哮喘豚鼠肺组织中嗜酸细胞凋亡与白细胞介素5mRNA表达？…

目的 探讨哮喘时嗜酸细胞（ＥＯＳ）凋亡与肺组织白细胞介素５（ＩＬ－５）ｍＲＮＡ表达的关系。方法 将豚鼠随机分为对照组（正常组７只）、哮喘组（８只）、地塞米松组（８只），应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术和原位杂交方法，检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中不同密度ＥＯＳ凋亡百分比和肺组织ＩＬ－５ｍＲＮＡ的表达。结果 （１）正常对照组ＢＡＬＦ中低密度ＥＯＳ、正常密度ＥＯＳ凋是     

肺癌、良性实质性病变和正常肺组织粒酶逆转录酶定位表达的研究

目的：研究端粒酶在肺良、恶性病变和正常肺组织中表达的定位,以阐明端粒酶在上述疾病发病机制中的作用,以及在正常肺组织中的生物学意义。方法：对38例肺癌、7例良性实质性病变及35例病灶旁正常肺组织标本用核酸原位杂交和免疫组织化学技术对端粒酶逆转录酶（hTERT)mRNA和蛋白质的定位表达进行了研究,同时与端粒酶活性进行了对比。结果：肺癌、良性实质性病变和病灶旁正常肺组织端粒酶活性阳性分别31／38、3／7、7／35（P＜0．001）;肺癌组织癌细胞、肺良性实质性病变中的淋巴细胞、纤维母细胞、巨噬细胞等以及病灶旁正常 肺组织小气道、细支气管上皮的部分细胞和少部分肺泡上皮细胞hTERT蛋白有阳性表达,在有淋巴小结的肺组织其生发中心可见hTERT表达,多数巨噬细胞也有hTERT阳性表达。hTERTmRNA所表达的细胞与免疫组织化学结果类似。肺癌hTERT免疫染色平均吸光度比较：鳞癌A值比腺癌略高,Ⅲ期比I期、Ⅱ期稍高,分化程度越低A值也越高,但P＞0．05。结论：（1）端粒酶除了参与肺癌的发病机制外,也参与肺良性实质性病变发生发展。（2）端粒酶对于维持正常肺组织支气管上歧细胞、肺泡巨噬细胞和淋巴细胞的功能可能有重要的生物学意义。（3）端粒酶是一种增殖指标,而非肺癌的恶性特异性标志,端粒酶作为肺癌诊断标记物时可能有一定的假阳性。     

哮喘患者外周血T淋巴细胞凋亡及其分子机制

目的　探讨哮喘患者外周血 Ｔ淋巴细胞凋亡率的变化及其分子机制。方法　取１２ 例急性发作期哮喘患者（ 哮喘组） 及１０ 名正常对照者（ 对照组） 外周血淋巴细胞并无菌分离 Ｔ 淋巴细胞,采用电镜和原位末端终止法（ Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ） 观察抗 Ｃ Ｄ＋３ 单抗（１００ ｍｇ／ Ｌ） 诱导体外培养０ 、２４ 、４８ 、７２ 小时后 Ｔ淋巴细胞凋亡变化,同时采用细胞原位杂交法观察不同培养时间 Ｔ 淋巴细胞 Ｂｃｌ２ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 及 Ｂａｘｍ Ｒ Ｎ Ａ表达变化。结果　正常组及哮喘组 Ｔ 淋巴细胞抗 Ｃ Ｄ＋３ 单抗诱导后均出现凋亡典型形态改变,哮喘患者外周血 Ｔ细胞经抗 Ｃ Ｄ＋３ 单抗诱导２４ 小时后凋亡率为（９１９ ±２２５） ％ ,４８ 小时为（１５８９ ±２１８） ％ ,７２ 小时为（２１３７ ±３２４） ％ ;与正常组２４ 小时（１７９ ±２２２） ％ 、４８ 小时（２５２５ ±３５３） ％ 、７２ 小时（３５１４ ±２５３） ％ 比较,差异有显著性（ Ｐ 均＜ ００１） ,哮喘组７２ 小时方接近正常组２４ 小时水平。哮喘组 Ｔ 淋巴细胞凋亡抑制基因 Ｂｃｌ２ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达各时相均与正常组比较,差异有显著性（ Ｐ＜ ００１） 。而凋亡促进基因     

肺癌、良性实质性病变和正常肺组织端粒酶逆转录酶定位表达的研究

目的研究端粒酶在肺良、恶性病变和正常肺组织中表达的定位,以阐明端粒酶在上述疾病发病机制中的作用,以及在正常肺组织中的生物学意义。方法对38例肺癌、7例良性实质性病变及35例病灶旁正常肺组织标本用核酸原位杂交和免疫组织化学技术对端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA和蛋白质的定位表达进行了研究,同时与端粒酶活性进行了对比。结果肺癌、良性实质性病变和病灶旁正常肺组织端粒酶活性阳性分别为31/38、3/7、7/35（P<0.001）;肺癌组织癌细胞、肺良性实质性病变中的淋巴细胞、纤维母细胞、巨噬细胞等以及病灶旁正常肺组织小气道、细支气管上皮的部分细胞和少部分肺泡上皮细胞hTERT蛋白有阳性表达,在有淋巴小结的肺组织其生发中心可见hTERT表达,多数巨噬细胞也有hTERT阳性表达。hTERTmRNA所表达的细胞与免疫组织化学结果类似。肺癌hTERT免疫染色平均吸光度比较鳞癌A值比腺癌略高,Ⅲ期比Ⅰ期、Ⅱ期稍高,分化程度越低A值也越高,但P>0.05。结论(1)端粒酶除了参与肺癌的发病机制外,也参与肺良性实质性病变发生发展。（2）端粒酶对于维持正常肺组织支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞和淋巴细胞的功能可能有重要的生物学意义。(3)端粒酶是一种增殖指标,而非肺癌的恶性特异性标志,端粒酶作为肺癌诊断标记物时可能有一定的假阳性。     

RANTES与肺疾病

调节激活正常Ｔ细胞表达和分泌细胞因子（ＲＡＮＴＥＳ）是一类Ｃ－Ｃ家族趋化因子，对Ｔ淋巴细胞、嗜酸性细胞等有趋化、募集、激活的作用。近来发现该因子与某些肺疾病，特别是淋巴细胞和哮酸性细胞浸润为主的疾患，如哮喘、结节病关系密切，是调控肺免疫、炎症损伤细胞因子网络的重要成员，，本就ＲＡＮＴＥＳ在肺疾病中作用机制作一介绍。     

卵蛋白致敏豚鼠外周血淋巴细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白的表达

Ｔ淋巴细胞在哮喘气道炎症的发生和发展中起枢纽作用。哮喘时激活的Ｔ淋巴细胞增加［１］,白细胞介素３（ＩＬ３）、ＩＬ５、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子ｍＲＮＡ（ＧＭＣＳＦｍＲＮＡ）表达增强,除了抗原反复刺激外,与Ｔ淋巴细胞凋亡障碍,生存时间延长可能也有一定的关系。目前,已证实凋亡的发生是受基因控制,发现了许多与凋亡有关的基因。我们的实验观察了哮喘豚鼠外周血淋巴细胞的凋亡及其相关基因Ｂ细胞淋巴瘤（ｂｃｌ２）、白细胞介素１β转化酶（ＩＣＥ）的表达。材料与方法　哮喘豚鼠模型：雄性豚鼠４００～５００…     

支气管哮喘患者外周血T淋巴细胞亚群粘附分子表达的探讨

粘附分子是细胞膜表面的糖蛋白［１］。粘附分子在炎症性疾病中的作用已受到国外学者的广泛重视。目前研究表明，支气管哮喘（哮喘）的本质是一种慢性气道炎症性疾病。本研究采用流式细胞仪术检测４０例发作期哮喘患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群上细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）、淋巴细胞功能相关抗原－１（ＬＦＡ－１）的表达，探讨其与哮喘病情轻重、气道反应性及气道阻塞的关系。１　材料与方法１－１　对象及分组　正常对照组：选自本院健康体检者，共２０例，男９例，女１１例，年龄１８～６０岁。哮喘病人组：均为我院肺科确诊的发作…     

吸入糖皮质激素对哮喘内皮素和内皮素转化酶mRNA表达的影响

目的探讨内皮素１（ＥＴ－１）和内皮素转化酶（ＥＣＥ）ｍＲＮＡ在哮喘气道粘膜的表达，以及吸入激素对其表达的影响。方法应用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应，测定支气管粘膜组织ＥＴ－１和ＥＣＥｍＲＮＡ的表达量；对支气管粘膜炎症程度进行评分。结果哮喘非激素组（１０例）和对照组（１０名）ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达量分别为０．８６±０．０６，０．１４±０．０６（Ｐ＜０．０５）；ＥＣＥｍＲＮＡ表达量分别为０．３１±０．０４，０．３０±０．０５（Ｐ＝０．２３８）；哮喘激素组（１０例）ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达量为０．２２±０．０１，ＥＣＥｍＲＮＡ表达量为０．１６±０．０１；哮喘非激素组粘膜炎症评分为６．０±１．９，且与ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达量呈正相关（ｒ＝０．７８，Ｐ＜０．０５）。结论哮喘支气管粘膜ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达增高明显，而ＥＣＥｍＲＮＡ无明显改变；吸入糖皮质激素显著抑制ＥＴ－１和ＥＣＥｍＲＮＡ的表达，可能是抗炎治疗哮喘的机制之一     

哮喘患者TH亚群的失衡及与相关细胞因子,肺通所功能改？…

分析哮喘患者辅助性Ｔ淋巴细胞亚群平衡的变化及与相关细胞因子、血清总ＩｇＥ、外周血哮酸细胞及肺通气功能的相关关系。方法采用酶联免疫斑点法测定２０例哮喘患者外周血ＴＨ亚群、ＰＢＭＣ培养上清白细胞介素４（ＩＬ－４）和γ干扰素含量、血清总ＩｇＥ、外周血嗜酸细胞计数及肺通气功能,并与１０名健康正常者的结果进行比较。     

内皮素和一氧化氮平衡在哮喘犬发病机制中的作用

目的 探讨内皮素（ＥＴ）和一氧化氮（ＮＯ）平衡失调在支气管哮喘（简称哮喘）发病机制中的作用。方法 吸入猪蛔虫抗原复制过敏性哮喘犬模型，随机将实验动物分为五组，即对照组（Ａ组，６只），哮喘组（Ｂ组，６只）生理盐水＋哮喘组（Ｃ组，６只）Ｎ＾Ｇ－单甲基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）＋哮喘组（Ｄ组，６只）和左旋精氨本－ａｒｇ）＋哮喘组（Ｅ组，６只），观察了ＥＴ－１和ＮＯ对犬气道平滑肌的影响。结果 ＥＴ－１使呼     

细胞间粘附分子1mRNA在哮喘豚鼠支气管组织中的原位表达

为了解哮喘豚鼠支气管组织中的细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）ｍＲＮＡ表达情况，将实验豚鼠随机分为正常对照组、氟美松组和哮喘组，采用原位杂交方法显示ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达变化，用ＨＥ染色方法来测定炎细胞在支气管粘膜中的浸润程度。原位杂交结果显示，ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ主要在支气管粘膜下的小血管、毛细血管内皮细胞以及支气管上皮细胞的胞浆内表达。定量分析结果表明，哮喘组豚鼠支气管组织表达ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ较正常对照组及氟美松组显著增加（Ｐ＜０．０２，Ｐ＜０．０５），哮喘豚鼠支气管组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达量与炎细胞总数之间显著相关（Ｐ＜０．０５）。提示支气管粘膜组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ表达与哮喘支气管粘膜嗜酸细胞为主的炎细胞浸润有关，糖皮质激素能够抑制细胞粘附分子的表达。     

内皮素在低氧性肺动脉高压大鼠肺内表达和水平变化的研究

为了确定在慢性缺氧过程中大鼠肺内内皮素（ＥＴ）－１ｍＲＮＡ是否表达及变化，采取体外转录并用地高辛－ＵＴＰ标记ＥＴ－１和ｃ－ｆｏｓＲＮＡ探针进行组织原位杂交，用放射免疫法测定血浆和肺组织匀浆ＥＴ－１浓度。结果显示，缺氧３周大鼠肺内ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达增加，主要阳性反应部位位于血管内皮和支气管上皮细胞。ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ主要位于血管平滑肌和支气管平滑肌细胞。缺氧３周大鼠静脉血浆ＥＴ－１浓度为３．８５±１．５２ｎｇ／Ｌ（与对照组比较，Ｐ＜０．０５），动脉血浆为４．７２±１．６６ｎｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０５），肺组织匀浆中为２．０５±０．６８ｎｇ／ｇ（Ｐ＜０．０５）。认为慢性缺氧可引起大鼠肺动脉压力升高，同时伴有肺血管的重建以及右心室的肥厚；随着肺动脉压的改变，其血浆和肺组织匀浆中内皮素水平显著升高。肺内ＥＴ－１的表达和产生主要位于肺血管内皮细胞以及支气管上皮细胞     

哮喘豚鼠肺组织粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达…

目的 探讨粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子在哮喘嗜酸细胞炎症中的作用。方法 建立哮喘豚鼠实验模型，用雷公藤处理，观察肺组织Ｅｏｓ密度，斑点分子杂交检测支气管肺组织ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ含量。结果 哮喘组肺组织Ｅｏｓ浸润密度增加，ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ表达水平增高，与对照组相比差异有显著性（Ｐ〈０．０５），雷公藤处理后ｍＲＮＡ表达显著降低，但Ｅｏｓ浸润密度减少不明显。结论 ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ表达增加     

端粒酶作为肺癌诊断标记物价值的研究

最近提出的肿瘤形成的端粒－端粒酶假说受到医学界的广泛关注,端粒酶与肿瘤的关系已成为近年来的研究热点［１,２］。端粒酶是否是一个好的肺癌诊断的标记物和治疗靶点是临床医生关注的焦点。为此,我们检测了端粒酶活性、端粒酶的各个亚基包括ＲＮＡ成分（ｈＴＲ）、端粒酶逆转录酶（ｈＴＥＲＴ）、端粒酶相关蛋１（ｈＴＥＰ１）的基因表达、ｈＴＥＲＴ亚基的ｍＲＮＡ的定位表达、ｈＴＥＲＴ蛋白质的定位表达,并与肺癌的病理分型、ＴＮＭ分期进行了比较,以阐明端粒酶作为肺癌诊断标记物的价值。 一、材料和方法 １．资料和标本来源：１…     

哮喘豚鼠肺组织粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达及雷公藤的影响

目的探讨粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）在哮喘嗜酸细胞（Ｅｏｓ）炎症中的作用。方法建立哮喘豚鼠实验模型，用雷公藤处理，观察肺组织Ｅｏｓ密度，斑点分子杂交检测支气管肺组织ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ含量。结果哮喘组肺组织Ｅｏｓ浸润密度增加，ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达水平增高，与对照组相比差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。雷公藤处理后ｍＲＮＡ表达显著降低，但Ｅｏｓ浸润密度减少不明显。结论ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达增加可能是导致哮喘Ｅｏｓ气道炎症的原因。雷公藤能抑制ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达，可能具有哮喘抗炎治疗的潜在应用价值。     

哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡与白细胞介素—1β转换酶,Fas表达的关联 …

支气管哮喘是由嗜酸粒细胞等多种炎性细胞参与的慢性气道炎症性疾病。哮喘患者肺内嗜酸粒细胞浸润是其显著的病理特征。这种嗜酸粒细胞增多,除了与哮喘体内嗜酸粒细胞生成增多外,还与嗜酸粒细胞在肺内生存时间延长,即正常的细胞凋亡受到抑制有关。本实验通过观察哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(ＢＡＬＦ)中嗜酸粒细胞的凋亡和白细胞介素1β转换酶(ＩＣＥ)及Ｆａｓ的表达,探讨哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡与ＩＣＥ和Ｆａｓ表达的关系。一、材料与方法1.健康雄性豚鼠30只,体重400～500ｇ,随机分为2组,每组15只。哮喘组:采用卵白蛋白致敏和激发建立哮喘模…     

间质性肺疾病患者血清和支气管肺泡灌洗液中内皮素1活性的变化

目的评价内皮素对肺纤维化发生、发展作用的影响。方法利用同位素放射免疫直接测定法,检测１０例肺结节病和８例特发性肺纤维化（ＩＰＦ）患者外周血和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中内皮素１（ＥＴ１）的活性,并与８名健康非吸烟者进行对照。结果肺结节病和ＩＰＦ患者血清和ＢＡＬＦ中的ＥＴ１活性分别为（６２±２９）ｎｇ／Ｌ,（１７０±２４）ｎｇ／Ｌ和（７７±７１）ｎｇ／Ｌ、（１０±３）ｎｇ／Ｌ,与正常对照组（２０±８）ｎｇ／Ｌ、（４０±０６）ｎｇ／Ｌ比较,差异有显著性（Ｐ＜００１）;血清中ＥＴ１活性与动脉血氧分压（ＰａＯ２）呈明显负相关（ｒ＝－０５３８,Ｐ＜００１）;结节病组和ＩＰＦ组ＢＡＬＦ中的ＥＴ１水平与ＢＡＬＦ中细胞总数呈正相关（ｒ＝０６４９,Ｐ＜００１）,肺结节病患者、ＩＰＦ患者ＢＡＬＦ中ＥＴ１与淋巴细胞、中性粒细胞呈正相关（ｒ＝０７１２,０８１３,Ｐ均＜００１）。结论ＥＴ１在肺结节病和ＩＰＦ发病机制中起着重要作用,并可作为疾病活动性判定的一项重要参考指标。     

共刺激信号与支气管哮喘大鼠γδT细胞活化关系的研究

我们以前的研究表明[1,2 ] ,γδＴ细胞在支气管哮喘 (简称哮喘 )患者支气管肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中明显活化 ;γδＴ细胞可能存在Ｔｈ1/Ｔｈ2模式 ,并表现为Ｔｈ2优势应答。为进一步阐明γδＴ细胞活化的细胞和分子机制 ,我们探讨了单核 /巨噬细胞 (Ｍｏｎ/Ｍ)与γδＴ细胞间共刺激分子Ｂ7∶ＣＤ2 8/ＣＴＬＡ 4的改变。材料与方法　 2～ 3月龄雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 0只 ,体重(2 0 0± 5 0 )ｇ。随机分为正常组和哮喘组 ,每组各 10只。哮喘模型的建立、鉴定及标本的收集和处理按文献 [1]方法。用补体攻击结合洗淘法进行γδＴ细胞选择…     

内源性一氧化氮对哮喘患者白细胞介素(IL)-4、IL-5及γ干扰素表达的影响

为探讨哮喘发病中Ｔｈ１和Ｔｈ２细胞间功能不平衡的原因及调节机制,本组观察了哮喘发作期患者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）白细胞介素（ＩＬ）４、ＩＬ５和γ干扰素（ＩＦＮγ）ｍＲＮＡ表达及分泌水平的变化,并观察体外实验中左旋精氨酸（ＬＡｒｇ）及Ｎω左旋精氨酸甲酯（ＬＮＡＭＥ）对其的影响。一、对象与方法１．对象：哮喘组：根据１９９７年全国哮喘会议制订的诊断标准［１］诊断的１０例哮喘发作期患者,男女各５例,平均年龄３４岁,均为支气管舒张试验１秒钟用力呼气容积占用力肺活量比值（ＦＥＶ１％）＞１５％或乙…     

硝酸甘油对哮喘患者一氧化氮内皮素的影响及机制

目的　了解哮喘患者肺泡巨噬细胞（ＡＭ） 、支气管上皮细胞（ＢＥＣ） 源性一氧化氮（ＮＯ）、内皮素（ＥＴ）的分泌状态及硝酸甘油（ＮＴＧ）对哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ产生ＮＯ、ＥＴ的影响及机制。方法　分离纯化了１５ 例轻、中度哮喘发作期患者、７ 名健康受试者ＡＭ、ＢＥＣ,并分为哮喘未干预组、哮喘ＮＴＧ干预组和健康对照组,用放射免疫法和镀铜镉还原法分别测定ＡＭ、ＢＥＣ培养４８ 小时上清液中ＥＴ、ＮＯ·２／ＮＯ·３ 浓度,用原位杂交的方法检测ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ、ＥＴｍＲＮＡ 的表达。结果　（１） 健康受试者ＡＭ、ＢＥＣ分泌少量ＮＯ和ＥＴ及少量ｉＮＯＳｍＲＮＡ 、ＥＴｍＲＮＡ表达;（２）哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ源性ＮＯ、ＥＴ水平及ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ、ＥＴｍＲＮＡ表达与各组比较差异有显著性（ Ｐ均＜ ０－０５）;（３）ＮＴＧ 促进哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ源性ＮＯ产生（ Ｐ均＜０－０５）,明显抑制ＥＴ产生和ＥＴｍＲＮＡ 的表达,与对照组比较差异均无显著性（ Ｐ均＞ ０－０５） ,ＮＴＧ同时抑制哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达,与健康对照组、哮喘未干预组比较差异有显著性（Ｐ均＜０－０５） ;（４） 除哮喘ＮＴＧ