52,P<0.01]。③在休克复苏时、复苏1h、复苏2h模型组和银杏叶提取物组家兔血清肿瘤坏死因子α的含量均较对照组升高,且同一时间模型组升高程度较银杏叶提取物组明显[(162.38±22.33),(163.46±21.83),(74.64±14.29);(280.63±23.29),(259.72±17.22),(75.41±14.46);(512.44±23.56),(338.99±20.26),(75.98±14.26)μg/L;q=3.538～69.923,P<0.01]。④复苏2h末,组与银杏叶提取物组家兔肺组织中核因子κB阳性细胞率均升高(F=3615.20,P<0.01),模型组升高的程度尤为明显(q=62.721,P<0.01)。⑤苏木精-伊红染色和免疫组化光镜病理检查显示肺组织、肺间质水肿、肺泡隔增宽、中性粒细胞浸润。应用银杏叶提取物组家兔肺组织损伤和炎性细胞浸润较轻。结论:银杏叶提取物对家兔失血性休克肺损伤具有一定的保护作用,机制可能与减少肿瘤坏死因子α的生成,抑制缺血肺组织核因子κB活性有关。     

蒲金口服液对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠一氧化氮合酶的影响

目的:通过蒲金口服液对缺氧缺血性新生大鼠脑组织一氧化氮合酶(nitricoxidosynthase,NOS)的影响,探讨缺氧缺血性脑病的发病机制和化痰活瘀治疗的作用机制。方法:采用7日龄SD大鼠结扎右侧颈总动脉和置入低氧环境中诱发的缺氧缺血性脑损伤模型,于造模后即刻、2,4,6,8和10h,将1日药量共分为6次灌胃犤1.25mg/(kg·d)犦;假手术组术后给予生理盐水灌胃;缺氧缺血性脑损伤模型术后给予生理盐水灌胃;银杏叶提取物组术后给予银杏叶提取物混悬药液灌胃犤40mg/(kg·d)犦,造模后24h处死大鼠,取右侧顶枕区脑组织制成10%脑组织匀浆,用可见光分光光度计通过比色法测定NOS含量。结果:蒲金口服液高剂量组NOS含量为(37.60±5.47)μkat/L,与缺氧缺血性脑损伤模型组NOS含量为(49.97±5.53)μkat/L相比较,差异有极显著性意义(P<0.01);蒲金口服液高剂量组与银杏叶提取物组NOS含量为(42.92±2.70)μkat/L相比较,差异有显著性意义(F=10.22,P<0.05)。结论:蒲金口服液高剂量组能显著降低缺氧缺血性脑损伤大鼠NOS含量,且效果优于银杏叶提取物组。     

银杏叶提取物对糖尿病学习记忆功能障碍大鼠脑内载脂蛋白E mRNA表达的影响

目的:以旷场分析法和Morris水迷宫法,结合反转录-聚合酶链反应方法,探讨银杏叶提取物对糖尿病学习记忆功能障碍大鼠大脑皮质和海马载脂蛋白EmRNA表达的影响。方法:实验于2003-09/2005-08在广西医科大学实验中心完成。①56只大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、糖尿病模型对照组、糖尿病模型 胰岛素10u/kg组、糖尿病模型 银杏叶提取物100mg/kg组、糖尿病模型 银杏叶提取物50mg/kg组,除正常对照组为12只,其余各组为11只。②腹腔注射佐链霉素55mg/kg建立糖尿病模型,以旷场分析法和Morris水迷宫法考察各组大鼠学习记忆能力,用反转录-聚合酶链反应方法检测糖尿病学习记忆功能障碍大鼠脑内皮层和海马载脂蛋白EmRNA的表达。结果:参加实验大鼠56只,进入旷场分析及Morris水迷宫实验53只大鼠,饲养过程中糖尿病模型对照组、糖尿病模型 胰岛素10u/kg组、糖尿病模型 银杏叶提取物50mg/kg组各有1只死亡。正常对照组取10只,其余各组取8只大鼠进入目的基因反转录-聚合酶链反应分析。①旷场分析示,糖尿病组较正常对照组中央格停留时间延长、探洞次数减少,银杏叶提取物组较糖尿病组中央格停留时间缩短,探洞次数显著增加。②Morris水迷宫示糖尿病组逃避潜伏期延长、搜寻平台策略成绩较正常对照组降低。银杏叶提取物组逃避潜伏期较糖尿病组缩短,搜寻平台策略成绩较糖尿病组升高。③目的基因反转录-聚合酶链反应示糖尿病组海马的载脂蛋白EmRNA表达水平较正常对照组明显增加,而糖尿病组皮层的载脂蛋白EmRNA表达水平较正常对照组未见明显影响(P>0.05),银杏叶提取物100,50mg/kg治疗组海马的载脂蛋白EmRNA的表达水平较糖尿病组均明显降低,而银杏叶提取物100,50mg/kg治疗组皮层的载脂蛋白EmRNA表达水平较糖尿病组未见明显影响(P>0.05)。结论:银杏叶提取物可明显抑制糖尿病学习记忆功能障碍大鼠脑内海马载脂蛋白EmRNA的表达水平,提示银杏叶提取物对糖尿病大鼠学习记忆功能障碍有明显的保护作用。     

银杏叶提取物新配方对高脂血症大鼠的干预效应

背景:调脂治疗在冠状动脉粥样硬化性心脏病的一、二级预防中的作用已得到充分肯定,银杏叶提取物具有一定的降脂作用。目的:建立高脂大鼠模型,观察银杏叶提取物新配方(由银杏总黄酮和银杏内酯组成)对高脂血症大鼠血脂水平的干预及肝脏脂肪变性程度。设计:随机对照观察。单位:复旦大学附属金山医院心内科,苏州大学药学系,苏州中药研究所。材料:选取清洁级 SD 大鼠 60只,适应性饲养 1周后,随机分成 6组:正常对照组、高脂模型组、力平脂 25m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方20m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 40m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 80m g/(kg·d)组,10只 /组。方法:力平脂 25m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 20m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 40m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 80m g/(kg·d)组均以 10m L /kg 体积于每天上午 9:00～10:00灌服给药,正常对照组和高脂模型组给予等体积的蒸馏水灌服。除正常对照组外,其余各组大鼠于每天下午 1:00～2:00同时以 10m L /kg 体积灌服脂肪乳剂,连续 28d。第 29天各组分别测定血清总胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇、血清载脂蛋白 AI、血清载脂蛋白 B。同时取出各组大鼠肝脏进行病理检查,观察肝脏脂肪变性程度。主要观察指标:造模后各组大鼠的血脂情况以及肝脏脂肪变性程度。结果:实验选用大鼠 60只,均进入结果分析。①造模后各组大鼠血脂情况的比较:高脂模型组血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇明显增加,高密度脂蛋白胆固醇降低,与正常对照组比较差异显著(P <0.01),但血清三酰甘油仅有轻度升高(P >0.05);银杏叶提取物新配方 20～80m g/(kg·d)组均可不同程度地抑制大鼠高脂血症的形成,表现为血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇均明显降低(P <0.05或 0.01),并有一定升高高密度脂蛋白胆固醇、血清载脂蛋白 AI及降低血清载脂蛋白 B 的作用,其中银杏叶提取物新配方 80m g/(kg·d)组最为显著(P <0.05)。②造模后各组大鼠肝脏脂肪变性程度的比较:高脂模型组大鼠的肝病理检查可见弥漫性脂肪空泡;银杏叶提取物新配方 40,80m g/(kg·d)组大鼠肝脂肪变性程度有一定的减轻,尤以银杏叶提取物新配方 80m g/(kg·d)组效果明显。结论:提示银杏叶提取物新配方可有效地纠正高脂血症的脂质代谢,对高脂饮食所致的高脂血症具有良好的预防作用。     

实验性肝纤维化过程中Activin A表达变化与银杏叶提取物的逆转效应

目的:Activin A是转化生长因子超家族成员,是肝脏再生过程中的负向调节因子.实验拟验证银杏叶提取物反转实验性大鼠肝纤维化过程中Activin A的表达效应.方法:实验于2005-09/2006-12在武汉市第一医院中心实验室完成.①实验材料:SPF级SD雄性大鼠36只,体质量(160±20)g;银杏叶提取物(由武汉市一医院中药制剂室提供,经湖北午时药业股份有限公司检验,编号02-391).②实验分组:36只雄性SD大鼠被随机分为3组:正常组、肝纤维化模型组和银杏叶提取物治疗组.③实验过程:模型组和银杏叶提取物治疗组用500 mL/L 四氯化碳腹腔注射8周造模.银杏叶提取物治疗组大鼠造模后每天给予银杏叶提取物灌胃8周.④实验评估:用药结束后,分别麻醉后处死各组大鼠,分离血清行肝功能生化指标检测;取肝脏进行免疫组织化学检测Activin A;反转录-聚合酶链反应检测Activin A mRNA.结果:36只大鼠全部进入结果分析.①银杏叶提取物治疗组大鼠肝功能指标较模型组明显改善.②光镜下观察银杏叶提取物治疗组肝纤维化分级较模型组明显恢复.③银杏叶提取物治疗组Activin A阳性染色程度较模型组明显减轻.④银杏叶提取物治疗组肝组织中ActivinA mRNA表达较模型组明显减弱.结论:银杏叶提取物降低四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠Activin A表达,从而改变其肝纤维化程度.     

银杏叶提取物改善学习记忆障碍老龄大鼠痴呆模型的作用途径

背景：近年研究显示,银杏叶提取物是一种天然的自由基清除剂,可保护机体免受自由基引起的损害,改善脑循环障碍和神经元的功能,而关于银杏叶提取物对认知功能等高级神经功能活动影响的实验或临床研究相对滞后.目的：探讨银杏叶提取物对中枢神经系统高级功能活动的作用,为临床应用银杏叶提取物治疗认知功能障碍提供实验依据.设计：随机对照实验.单位：华中科技大学同济医学院附属精神病医院老年科,华中科技大学同济医学院病理生理教研室,华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科.材料：实验于2002-06在华中科技大学同济医学院基础部完成.选择Wistar大鼠40只,随机分为5组：正常老龄对照组、模型组、银杏叶提取物75 mg/kg组、银杏叶提取物150 m/kg组,银杏叶提取物500 mg/kg组,每组8只.方法：采用东莨菪碱致老龄大鼠学习记忆障碍的拟老年性痴呆动物模型,其中正常老龄对照组和模型组以相同体积的生理盐水灌胃,银杏叶提取物各组分别按75,150,500 mg/kg银杏叶提取物灌胃,50～400g/次,单次连续给药5 d,于第6天测试水迷宫及避暗试验,测试期间停止灌药,以水迷宫和避暗实验等学习记忆行为训练及生化检测方法,观察用药前后动物学习记忆行为和脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量的变化.主要观察指标：①各组大鼠游迷宫所需时间.②各组大鼠游迷宫错误次数.③各组大鼠避暗试验所需时间及错误次数.④各组大鼠脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量.结果：银杏叶提取物150 mg/kg组中除1只大鼠不明原因死亡外,银杏叶提取物75,500 mg/kg组各有1只大鼠在灌胃时逃走,最终进入结果分析大鼠为37只.①银杏叶提取物各剂量组造模大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数均明显少于模型组（P＜0.05或P＜0.01）,模型组大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数明显高于正常老龄对照组（P＜0.01）.②银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组大鼠为达到暗环境被动回避试验内容,学习过程明显短于模型组[（156.78&;#177;25.97）,（172.66&;#177;13.56）,（198.54&;#177;17.12）,（208.34&;#177;28.56）s,P＜0.05或P＜0.01].模型组学习时间较正常老年对照组显著延长[（208.46&;#177;28.56）,（127.46&;#177;11.03）s,P＜0.01];银杏叶提取物500,150,75 m/kg组发生电击的错误次数也明显少于模型组[（3.41&;#177;0.26）,（6.97&;#177;0.35）,（7.23&;#177;0.62）,（8.38&;#177;0.92）次,P＜0.01],银杏叶提取物500mg/kg组电击次数显著少于150mg/kg组（P＜0.01）,150mg/kg组明显少于75mg/kg组（P＜0.05）.③银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组造模大鼠海马乙酰胆碱含量明显高于模型组[（421.89&;#177;36.32）,（387.45&;#177;32.76）,（380.17&;#177;41.25）,（36528&;#177;11.42）mg/g,P＜0.05或P＜0.01],而银杏叶提取物500 mg/kg组的海马乙酰胆碱含量显著高于银杏叶提取物150,75 mg/kg组（P＜0.01）.另外,与正常老龄对照组比较,东莨菪碱致学习记忆障碍模型组大鼠海马脑区的蛋白质含量显著降低[（41.75&;#177;3.82）,（95.13&;#177;6.34）mg/kg,P＜0.01],在给予银杏叶提取物后,造模后的实验大鼠海马脑区蛋白质含量虽有所增加,但差异无显著性意义（P＞0.05）.结论：银杏叶提取物呈剂量依赖性显著改善实验动物的学习记忆能力,并显著增加海马脑区乙酰胆碱含量.     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠学习记忆及海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

背景:研究表明,银杏叶提取物具有促进脑损伤后功能修复、改善老年人学习与记忆功能障碍以及促进中枢神经系统可塑性的作用,但其对2型糖尿病大鼠学习记忆功能的影响又如何呢?目的:观察银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠学习记忆功能障碍的改善作用和对海马内星形胶质细胞特异性蛋白胶质纤维酸性蛋白表达的影响。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:广西医科大学药学院药理学教研室。材料:选用84只雄性清洁级Wistar大鼠,8周龄,体质量180～220g。银杏叶提取物粉,广西桂林思特新技术公司提供,含黄酮24.8%,萜内酯6.2%,生产批号:200405。方法:实验于2003-06/2005-03在广西医科大学中心实验室(省重点实验室)药理室完成。①随机抽取70只大鼠,禁食24h,按55mg/kg腹腔注射链脲佐菌素(pH4.4柠檬酸缓冲液配制),注射后第4天,空腹血糖>15mmol/L的56只为2型糖尿病大鼠。②将56只糖尿病大鼠按随机数字表法分为4组:模型组,胰岛素治疗组,银杏叶提取物高、低剂量组,每组14只。4组糖尿病大鼠的空腹血糖差异不明显(P>0.05)。另取未注射链脲佐菌素的大鼠14只作正常对照组。胰岛素治疗组:皮下注射10U/(kg·d);银杏叶提取物高、低剂量治疗组:灌胃银杏叶提取物混悬液100和500mg/(kg·d);正常对照组和模型组:每天灌胃等量生理盐水,连续6个月。③Morris水迷宫实验观察记忆能力改变:圆形水池直径为100cm,高60cm,平台高40cm,水深42cm。大鼠每天上、下午各训练2次,连续4d。第5和8天上午测定每只大鼠学习能力[90s内找到平台的时间(逃避潜伏期);搜寻平台的策略直线式,记分4分;趋向式,记分3分;随机式,记分2分;圆圈式,记分1分)]。④测试结束后,各组取大鼠分别进行反转录聚合酶链反应(n=8)及免疫组织化学(n=6)实验,观察大鼠海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白mRNA及其蛋白的表达,分别以目的基因胶质纤维酸性蛋白区带的灰度值与内参β-actin区带的灰度值之比和胶质纤维酸性蛋白反应阳性细胞的体密度比表示。⑤组间差异显著性比较采用方差分析和q检验。主要观察指标:银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠Morris水迷宫实验结果及海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白mRNA及其蛋白表达的影响。结果:造模失败脱失14只,其余70只大鼠进入结果分析。①Morris水迷宫实验结果:模型组大鼠第5,8天的逃避潜伏期明显长于正常对照组,搜寻平台策略得分明显低于正常对照组(P<0.01)。胰岛素治疗组及银杏叶提取物高、低剂量组的第5,8天逃避潜伏期均明显短于模型组,搜寻平台策略得分明显高于模型组(P<0.05～0.01)。胰岛素治疗组和银杏叶提取物高、低剂量组Morris水迷宫实验结果差异不明显(P>0.05)。②海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白mRNA及其蛋白表达:模型组大鼠海马的胶质纤维酸性蛋白mRNA表达水平明显高于其他3组(P<0.01)。免疫组化结果显示,与正常对照组比较,模型组大鼠海马星形胶质细胞胞体明显增大、数量增加、突起明显增粗,胶质纤维酸性蛋白阳性表达细胞的体密度比明显增高(P<0.01)。与模型组比较,胰岛素治疗组和银杏叶提取物高、低剂量组海马星形胶质细胞胞体缩小、数量减少、突起明显变短,胶质纤维酸性蛋白表达的体密度比明显下降(P<0.01)。胰岛素治疗组和银杏叶提取物高、低剂量组胶质纤维酸性蛋白mRNA表达水平和胶质纤维酸性蛋白表达的体密度比比较,差异不明显(P>0.05)。结论:2型糖尿病大鼠存在学习记忆能力障碍,反应性星形胶质细胞可能参与了该障碍发生过程,银杏叶提取物可能通过抑制星形胶质细胞反应性增生对糖尿病大鼠学习记忆损伤起到保护作用。