趋化因子受体CXCR4小干扰RNA对人大肠癌细胞株迁移的抑制作用

目的:探讨趋化因子受体CXCR4小干扰RNA(siRNA)对人大肠癌细胞株迁移的抑制作用.方法:采用RT-PCR、Western印迹和体外迁移实验检测趋化因子受体CXCR4在大肠癌细胞株SW480、SW620、LoVo 细胞的表达及迁移能力.将与CXCR4 mRNA互补的 siRNA及非抑制性双链RNA(Non-silencing dsRNA),在脂质体介导下以150 nmol/L终浓度转染大肠癌细胞SW480,以RT-PCR和Western印迹法检测CXCR4表达的变化,Transwell迁移实验检测大肠癌细胞SW480迁移的变化.结果:大肠癌细胞SW480高表达CXCR4,大肠癌细胞LoVo低表达CXCR4,SW620的CXCR4表达水平介于二者之间.与LoVo 细胞相比,SW480和SW620迁移细胞明显增多(P＜0.01).与对照组、脂质体组和Non-silencing dsRNA组相比,siRNA组SW480细胞内CXCR4 mRNA和蛋白均明显降低,细胞迁移被明显抑制 (P＜0.01).结论:CXCR4 siRNA可通过下调CXCR4的表达抑制人大肠癌细胞SW480的迁移.     

SU11248对结肠癌细胞系CXCR4受体表达的影响

目的探讨SU11248对结肠癌细胞系SW480中趋化因子受体CXCR4表达的影响。方法采用RT—PCR技术和免疫细胞化学染色法检测结肠癌细胞系SW480细胞中CXCR4 mRNA和蛋白的表达。采用MTT法检测SU11248对SW480细胞增殖的影响。用Westernblot检测SU11248作用后CXCR4蛋白及相关的信号调控分子的表达。结果SW480细胞中CXCR4 mRNA和蛋白呈阳性表达;SU11248对SW480细胞增殖和CXCR4表达有明显抑制作用;SU11248对调控CXCR4表达的相关的信号通路有抑制作用。结论SU11248可抑制结肠癌细胞增殖,降低CXCR4在结肠癌的表达。     

CO_2气腹压力和持续时间对人结肠癌细胞增殖的影响

目的：研究CO2气腹压力和持续时间对人结肠癌SW480细胞增殖的影响。方法：建立体外模拟CO2气腹环境,在全自动气腹机作用下,维持密闭真空压缩袋内不同压力（9、12、15 mmHg）,不同持续时间（1、2、4 h）作用于SW480细胞,作用后12 h,流式细胞仪观察细胞周期变化;作用后12、24、36、48、60和72 h,MTT法检测细胞增殖情况。结果：流式细胞仪检测细胞周期结果显示,CO2气腹压力对于人结肠癌G0/G1期细胞数值有显著影响（P〈0.01）,对于S期、G2/M期细胞周期无影响。而不同CO2气腹持续作用时间对于各细胞周期无影响（P〉0.05）,CO2气腹压力与作用时间对于各细胞周期不存在交互作用（P〉0.05）;MTT法结果显示CO2气腹下各组人结肠癌SW480细胞在不同压力和持续时间作用后12～72 h检测的平均D（490）值均小于对照组。通过析因设计的方差分析,在CO2气腹作用后12、24、36、48、60和72 h,压力与作用时间对SW480细胞的增值无交互作用（P〉0.05）。压力在24、36 h对SW480细胞的增值有一过性抑制作用（P〈0.01）,在SW480细胞增殖初、后期都无影响（P〉0.05）;不同作用时间对SW480细胞的增值无影响（P〉0.01）。结论：CO2气腹不同压力对结肠癌细胞的增殖有一过性抑制作用,CO2气腹72 h内不同作用时间对结肠癌细胞的增殖未见明显影响。     

腹腔镜CO_2气腹对人宫颈癌CaSki细胞中凋亡抑制因子表达的影响

目的:研究CO2气腹对人宫颈癌CaSki细胞中survivin mRNA和蛋白表达的影响,探讨其促肿瘤生长的分子机制。方法:建立腹腔镜CO2气腹体外模型,以不同压力(0mmHg、7mmHg、14mmHg)的CO2气腹对人宫颈癌CaSki细胞处理不同时间(1h、2h、3h、4h),设未处理组为对照。采用RT-PCR法和免疫细胞化学法分别检测处理后各组细胞survivin mRNA和蛋白表达情况。结果:CO2气腹在一定的压力和作用时间范围上调CaSki细胞中survivin mRNA和蛋白的表达。结论:CO2气腹促肿瘤生长的效应可能是通过抑制肿瘤细胞的凋亡而实现的。     

Glycodelin －A 对 CD4＋T 细胞表达趋化因子受体的影响

目的：通过研究妊娠相关蛋白－A（Glycodelin －A）对 CD4＋T 细胞表达趋化因子受体的影响,探讨Glycodelin －A 影响 CD4＋T 细胞的可能机制。方法抽取正常育龄女性外周血,将全血加入不同浓度 Glycodelin －A 后于体外环境下分别培养6、24、48 h。多重荧光标记后利用流式细胞术（FCM）分析 CD4＋T 细胞表面 CXCR4、CCR2、CCR5表达率。结果Glycodelin －A 对 CD4＋T 表达 CXCR4表达无明显调节作用,适宜浓度下对 CD4＋T 表达 CCR2起上调作用,对 CD4＋T 表达 CCR5起下调作用。结论Glycodelin －A 可通过改变 CD4＋T 细胞表达趋化因子受体 CCR2、CCR5表达影响 CD4＋T 细胞功能。     

CO2气腹对人宫颈癌CaSki细胞Survivin和Bcl-2表达的影响

目的 探讨CO2气腹对人宫颈癌CaSki细胞抗凋亡能力的影响.方法 建立腹腔镜CO2气腹体外模型,以不同压力(0、7、14 mmHg)的CO2气腹对人宫颈癌CaSki细胞处理不同时间(1、2、3、4 h),设未处理为对照组.采用RT-PCR、Western blot分别检测CO2气腹处理后各组细胞Survivin mRNA 和Bcl-2蛋白的表达情况.结果 当压力为7、14 mmHg时,Survivin和Bcl-2的表达均随着气腹处理时间的延长呈上升趋势(P＜0.05).当处理相同时间时,7 mmHg组Survivin和Bcl-2的表达量均明显高于其他压力组和对照组(P＜0.05).结论 在一定压力和作用时间范围,CO2气腹能提高宫颈癌细胞的抗凋亡能力,这可能是CO2气腹促肿瘤生长的机制之一.     

不同分子分型乳腺癌组织中趋化因子 CXCL12 及其受体 CXCR4 和 CXCR7 的表达及临床意义

目的：探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4和CXCR7在不同分子分型乳腺癌组织中的表达及临床意 义。方法：应用实时定量PCR检查80例不同分子分型乳腺癌组织中的趋化因子CXCL12 mRNA及其受体CXCR4和 CXCR7 mRNA的表达,采用免疫组织化学技术检测160例不同分子分型乳腺癌细胞组织中趋化因子CXCL12蛋白及其 受体CXCR4和CXCR7蛋白的表达,并分析它们在不同分子分型乳腺癌中的表达差异。结果：CXCL12 mRNA及其受 体CXCR4和CXCR7 mRNA在Luminal A和Luminal B型中表达无差异,在HER-2过表达型和三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)两个类型之间的表达也无差异,但三者在HER-2过表达型和TNBC中的表达明显高于Luminal A和 Luminal B型(均P<0.05);CXCL12蛋白、CXCR4蛋白和CXCR7蛋白在HER-2过表达型和TNBC中的阳性表达率均明显高 于Luminal A和Luminal B型(均P<0.05),但在Luminal A和Luminal B之间及HER-2过表达型和TNBC之间的表达无差异。 结 论：趋化因子CXCL12及其受体CXCR4和CXCR7在HER-2过表达型乳腺癌和TNBC组织中高表达,可能与该类型乳腺 癌预后较差有关,抑制其表达可为该类乳腺癌的治疗提供重要途径。     

CXCR4、CCR7在非小细胞肺癌中表达的差异及意义

目的 探讨非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)中CXC类趋化因子受体4(chemokine CXC motif receptor 4,CXCR4)、CC类趋化因子体7(chemokine CC motif receptor 7,CCR7)表达的差异性及其表达在局部淋巴结转移中的作用.方法 未做治疗的41例NSCLC肿瘤原发灶,以及25例移淋巴结和20例正常肺组织接SABC免疫组化法观察CXCR4、CCR7的表达.结果 NSCLC原发灶中肿瘤细胞CXCR4、CCR7阳性表达均明显高于正常肺组细胞(P＜0.05);CXCR4阳性表达率高于CCR7(分别为92.68%、68.29%;P＜0.05).原发灶中CCR7与TNM分期、淋巴结转移状况相关(P＜0.05).淋巴结移灶中CXCR4、CCR7表达阳性率差异无统计学意义(96%、84%;P＞0.05).结论 NSCLC中肿瘤细胞高表达CXCR4及CCR7可能与肿瘤细胞局部淋巴结靶性转移有关.对NSCLC而言,CCR7的作用可能更为关键.     

CCR7、CXCR4在肺癌中的表达及意义

目的探讨CC族趋化因子受体7(CCR7)和CXC族趋化因子受体4(CXCR4)在肺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学检测72例肺癌组织标本和30例良性肺疾病肺组织标本中CXCR4和CCR7的表达情况,并分析其不同临床病理特征中表达的差异。结果 CCR7和CXCR4在肺癌组织中的表达阳性率均明显高于正常肺组织,差异有统计学意义(P<0.01);CCR7和CXCR4表达与肺癌患者的TNM分期,纵膈淋巴结转移密切相关(P<0.01),与年龄、性别、病例组织学类型等均无关(P>0.05),并且Spearman相关分析显示,CXCR4表达与CCR7表达呈高度正相关(r=0.623,P<0.001)。结论 CXCR4和CCR7在肺癌纵膈淋巴转移中发挥重要作用。     

模拟CO2气腹对人胃癌MKN-45细胞增殖和细胞周期的影响

目的 通过建立体外模拟CO2气腹环境,研究CO2气腹对人胃癌MKN-45细胞增殖和细胞周期的影响。方法 建立体外模拟CO2的气腹环境,在全自动气腹机作用下维持密闭培养箱内压力为12mmHg,作用时间4h。处理后用MTT法检测细胞增殖情况;通过流式细胞仪观察细胞周期变化。结果 MTT法检测细胞增殖结果显示,气腹组人胃癌MKN-45细胞的增殖速度与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）;流式细胞仪检测人胃癌MKN-45细胞周期,CO2气腹组增殖指数与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论 体外模拟持续12mmHg CO2气腹环境,连续对人胃癌MNK-45细胞作用4h,不会促进胃癌细胞的增殖和生长。     

不同期别梅毒患者外周血CD4＋T细胞表面趋化因子受体的研究

目的 研究不同期别梅毒患者趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR4、CXCR3水平,探讨梅毒患者免疫功能的变化.方法 检测不同期别梅毒患者外周血趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR4、CXCR3水平,以健康体检者作为正常对照组.结果 二、三期梅毒患者与正常对照组及一期梅毒患者比较,外周血CCR3水平增高,CCR5水平降低（P＜0.05或0.01）;三期梅毒患者与二期患者比较,外周血CCR3水平增高（P＜0.05）;二、三期梅毒患者治疗后与治疗前比较,外周血CCR3水平降低（P＜0.05）;二期梅毒患者治疗后与治疗前比较,外周血CCR5水平升高（P＜0.05）.结论 趋化因子受体在梅毒的发病和发展中可能起着重要作用.     

CO2气腹对人宫颈癌CaSki细胞MMP-9和VEGF表达的影响

目的 探讨腹腔镜二氧化碳（CO2）气腹对人宫颈癌CaSki细胞株基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响.方法 建立腹腔镜CO2气腹体外模型,将CaSki细胞株分别置于0、7和14mmHg的CO2气腹环境下培养1、2、4和8h.采用RT-PCR和Western blot法分别检测处理后各组CaSki细胞株中MMP-9和VEGF表达情况.结果 RT-PCR和Western blot结果显示,与0 mmHg CO2气腹组相比,7和14 mmHg CO2气腹组CaSki细胞株MMP-9和VEGF的mRNA和蛋白表达显著增加（P＜0.05）,且随着处理时间的延长MMP-9和VEGF的表达呈上升趋势（P＜0.05）,处理4h时MMP-9和VEGF的表达量达到高峰;在同一时间点时,7mmHg CO2气腹组的MMP-9和VEGF表达量最高（P＜0.05）.结论 在一定压力和作用时间范围内,CO2气腹可能是通过上调MMP-9和VEGF的表达,进而促进肿瘤生长.     

Relationship between expression of chemokine receptors CCR3, CCR5 and CXCR3 on CD4+ T cells and spontaneous abortion in mice

Background Previous studies have shown that local immune cells in the feto-maternal interface are recruited from peripheral blood, and that chemokines and their receptors play an initial and key role in this recruitment process. In this study, we aimed to determine whether spontaneous abortion is associated with the expression of chemokine receptors CCR3, CCR5, and CXCR3 on CD4^＋ T cells.
Methods Peripheral blood, spleen, and thymus were collected from the spontaneous abortion mouse model CBA/JxDBA/2 （SA group, n=14）, the normal pregnant mouse model CBA/JxBALB/c （NP group, n=13）, and normal non-pregnant CBA/J mice （NNP group, n=11）. The number of chemokine receptors CCR3, CCR5, and CXCR3 expressed on CD4^＋ T cells was measured by double-label flow cytometry （FCM） method.
Results In peripheral blood, the SA group had significantly lower CCR3 expression （P 〈0.01） and higher CCR5 and CXCR3 expression （P 〈0.01） on CD4^＋ T cells than did the NP group. But comparing these chemokines between the SA and NNP groups, there was no significant difference （P 〉0.05）. In spleen, the SA group expressed significantly lower CCR3 expression （P 〈0.01） and higher CCR5 and CXCR3 expression （P 〈0.05） on CD4^＋ T cells than did the NP group. When compared with the NNP group, the SA group had significantly higher CCR3 expression （P 〈0.01）, but was not statistically different with regards to the other two chemokines （P 〉0.05）. In thymus, the SA group had significantly lower CCR3 expression （P 〈0.05） and higher CXCR3 expression （P 〈0.05） on CD4^＋ T cells than the NP group, with no significant difference in CCR5 expression （P 〉0.05）. Compared with the NNP group, the SA group had higher CCR3 expression （P 〈0.01）, but there was no statistical difference in CXCR3 and CCR5 expression （P 〉0.05） between the two groups.
Conclusion The abnormal expression of CCR3, CCR5 and CXCR3 on CD4^＋ T cells may play an important role in the pathogenesis of spontaneous abortion.     

支气管哮喘患者外周血CD3+T细胞趋化因子受体表达的研究

目的 探讨支气管哮喘患者外周血CD3⁺T细胞趋化因子受体表达情况。方法 选取2017年1月—2017年12月山东省立第三医院就诊的40例支气管哮喘患者及同期该院体检的27例健康志愿者，采用流式细胞仪检测所有受试者外周血CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上趋化因子受体CXCR1、CXCR2、CXCR3、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR8的表达。比较轻、中度支气管哮喘患者、重度支气管哮喘患者及健康志愿者，以及不同剂量糖皮质激素使用者趋化因子受体表达的差异。结果 轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1、CCR7阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CCR7阳性表达率低于对照组（P <0.05）。轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。3组吸入不同剂量糖皮质激素患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1的阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。每天吸入>800 μg/g布地奈德组的患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1阳性表达率低于每天吸入< 400 μg/g布地奈德组的患者（P <0.05）。结论 重度支气管哮喘组患者外周血CD3⁺T细胞部分趋化因子表达减少，轻、中度哮喘患者Th1和Th2相关的趋化因子受体参与免疫应答，而重度支气管哮喘患者Th1/Th2应答下降。     

鼻咽癌组织中CCR7和CXCR4的表达及其临床意义

目的探讨CXC族趋化因子受体4（CXCR4）和CC族趋化因子受体7（CCR7）在鼻咽癌（NPC）组织中的表达及其临床意义。方法随机选择2012年1月至2013年10月本院NPC患者60例,取其鼻咽癌组织（病例组）,选择同期鼻咽部炎症患者30例,取其鼻咽部组织（对照组）,采用免疫组织化学检测两组患者的CXCR4和CCR7表达情况。结果病例组CCR7和CXCR4的阳性表达分别为32例和27例,均高于对照组的6例和4例,其差异均有统计学意义（P〈0.05）,Ⅲ期＋Ⅳ期患者的CCR7和CXCR4阳性例数为22例和16例,高于Ⅰ期＋Ⅱ期的10例和11例,其差异均具有统计学意义（P〈0.05）;M1期CCR7阳性例数为24例,高于M0期的8例,差异也具有统计学意义（P〈0.05）;有淋巴结转移的患者CCR7和CXCR4阳性例数分别为23例和24例,未转移者9例和3例,其差异也具有统计学意义（P〈0.05）。结论 CCR7和CXCR4在鼻咽癌中的阳性表达率均明显高于非鼻咽癌组织,且与鼻咽癌临床分期和淋巴结转移有关,CXCR4和CCR7在鼻咽癌的发生和发展中具有重要的意义。     

不同压力CO2气腹对兔动脉血气和红细胞流变性的影响

目的研究不同压力CO2气腹对兔动脉血气分析值和红细胞流变性的影响。方法 18只雌性健康兔按气腹压力随机均分为3组：气腹压0mmHg组（Ⅰ组）、气腹压10mmHg组（Ⅱ组）和气腹压15mmHg组（Ⅲ组）。每组兔均在不同的压力下接受气腹1h。测定CO2气腹前5min（T0）、CO2气腹后30min（T1）、CO2气腹后60min（T2）的动脉血气分析值和红细胞流变性参数。结果气腹后30～60min,Ⅱ组与Ⅰ组比较,pH、红细胞变形指数显著下降（P〈0.05）,PaCO2、红细胞刚性指数和聚集指数显著增加（P〈0.05）。Ⅲ组各参数变化更为显著（P〈0.01）。PaO2、红细胞压积气腹前后无明显变化。结论 CO2气腹后,动脉血pH下降、PaCO2升高,红细胞流变性减弱。