新疆鼻咽癌226例临床病理分析

目的研究．LMP1在新疆地区鼻咽癌中的表达及EB病毒与鼻咽癌的关系。方法应用免疫组化法检测100例鼻咽癌中EBVLMP1的表达情况。结果100例鼻咽癌中,LMP1阳性表达为60％（60／100）,35例淋巴结转移病例中,LMP1阳性表达为80％（28／35）。EB病毒LMP1阳性表达与鼻咽癌淋巴结转移显著相关,与年龄、性别、民族及组织分型无明显相关性。结论新疆地区鼻咽癌与EBV感染密切相关,EBVLMP1在鼻咽癌发生、发展中扮演重要角色。     

鼻咽癌原发灶与颈部淋巴结转移癌组织中nm23-H1、MMP-9蛋白表达及其意义

目的：研究鼻咽癌原发灶和颈部淋巴结转移癌组织中nm23-H1（non—metastatic cloneNo．23）、MMP-9（matrix metalloproteinase9）基因蛋白的表达及其意义。方法：采用免疫组化二步法检测22例鼻咽癌患者自身原发灶和颈部淋巴结转移癌组织中nm23-H1、MMP-9蛋白的表达。结果：淋巴结转移癌组织的nm23-H1阳性表达率（17／22，77．3％）低于原发灶组织中的表达水平（18／22，81．8％），但未见显著性（P〉0．05）；MMP-9在淋巴结转移癌组织中，癌细胞阳性表达率（19／22，86．4％）高于原发灶组织中的表达水平（13／22，59．1％），差异有显著性（P〈0．05）；原发灶与转移灶中nm23-H1呈正相关，转移癌组织中nm23-H1和MMP-9呈负相关，均有统计学意义（P〈0．05）。结论：在鼻咽癌组织中，nm23-H1蛋白的表达下调可能是导致癌细胞侵袭转移的-个重要因素。MMP-9在鼻咽癌组织其表达强度可能与鼻咽癌病期进展和颈部淋巴结转移有关。     

Cyclin A、CDK2基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的研究细胞周期素A（Cyclin A）和细胞周期素依赖性激酶2（cyclin—dependent kinases，CDK2）基因在非小细胞肺癌（non—small—cell lung cancer，NSCLC）组织中的表达及其相互关系，探讨其对NSCLC发生、发展、淋巴结转移及预后的影响。方法采用免疫组织化学二步法检测40例NSCLC（伴淋巴结转移21例，不伴淋巴结转移19例），11例支气管黏膜上皮增生或不典型增生，9例淋巴结转移癌组织中Cyclin A、CDK2蛋白的表达，并随访40例NSCLC患者3年生存期。结果在支气管黏膜上皮增生或不典型增生，不伴淋巴结转移的NSCLC，伴淋巴结转移的NSCLC，淋巴结转移癌组织中，Cyclin A蛋白的阳性表达率分别为9．09％（1／11），31．58％（6／19），80．95％（17／21），66．67％（6／9）；CDK2蛋白的阳性表达率分别为9．09％（1／11），36．84％（7／19），76．19％（16／21），77．7896（7／9）；不伴淋巴结转移的NSCLC组织中的Cyclin A、CDK2蛋白阳性表达率分别与伴淋巴结转移NSCLC组织、淋巴结转移癌组织的Cyclin A、CDK2蛋白阳性表达率比较，差异均有显著性（P均〈0．05）。23例Cyclin A蛋白表达阳性患者3年生存率为21．74％（5／23），17例表达阴性患者3年生存率为58．82％（10／17），两者比较有显著性差异（P〈0．05）；23例CDK2蛋白表达阳性息者3年生存率为17．39％（4／23），17例表达阴性患者3年生存率为64．71％（11／17），两者比较有显著性差异（P〈0．05）。NSCLC中Cyclin A与CDK2蛋白表达呈正相关（x^2=19．22，P〈0．001，列联系数Pearson=0．570）。结论在NSCLC发生、演进、浸润、淋巴结转移过程中Cyclin A、CDK2起正调控作用，NSCLC组织中Cyclin A、CDK2表达上调可作为判断NSCLC预后不良的参考指标。     

N2~3期鼻咽癌EGFR、VEGF、EBER表达与放化疗敏感性的关系

[目的]探讨N期鼻咽癌EGFR、VEGF、EBER表达与放化疗敏感性间的关系。[方法]采用免疫组织化学疗法研究143例经病理确诊的鼻咽癌患者组织EBER、EGFR和VEGF表达：定量PCR和酶联免疫吸附法（ELISA）检测92例N。期鼻咽癌患者血浆EB病毒游离DNA（EBV／DNA）、EGFR、VEGF的表达水平,并对92例NH期鼻咽癌随访2年。[结果]N期鼻咽癌EBER、EGFR及VEGF表达阳性牢分别为97．8％（90／92）、95．7％（88／92）和35．9％（33／92）。EBER表达与远处转移、复发及临床缓解相关,VEGF和EGFR表达强度与远处转移均呈正相关。期鼻嘲癌患者血浆EBV／DNA、EGFR、VEGF治疗前与同步放化疗后比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）。血浆中EGFR和VEGF表达水平与远处转移相关。[结论]血浆和组织中EGFR和VEGF表达水平均可能与鼻咽癌远处转移相关。     

STAT3在鼻咽癌中的表达特征及其与bcl—2和LMP1表达的关系

目的：探讨鼻咽癌中信号传导和转录激活子3(sTAT3)的表达特征及其与bcl-2和EB病毒潜在膜蛋白1(LMP1)表达的关系。方法：采用原位杂交和免疫组化法分别检测62例鼻咽癌组织中EB病毒EBER1的表达和STAT3、bcl-2和LMP1蛋白的表达。结果：鼻咽癌中EBER1阳性率为100．0％(62／62)；LMP1阳性率为61．3％(38／62)；STAT3和bcl-2阳性癌细胞占癌细胞总数的百分率跨度分别为5．0％～95．0％和0～100．0％。STAT3与bcl-2表达呈正相关，rs=0．444，P=0．000。STAT3与LMP1表达无显著相关性。结论：鼻咽癌细胞中STAT3呈持续表达状态(即异常激活状态)。STAT3的异常激活可能通过上调bcl-2这一抗凋亡基因的表达，从而延长了鼻咽癌细胞的生存时间。     

鼻咽癌组织趋化因子受体CXCR4表达的研究

目的：分析CXCR4表达与鼻咽癌淋巴结转移的关系。方法：免疫组化法观察47例鼻咽癌组织中肿瘤细胞CXCR4和EB病毒（EBV）潜伏膜蛋白1（LMP1）的表达，分析CXCR4和LMP1表达与临床病理特征的关系。结果：CXCR4在鼻咽癌细胞不仅表达强度强弱不等，30％患者强表达CX—CR4，而且出现不同的细胞内定位，但没有观察到CXCR4表达变化与患者性别、年龄、病理类型、T分期、淋巴结转移相关。LMP1蛋白表达与CXCR4表达强度相关，P=0．012；但与CXCR4的细胞内定位无关，P=0．699。结论：在鼻咽癌细胞中，尽管LMP1可能调节CXCR4表达，但CXCR4不参与肿瘤细胞向淋巴结转移，提示其他因素诱导鼻咽癌细胞向淋巴结转移。     

KAI1／CD82 mRNA和蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的 探讨KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化SP法检测70例鼻咽癌和30例正常鼻咽部组织中KAI1／CD82蛋白的表达情况;逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测28例鼻咽癌和15例正常鼻咽部新鲜组织中KAI1／CD82 mRNA的表达情况。分析KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白的表达与临床病理特征之间的关系。结果 KAI1／CD82 mRNA在鼻咽癌组织中的阳性表达率为42.9％（12／28）,低于正常鼻咽部组织中的73.3％（11／15）,差异无统计学意义（P＞0.05）;KAI1／CD82蛋白在鼻咽癌组织中的阳性表达率为44.3％（31／70）,低于正常鼻咽部组织中的700％（21／30）,差异有统计学意义（P＜0.05）。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中的表达与患者的性别、年龄、病理类型、T分期均无关（P＞0.05）,而与淋巴结转移有关。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在无淋巴结转移组中的阳性表达率分别为85.7％和68.4％,明显高于淋巴结转移组的28.6％和35.3％,差异均有统计学意义（P＜0.05）。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在N1、N2、N3亚组间表达率的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中表达下调,该基因可以抑制鼻咽癌发生、发展及淋巴结转移,有望作为鼻咽癌诊断和预后判定的一种有效分子标记物。     

EB病毒LMP1与E-cadherin、ICAM-1在鼻咽癌组织中的表达及其相关性

 目的研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)对鼻咽癌细胞黏附分子E-cadherin和ICAM-1表达的影响,探讨LMP1在鼻咽癌转移中的作用及其相关的机制。方法应用免疫组织化学(SP法)分别检测LMP1、E-cadherin和ICAM-1蛋白在31例鼻咽粘膜慢性炎、32例鼻咽癌和24例鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中的表达。结果LMP1和ICAM-1蛋白在鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移灶中的阳性表达率显著高于在鼻咽粘膜慢性炎组织中的阳性表达率,E-cadherin蛋白在鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移灶中的阳性表达率则显著低于在鼻咽粘膜慢性炎组织中的阳性表达率。Spearman相关分析显示,在鼻咽癌组织和鼻咽癌淋巴结转移灶中,LMP1与E-cadherin的表达呈负相关,而与ICAM-1的表达呈正相关。结论在鼻咽癌和鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中LMP1可能通过抑制E-cadherin的表达和促进ICAM-1的表达进而影响肿瘤细胞的黏附性,促进鼻咽癌的侵袭和转移。     

EB病毒LMP1与E-cadherin、ICAM-1在鼻咽癌组织中的表达及其相关性北大核心

目的研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)对鼻咽癌细胞黏附分子E-cadherin和ICAM-1表达的影响,探讨LMP1在鼻咽癌转移中的作用及其相关的机制。方法应用免疫组织化学(SP法)分别检测LMP1、E-cadherin和ICAM-1蛋白在31例鼻咽粘膜慢性炎、32例鼻咽癌和24例鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中的表达。结果LMP1和ICAM-1蛋白在鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移灶中的阳性表达率显著高于在鼻咽粘膜慢性炎组织中的阳性表达率,E-cadherin蛋白在鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移灶中的阳性表达率则显著低于在鼻咽粘膜慢性炎组织中的阳性表达率。Spearman相关分析显示,在鼻咽癌组织和鼻咽癌淋巴结转移灶中,LMP1与E-cadherin的表达呈负相关,而与ICAM-1的表达呈正相关。结论在鼻咽癌和鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中LMP1可能通过抑制E-cadherin的表达和促进ICAM-1的表达进而影响肿瘤细胞的黏附性,促进鼻咽癌的侵袭和转移。     

Fascin1和E-cadherin在鼻咽癌组织中的表达及意义

[目的]探讨fascin1及E-cadherin蛋白的表达与鼻咽癌(NPC)临床病理特征及预后的相关性。[方法]应用免疫组化SP法检测fascin1及E-cadherin蛋白在51例鼻咽癌组织中的表达情况。[结果]Fascin1及E-cadherin蛋白在鼻咽癌组织中的表达均与颈淋巴结的转移、临床分期密切相关(P<0.05)。Fascin1与E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.58,P<0.05)。Fascin1的表达与鼻咽癌患者的5年生存率相关(P<0.05),与1、3年生存率无相关性(P>0.05)。而E-cadherin与患者的预后无关。[结论]Fascin1的过表达可能是鼻咽癌早期颈淋巴结转移的重要因素,有可能作为检测鼻咽癌区域淋巴结转移潜力的重要指标之一,也为评价鼻咽癌预后提供参考价值,其调节机制可能与E-cadherin下调有关。     

EB病毒LMP1对人鼻咽癌细胞转移能力的影响

背景与目的:EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌的浸润和转移过程中起重要的作用。本实验目的在于研究EB病毒LMP1对人鼻咽癌细胞转移能力的影响和探讨其中的相关机制。方法:应用免疫细胞化学RT-PCR法和Western blot检测LMP1、E-cadherin和intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1)在人高分化鼻咽癌细胞系CNE1和转染了LMP1基因的CNE1-GL细胞中的表达。应用细胞-细胞粘附实验、细胞-基质粘附实验、划痕实验和细胞运动实验观察LMP1对鼻咽癌细胞粘附和运动能力的影响。结果:免疫细胞化学结果显示:LMP1在CNE1和CNE1-GL细胞中的阳性率分别为0和(96.60±3.03)%(P<0.01);E-cadherin蛋白的阳性率分别为(37.47±1.50)%和(19.53±1.92)%(P<0.01);ICAM-1蛋白的阳性率分别为(5.27±1.45)%和(93.33±4.23)%(P<0.01)。RT-PCR和Westernblot结果表明,与CNE1细胞相比较,CNE1-GL细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),而ICAM-1的mRNA和蛋白表达则明显升高(P<0.01)。肿瘤细胞同质粘附实验显示,CNE1-GL细胞的同质粘附能力较CNE1细胞弱(P<0.05)。肿瘤细胞-基质粘附实验得出CNE1-GL细胞的异质粘附能力(A值=0.60±0.03)较CNE1细胞(A值=0.46±0.01)强(P<0.01)。肿瘤细胞运动实验显示,穿过PVPF膜的CNE1-GL细胞数多于CNE1细胞(119.3±6.0 vs 46.3±7.0,P<0.05)。结论:LMP1通过抑制E-cadherin表达、促进ICAM-1表达从而抑制肿瘤细胞的同质粘附能力、增强其异质粘附能力和运动能力来参与鼻咽癌的侵袭和转移。     

STAT3在鼻咽癌中的表达特征及其与bcl-2和LMP1表达的关系

目的:探讨鼻咽癌中信号传导和转录激活子3(STAT3)的表达特征及其与bcl2和EB病毒潜在膜蛋白1(LMP1)表达的关系。方法:采用原位杂交和免疫组化法分别检测62例鼻咽癌组织中EB病毒EBER1的表达和STAT3、bcl2和LMP1蛋白的表达。结果:鼻咽癌中EBER1阳性率为1000%(62/62);LMP1阳性率为613%(38/62);STAT3和bcl2阳性癌细胞占癌细胞总数的百分率跨度分别为50%~950%和0~1000%。STAT3与bcl2表达呈正相关,rs=0444,P=0000。STAT3与LMP1表达无显著相关性。结论:鼻咽癌细胞中STAT3呈持续表达状态(即异常激活状态)。STAT3的异常激活可能通过上调bcl2这一抗凋亡基因的表达,从而延长了鼻咽癌细胞的生存时间。     

EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞转移相关因素的影响

背景与目的:已证实EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)编码的潜伏膜蛋白1(latentmembraneprotein1,LMP1)能够诱导鼻咽癌细胞中基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)的表达。本实验的目的是观察EB病毒潜伏膜蛋白1(EBV-LMP1)对鼻咽癌细胞系CNE1细胞转移相关因素的影响,探讨LMP1在鼻咽癌侵袭、转移过程中的作用。方法:用免疫组化法及Westernblot法检测CNE1-GL(转染LMP1基因的CNE1细胞)和CNE1细胞中MMP-9的表达情况;用细胞-基质粘附实验、细胞运动实验和肿瘤细胞重组基底膜侵袭实验检测LMP1对CNE1细胞粘附、运动及侵袭能力的影响。结果:免疫组化法及Westernblot法结果均显示CNE1-GL细胞中MMP-9的表达明显高于CNE1细胞(P<0.05);肿瘤细胞-基质粘附实验结果显示,CNE1-GL的粘附能力(平均吸光度值为1.2508±0.0711),高于CNE1细胞(平均吸光度值为0.9519±0.068),两者相比差异有显著性(P<0.01)。运动实验及重组基底膜侵袭实验结果均显示,穿过游离的聚乙烯吡咯烷酮膜(polyvinylpyrroli-done-free,PVP-F)的CNE1-GL细胞数明显高于CNE1细胞(P<0.01)。结论:LMP1能够诱导CNE1细胞中MMP-9的表达,且增强CNE1细胞与基底膜的粘附能力、运动能力及侵袭能力。     

EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞凋亡的影响

背景与目的:已证实EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latentmembraneprotein,LMP1)具有转化致瘤作用,在鼻咽癌的发生发展中起重要作用。LMP1的转化致瘤作用可能与细胞凋亡有关,本实验目的是观察EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞凋亡的影响,探索LMP1在鼻咽癌发生发展中的可能机制。方法:用电转染的方法将带有绿色荧光蛋白GFP报道系统的EB病毒LMP1基因真核表达质粒导入CNE1,用荧光显微镜检测报道基因GFP的表达情况;用免疫组化法及Westernblot法检测目的基因LMP1的表达情况;用流式细胞仪、荧光染色及DNA片段分析等方法检测在有地塞米松磷酸钠或无血清饥饿诱导的情况下LMP1对CNE1细胞凋亡的影响。结果:CNE1G细胞(转染空载质粒PAT-GFP的CNE1细胞)及CNE1GL(转染目的基因质粒PAT-GFP-LMP1的CNE1细胞)有绿色荧光蛋白表达,CNE1细胞(未经转染的CNE1细胞)无绿色荧光蛋白表达;CNE1GL细胞LMP1呈阳性表达,而CNE1及CNE1G细胞均为阴性。CNE1、CNE1G及CNE1GL3组细胞分别用地塞米松磷酸钠或无血清1640培养液处理后均有凋亡出现,且两种诱导方法均能使CNE1GL组细胞的凋亡指数(apoptosisindex,AI)较CNE1及CNE1G组明显增高(P<0.05),而CNE1与CNE1G组的凋亡指数无明显差别。3组细胞常规培养下则无凋亡出现。结论:LMP1基因成功导入CNE1细胞     

EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞系CNE1有丝分裂调控机制的影响

EB病毒潜伏膜蛋白(latent membrane protein l,LMPl)是被证实在鼻咽癌中具有癌基因功能的病毒编码基因的表达产物;LMPl参与异常的细胞周期调控,但是否导致有丝分裂检测点调控机制紊乱仍未得到实验证实。本实验观察LMPl对鼻咽癌细胞株CNEl有丝分裂调控的影响,进一步探讨LMPl在鼻咽癌发病机制中的作用。     

DNAzymes targeted to EBV-encoded latent membrane protein-1 induce apoptosis and enhance radiosensitivity in nasopharyngeal carcinoma

Epstein-Barr virus (EBV) is involved in the carcinogenesis of several types of cancers such as nasopharyngeal carcinoma (NPC) and Burkitt's lymphoma. The latent membrane protein (LMP1) encoded by EBV is expressed in the majority of EBV-associated human malignancies and has been suggested to be one of the major oncogenic factors in EBV-mediated carcinogenesis. Therefore, genetic manipulation of LMP1 expression may provide a novel strategy for the treatment of the EBV-associated human cancers. Deoxyribozymes (DNAzymes) are catalytic nucleic acids that bind and cleave a target RNA in a highly sequence-specific manner. We have designed several LMP1-specific DNAzymes and tested their effect on cell proliferation and apoptosis in LMP1-positive cells. Here, we show that active DNAzymes down-regulated the expression of the EBV oncoprotein LMP1 and inhibited cellular signal transduction pathways abnormally activated by LMP1. This down-regulation of the LMP1 expression was shown to be associated with a decrease in the level of antiapoptotic Bcl-2 and an increase in Caspase-3 and -9 activities in the nasopharyngeal carcinoma cell line CNE1-LMP1, which constitutively expresses the LMP1. When combined with radiation treatment, the DNAzymes significantly induced apoptosis in CNE1-LMP1 cells, leading to an increased radiosensitivity both in cells and in a xenograft NPC model in mice. The results suggest that LMP1 may represent a molecular target for DNAzymes and provide a basis for the use of the LMP1 DNAzymes as potential radiosensitizers for treatment of the EBV-associated carcinomas.