天冰调督胶囊对慢性点燃癫痫大鼠学习记忆行为及海马NMDAR1表达的影响

目的:观察天冰调督胶囊对印防己毒化学点燃癫痫模型大鼠学习记忆行为学改变及海马组织NMDAR1表达的影响。方法:SD大鼠腹腔注射印防己毒素(1.5 mg/kg)连续30 d,制作反复发作癫痫模型,点燃模型大鼠随机分为模型组、天冰调督胶囊低(0.4 g/kg)、高(0.8 g/kg)剂量组、丙戊酸钠组及拉莫三嗪组,采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆行为学,RT-PCR检测海马组织NMDAR1 mRNA,Western-blot和免疫组化法检测NMDAR1蛋白表达情况。结果:治疗60 d后,与模型组比较,天冰调督胶囊低、高剂量组大鼠水迷宫实验寻找平台时间显著缩短(P0.05或P0.01),通过平台次数显著增加(P0.01);NMDAR1 mRNA含量均增加(P0.05或P0.01);在CA3、DG区NMDAR1表达均增强(P0.05)。结论:天冰调督胶囊可能通过调节NMDAR1水平改善癫痫学习记忆等认知障碍。     

调督抗痫胶囊对马桑内酯所致大鼠癫痫模型情感行为及空间记忆的影响

目的:研究调督抗痫胶囊抗马桑内酯所致大鼠慢性癫痫大发作的作用。方法:马桑内酯所致的大鼠慢性癫痫大发作模型,分别口服不同剂量的调督抗痫胶囊、苯妥英钠合脑复康和生理盐水,连续120 d后,按文献的方法,检测癫痫大鼠情感行为、空间记忆的变化和海马Ach含量及ChAT、AchE活动。结果:中药高剂量组和苯妥英钠合脑复康组在旷场活动性、拒俘反应性、水迷宫搜索时间及距离、空间学习记忆能力上明显优于模型组,海马Ach含量及ChAT、AchE活性则高于模型组(P<0.05)。结论:调督抗痫胶囊可以明显改善慢性癫痫大鼠情感行为及认知能力低下状态。     

天冰调督胶囊对慢性点燃癫痫大鼠腺苷A1受体表达的影响

目的探讨天冰调督胶囊对慢性点燃癫痫大鼠腺苷A1受体表达的影响。方法 SD大鼠腹腔注射印防己毒素(1.5 mg/kg)制作慢性反复发作癫痫模型,点燃模型大鼠随机分为模型组,天冰调督低、高(0.4,0.8 g/kg)剂量组,丙戊酸钠组,拉莫三嗪组,各组连续灌胃给药60 d,分别以免疫组织化学方法、免疫印记法观察各组大鼠脑组织腺苷A1R受体表达情况。结果模型组腺苷A1受体免疫反应阳性数量减少,与正常组相比有显著性差异(P<0.05);天冰调督胶囊各组腺苷A1受体表达有不同程度改善(P<0.05或0.01)。结论天冰调督胶囊可能通过调节腺苷A1受体表达改善慢性反复发作癫痫大鼠神经功能。     

调肝解毒方对点燃癫痫大鼠情感行为及神经肽Y蛋白表达的影响

目的观察调肝解毒方对慢性点燃癫痫大鼠情感行为的影响及其作用机制。方法腹腔注射印防己毒素制作慢性癫痫模型,将造模成功的60只SD大鼠随机分为模型组、调肝低量组、调肝高量组、拉莫三嗪组各15只,另设正常组(15只)同期观察治疗60天。治疗期间正常组、模型组灌胃10ml/kg生理盐水;调肝低量组、调肝高量组分别灌胃0.4g/kg、0.8g/kg调肝解毒方混悬液;拉莫三嗪组灌胃0.002g/kg拉莫三嗪混悬液,每天1次。用旷场实验、抬高迷宫实验观察大鼠情感行为改变,并检测大鼠海马等脑组织神经肽Y(NPY)的表达。结果与模型组比较,拉莫三嗪组、调肝高量组情感行为学各指标差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);调肝低量组拒俘反应性评分及开放臂逃避时间差异亦有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,其他各组大鼠脑海马区、尾壳核NPY蛋白表达均明显提高(P<0.05或P<0.01);拉莫三嗪组、调肝高量组脑海马各区NPY阳性细胞数均有增加(P<0.05或P<0.01);调肝低量组CA3、DG区亦有增加(P<0.01)。结论调肝解毒方可改善慢性点燃癫痫大鼠情感行为异常,并可能与其调节脑组织NPY表达有关。     

穴位埋线对癫痫大鼠认知行为、海马神经元丢失程度、及BDNF蛋白表达的影响

目的:观察穴位埋线疗法对氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠认知行为学、镜下海马CAl区神经元丢失程度半定量分析及脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。方法:80只健康SD雄鼠随机分为空白组、模型组、西药组及埋线组,每组20只。癫痫模型建立后分别进行相应的干预共28 d,选择干预前及末次干预2个时间点,分别对各组大鼠进行拒俘反应实验;到达预定存活时间时,处死各组大鼠取海马,尼氏染色法半定量分析各组海马CAl区的神经细胞丢失程度,免疫组化法检测各组海马CA1区BDNF蛋白表达的情况。结果:西药组及埋线组大鼠攻击行为和逃避行为明显减少(P<0.05);西药组、埋线组神经元丢失程度有所减轻(P<0.05);西药及穴位埋线干预后海马中BDNF表达均较模型组增高(P<0.05);各指标西药组与埋线组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:癫痫可造成大鼠认知障碍,穴位埋线可以通过间接提高BDNF蛋白表达以减缓海马神经细胞丢失程度,具有明显的改善癫痫后认知障碍的作用,疗效与口服抗癫痫药左乙拉西坦相当。     

活血通督汤对脊髓损伤后胶质瘢痕形成的影响

目的:观察活血通督汤对脊髓损伤后肢体运动功能和胶质瘢痕形成的影响,探讨活血通督汤治疗脊髓损伤的作用机制。方法:成年SD大鼠18只,采用随机数表法随机分为假手术组、模型组和活血通督汤组,每组各6只。假手术组仅行椎板切除术,模型组和活血通督汤组采用NYU脊髓打击器建立脊髓损伤模型,造模后假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,活血通督汤组给予活血通督汤灌胃。术后第1,3,5,7天行BBB肢体运动功能评分,7d后取材。采用尼氏染色法观察神经元细胞形态结构以及神经元受损情况,免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,计算GFAP阳性细胞数。结果:自术后第3天起,活血通督汤组的大鼠BBB评分高于模型组大鼠BBB评分,差异有统计学意义(P0.05);尼氏染色结果显示活血通督汤组神经元受损情况得到改善,神经元的形态结构优于模型组;免疫荧光检测结构显示与假手术组相比,脊髓损伤后GFAP表达显著,损伤处GFAP阳性细胞数增多,差异有统计学意义(P0.05);与模型组相比,活血通督汤组GFAP阳性细胞数较少,差异有统计学意义(P0.05)。结论:活血通督汤能促进脊髓损伤后肢体运动功能的恢复,其机制可能与抑制GFAP表达、降低脊髓损伤后胶质瘢痕形成有关。     

草果知母汤对印防己毒点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力的影响

目的:观察草果知母汤(Tsaoko-Anemarrhenae decoction,TAD)对印防己毒(Picrotoxin,PTX)化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力的影响,为进一步研究癫痫患者学习记忆损害的治疗提供线索。方法:27只雄性SD大鼠随机分为点燃组、点燃+TAD组和对照组,分别用PTX、PTX+TAD和生理盐水腹腔注射,然后行水迷宫行为的测定,评价其学习记忆能力。结果:癫痫大鼠在水迷宫测定中,点燃组和点燃+TAD组在寻找平台的潜伏期时间与对照组相比没有显著性差异。点燃组对平台空间位置的记忆的能力较对照组要差,差异有显著性。点燃+TAD组对平台空间位置的记忆能力与对照组无显著性差异,但是明显好于点燃组(P0.05)。结论:PTX化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中记忆能力下降,而TAD能明显改善PTX化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中的记忆能力。     

益肾调督针法对脑缺血再灌注模型大鼠大脑海马神经元凋亡及JNK、p-JNK表达的影响

目的：研究益肾调督针法对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡的影响。方法：SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和益肾调督针法组,每组10只。除假手术组外,其余各组均应用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型。益肾调督针法组予针刺百会、风府、大椎、命门及双侧肾俞、太溪穴,于缺血再灌注24 h后针刺1次。应用Zea-Longa评分法评估各组大鼠神经功能,应用HE染色观察大鼠海马神经细胞病理形态学变化,应用TTC染色法观察大鼠脑组织梗死情况,TUNEL法检测海马神经细胞的凋亡情况,免疫荧光技术检测JNK、p-JNK的表达情况。结果：与假手术组比较,模型组的神经行为学评分显著升高（P<0.01）,大鼠海马神经细胞排列散乱,核固缩、深染,脑组织相对梗死体积百分比增大（P<0.05）,凋亡神经元数量、JNK及p-JNK阳性表达均明显升高（P<0.05）;与模型组比较,益肾调督针法组大鼠的神经行为学评分显著降低（P<0.01）,海马神经细胞形态改善,脑组织相对梗死体积百分比明显缩小（P<0.05）,凋亡神经细胞数目、JNK及p-JNK阳性表达明显降低（P<0.05）。结论：益肾调督针法能有效改善缺血再灌注大鼠神经功能缺损情况,下调海马区JNK和p-JNK的表达,减少神经细胞凋亡,这可能是其防治脑缺血再灌注损伤的机理所在。     

活血通督汤对大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障的修复作用

目的：通过对大鼠脊髓损伤（SCI）后的行为学评分、脊髓组织病理分析以及血-脊髓屏障（BSCB）功能的评测,观察活血通督汤对大鼠SCI后BSCB的影响。方法：将24只雌性SD大鼠随机均分为假手术组、模型组及活血通督汤组,每组8只。假手术组仅咬除椎板不损伤脊髓,模型组和活血通督汤组采用改良Allen’s法建立SCI模型。分别于第1、3、5、7天行BBB评分,7 d后取材。采用HE染色观察大鼠脊髓组织受损程度,尼氏染色观察神经元形态,透射电镜观察BSCB紧密连接超微结构,EB染色检测BSCB通透性。结果：与假手术组比较,模型组和活血通督汤组相同时点BBB评分显著降低（P<0.01）,在干预第7天时,活血通督汤组大鼠BBB评分显著高于模型组（P<0.05）。HE染色结果显示：与模型组比较,活血通督汤组炎症细胞浸润有所减少,神经细胞形态结构较完整且数量增多,但仍存在脊髓空洞样病变;尼氏染色结果显示：与模型组比较,活血通督汤组神经细胞形态较好且数量增多,尼氏体数量较多,空泡样改变减少,瘀血面积较小或消失;透射电镜结果显示：与模型组比较,活血通督汤组大鼠脊髓血管内皮细胞紧密连接较完整,血...     

滋肾通络方对局灶性脑缺血大鼠脑组织脑源性神经营养因子蛋白含量的影响

目的观察滋肾通络方对MCAO大鼠脑组织脑源性神经营养因子(brain derived neurophic factor,BDNF)蛋白含量的变化,以探讨BDNF在脑缺血中的意义及滋肾通络方对缺血周围区神经细胞损伤修复的作用。方法制作MCAO大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药组。灌胃20天后,取大鼠脑组织,用免疫组织化学法检测各组BDNF的蛋白表达。结果假手术组海马区几乎见不到BDNF阳性细胞表达;模型组切片染色增强,阳性细胞略有表达;西药组、中药低剂量组及高剂量组均见到切片染色强,BDNF阳性细胞强表达,尤以中药高剂量组阳性细胞表达最强。结论 BDNF与损伤后神经元的修复作用有关。滋肾通络方可通过调节BDNF的合成,促进神经细胞的存活和损伤修复,从而减轻缺血性脑损伤。     

耳针改善血管性痴呆大鼠记忆与nNOS表达的关系

目的 探讨耳针对血管性痴呆大鼠（VD）学习记忆的改善及与nNOS蛋白表达的关系。方法采用4－血管阻断的方法,建立大鼠VD模型,然后进行耳穴肾, 脑针刺治疗,用免疫组化法检测海马nNOS蛋白的变化,并用Nissl染色方法,结合图象分析统计海马神经元丢失比率;同时采用Y型迷宫,进行行为学检测,定量测定其学习记忆成绩,结果 耳针治疗后VD大鼠海马CA1区nNOS蛋白表达减少,海马CA1区神经元技失比率较VD模型组减少,与学习记忆成绩呈负相关。结论 耳针改善了VD大鼠学习记忆,这可能是针刺抑制脑缺血后nNOS的过量增加,达到对VD大鼠海马神经元的保护作用。     

熟地黄有效成分5-HMF对皮质酮损伤型海马神经元GCR、BDNF、SGK表达的影响

目的:观察熟地黄中有效成分5-羟甲基糠醛(5-HMF)对高浓度皮质酮(CORT)致海马神经元损伤及学习记忆相关蛋白学习记忆相关蛋白(GCR)、脑源性神经营养因子(BDNF)、血清和糖皮质激素调节蛋白激酶(SGK)蛋白表达的影响。方法:用24h新生大鼠原代培养海马神经细胞。第8天细胞用药处理,将细胞分为3组:正常对照组、模型组及5-HMF组。24h后,通过MTT法测定细胞活性,生化方法检测衰老特异性指标β-半乳糖苷酶活性,Western Blot检测学习记忆相关蛋白GCR、BDNF、SGK的基因表达。结果:与正常组相比,模型组细胞活力显著下降,β-半乳糖苷酶活性显著升高,GCR、BDNF、SGK蛋白表达显著性降低;0.5mg/L的5-HMF明显提高细胞活力,降低β-半乳糖苷酶活性,提高模型细胞GCR、BDNF、SGK基因表达(P0.05,P0.01)。结论:0.5mg/L 5-HMF可以保护大鼠海马神经细胞免遭高浓度皮质酮的损伤,通过调节GCR、BDNF、SGK的基因表达,可能在延缓学习记忆功能退化中发挥作用。     

土家药天珠散对脑缺血所致大鼠学习记忆障碍的改善作用

目的研究天珠散对脑缺血所致的血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆相关指标的影响。方法双侧颈总动脉永久性结扎复制脑缺血所致学习记忆障碍大鼠模型,天珠散连续ig给药63 d,以Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,脑海马组织HE染色和Nissl染色观察病理变化,免疫组织化学法检测大鼠海马微管相关蛋白-2(MAP-2)、突触素-1(SYN-1)表达。结果 Morris水迷宫实验,从第2天开始,模型组大鼠逃避潜伏期明显长于假手术组(P0.05、0.01),尼莫地平组和天珠散给药组大鼠逃避潜伏期较模型组不同程度缩短(P0.05、0.01)。HE染色显示模型组大鼠脑海马CA1、CA3区神经细胞出现变形、坏死,尼莫地平、天珠散能减轻神经细胞损伤。Nissl染色显示,天珠散能增加海马CA1、CA3区尼氏体含量。尼莫地平能显著提高大鼠脑海马MAP-2表达,天珠散有增加MAP-2表达的趋势。SYN-1在不同区域表达结果不同,CA1、齿状回区模型组增加,CA3区下降,天珠散具有增加CA3区SYN-1表达趋势。结论天珠散能通过减轻脑组织神经细胞的损伤、促进神经递质的合成,调节MAP-2、SYN-1表达,改善慢性低灌注型VD大鼠的学习记忆能力。     

消郁安神胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元形态的影响

目的 观察消郁安神胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元形态的影响.方法 对抑郁模型大鼠灌胃消郁安神胶囊,然后观察大鼠的空间学习记忆行为和海马神经元形态.结果 慢性应激抑郁模型大鼠空间学习记忆能力明显下降,还能使海马CA1区和CA3区锥体细胞层变薄,细胞排列紊乱、疏松,胞浆尼氏体减少,并且出现大量神经元缺失,药物组动物改善明显.结论 消郁安神胶囊能抵抗抑郁模型大鼠海马神经元的形态改变.     

补肾活血中药复方对实验性糖尿病大鼠视路神经元病理损害的影响及机理探讨

目的:观察实验性糖尿病大鼠视路神经元组织形态学的病理改变,并探讨补肾活血中药复方防治实验性糖尿病大鼠视路损害的作用机理。方法:用免疫组化及Nissl染色结合图像分析半定量测定视网膜、外侧膝状体及视皮质的神经营养因子-3(neurotrophic-3,NT-3)、突触素I(synapsin I,Syn I)的表达强度和Nissl小体的含量。结果:与正常对照组相比,阴性对照组大鼠视路三级神经元的NT-3、Syn I的表达强度和Nissl小体的含量均明显降低(P<0.05或0.01);与阴性对照组相比,中药治疗组大鼠视网膜、外侧膝状体及视皮质的NT-3、Syn I表达强度和Nissl小体的含量均明显增高,尤以中药高剂量组明显(P<0.05或0.01)。结论:补肾活血中药能减轻实验性糖尿病大鼠视路三级神经元病理损害,其作用机制之一可能是通过增加糖尿病大鼠视路NT-3的表达,一定程度恢复糖尿病大鼠视觉通路神经细胞突触的密度和分布(轴突再生),并改善其神经递质释放调节功能。     

铁筷子挥发油对慢性脑缺血致血管性认知功能障碍大鼠的作用及机制研究

目的 探究苗药铁筷子[腊梅Chimonanthus praecox及山腊梅C. nitens的干燥根]挥发油对慢性脑缺血（chronic cerebral hypoperfusion,CCH）致血管性认知功能障碍（vascular cognitive impairment,VCI）大鼠的作用及机制。方法 采用改良的双侧颈总动脉结扎（bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO）法建立CCH模型,将造模成功大鼠随机分为模型组及铁筷子挥发油高、中、低剂量（80、40、20 mg/kg）组和丁苯酞（63 mg/kg）组,另设假手术组,给予相应药物干预28 d,采用水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力;采用旷场实验、Y迷宫实验检测各组大鼠自主活动性和新奇事物探索能力;采用苏木素-伊红（HE）染色、Nissl染色、TUNEL染色观察各组大鼠大脑皮层及海马CA1区神经细胞结构变化、尼氏小体以及凋亡细胞数量变化;采用ELISA法检测各组大鼠血清中脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）水平;采用比色法检测各组大鼠海马组织中乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AChE）和乙酰胆碱转移酶（cholineacetyltransferase,ChAT）的活性;采用Western blotting法检测各组大鼠海马组织中BDNF、酪氨酸激酶受体B（tyrosine kinase receptor B,TrkB）、磷酸化TrkB（phosphorylated TrkB,p-TrkB）、磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylin-ositol-3-kinase,PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein-asparate protease-3,Caspase-3）蛋白表达。结果 与模型组比较,铁筷子挥发油组大鼠逃避潜伏期缩短（P＜0.05、0.01）,穿越平台次数和跨格次数提高（P＜0.05、0.01）,在新异臂所待时间延长（P＜0.05）;神经细胞结构的变性得到改善,脑组织中尼氏小体的数量提高（P＜0.05）,细胞凋亡减少（P＜0.05）;血清中BDNF水平及海马组织中ChAT活性升高（P＜0.05、0.01）,海马组织中AChE活性降低（P＜0.05）;海马组织中BDNF、TrkB、p-TrkB、PI3K和p-Akt蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05、0.01）,Caspase-3蛋白表达水平降低（P＜0.05）。结论 苗药铁筷子挥发油可以改善CCH致VCI大鼠认知功能障碍,其作用机制可能与激活BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路有关。     

肝性脑病大鼠海马神经元的变化与学习记忆力关系的探讨

目的探讨肝性脑病大鼠海马神经元的形态学改变与学习记忆力关系。方法选择雄性大鼠50只,实验开始前所有动物进行Morris水迷宫测试,之后将动物分为正常组和实验组。9周后建立CCl4肝性脑病模型,分别取2组大鼠肝、海马组织进行HE染色、尼氏染色。结果肉眼下可见实验组大鼠肝脏普遍呈坏死性肝硬化,大鼠Morris水迷宫测试逃避潜伏期显著延长;尼氏染色结果显示实验组大鼠海马神经元数目减少、染色较浅,胞浆内尼氏体减少或消失。结论肝性脑病时学习、记忆力下降可能与海马功能受损密切相关。     

茸菖胶囊对戊四唑致痫大鼠学习记忆能力及海马苔藓纤维出芽的影响

[目的]观察茸菖胶囊对戊四唑致癫痫大鼠学习记忆能力及海马组织苔藓纤维发芽(MFS)的影响。[方法]以戊四唑点燃大鼠为模型,随机分为中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、丙戊酸钠组、模型组、正常组,水迷宫实验记录逃避潜伏期和跨越平台次数,戊四唑惊厥阈实验测定惊厥潜伏期,Timm染色法观察海马苔鲜纤维出芽。[结果]各治疗组大鼠与治疗前相比,均可减少大鼠的发作程度,水迷宫实验:中药组逃避潜伏期和跨越平台次数均明显短于模型组(P>0.05)。Timm染色结果表明:各治疗组海马CA3区及齿状回分子层Timm染色颗粒MFS评分低于模型组(P<0.01)。[结论]茸菖胶囊可以有效控制癫痫大鼠的发作次数及级别,改善戊四唑致癫痫大鼠的学习记忆能力,其作用机制与抑制海葬纤维异常出芽,从而保护海马神经元有关。