一种改良帕金森大鼠模型的制作

目的 建立一种改进的帕金森（PD）大鼠模型制作方法，并对模型进行综合评价。方法 选取Wistar大鼠60只，分别制作右侧中脑黑质致密部（SNc）和中脑内侧前脑束（MFB）两点6-OHDA毁损传统PD大鼠模型及中脑内侧前脑束（MFB）单点6-OHDA毁损改良PD大鼠模型；检测大鼠行为及黑质多巴胺（DA）能神经元变化。结果 改良组大鼠死亡率低于传统组和对照组，行为学检测和免疫组化检测与传统组差异无显著性（P〉0．05），与对照组比较注射侧黑质多巴胺能神经元显著减少（P〈0．01）。结论 本实验方法可快速简便地建立稳定的PD大鼠模型．     

腺病毒介导的血管内皮生长因子基因转移对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)基因转移对帕金森病(PD)大鼠的保护作用。方法携带VEGF165基因的腺病毒(Ad-VEGF165)感染PD模型大鼠纹状体后,采用大鼠旋转行为观察、免疫组织化学方法和高效液相色谱技术检测VEGF165基因转移的PD大鼠行为学变化、黑质纹状体酪氨酸羟化酶(TH)、层黏蛋白(laminin)和胶质纤维原性酸性蛋白(GFAP)的表达以及纹状体区多巴胺(DA)及代谢产物含量变化。并与重组腺病毒载体(Ad-Lacz)组及磷酸盐缓冲液(PBS)组进行比较。结果Ad-VEGF165成功感染PD大鼠并高表达目的基因和蛋白。感染Ad-VEGF165的大鼠获得行为学改善,其黑质和纹状体TH阳性细胞数和纤维密度与对侧半球的比值(0．42±0．11和0．56±0．10)高于Ad-LacZ组(0．20±0．10和0．28±0．09)和PBS组(0．22±0．13和0．24±0．08),P<0．01;纹状体区血管和胶质细胞数量均明显增多;Ad-VEGF165感染组大鼠纹状体区DA及代谢产物含量与对侧比值也高于对照组。结论Ad-VEGF基因转移能保护PD大鼠多巴胺能神经元,血管和胶质细胞的增生可能参与了VEGF对在体多巴胺能神经细胞的保护机制。     

姜黄素对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元作用的研究

目的探讨姜黄素（Curcumin,Cur）对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）制备的帕金森病（PD）模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法将C57BL6雄性小鼠随机分为正常对照组、MPTP模型组及姜黄素预处理组。用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测黑质酪氨酸羟化酶（TH）及多巴胺转运体（DAT）基因的表达水平。应用高效液相色谱法检测纹状体（Str）内DA及其代谢物二羟基苯乙酸（DOPAC）含量。结果MPTP模型组黑质TH和DAT基因的表达较正常对照组明显降低,姜黄素预处理组可逆转上述改变（P〈0.01）。MPTP模型组Str内DA及其代谢产物DOPAC的含量较对照组明显减少,应用姜黄素后可逆转上述改变（P〈0.01）。结论姜黄素对MPTP制备的PD模型小鼠黑质纹状体DA能神经元有明显的保护作用。     

表没食儿茶素没食子酸酯对帕金森病大鼠的神经保护作用及其机制探讨

目的观察表没食儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）对鱼藤酮致帕金森（Parkinson disease,PD）大鼠模型黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法健康成年雄性Wistar大鼠60只,随机分为对照组、实验组和药物干预组（每组20只）。实验组和药物干预组背部皮下注射鱼藤酮制备PD大鼠模型,药物干预组同时给予大鼠腹腔注射EGCG。采用分光光度法检测大鼠脑内丙二醛（malondialdehyde,MDA）和还原型谷胱甘肽（dutathione,GSH）,免疫组织化学和Western blot检测大鼠中脑黑质及纹状体中酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）的表达变化。结果实验组大鼠纹状体中MDA明显增高（P〈0．05）,GSH含量明显降低（P〈0．05）,中脑TH免疫反应阳性神经元数明显少于对照组（P〈0．05）,TH蛋自在黑质和纹状体与对照组比较明显降低（P〈0．05）;EGCG干预后与实验组相比MDA明显降低及GSH明显增高（P〈0．05）,TH免疫反应阳性神经元数明显增加（P〈0．05）,TH蛋白明显增加（P〈0．05）。结论化应激在PD发病中起着非常重要的作用,抗氧化治疗能有效减轻大鼠脑内多巴胺能神经元损伤情况,同时改善PD样症状,为PD的治疗提供了新的靶点。     

抑颤汤治疗帕金森病的实验研究

目的：探讨抑颤汤治疗帕金森病（Parkinson′s disease,PD）的作用机制。方法：建立PD大鼠模型，设立正常对照组、生理盐水对照组、抑颤汤组，观察抑颤汤治疗前后PD大鼠行为特征、脑黑质神经细胞变化；采用脑组织液微透析技术，用高效液相色谱法测定细胞外液中儿茶酚胺类物质含量的变化；用放免法测定M、DA受体数量及亲和力的变化。结果：抑颤汤能明显改善PD模型大鼠的旋转行为，同时提高了损毁侧脑组织DT和M爱体最大结合量（Bmax）和亲和常数（KD），尾状核和壳状核部位的细胞外液中DOPAC、HVA、DA、5－HT水平明显低于未损毁侧，与生理盐水组对照差异显著（P＜0．01）。与生理盐水组对照，脑黑质神经细胞数量明显增多，神经元体积较饱满，结构较清晰，细胞内高尔基体、线粒体等趋于正常。结论：抑颤汤能刺激PD模型大鼠受体系统，使DA、M受体的亲和力和敏感性提高；促进其损毁侧黑质纹状体分泌儿茶酚胺类物质，提高脑组织中儿茶酚胺类物质的含量；促进受损脑黑质神经细胞的修复，为临床应用抑颤汤治疗PD提供了实验依据。     

3 种不同脑区定点注射 6-OHDA 单侧损伤大鼠帕金森病模型的比较研究

[摘要] 目 的 从 神 经 行 为 学、组 织 病 理 和 生 化 方 面 对 3 种 不 同 脑 区 单 侧 定 点 注 射 6- 羟 基 多 巴 胺 ( 6- hydroxydopamine , 6-OHDA )损伤大鼠帕金森病( Parkinsondisease , PD )模型进行比较研究。方法 健康雄性 SD 大 鼠随机分为 3 组( n =10 ):纹状体组、黑质组、黑质 + 中脑腹侧被盖区组。根据脑立体定位图谱,将微量 6-OHDA 单点定位注入大鼠中脑黑质区、纹状体区和双点定位注入黑质区与中脑腹侧被盖区。观察阿朴吗啡诱发大鼠旋转 行为,免疫组织化学检测大鼠黑质区酪氨酸( tyrosinehydroxy-lase , TH + )阳性神经元数目,电化学高效液相色谱法 检测纹状体中多巴胺( dopamine , DA )及其代谢产物 3 , 4- 二羟苯乙酸( dihydroxy-phenylaceticacid , DOPAC )和高香 草酸( homovanillicacid , HVA )含量。结果 纹状体组 3 周后模型稳定,黑质组与黑质 + 中脑腹侧被盖区组大鼠 2 周后稳定, 3 组 30min 内向健侧转圈数均呈升高趋势,黑质 + 中脑腹侧被盖区组高于纹状体组和黑质组,组间· 时点间交互作用差异有统计学意义( P <0.05 )。纹状体组和黑质 + 中脑腹侧被盖区组造模成功率高于黑质组 ( P <0.05 )。 3 组大鼠注射 6-OHDA 损伤侧纹状体中 DA 、 DOPAC 、 HVA 含量和 TH + 神经元数目均明显低于非 损伤侧( P <0.05 )。结论 纹状体单点注射 6-OHDA 损伤建立 PD 模型成功率高,可作为研究 PD 的一种稳定可靠 的动物模型。     

蛋白酶抑制剂Lactacystin建立帕金森病大鼠模型的胶质细胞反应

目的：探讨蛋白酶抑制剂造成的蛋白酶功能损伤的帕金森病（PD）动物模型黑质区胶质细胞的病理特点.方法：将SD大鼠随机分成3组：Lactacystin组、生理盐水组及正常对照组.使用立体定向注射方法向黑质区注射Lactacystin制作PD大鼠单侧模型.采用免疫组化方法观察大鼠黑质区酪氨酸羟化酶（TH）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、植物凝集素（BSI-B4）免疫阳性细胞并对其进行细胞计数及灰度分析,对黑质区的多巴胺神经元、星形胶质细胞及小胶质细胞进行分析.结果：模型组病变侧黑质区TH阳性细胞较正常组和生理盐水组明显减少（P〈0.05）,胞浆染色浅.GFAP免疫组化染色模型组灰度值较正常组及生理盐水组降低（P〈0.05）.BSI-B4免疫组化染色模型组阳性细胞均数较正常组和生理盐水明显增加（P〈0.05）;模型组灰度值较正常组及生理盐水组低（P〈0.05）.结论：泛素蛋白酶抑制剂lactacystin可导致多巴胺能神经元变性死亡,并可导致黑质区小胶质细胞增生活化与星形胶质细胞的活化.     

黑质致密部和内侧前脑束注射6-OHDA 制备的帕金森病大鼠模型纹状体中 DA 含量比较

目的：：比较黑质致密部(SNc)损毁和内侧前脑束(MFB)损毁2种方法制备的帕金森病(PD)大鼠模型对纹状体中多巴胺(DA)递质含量的影响。方法：将大鼠随机分为假手术组(n=12)、SNc 损毁组(n=15)和 MFB 损毁组(n=14)。采用高效液相色谱-电化学检测法,观察3组大鼠损毁侧纹状体中 DA的含量。结果：与假手术组相比较,SNc 损毁组(P <0.001)和 MFB 损毁组(P <0.001)大鼠纹状体中 DA含量均显著降低,与 SNc 损毁组相比较,MFB 损毁组大鼠纹状体中 DA 含量下降更为显著(P =0.005)。结论：MFB 损毁制备的 PD 大鼠模型对 DA 能神经元的损伤范围较 SNc 损毁有所扩大,为不同研究选择制备模型的方法提供一定的理论依据。     

质子磁共振波谱在帕金森病大鼠模型中的应用研究

目的：探讨质子磁共振波谱（^1H-MRS）在帕金森病（PD）大鼠模型纹状体内的变化及在PD大鼠模型中的应用。方法：选用雄性Wistar大鼠12只,向其右侧纹状体内两点注射6-羟基多巴（6-OHDA）制作PD大鼠模型。5周后颈部皮下注射阿朴吗啡诱导其向健侧旋转,每分钟大于7圈者为成功模型,获6只。对照组6只大鼠以同样方法注射等剂量的生理盐水。利用BIOSPEC47／30核磁共振仪（4．7T）对双侧纹状体行^1H-磁共振波谱检测,检测后立即处死动物并行黑质及纹状体酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学染色。结果：模型组大鼠右侧黑质致密部TH阳性神经元及纹状体TH阳性纤维明显减少（P〈0．01）,证明模型制作成功。模型组大鼠右侧（毁损侧）纹状体内NAA／Cr比值明显低于左侧及对照组的两侧f尸〈0．05）,对照组两侧NAA／Cr比值无显著差别。两组大鼠双侧纹状体内Cho／Cr比值均无显著差别。结论：^1H-MRS可以作为一种无创性的新技术,为偏侧大鼠PD模型纹状体部位的神经细胞的病理学改变提供有价值的信息。     

EGb防治PD的实验研究

目的 观察银杏叶提取物（Ginkgo biloba leaves,EGb）在1－甲基－4苯基－1,2,3,6－四氢吡啶（1－methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahyropyridine,MPTP）诱导的帕金森氏病（PD）模型中对旋转症状及纹状体中多巴胺（dopamine,DA)含量的影响。方法 腹腔注射EGb连续20d,采用大脑立体定位仪向大鼠黑质内注射MPTP诱导旋转,观察大鼠旋转情况,测定大鼠相关脑区中DA含量的变化。结果 EGb相对增加了纹状体中DA的含量,改善了PD的旋转症状。结论 EGb对MPTP诱导的在鼠PD模型有防治作用。     

神经降压素对帕金森病模型大鼠纹状体DA含量影响

目的观察神经降压素(NT)对正常和帕金森病模型大鼠纹状体多巴胺(DA)及其代谢产物含量的影响。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)单侧损毁内侧前脑束制备帕金森病大鼠模型。将5μL 1 mmol/L NT或生理盐水双侧缓慢注入正常及帕金森病模型大鼠侧脑室30 min后,利用高效液相色谱分析(HPLC)法检测纹状体DA及其代谢产物高香草酸(HVA)和3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)含量的变化。结果正常大鼠NT组纹状体DA含量与生理盐水组相比均明显升高(t=5.32,P<0.01)。帕金森病模型大鼠生理盐水组损毁侧纹状体DA含量与未损毁侧和正常大鼠生理盐水组相比明显降低(F=61.23,P<0.001);损毁侧纹状体DA更新率(DOPAC+HVA)/DA、DOPAC/DA、HVA/DA均明显高于未损毁侧和正常大鼠生理盐水组(F=27.52、21.12、28.43,P<0.001)。帕金森病模型大鼠侧脑室注射NT可明显提高两侧纹状体DA的含量(t=3.87、2.26,P<0.05)。结论 NT可增加正常及帕金森病模型大鼠纹状体DA的含量,提示NT具有抗帕金森病效应。     

葛根素对急性乙醇中毒大鼠脑内阿片肽和多巴胺的调控作用

目的： 检测葛根素对急性乙醇中毒大鼠皮层、小脑、海马和纹状体内阿片肽和多巴胺（DA）表达水平的调控作用,为临床防治乙醇中毒和开发中药葛根提供依据。方法： 雄性SD大鼠24只随机分为对照组、乙醇中毒组和葛根素组,每组8只,采用放射免疫法检测各组大鼠皮层、小脑、海马和纹状体内β-内啡肽（β-EP）、强啡肽（DnyA）和亮脑啡肽（L-EK）表达水平,采用高效液相色谱法检测各组大鼠各脑区DA、多巴克（DOPAC）和高香草酸（HVA）的表达水平,并计算（DOPAC+HVA）/DA的比值。结果：与对照组比较,乙醇中毒组和葛根素组大鼠皮层内β-EP、DnyA和L-EK表达水平降低(P<0.01),皮层、小脑、海马和纹状体内 DA、DOPAC和HVA表达水平均升高 (P<0.01);与乙醇中毒组比较,葛根素组大鼠皮层内β-EP、DnyA和L-EK表达水平升高(P<0.05,P<0.01),DA(P<0.01)、DOPAC(P<0.01)和HVA表达水平均降低,小脑、海马和纹状体内所有指标表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),皮层、小脑和海马内（DOPAC+HVA）/DA 比值升高,纹状体内该比值降低（P>0.05）。结论：葛根素对急性乙醇中毒造成的脑组织损伤有保护作用,其机制可能与葛根素对脑内阿片肽和DA的调控有关。     

姜黄素类似物L6H3对帕金森病大鼠脑部纹状体中单胺类神经递质代谢物的影响

目的：研究姜黄素类似物L6H3对帕金森病（PD）大鼠脑纹状体中7种单胺类神经递质及其代谢物的影响。方法：采用脑部纹状体定位注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）建立PD大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、PD组和PD+L6H3组。通过微透析活体取样技术和高效液相色谱电化学检测法（HPLC-ECD）联用测定PD组大鼠脑纹状体细胞外液中单胺类神经递质及其代谢物含量。结果：造模后第6周（即给药第2周）及造模后第7周（即停药第1周）,PD+L6H3组大鼠脑纹状体的多巴胺（DA）、3,4-二羟基苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、5-羟色胺（5-HT）、5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）与PD组比较明显升高（P＜0.01）。结论：L6H3在给药后第2周及停药后1周均能明显提高PD大鼠脑中单胺类神经递质及其代谢物的含量。     

建立类似于绝经期妇女帕金森病大鼠模型的实验研究

目的探讨利用6-羟基多巴(6-OHDA)制备模拟绝经期妇女帕金森病的大鼠模型。方法应用6-OHDA制备OVX PD模型大鼠,应用免疫组织化学染色、高效液相色谱法等技术对大鼠黑质(SN)的酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数目、纹状体多巴胺(DA)及其代谢物二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量进行考察并评价。结果阿朴吗啡可诱导出明显的PD大鼠旋转行为;大鼠损伤侧黑质TH阳性神经元数量较健侧显著减少(P<0.01),纹状体DA及其代谢物DOPAC和HVA含量也较健侧明显减少(P<0.01)。结论本模型具有绝经期妇女帕金森病的基本的病理特点。     

淫羊藿苷脂质体经鼻给药对帕金森病大鼠行为学及神经递质的影响

目的观察经鼻给予淫羊藿苷脂质体对帕金森病模型大鼠的行为学症状及纹状体相关神经递质含量的影响。方法按随机原则选16只大鼠为假手术组(假手术/in组),另将64只造模成功的PD大鼠分为PD模型组(PD/in组)、淫羊藿苷脂质体经鼻给药组(ICA-PGL/in组)、淫羊藿苷经鼻给药组(ICA/in组)、淫羊藿苷脂质体静脉注射给药组(ICA-PGL/iv组),每组16只。药物持续干预2周后,通过检测大鼠阿扑吗啡旋转次数、圆筒实验、纹状体区TH表达以及相关神经递质含量的改变来观察淫羊藿苷脂质体结合经鼻给药方式对帕金森病模型大鼠的疗效。结果淫羊藿苷各治疗组运动功能较PD/in组有不同程度的改善,纹状体区双侧TH阳性纤维表达及纹状体区右侧单胺类神经递质DA、DOPAC和HVA含量较PD/in组均有不同程度的提高,其中以ICA-PGL/in组疗效最为突出(P0.01)。结论经鼻给药淫羊藿苷脂质体对帕金森病模型大鼠运动功能及神经递质的修复有不错的疗效。     

温肾养肝汤对MPTP所致帕金森病多巴胺能神经元损伤保护的分子机制研究

目的 探讨温肾养肝汤保护多巴胺(Dopamine,DA)能神经元,延缓帕金森病(Parkinson's disease,PD)进程的作用机制.方法 将50只小鼠随机分为正常组,模型组,温肾养肝汤高、低剂量组,金刚烷胺组,每组10只,除正常组外,其余组小鼠腹腔注射30 mg·kg-11-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四...     

益智宁神颗粒对SHR大鼠前额叶-纹状体多巴胺含量、GDNF mRNA及其蛋白表达的影响

[目的]研究益智宁神颗粒对幼龄自发性高血压(SHR)大鼠前额叶-纹状体多巴胺含量、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA及其蛋白表达的影响。[方法]以32只幼年SHR大鼠为研究对象,采用随机区组法分为模型对照组、益智宁神组、盐酸哌甲酯组、托莫西汀组,另设8只京都(WKY)大鼠为正常对照组。按各组设计剂量连续给药4周后,取前额叶、纹状体,采用高效液相法检测多巴胺(DA)含量、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测GDNF mRNA表达、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测GDNF蛋白表达。[结果]1)SHR各组大鼠前额叶、纹状体DA的含量均有低于WKY组的趋势,其中,益智宁神组大鼠前额叶DA含量明显高于模型对照组(P0.05);益智宁神组大鼠纹状体DA含量低于正常对照组、盐酸托莫西汀组(P0.05)。2)SHR各组前额叶、纹状体GDNF mRNA表达依次为盐酸托莫西汀组盐酸哌甲酯组益智宁神组模型对照组(P0.05)。3)SHR大鼠各组间前额叶、纹状体GDNF蛋白表达均高于WKY组;其中,益智宁神组前额叶GDNF蛋白表达与其余SHR大鼠各组无统计学差异(P0.05),其纹状体GDNF蛋白表达低于盐酸哌甲酯组(P0.05)。[结论]益智宁神颗粒能够提高SHR特定脑区DA含量、GDNF mRNA及其蛋白表达,对促进幼龄SHR大鼠特定脑区DA能神经网络成熟度具有一定的作用。     

震颤宁治疗帕金森病的实验研究

[目的]探讨中药襄颤宁治疗帕金森氏病(PD)的药效机理。[方法]采用6-羟多巴胺(6-OHDA)纹状体两点注射法复制PD模型,观察震颤宁对大鼠旋转行为、纹状体及血液中多巴胺(DA)和高香草酸(HVA)、过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量的影响。[结果]高剂量震颤宁可改善PD大鼠旋转行为,使旋转圈数较治疗前减少(P<0.05);提高大鼠全血GSH舍量(P<0.05),使GSH-PX活性显著增高(P<0.01),血清MDA含量显著降低:右侧纹状体GSH含量显著增高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),并可增加纹状体DA含量,降低HVA/DA比值。低剂量震颤宁对PD大鼠旋转行为无明显改善(P>0.05);可降低血清MDA含量(P<0.01),而对GSH-PX活性无明显改善;并可使大鼠纹状体GSH含量增加,而对MDA含量无明显影响,对DA、HVA/DA亦无显著影响。[结论]震颤宁可能通过改善机体及纹状体的氧化应激状态和保护神经元,间接补充纹状体DA含量而改善PD症状,并呈剂量效应关系。