腺苷、左旋精氨酸对动脉化静脉的保护的实验研究

目的研究腺苷、左旋精氨酸对兔颈外静脉移植至股动脉后的保护作用,并探讨可能的机制。方法40只新西兰大白兔随机分为A、B、C、D四组,每组10只。各组获取颈外静脉后,A组颈静脉作为正常对照组,B、C、D组作为桥血管端-端吻合于股动脉,每日分别经耳缘静脉给予B组-腺苷、C组-左旋精氨酸、D组-生理盐水各1周,于术后4周取血管桥标本,用40%甲醛固定,石蜡包埋,制成5μm切片,常规脱蜡至水,行HE染色和弹力纤维染色,光镜下观察、测定移植静脉内膜中膜厚度变化。结果移植后血管狭窄程度观察:移植4周后,各组静脉均有内膜及中膜较正常颈静脉明显增厚表现,腺苷及左旋精氨酸组内膜及中膜增厚较对照组轻。内膜中膜厚度分别为:A组(51.15±2.64)、B组(74.02±2.15)、C组(80.98±2.25)、D组(98.54士4.34),可见单纯手术组>左旋精氨酸干预组>腺苷干预组>正常对照组,各组之间P=0.000,均小于0.05,有统计学意义。结论1.兔颈外静脉移植至股动脉后内膜及中膜增厚。2.腺苷及左旋精氨酸能抑制动脉化静脉内膜及中膜增厚,有减轻桥静脉狭窄的作用。     

大白兔颈动脉移植后血浆一氧化氮浓度的变化

目的:探讨大白兔颈动脉移植后血浆一氧化氮(NO)浓度的变化及其意义.方法:建立大白兔颈动脉移植模型,根据移植前供体血管不同处理方法将30只大白兔随机分为A(自体血管移植组)、B(无预处理异体血管移植组)、C(青霉素和链霉素处理后常温保存异体血管移植组)、D(青霉素和链霉素处理后液氮冷冻保存异体血管移植组)4组.观察移植后血管形态变化.测定并比较移植后1,2,3周血浆NO浓度.结果:B组血管移植后宿主血浆NO平均含量显著高于A组和D组(P＜0.05);C组血浆NO含量和D组与A组无显著差异(P＞0.05).在血管形态上,A组结构正常,仅有炎性细胞浸润.其余各组术后1周可见内膜开始增生,2周内膜明显增厚,3周内膜增厚最显著.其中B组改变最严重.结论:青霉素和链霉素可降低供体血管的抗原性及宿主诱导型一氧化氮合酶活性;液氮冷冻保存可能具有协同效应.     

核因子κB的小干扰RNA防治自体移植静脉再狭窄的实验研究

目的 探讨核因子κB(NF-κB)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对大鼠自体静脉移植术后血管内膜增殖及相应炎性细胞因子表达的影响.方珐雄性Wistar大鼠80只,随机分为空白组(A组,n=10);自体静脉移植组(B组,n=18);空载体组(阴性质粒脂质体医用蛋白胶复合物转染移植静脉,C组,n=26)和基因转染组(NF-κB siRNA阳离子脂质体医用蛋白胶复合物转染自体移植静脉,D组,n=26).B、C及D组需制作大鼠自体颈外静脉--腹主动脉移植模型,每组4个时点(3,7,14,21 d),相应时间点取移植静脉观察病理形态学变化,免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA),PCR测定单核细胞趋化因子(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA含量,Western blot测定NF-κB p65蛋白的表达.结果 自体静脉移植术后,B、C和D组移植静脉血管桥均出现内膜增生变厚,新生内膜有大量PCNA阳性细胞,中膜平滑肌细胞增生活跃.术后3 d,B组和C组MCP-1mRNA及TNF-αmRNA表达水平明显高于A组(P<0.05),但D组水平明显低于C组(P<0.05).术后7 d,B、C组NF-κB p65蛋白表达水平明显高于A组(P<0.05),与C组相比,D组NF-κB p65蛋白水平明显降低(P<0.05).结论 NF-κB的基因表达产物和MCP-1mRNA、TNF-αmRNA的表达有一定相关性,自体静脉移植术后新生内膜增生及炎性细胞因子表达在不同时相点呈动态变化.转染NF-κB siRNA阳离子脂质体复合物可抑制NF-κB的表达,减少MCP-1及TNF-αmRNA的表达,从而抑制移植静脉内膜增生和VSMC增殖,减轻再狭窄.     

全膝关节置换术后置管及置管时间临床对比研究

目的:探讨全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)后置管与否及不同置管时间对患者的影响.方法:回顾性研究了接受TKA治疗的患者220例,剔除中途丢失病例,现将200例接受TKA手术治疗的患者,分成A、B、C、D、E 5组,每组各40例,E组术后不放置引流管,A、B、C、D 4组分别夹闭引流管1、2、3、4 h后开放引流,5组均在引流量<50 mL后拔除引流管.观察各组临床指标及术后并发症发生情况.结果:(1)术后1 d和术后3 d,E组血红蛋白值高于A、B、C、D组(P<0.05);(2)5组术前、术后7 d红细胞压积差异无统计学意义(P>0.05),术后1 d和术后3 d,E组血红蛋白高于A、B、C、D组(P<0.05);(3)E组术后1 d和术后3 d患肢周径要大于A、B、C、D组(P<0.05);C组术后1 d和术后3 d患肢周径小于A、B、D、E组(P<0.05);(4)E组总出血量少于其他组;A组术后总引流量要多于B、C和D组(P<0.05),(5)术后第1天和第3天,E组患肢活动度明显低于A、B、C、D组患肢活动度,差异有统计学意义(P<0.05),术后1 d和3 d,C组患肢活动度均优于A、B、D、E组;(6)E组术后1 d、术后3 d膝关节疼痛视觉模拟评分(VAS)评分高于A、B、C、D组(P<0.05);但是,A、B、C、D组患者术后1 d和术后3 d膝关节VAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);(7)术后第1天和第3天,E组患肢的膝关节评分(HSS)评分低于A、B、C、D组(P<0.05);C组患肢的术后HSS评分高于A、B、D、E组;(8)5组患者术后张力水疱,术后皮下瘀斑和皮下血肿比较差异有统计学意义(P<0.05),E组张力水疱发生率高于A、B、C、D组(P<0.05),C组术后的皮下瘀斑和皮下血肿发生率要低于A、B、D、E组(P<0.05),切口感染和下肢深静脉血栓的发生率(术后1周行下肢静脉造影检查,充盈缺损是静脉血栓直接征象)比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:TKA术后早期夹闭引流管3 h与其他组相比,能明显减少术后出血量,维持Hb,改善膝关节功能,减轻疼痛,降低术后并发症发生率低,值得推广.     

外膜涂抹益气活血方防治静脉移植物再狭窄的实验研究

目的 探讨术中局部应用益气活血方对自体移植静脉再狭窄的影响及其作用机制.方法 建立家兔颈总动脉自体颈外静脉移植模型,随机分为:(1)A组,手术组;(2)B组,手术+抹胶(pluronic-F-127 gel)组;(3)C组,手术+抹益气活血方剂(由黄芪、川穹、三七组成)组,益气活血方由pluronic-F-127gel携带,涂抹于静脉移植物外膜.分别于术后7、14、28 d用免疫组织化学方法检测移植静脉增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况;HE、Masson染色后应用计算机图像分析系统检测术后14 d移植静脉内膜、中膜增生情况及内膜厚度/中膜厚度(I/M)值;应用流式细胞仪检测移植静脉DNA含量,观察血管平滑肌细胞(VSMC)的细胞周期,确定各期细胞所占的百分比.结果 术后14 d,C组移植静脉内膜厚度、中膜厚度、I/M值明显低于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05);术后7、14、28 d,C组的VSMC增殖率低于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪分析,C组G0/G1、S、G2/M期细胞所占比例逐渐减少,A组和B组G0/G1、S、G2/M期细胞所占比例逐渐增多,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 用pluronic-F-127 gel携带益气活血方涂抹自体移植静脉外膜可使移植静脉内膜、中膜增生减轻,对防治静脉移植物术后早期再狭窄有良好作用,其机制可能在于益气活血方能显著抑制VSMC的过度迁移增殖,减少细胞外基质的大量合成,从而减轻移植静脉内膜、中膜增生,对抗血管重构.     

外膜炎症及炎症因子与大鼠移植物动脉硬化早期发病关系

目的 探讨外膜炎症及血清炎症因子与移植物动脉硬化早期发病的关系.方法 把36只同种异体胸主动脉腹腔移植大鼠及16只同系移植对照大鼠随机分成4组(每组实验组9只,对照组4只):A组,术后1周处死;B组,术后2周处死;C组,术后3周处死;D组,术后4周处死.术前及处死时抽血分离留取血清,使用酶联免疫吸附法检测血清炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)水平,处死后留取血管标本,HE染色观察血管外膜炎症细胞浸润程度及病理改变;用免疫组织化学法检测α-肌动蛋白(α-actin)、周期蛋白依赖性激酶1(cyclin dependent kinase-1,CDK1)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在血管壁中的表达.对比各组与术前血清炎症因子水平变化及各组间观察指标的变化.结果 术后7 d,外膜大量炎症细胞浸润;术后14 d,外膜有轻度胶原纤维增生伴炎症浸润;术后28 d,外膜明显增厚,内有大量增生的平滑肌细胞、胶原纤维及炎症细胞,血管中层断裂,可见外膜平滑肌细胞迁移至内膜,内膜亦出现明显纤维化及平滑肌细胞增生.在血管外膜平滑肌细胞中,α-肌动蛋白、PCNA和CDK.表达愈来愈高(均P<0.05),且早于内膜.移植术后A、B、C、D组血清炎症介质水平均高于术前基础水平.IL-6水平,B实验组高于术前(P<0.05),A、C、D实验组显著高于术前(均P<0.01),A、B、C对照组也高于术前基础水平(均P<0.05);A、C、D实验组显著高于对照组(均P<0.01).TNF-α水平,A、B、C实验组高于术前(均P<0.05),D实验组显著高于术前(P<0.01),A、B、C、D对照组与术前无明显变化,各实验组均明显高于对照组(均P<0.01),差异有统计学意义.结论 大鼠同种异体胸主动脉移植模型建立后,随着外膜炎症加重,移植血管外膜及内膜出现明显动脉硬化;血清炎症介质水平呈持续升高,提示外膜炎症细胞浸润及炎症因子均参与移植物动脉硬化的早期发生.     

静电纺丝血管外支架缓释siRNA纳米粒抑制静脉移植物内膜增生

目的 评价聚(乳酸.羟基乙酸)共聚物/壳聚糖(PLGA/CS)纳米粒超细纤维复合膜血管外支架缓释组织因子小干扰RNA(TFsiRNA)抑制静脉移植物内膜增生的有效性.方法 使用改进静电纺丝技术制备PLGA/CS纳米粒超细纤维复合膜.氯仿溶解复合膜PLGA后测量壳聚糖含量,检测超细纤维复合膜吸水率.建立SD大鼠右颈外静脉一颈总动脉间置移植模型,随机分为5组:A组(PLGA/CS-TFsiRNA纳米粒外支架组),B组(PLGA/CS-Stealth~(TM) RNAi阴性对照纳米粒外支架组),C组(PLGA/CS空白纳米粒外支架组),D组(PLGA外支架组),E组(无外支架组).BLOCK-iT~(TM)荧光寡核苷酸检测静脉移植物转染.分别于术后1、3、7、14、28 d取标本.免疫印迹和免疫组化检测管壁组织因子蛋白表达,免疫组化检测管壁增殖细胞核抗原表达,计算机图像系统分析新生内膜厚度.结果 通过调节静电纺丝PLGA和壳聚精纳米粒溶液流量控制复合膜中PLGA和壳聚糖含量.复合膜由于加入壳聚糖具有良好吸水性.术后12 d静脉移植物管壁可检测BLOCK-iT~(TM)荧光寡核苷酸绿色荧光.术后3、7 d,A组组织因子蛋白表达明显低于其他组(P＜0.05,其中术后3 d分别为0.40±0.03与0.75±0.01、0.75±0.05、0.77±0.07,术后7 d分别为0.30±0.03与0.84±0.05、0.86±0.06、0.85±0.06),术后14 d,A组增殖细胞核抗原表达明显低于其他组(P＜0.01,13.O%±2.6%与25.0%±2.8%、24.2%±3.9%、24.0%±4.1%、44.8%±3.7%),A组术后28 d新生内膜厚度明显低于未治疗组,P＜0.01,(18.8±2.9)μm与(38.7±5.0)μm、(37.3±3.6)μm、(37.2±2.6)μm、(67.5±4.8)μm.结论 静电纺丝制备PLGA/CS纳米粒超细纤维复合膜血管外支架缓释组织因子siRNA能有效抑制大鼠静脉移植物早期内膜增生,这将成为基因治疗静脉移植物狭窄一种新方法.     

兔卵巢组织移植后组织学研究

目的:构建母兔自体及异体卵巢组织移植模型,揭示卵巢组织移植后组织学特征。方法:以母兔为实验动物,A组阳性对照,不做任何处理;B组阴性对照,切除双侧卵巢;C组自体移植组,分离卵巢组织,切成1mm3左右大小的米粒块,种植于颈部皮下;D组异体移植组,卵巢组织处理方法与C组相同,移植时将卵巢组织异体进行种植。术后60d处死母兔,子宫称重,对移植物及子宫内膜进行组织学检查。结果:1C组与D组中分别有5与3只母兔阴道呈红色或者粉红色、湿润、肿胀,进入发情期;2自体、异体皮下移植后存活的卵巢组织形态与移植前相似,表面血管较为丰富,皮质内可见正常形态的原始卵泡、初级卵泡,部分移植物可见成熟的窦状卵泡;3A组、C组、D组母兔子宫内膜表层细胞呈锯齿状,宫腔间隙较宽,被复粘膜层子宫腺发育,固有膜宽大,肌壁厚,而B组母兔宫腔呈裂隙状,粘膜层平坦,缺乏子宫腺,固有膜变窄,肌壁变薄。结论:母兔卵巢组织移植后,移植物可存活,并进一步释放内源性激素,对靶器官产生作用。     

以胎鼠为供体的肾上腺移植实验研究

目的研究以不同胎龄胎鼠为供体的肾上腺移植后，移植物的结构重建及分泌功能状况。方法将30只SD大鼠，分为5组，每组6只。A组，假手术组；B组，双侧肾上腺切除组；C、D、E组分别以16、18、20d龄胎鼠为供体进行移植。结果术后4周，C、D、E组镜下显示被膜增厚，被膜下有许多新增殖的细胞，球状带、束状带有较好的重建。体质量：A组术后第3周降至最低点，第4周逐渐恢复接近术前水平；B组术后持续上升；C、D组术后前2周增高，后2周持续下降；E组术后前3周缓慢升高，第4周回落。血清皮质酮水平：B组术后急剧下降；C、D、E组术后2周都大幅下降，然后逐渐增高；D、E组术后同期水平接近，C组术后水平却明显低于D、E组（P〈0．05）。结论胎鼠肾上腺移植后易于成活，结构可较好地重建，分泌功能逐步增强，是一种合适的供体；大龄胎鼠的供体移植后，在免疫排斥反应方面与小龄胎鼠的供体无明显差异，而结构重建及分泌功能优于小龄胎鼠的供体。     

不同成分淋巴细胞输注对荷瘤小鼠异基因骨髓移植的影响

目的:建立荷瘤小鼠非清髓异基因骨髓干细胞移植模型,探讨不同成分的供者淋巴细胞输注(DLI)对移植效果的影响及抗肿瘤机制. 方法: 受者鼠为Balb/c(H-2Kd)小鼠,供者鼠为C57bl/6(H-2Kb)小鼠,受者小鼠腹腔接种小鼠肝癌细胞株H22细胞,观察腹水生成情况及生存状况. 于接种瘤细胞后d5给予全身照射预处理,随后给受者小鼠尾静脉输注供者鼠的骨髓细胞,建立荷瘤小鼠的MHC不相合亚移植模型. 依据不同DLI将荷瘤鼠受者鼠随机分为A,B,C,D,E组,每组10只. A,B,C,D组均给予预处理,A组预处理后于移植d1,7给予供者小鼠全脾细胞0.5×107个;B组分别于移植d1,7给予去除CD8 细胞供者鼠脾细胞0.5×107个;C组于移植d1,7给予去除CD4 细胞供者鼠脾细胞0.5×107个;D 组只接受预处理不作移植及DLI;E组为对照组,既不作预处理,也不接受骨髓细胞移植及DLI. 观察各组成瘤率、生存期、嵌合状态、造血恢复情况及移植物抗宿主病(GVHD). 结果:所有小鼠均产生腹水,成瘤率100%;生存期C组最长为(35.6±3.1)d,B组为(23.7±10.9)d,B,C两组相比有统计学差异(P＜0.05);接受移植的A,B,C组嵌合率均高于0.80,只接受预处理的D组鼠白细胞计数自行恢复正常;GVHD评分C组与B组有明显差异(P＜0.05). 结论:建立非清髓荷瘤小鼠异基因骨髓干细胞移植模型条件适宜,说明去除CD4 细胞的DLI能够有效地减轻GVHD反应,延长荷瘤鼠生存期;去除CD8 细胞的DLI会加重GVHD反应,影响移植.     

小剂量胰岛素局部应用对移植无细胞真皮后血管化过程的影响

目的:观察小剂量胰岛素局部应用对无细胞真皮移植后血管化过程的影响。方法:制备猪脱细胞真皮基质。96只大鼠移植猪脱细胞真皮基质并浸润注射不同浓度胰岛素,A组0.1u、B组0.05u、C组0.01u组,D组注射等渗盐水。隔日注射,至术后第13d止。于移植后2,3,4,7,14,28d取无细胞真皮组织活检,HE及免疫组织化学染色观察移植物血管化过程,并测定血糖浓度的变化。结果:术后第2d在A、B组移植片双面浅层可见成纤维细胞及炎性细胞浸润;第4dA、B组移植片内血管内皮细胞数多于C、D组(P<0.05);第7dA、B组移植片双面浅层可见新生血管形成,结构完整;第14dA、B组血管数量明显大于C、D组(P<0.05);第28d各组间血管数无明显差异。B、C、D组注射胰岛素后6h血糖波动在4.80～7.70mmol/L,与术前相比无显著性差异,A组注射胰岛素后1h血糖明显降低(P<0.01)。结论:小剂量胰岛素局部应用能明显促进无细胞真皮的早期血管化过程。     

核因子κB的小干扰RNA防治自体移植静脉再狭窄的实验研究

目的   探讨核因子κB（NF-κB）的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA)对大鼠自体静脉移植术后血管内膜增殖及相应炎性细胞因子表达的影响。方法    雄性Wistar大鼠80只,随机分为空白组（A组,n=10）;自体静脉移植组（B组,n=18）;空载体组（阴性质粒脂质体医用蛋白胶复合物转染移植静脉,C组,n=26）和基因转染组（NF-κB siRNA阳离子脂质体医用蛋白胶复合物转染自体移植静脉,D组,n=26）。B、C及D组需制作大鼠自体颈外静脉——腹主动脉移植模型,每组4个时点( 3,7,14,21d),相应时间点取移植静脉观察病理形态学变化,免疫组化检测增殖细胞核抗原（PCNA）,PCR测定单核细胞趋化因子（MCP-1）和肿瘤坏死因子-α（TNF α）的mRNA含量,Western blot测定NF-κB p65蛋白的表达。结果    自体静脉移植术后,B、C和D组移植静脉血管桥均出现内膜增生变厚,新生内膜有大量PCNA阳性细胞,中膜平滑肌细胞增生活跃。术后3d,B组和C组 MCP-1 mRNA及TNF-αmRNA表达水平明显高于A组（P＜0.05）,但D组水平明显低于C组（P＜0.05）。术后7d,B、C组NF-κB p65蛋白表达水平明显高于A组（P＜0.05）,与C组相比,D组NF κB p65蛋白水平明显降低（P＜0.05）。结论     NF-κB的基因表达产物和MCP-1mRNA、TNF-αmRNA的表达有一定相关性,自体静脉移植术后新生内膜增生及炎性细胞因子表达在不同时相点呈动态变化。转染NF-κB siRNA阳离子脂质体复合物可抑制NF-κB的表达,减少MCP-1及TNF-αmRNA的表达,从而抑制移植静脉内膜增生和VSMC增殖,减轻再狭窄。     

大鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病模型的建立

目的建立较稳定的异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病动物模型,为异基因骨髓移植后的急性移植物抗宿主病(aGVHD)的相关研究提供实验参照。方法以雄性SD大鼠为供鼠,雌性Wistar大鼠为受鼠,受体大鼠随机分成A、B、C、D、E 5组,移植当天所有受鼠均接受8.5 GY的全身照射(TBI),于照射后4~6 h内,A组回输等量培养液,B组经尾静脉输注供鼠骨髓细胞(2×108个/kg),C、D、E组分别回输供鼠骨髓细胞(2×108个/kg) 不同比例的脾细胞。观察各组大鼠生存期、外周白细胞计数、及有无aGVHD的临床及病理表现。结果A组大鼠于15d内全部死亡,外周血白细胞计数明显减低,骨髓病理示造血组织减少,提示死于造血衰竭。B、C、D、E组大鼠外周血白细胞计数均有明显恢复,B组大鼠8只存活超过50 d,C、D、E组大鼠均于50 d观察期内死亡,并有aGVHD的临床表现及病理表现,但C组大鼠aGVHD的程度较轻且时间不集中,其中D、E组大鼠可于相对集中的时间内观察到典型aGVHD临床及病理。结论TBI预处理的方式是可行的,单纯输入异基因骨髓细胞不能引起明显的aGVHD,骨髓细胞与脾细胞1∶1及1∶1.5混合组均可作为异基因骨髓移植后理想的aGVHD动物模型。     

舒芬太尼持续静脉镇痛对腹腔镜疝囊高扎术后婴儿应激反应的影响

目的 观察不同剂量舒芬太尼持续静脉输注对婴儿腹腔镜疝囊高扎术后镇痛效果及应激反应的影响.方法 56例腹腔镜疝囊高扎手术的婴幼儿,随机分为A组(18例)、B组(22例)、C组(28例)、D组(16例).手术后A组未用镇痛药物,B组以舒芬太尼0.005mg/(kg·d)持续静脉输注,C组舒芬太尼0.01 mg/(kg·d)持续静脉输注,D组舒芬太尼0.015 mg/(kg·d)持续静脉输注,术后6h、12h、24h采用FLACC进行镇痛评分,观察镇痛满意度及不良反应,同时于术前,术毕即刻、术后4h、24h检测血浆中去甲肾上腺激素(NE),肾上腺激素(E),促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(Cor)浓度.结果 术后A组镇痛效果不佳,满意率最低;B组镇痛效果稍好,满意率较高;C、D组镇痛效果佳且满意率最高,但D组有1例患儿呼吸减慢.A、B2组术后4h血浆NE、E浓度明显高于其他时间段,24h降到术前水平(P＜0.05).A组术后4hNE、E分别明显高于同时点B、C、D组,而B组同时点较C、D组明显增加(P＜0.05).A、B组术后4、24h血浆ACTH和Cor浓度明显高于其他时间段,24h除A组外降到术前水平(P＜0.05).A组术后4、24hACTH、Cor浓度明显高于同时点B、C、D组,而B组4h Cor浓度较C、D组明显增加(P＜0.05).结论 婴儿腹腔镜疝囊高扎手术后给予舒芬太尼0.01 mg/(kg·d)术后持续静脉镇痛,镇痛效果好,无呼吸抑制,很少恶心呕吐等不良反应.     

雷帕霉素纳米粒局部处理兔离体静脉对防治其移植后狭窄的作用

目的 研究用纳米缓释技术处理的雷帕霉素(RPM-NP)对移植静脉狭窄的防治作用.方法 选取家兔40只,建立兔颈外静脉间位移植至颈总动脉的移植静脉模型,按处理方式不同,分为4组:药物纳米局部干预组(RPM-NP局部处理颈外静脉,n=10,A组)、药物纳米全身干预组(RPMNP周围静脉滴注,n=10,B组)、空白纳米局部干预组(空白纳米粒局部处理颈外静脉,n=10,C组)和未干预组(不做上述处理,n=10,D组).术后28 d,切取各组移植静脉和对侧正常静脉,病理学检测移植静脉内膜厚度、内径、内膜/中膜厚度比以及胶原容积指数.结果 移植静脉的组织病理学检测结果表明,A、B、C、D组移植静脉和对侧正常静脉的内膜/中膜厚度比分别为0.26±0.02、0.73±0.05、0.71 ±0.04、0.69±0.03、0.24±0.01,胶原容积指数比分别为0.24±0.03、0.56±0.06、0.53±0.07、0.49±0.08、0.21 ±0.01.B、C、D组的组织病理学(移植静脉内膜厚度、内径、内膜/中膜厚度比以及胶原容积指数)与对侧正常静脉组比较,均出现明显的病理学改变,差异均有统计学意义(均P＜0.05);3组之间移植静脉的组织病理学结果比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).而A组移植静脉的组织病理学结果与对侧正常静脉比较,差异无统计学意义(P＞0.05);与其他3组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用纳米缓释技术处理的雷帕霉素,对离体的移植静脉行管腔内局部处理,能抑制移植静脉内膜增生,防治移植静脉狭窄.     

白介素10在心脏移植排斥反应中表达的实验研究

研究白介素10(IL-10)在大白鼠心脏移植排斥反应中心脏局部的表达变化情况,并探讨其参与排斥反应的可能机制。分五组A组(对照组)、B组(供体特异性全血输注组)、C组(Anti-IL-2Mab组)、D组(Anti-IL-4Mab组)、E组(Anti-IL-2Mab+CsA组)处理受体,将大鼠移植心移植到受体的颈部,观察移植心存活时间、动态病理变化。并于移植术后第1d、第3d、第5d、第7d、第9d、第11d、第14d分别取移植心置于液氮中待测。应用半定量的RT-PCR法动态检测移植心IL-10的表达情况。结果表明各组移植心存活时间分别为(8.3±1.7)d、(29.2±7.1)d、(26.4±5.7)d、(10.2±1.9)d、(55.0±10.6)d。其中B组、C组对A组差异有显著意义,E组对A组及C组分别有极显著意义和显著意义。IL-10在B组、C组及E组均有较强的表达,在A组及D组表达微弱,并与移植物的存活时间密切相关。结果提示IL-10参与调节移植排斥反应,其表达水平与移植物存活时间正相关,机制可能为Th类细胞因子的免疫偏离。应用TH1类细胞因子单克隆抗体并联用免疫抑制剂可以有效的抑制移植排斥反应,从而延长移植物的存活期。     

聚乙二醇对同种小鼠胰岛移植后抗排斥治疗的影响

目的 探讨聚乙二醇(PEG)包埋小鼠胰岛细胞对同种小鼠胰岛移植物存活的影响,以及其与抗排斥药雷帕霉素共同应用对胰岛移植后抗排斥治疗的影响.方法 选取C57BL/16雄性小鼠皮下预血管化糖尿病模型,行BALB/c小鼠胰岛移植.随机分为6组:A组:正常胰岛移植组.B组:PEG包埋胰岛移植组.C组:正常胰岛移植+雷帕霉素1.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗组.D组:PEG包埋胰岛移植+雷帕霉素1.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗组.E组:正常胰岛移植+雷帕霉素3 mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗组.F组:PEG包埋胰岛移植+雷帕霉素3 mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗组.观察小鼠血糖变化,病理检测移植物存活情况.结果 B组胰岛存活时间(25.5±5.9)d较A组(14.7±2.6)d明显延长(P<0.01),C组胰岛存活时间(35.0±3.1)d,D、E、F组胰岛于移植后6周均存活.HE染色下B组较A组炎症反应轻,胰岛结构完整.免疫组化染色显示B组有散在染色增强细胞团而A组未见.结论 PEG包埋胰岛细胞可显著延长移植物的存活时间,并能减少免疫抑制剂雷帕霉素的用量.     

冻干去细胞异种神经和类许旺细胞共移植修复外周神经缺损的实验研究

目的 研究冻干化学去细胞异种神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果.方法 48只成年雌性DA大鼠分别用4种移植物桥接大鼠1.5cm坐骨神经缺损:冻干化学去细胞异种神经与类许旺细胞共移植组、冻干化学去细胞异种神经移植组、化学去细胞异种神经移植组、异种神经移植组.术后4周、24周通过大体观察、神经电生理、肌肉湿重及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果.结果 术后24周A组运动神经传导速度和肌肉湿重恢复率优于B、C、D组(P＜0.05);组织学检测发现,术后24周A组移植段再生神经纤维较多,以有髓神经纤维为主.结论 种植类许旺细胞的冻干化学去细胞异种神经能有效的修复大鼠周围神经缺损.     

PC预处理同种异体静脉重建犬股动脉的研究

目的探讨多聚环氧化合物(PC)预处理同种异体静脉的实验应用.方法30只实验犬,60侧股动脉移植段,随机分为三组,经PC(n=30)和戊二醛(GA,n=20)交联处理的异体犬静脉以及自体静脉(NS,n=10)分别植入犬股动脉缺损处,以多普勒超声检测或DSA观测血管植入后3、7、14、30、60、90 d的通畅率,并取移植血管标本进行扫描和透射电镜观察,图像分析和测定内膜/中膜比值.结果移植早期(14 d),PC组、GA组和NS组累积通畅率分别为64.2%、42.86%、90%.PC组在术后30、60、90 d的累积通畅率分别为48.15%、21.88%、13.13%,与GA组比较有显著差异(P＜0.05).PC组7 d内皮细胞向静脉爬行,90 d覆盖静脉表面.GA组90 d内膜面有局灶状分布的新生内皮细胞.NS组30 d内皮细胞重新覆盖内膜面.术后7 d,三组的内膜/中膜比值无显著差异(P＞0.05);术后30、90 d,三组之间比值有显著差异(P＜O.05).结论PC预处理同种异体静脉植入动脉环境后,内膜再内皮化、内膜增殖和90 d内累积通畅率均好于GA组.     

兔胚胎卵巢细胞团同种异体移植研究

本实验随机将18只NZW雌兔分为4组。A组(5只):系内移植,供、受体同系,B组(5只):系间移植,供体为NZW封闭群,受体为NZW近交系;C组(5 只);系间移植,供、受体情况同B组,移植物预培养2～3天;D组(3只):移植部位注射等体积培养液,其余条件同前。实验结果显示;①A、B、C3组受体兔在卵巢细胞团移植后,血浆E2水平明显上升(P<0.01),提示移植物有E2分泌;移植后30天内,A组较B、C组E2水平高(P<0.05或<0.01),提示同系移植卵巢功能恢复校好;移植后30～60天,C组E2较B组高(P<0·01),提示培养后移植优于未培养直接移植。②同期移植部位有生长卵泡存在,生殖道组织学也与此结果吻合。