三氧化二砷抑制裸鼠肝癌侵袭及转移的体内实验研究

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对裸鼠肝癌侵袭及转移基因的影响.方法 建立人肝癌细胞系(Bel-7402)裸鼠肝癌模型,用不同剂量As2O3治疗,计算各组瘤体体积及瘤重,计算瘤重抑制率;肿瘤组织及双肺病理组织检查,观察肿瘤血管分布,肺转移结节计数;采用免疫组化检测肿瘤组织中VEGF、COX-2、HIF-1α和CD44V6的表达情况.结果 As2O3治疗组平均瘤重和瘤体积较对照组明显减低,有显著性差异(P<0 01);病理结果,可见肝脏部位白色肿瘤组织块,并可见肿瘤表面红色粗大的肿瘤血管.As2O3治疗组与对照组相比,肺转移结节数目明显减少,有显著性差异(P<0 01).免疫组化结果,各组细胞均着色,治疗组VEGF、COX-2、HIF-1α和CD44V6阳性表达率较对照组均降低,有统计学意义(P<0 05).结论 As2O3能抑制肝癌细胞的侵袭和转移,降低VEGF、COX-2、HIF-1α和CD44V6的表达.     

NS-398对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成的影响

目的探讨NS-398对裸鼠胃癌移植瘤血管生成的影响.方法12只裸鼠随机分为2组,以人胃癌细胞株SGC7901建立荷瘤裸鼠动物模型.治疗组于接种第2 d开始给予10 mg/kg NS-398腹腔注射,隔d给药;对照组隔d腹腔注射同体积PBS,连续20 d,观察抑瘤率,应用免疫组织化学技术检测2组肿瘤组织环氧合酶-2(COX-2)、VEGF表达及微血管密度(MVD).结果NS-398抑瘤率达88.7%,COX-2、VEGF及MVD在治疗组分别为2.6±0.8,2.3±1.2和21.2±4.8,显著低于对照组的5.0±0.6,5.8±0.4和41.3±2.6(P均＜0.05).结论NS-398可能通过抑制COX-2、减少VEGF的表达抑制裸鼠胃癌移植瘤血管生成.     

选择性COX-2抑制剂尼美舒利对人卵巢癌细胞株移植瘤生长的不同影响

目的:探讨选择性COX-2抑制剂尼美舒利(Nimesulide)对COX-2表达不同的人卵巢癌细胞株移植瘤生长的影响。方法:培养人卵巢癌细胞株SKOV-3(COX-2表达阴性)和OVCAR-3(COX-2表达阳性),制作裸鼠皮下移植瘤模型。应用尼美舒利干预,观察各组肿瘤的生长情况,绘制生长曲线,计算抑瘤率。测定移植瘤组织内血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量。结果:SKOV-3组治疗组的肿瘤体积与对照组比较没有统计学差异(1.026 4±0.34)cm3vs(1.668 2±0.94)cm3(P=0.19>0.05);两组肿瘤的VEGF含量比较为没有统计学差异(1 481.1±235.61)pg/mL vs(1 648±179.02)pg/mL(P=0.09>0.05);两组的肿瘤生长曲线没有显著分离。OVCAR-3组治疗组的肿瘤体积(0.139 6±0.061)cm3小于对照组的肿瘤体积(0.263 4±0.056)cm3(P=0.01),抑瘤率为56.3%;治疗组的肿瘤生长曲线较对照组低平。治疗组肿瘤的VEGF含量为(1 070.4±578.29)pg/mL,低于对照组肿瘤的VEGF含量(1 641.3±541.84)pg/mL(P=0.04)。结论:选择性COX-2抑制剂对COX-2表达阳性的人卵巢癌组织有抑制生长的作用,对COX-2表达阴性的人卵巢癌组织的生长没有表现出抑制作用,这可能与COX-2抑制剂对COX-2表达不同的肿瘤组织内VEGF含量有不同的影响相关。     

顺铂联合长春瑞滨对小鼠移植性肝癌的抑制作用

目的 探讨顺铂(DDP)联合长春瑞滨(VNR)对移植性肝癌的抑制作用以及可能的分子机制.方法 建立H_(22)肝癌细胞系小鼠移植瘤模型40只,随机分为对照组、顺铂组、长春瑞滨组和顺铂+长春瑞滨组,治疗结束后第2周观察肿瘤体积变化和抑瘤率,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)检测治疗后小鼠移植性肝癌肿瘤细胞凋亡率,应用免疫组化(S-P法)检测血管内皮生长因子(VEGF)、caspase-3、低氧诱导因子(HIF-Iα)表达及微血管密度(MVD).结果 治疗组小鼠皮下移植瘤体积和抑瘤率与对照组相比均具有统计学意义(P<0.05);DDP与VNR联合用药组与单独应用DDP或VNR相比均具有统计学意义(P<0.05).TUNEL法检测显示DDP与VNR联合用药可明显诱导肝癌细胞凋亡,与各单独用药治疗组和对照组比较均具有显著差异(P<0.05).DDP与VNR联合用药上调caspase-3,下调VEGF、HIF-Iα蛋白表达,减低MVD,与对照组比较均具有显著差异(P<0.05).结论 DDP联合VNR可明显诱导肝癌细胞凋亡发生和抑制肿瘤细胞血管化,较单独应用DDP或VNR能更有效地抑制肝癌的生长,提示DDP联合VNR在肝癌治疗中可能起到重要作用.     

放射性125I粒子对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤VEGF表达的影响

目的 探讨放射性125I粒子对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响.方法 建立肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,将24只小鼠随机分为对照组和观察组,每组12只.观察组小鼠植入125I粒子,对照组小鼠植入空白粒子.检测裸鼠移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率.采用免疫组织化学法检测移植瘤组织内VEGF蛋白表达.采用PCR法检测移植瘤组织内VEGF mRNA表达.结果 观察组小鼠移植瘤体积及瘤重[(0.658±0.213) g]均明显小于对照组[(1.807±0.625) g],组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05);观察组小鼠平均抑瘤率为(68.2±5.3)%;观察组移植瘤中VEGF蛋白表达及VEGF mRNA表达分别为(22.6±5.9)、(98.7±8.2),均明显低于对照组的(58.5±6.4)、(138.7±5.2),组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 放射性125I粒子植入可显著抑制肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长,抑制VEGF表达可能是其主要作用机制.     

伊立替康节拍式化疗联合索拉非尼对小鼠移植性肝癌的作用

[目的]观察伊立替康(CPT-11)节拍式化疗联合索拉非尼(Sorafenib)对小鼠移植瘤生长的抑制作用及对血管增殖的影响。[方法]建立小鼠HCa肝癌移植瘤模型后,将荷瘤小鼠随机分成5组:空白对照组(A组);Sorafenib组(B组);CPT-11节拍式给药(LDM)组(C组);CPT-11常规剂量(TDM)组(D组);Sorafenib+CPT-11(LDM)组(E组)。用药28 d停药,24 h后处死小鼠,测量瘤体积及瘤重,计算抑瘤率,并用免疫组化SP法测定肿瘤细胞中VEGF表达和间质细胞CD31的表达,以计算微血管密度(MVD)。[结果]索拉非尼、CPT-11对小鼠HCa肝癌的生长均有抑制作用,E组抑瘤率(0.5490%)明显高于其他3个实验组(P<0.05);而且E组肿瘤细胞中VEGF表达明显降低、MVD计数明显减少(P<0.05)。[结论]CPT-11节拍式化疗联合索拉非尼可协同抑制小鼠HCa肝癌移植瘤生长及血管形成,节拍式化疗联合分子靶向治疗可能成为肝癌综合治疗的新途径。     

EGCG对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤COX-2、VEGF和bFGF表达的调控

探讨表没食子儿茶素没食子酸脂EGCG对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤生长和肿瘤血管生成的抑制作用及EGCG对移植瘤环氧合酶-2(COX-2)?血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)表达的调控?【方法】 将肝癌细胞HepG2种植至裸鼠背部皮下,10 d后开始用不同浓度EGCG治疗,38 d后处死?观测裸鼠移植瘤的体积和质量?并采用间接免疫流式细胞术和Western Blot法检测移植瘤COX-2?VEGF和bFGF的表达,用免疫组化法检测微血管密度(MVD)?【结果】 ①生理盐水组切除的移植瘤平均体积和质量分别是(1174.6 ± 793.5)mm3和(0.572 ± 0.138)g,EGCG 50 mg/kg组分别为(649.3 ± 100.8)mm3和(0.340 ± 0.066)g,两组比较差异有统计学意义(P < 0.05)?EGCG 50 mg/kg组抑瘤率为40.56%?②生理盐水对照组和EGCG 50mg/kg组的MVD值分别为23.24±1.76和14.27±1.25,两组差异有统计学意义(P < 0.01);间接免疫荧光流式细胞术和Western Blot检测结果提示EGCG呈浓度依赖性地抑制人肝癌细胞HepG2移植瘤中COX-2?VEGF和bFGF 的表达?【结论】 EGCG具有抑制人肝癌裸鼠移植瘤生长的作用;同时能抑制肝癌移植瘤内新生血管内皮细胞的生长,其机制可能与抑制COX-2的表达以及由此引起的VEGF和bFGF蛋白表达降低有关?     

人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对人肝癌细胞增殖性的影响

目的探讨人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对肝癌裸鼠移植瘤模型的治疗作用,观察其对移植瘤肝癌细胞增殖性的影响。方法采用人肝癌细胞株Bel-7402细胞,种植于32只雄性裸鼠皮下,随机分成联合用药组、Rg3组(5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg)、三氧化二砷组及对照组。实验自肿瘤接种第3天开始,人参皂甙Rg3(3个剂量),隔日灌胃,共20次;三氧化二砷40μg.kg-1.d-1,每日腹腔内注射,连续28d;对照组为生理盐水。停药1周后,脱颈处死,完整取出瘤块,检测肿瘤的重量,计算抑瘤率。采用免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)在裸鼠肝癌移植瘤组织中的表达情况。结果三氧化二砷组抑瘤率(55.25%)高于Rg3组(5mg/kg亚组为32.24%、10mg/kg亚组为45.10%,20mg/kg亚组为50.00%),但随着Rg3浓度的升高,二者之间的差异明显减小;联合用药组中,5mg/kg亚组平均瘤重(0.58±0.15)g,抑瘤率61.84%;10mg/kg亚组平均瘤重(0.54±0.11)g,抑瘤率64.47%;20mg/kg亚组平均瘤重(0.49±0.12)g,抑瘤率67.76%,其抑瘤作用高于三氧化二砷组,差异有统计学意义(P<0.05)。三氧化二砷组抑制肝癌细胞增殖作用(PI值:38.3±5.3)强于Rg3组(PI值:5mg/kg亚组58.1±2.4;10mg/kg亚组51.8±5.3;20mg/kg亚组41.9±6.5),联合用药组(PI值:5mg/kg亚组38.6±8.4;10mg/kg亚组30.9±3.2;20mg/kg亚组23.3±3.3)作用最强(P<0.05),可以明显抑制移植瘤肝癌细胞增殖性。结论三氧化二砷对裸鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用可能是通过抑制PCNA蛋白的表达。人参皂甙Rg3与三氧化二砷联合用药对移植瘤肝癌细胞增殖性的抑制有协同作用。     

柴胡皂苷D联合奥沙利铂对A549细胞荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其机制

考察柴胡皂苷D联合奥沙利铂对荷人肺腺癌A549细胞裸鼠的抑瘤作用及其机制。建立A549细胞荷瘤小鼠模型,灌胃给予柴胡皂苷D,以体内抑瘤率考察柴胡皂苷D的最佳剂量,再考察柴胡皂苷D与奥沙利铂联合用药对肿瘤的生长状态的影响,TUNEL法检测凋亡细胞,ELISA法检测血清中前列腺素E2(PGE2)浓度变化,Western blot检测瘤体中COX-2蛋白的表达。结果显示:柴胡皂苷D在1.0 mg/kg时抑制作用最佳(抑瘤率40.96%);柴胡皂苷D与奥沙利铂联合用药诱导荷瘤裸鼠瘤体凋亡的作用强于二者单独用药;荷瘤模型组PGE2浓度和COX-2的表达明显增高;单独和联合用药PGE2浓度、COX-2表达量均显著降低(P<0.05),且联合用药组的PGE2浓度和COX-2表达均显著低于单用组(P<0.01)。研究结果表明,柴胡皂苷D联合奥沙利铂用药能产生协同作用,其抑瘤作用可能是通过下调COX-2蛋白的表达来实现的。     

栀子抑制小鼠S180和肝癌及促进小鼠肝癌细胞凋亡作用

目的 探讨栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2表达以及细胞凋亡的作用.方法 分别采用荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌模型,灌胃栀子提取物10g·(kg·d)-1,qd×10d;观察瘤重和肿瘤抑瘤率,以及用酶联免疫分析法检测肝癌小鼠血清肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2含量及用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 栀子提取物能抑制荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的增重(P＜0.01),抑瘤率分别为44.8%和61.0%;下调荷瘤小鼠肝癌模型血清肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达(P＜0.01),小鼠肝癌细胞凋亡率为52.6%.结论 栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌有抑制作用,抑瘤作用机制是下调肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达,从而诱导小鼠肝癌细胞凋亡.     

三氧化二砷联合全反式维甲酸对小鼠肝癌细胞H22及移植瘤的抑制作用

目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)联合全反式维甲酸(all trans retinoic acid,ATRA)在体内和体外对小鼠肝癌H22细胞的抑制作用.方法建立小鼠肝癌H22移植瘤模型,观察As2O3联合ATRA的体内抑瘤作用;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法测定As2O3联合ATRA在体外对小鼠肝癌H22细胞株的生长抑制作用.结果 As2O3联合ATRA在体外能明显抑制H22细胞的生长和增殖,抑制率为52.24%;在体内对H22小鼠的肿瘤体积、重量均有明显的抑制作用,抑制率分别为66.25%、62.07%.结论 As2O3和ATRA在体内和体外对H22肿瘤细胞的生长均有抑制作用,联合应用作用加强,有协同作用.     

三氧化二砷对人肝癌细胞生长及其侵袭转移能力的影响

目的探讨三氧化二砷(As_2O_3)对人肝癌SMMC-7721细胞生长及其侵袭转移能力的影响。方法 MTT法检测不同浓度As_2O_3对人肝癌SMMC-7721细胞生长的影响,之后检测经As_2O_3作用前后对基底膜黏附能力的影响;Transwell膜侵袭系统观察As_2O_3作用前后SMMC-7721细胞游走与穿透基底膜能力的改变。结果 As_2O_3能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的生长以及对Matrigel的黏附能力,相同浓度不同作用时间比较及相同作用时间不同浓度比较,差异均有统计学意义(P<0.01);As_2O_3能抑制细胞游走与穿透基底膜的作用,与对照组比较,游走穿膜细胞数及侵袭穿膜细胞数均减少(P<0.05)。结论 As_2O_3具有抑制人肝癌细胞生长增殖以及侵袭转移的能力。     

三氧化二砷对人肺腺癌细胞A549/DDP裸鼠体内的多药耐药逆转作用

目的研究三氧化二砷（As_2O_3）对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/顺铂（DDP）裸鼠移植瘤的耐药逆转作用。方法建立人肺腺癌裸鼠移植瘤模型,观察As_2O_3、DDP及联合用药对体内移植瘤生长状况的影响;采用流式细胞术（FCM）测定不同用药对肿瘤细胞凋亡率变化和耐药细胞A549/DDP P-糖蛋白（P-gp）表达;采用RT-PCR检测不同用药对A549/DDP移植瘤组织MRP1-mRNA和LRP-mRNA表达的变化。结果体内裸鼠抑瘤实验显示As_2O_3有一定抑瘤作用,联合应用DDP可显著抑制肿瘤生长。FCM结果显示应用As_2O_3后肿瘤细胞平均凋亡率,明显高于对照组（P〈0.05）[（17.204±3.091）%vs（3.436±0.537）%],低浓度As_2O_3联合DDP后肿瘤细胞的凋亡率,明显高于DDP组（P〈0.05）[（14.472±3.891）%vs（5.612±1.167）%]。FCM对P-gp表达检测提示As_2O_3对移植瘤Pgp水平无影响。RT-PCR检测结果示含As_2O_3组MRP1表达明显低于不含As_2O_3组（P〈0.05）,肺癌耐药相关蛋白（LRP）在转录水平呈现相对低表达,含As_2O_3组同不含As_2O_3组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 As_2O_3能在体内逆转A549/DDP细胞的耐药性,其机制可能是As_2O_3可通过下调MRP1基因表达,提高A549/DDP细胞对DDP敏感性逆转其耐药,并可能通过诱导肿瘤细胞凋亡来起作用。     

As2O3磁性纳米微球磁感应加热治疗宫颈癌的研究

目的探讨As2O3磁性纳米微球磁感应加热治疗宫颈癌的作用和机理。方法用培养的SiHa细胞建立裸鼠人宫颈癌移植瘤模型,将研制的As2O3纳米微球、磁性纳米微球、As2O3磁性纳米微球等注入肿瘤细胞接种处,加高频交变磁场磁感应加热治疗3次后,d 45实验结束,分析比较3个实验组较对照组的延迟出瘤时间、质量抑制率、肝功能和肾功能情况及肿瘤、瘤周和内脏组织学的改变。同时观察磁流体热疗的升温和恒温效果。结果在高频交变磁场下,As2O3磁性纳米微球组肉眼未见肿瘤生长,该组的肿瘤质量抑制率为99.93%,明显高于As2O3纳米微球组(85.20%,P<0.01)及磁性纳米微球组(87.72%,P<0.01)。各实验组裸鼠血清AST、ALT、Bun及Cr水平与对照组相比无显著性差异(P>0.05),瘤旁和内脏组织未见明显损伤。结论在高频交变磁场作用下,As2O3纳米微球、磁性纳米微球、As2O3磁性纳米微球治疗裸鼠宫颈癌均有效,以As2O3磁性纳米微球效果最佳。本研究所采用的As2O3磁性纳米微球联合磁流体热疗技术具有双重抗癌功能,为宫颈癌和其他实体瘤的治疗提供了一条新途径。      

三氧化二砷与人参皂甙Rg3联合对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移能力的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)和人参皂甙Rg3(ginsenoside Rg3)联合运用对人肝癌SMMC-7721细胞黏附侵袭转移能力的影响以及与单独运用的差异。方法采用MTT法观察经As2O3、人参皂甙Rg3单独与联合作用后人肝癌SMMC-7721细胞对基底膜黏附能力的影响;Transwell膜侵袭系统观察As2O3与人参皂甙Rg3单独与联合作用后SMMC-7721细胞游走与穿透基底膜能力的影响。结果As2O3和人参皂甙Rg3单独与联合应用均能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞与Marigel的黏附,抑制细胞游走与穿透基底膜的能力(P<0.05),其联合抑制作用优于单独运用(P<0.05)。结论As2O3和人参皂甙Rg3均有抗肿瘤侵袭转移作用,两者联合可增强抑制效应。     

三氧化二砷对人结肠癌裸鼠移植瘤端粒酶活性及其催化亚单位表达的影响

目的:研究三氧化二砷(As2 O3 )注射液对人结肠癌裸鼠移植瘤端粒酶活性及其催化亚单位人端粒逆转录酶(hTERT)表达的影响。方法:建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水组、As2 O3 低剂量(2 .5mg·kg-1)组、As2 O3 高剂量(5mg·kg-1)组及5 - FU(2 0mg·kg-1)组。腹腔注射As2 O3 ,利用银染 端粒重复扩增(TRAP)法测定人结肠癌裸鼠移植瘤端粒酶活性、RT PCR法检测hTERT的表达。结果:生理盐水组及5 -FU组端粒酶活性及其催化亚单位表达不受影响,不同剂量As2 O3 均明显抑制端粒酶活性及其催化亚单位表达。结论:As2 O3 注射液对人结肠癌裸鼠移植瘤端粒酶活性及其催化亚单位的表达有抑制作用。     

Mechanism of Arsenic Trioxide Inhibiting Angiogenesis in Multiple Myeloma

Duringthelast decade,the efficacy of arsenic tri-oxide(As2O3)in both newly diagnosed and relapsedpatients with acute promyelocytic leukemia(APL)hasbeen established.And now,As2O3is used with otheragentsintreating patients with relapsed and refractorymultiple myeloma(MM)in clinical practice[1].Theinitial researches demonstratedthat As2O3couldinhibitproliferation andinduce apoptosisin MMcellsin vitroandin vivo[2,3].In addition to affecting tumorgrowth,As2O3has been showntoinhibit angiogenes…     

COX-2和VEGF在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨环氧化酶-2(cyclooxygenagse-2,COX-2)、血管内皮生长因子(vascul( )r endothelial cell growth factor,VEGF)在胃癌中的表达及意义.方法用免疫组化S-P法检测45例胃癌、癌旁组织COX-2、VEGF的表达.结果胃癌组织COX-2、VEGF的阳性表达率分别是77.78%和75.56%,明显高于癌旁组织(P＜0.01,P＜0.05);COX-2、VEGF均与胃癌的浸润浓度、淋巴结转移和临床分期密切相关(p＜0.05):COX-2( )组VEGF表达率显著高于COX-2(-)组(p＜0.05).结论COX-2.VEGF与胃癌的浸润转移及病期进展有关,COX-2可上调VEGF表达.     

环氧化酶-2在肺癌血管生成中的作用及机制

目的　探讨环氧化酶-2 (COX- 2) 在肺癌血管生成中的作用及可能机制。方法　应用免疫组织化学法研究79例人肺癌组织COX 2、血管内皮生长因子(VEGF) 的表达; 建立裸鼠肺癌细胞株A549 移植瘤模型, 观察选择性COX- 2抑制剂尼米舒利(NIM) 对肿瘤生长的影响, 并用RT-PCR及免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织的VEGF基因及蛋白表达。结果　在人肺癌组织中COX -2表达的阳性率为65. 8%, VEGF阳性率为72 .2%, COX -2 与VEGF显著相关(P<0 .01)。在裸鼠移植瘤体内实验中, NIM可有效抑制肿瘤的生长; 与对照组相比, NIM处理组肿瘤组织中VEGF mRNA及蛋白的表达均明显下调(均P<0. 01)。结论　COX -2与肺癌血管生成密切相关, 其作用机制可能是上调促血管生成因子VEGF的表达。关键词　肺癌; 　环氧化酶2; 　血管内皮生长因子