纯化小鼠腹水中抗富含组氨酸糖蛋白单克隆抗体方法的比较

用羟基磷灰石柱层析法，辛醚－硫酸铵沉淀法以及辛酸－硫酸按沉淀法加羟基磷灰石柱层析法从小鼠腹水中提取纯化抗富含组氨酸糖蛋白单克隆抗体。结果表明，羟基磷灰石柱层析法简便，快速，其单克隆抗体产量和纯度均高，适合大多数实验室采用。     

一种简单实用纯化腹水McAb方法——辛酸／硫酸铵法

采用辛酸－硫酸铵法（ＣＡ－ＡＳ）、硫酸铵沉淀法（ＣＡ）和亲合层析法,分别提取了小鼠株腹水单抗。结果显示：ＣＡ－ＡＳ法提取的ＩｇＧ纯度为８７％～９１％,高于ＣＡ法＊（５％～７０％）,低于亲合层析法（１００％）;ＣＡ－ＡＳ法提取的ＩｇＧ得率为４．８～５．５ｇ／Ｌ腹水,低于ＣＡ法（７．０～７．９ｇ／Ｌ腹水）,远高于亲合层析法（０．６ｇ／Ｌ腹水）;ＣＡ－ＡＳ法提取ＩｇＧ回收率为３９．０％～４４．４％,低于     

DL-四氢巴马汀对大鼠单胺的排空作用

本文报道四季豆抗生育成分的提取和抗生育作用。提取采用丙酮沉淀法每100g 四季豆可提取10g。亦研究了硫酸铵分级盐析法,二乙氨乙基纤维素,二乙氨乙基葡聚糖凝胶柱层析和羟基磷灰石柱层析等方法。四季豆提取物经羟基磷灰石柱层析分离和纯化,可得4个洗脱峰,其中0.1M 磷酸缓冲液洗脱峰经醋酸纤维素薄膜电泳,可得一条主要区带和一条痕迹     

检测PAIg酶标抗体制备中的影响因素探讨

以过碘酸钠法为基础，选用一定实验条件制备酶标抗体，探讨制备过程中影响酶标抗体质量的因素。结果显示，辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）与抗体比例在１∶１．５时，其标记率适当，容易获得质量较好的酶标抗体；ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析法纯化交联产物明显优于硫酸铵沉淀法。     

一种简单实用纯化腹水McAb方法--辛酸/硫酸铵法

采用辛酸－硫酸铵法（ＣＡ－ＡＳ）、硫酸铵沉淀法（ＣＡ）和亲合层析法,分别提取了小鼠多株腹水单抗。结果显示：ＣＡ－ＡＳ法提取的ＩｇＧ 纯度为８７％ ～９１％ ,高于ＣＡ 法（６５％ ～７０％ ）,低于亲合层析法（１００％ ）;ＣＡ－ＡＳ法提取的ＩｇＧ得率为４．８～５．５ｇ／Ｌ腹水,低于ＣＡ 法（７．０～７．９ｇ／Ｌ腹水）,远高于亲合层析法（０．６ｇ／Ｌ腹水）;ＣＡ－ＡＳ法提取ＩｇＧ回收率为３９．０％ ～４４．４％ ,低于ＣＡ法（５６．０％ ～６５．０％ ）,远高于亲合层析法（７．４％ ）。４Ｅ３、Ｈ６ 腹水抗体经ＣＡ－ＡＳ法提取前后酶联效价不变,表明ＣＡ－ＡＳ法对ＭｃＡｂ 活性无影响。作者认为,ＣＡ－ＡＳ法是一种操作简便,耗时短,效果佳,成本低的提取腹水ＭｃＡｂ 的新方法。     

长白白眉蝮蛇类凝血酶的研究Ⅰ：纯化方法的研究

采用四种纯化方法,对长白白眉蝮蛇类凝血酶的纯化途径进行研究。结果,阴阳离子交换柱、分子筛柱层析法周期较长,收率较低。羟基磷灰石柱法。对类凝血酶有较好的分离效果,但要求样品量小且纯度较高。亲和层析法分离类凝血酶,具有操作简便、纯化周期短、回收率高、处理样品量大等特点。     

用羟基磷灰石柱层析纯化抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体(简报)

本文比较了用羟基磷灰石柱层析和DEAE-52纤维素两种方法从小鼠腹水液中纯化抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的结果。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱,紫外分光光度定量分析及放射免疫分析法检测抗体免疫活性的结果表明:(1)羟基磷灰石柱层析法得率高,未见有其它杂蛋白污染,纯化前后的免疫活     

pH为10至11时羟基磷灰石液相生成动力学

利用液相沉淀法研究了ｐＨ为１０－１１时，「Ｃａ＾２－」浓度大于０．５ｍｏｌ／Ｌ条件下基磷灰石的生成机理及其动力学。结果表明反应经历了从磷酸八钙很快转化为非晶态磷酸钙，继而转化为缺钙羟基磷酸石和羟基磷灰石的过程。     

藻兰蛋白分离纯化方法的改进

目的 在藻兰蛋白原有分离纯化方法基础上，探讨对其进行改进的可能性。方法 用５０％（Ｗ／Ｖ）硫酸铵沉淀法粗分离的藻兰蛋白，再用ＤＥＡＥ离子交换柱和羟－基磷灰石柱纯化。结果 藻兰蛋白纯度达到９２％，并在６１９．４ｎｍ处有最大吸收峰。在聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）上只汪条带。分子量约为２６ＫＤ。结论 该方法既可达到较高纯度，又适合大量生产。     

DHCC受体的纯化

本文报告了正常雄性家兔小肠粘膜细胞核提取液，经３８％饱和度硫酸铵沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素层析、ＤＮＡ－纤维素层析、羟基磷灰石层析Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００凝胶过，最终得到纯化５２００倍的ＤＨＣＣ受体４０μｇ，产率为９％。     

四季豆蛋白抗生育作用的研究

本文报道四季豆抗生育成分的提取和抗生育作用。提取采用丙酮沉淀法每100g 四季豆可提取10g。亦研究了硫酸铵分级盐析法,二乙氨乙基纤维素,二乙氨乙基葡聚糖凝胶柱层析和羟基磷灰石柱层析等方法。四季豆提取物经羟基磷灰石柱层析分离和纯化,可得4个洗脱峰,其中0.1M 磷酸缓冲液洗脱峰经醋酸纤维素薄膜电泳,可得一条主要区带和一条痕迹区带,经聚丙烯酰胺凝胶电泳可得一条主要区带和另外二条痕迹区带。四季豆提取物对小鼠抗着床,抗早孕和中期引产均有明显效果。腹腔注射最低有效剂量为16.7mg/kg体重（丙酮法）和33.3mg/kg体重（盐析法）。主成分的抗早孕最低有效剂量为1.67-3.33mg/kg体重,比提取物效价提高10-20倍。实验证明四季豆抗生育成分是一种蛋白质。     

人骨形态形成蛋白的纯化及其诱导成骨的研究

本实验采用差示沉积、超滤及羟基磷灰石柱层析法,提取和纯化了人骨基质内骨形态形成蛋白,得到纯化的人骨形态形成蛋白,分子量为17000U(约17000道尔顿).以C_3H小鼠147只为实验动物,纯化的骨形态形成蛋白的诱导成骨率为100％。     

鼓槌石斛化学成分的研究

目的 研究鼓槌石斛的化学成分,为阐明其活性成分,开发其资源提供科学依据。方法 采用硅胶柱层析法进行分离,根据光谱数据鉴定结构。结果 从中分得4个化合物,分别为：2,4,7－三羟基－9,10－二氢菲（Ⅰ）,2,7－二羟基－3,4,6－三甲氧基菲(Ⅱ）,5,4′－二羟基－3,3′－二甲氧基联苄（Ⅲ）,3,4－二羟基苯甲酸（Ⅳ）。结论 化合物Ⅰ-Ⅳ均为首次从石斛属植物中分得。     

新生儿黄疸防治的实验研究

探讨人肝脏血红素加氧酶（ＨＯ）同功酶的性质，并应用血红素加氧酶抑制剂锡－原卟啉（ＳｎＰＰ）抑制酶的活性，为临床新生儿黄疸的防治提供新途径。方法采用２－二乙氨乙基－葡聚糖凝胶Ａ－２５和羟基磷灰石柱层析法从人肝脏分离纯化ＨＯ的同功酶，进行酶活性检测和十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果人肝脏微粒体含ＨＯ的同功酶，按洗脱先后顺序分别得到分子量为３００００和３６０００的ＨＯ－１和ＨＯ－２。酶促反应中需相同辅酶参与，其中ＨＯ－１酶活性明显高于ＨＯ－２，两者之比为２．４１，从分子量和酶的催化活性分析，发现ＨＯ－１属诱导型的传统ＨＯ同功酶，ＨＯ－２为新发现的非诱导型ＨＯ的同功酶。结论ＳｎＰＰ能有效抑制ＨＯ－１的活性，使胆红素产生减少。     

狂犬病免疫学诊断实验研究(摘要)

狂犬病免疫学诊断方法目前国内尚未见有文献报导。本研究采用狂犬病标准攻击毒cvs-7株感染小鼠,根据Sokol法提取和纯化狂犬病毒抗原。纯化抗原免疫山羊获得抗血清,经饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析法提取和纯     

醛糖还原酶的分离纯化和性质分析

利用离心、盐析及ＤＥＡＥ－纤维素、羟基磷灰石、葡聚糖－Ｇ１００多步层析法将牛睾丸ＡＲ分离纯化，醛糖还原酶（ａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＡＲ），并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性，为寻找有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索。结果：纯化的酶经ＳＤＳ－ｐＡＧＥ电泳鉴定示一单一蛋白条带，牛睾丸ＡＲＭｒ约为（４００００±１０００）ｕ，ＡＲ底物特异性，按１／ｋｍ大小依次排列为：Ｐ－硝基苯醛，ＤＬ－甘油醛，Ｄ－葡萄糖醛酸，Ｄ－木糖，Ｄ－半乳糖，Ｄ－葡萄糖。     

醛糖还原酶的分离纯化和性质分析

利用离心，盐析及ＤＥＡＥ－纤维素，羟基磷灰石，葡聚糖－Ｇ１００多步层析法将牛睾丸ＡＲ分离纯化，醛糖还原酶（ａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃａｓｅ，ＡＲ），并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性，为寻长有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索，结果；纯化的酶经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定示一单一蛋白条带，牛睾丸ＡＲ，Ｍｒ约为（４００００±１０００）ｕ，ＡＲ底物特异性，按１／Ｋｍ大小依次排列为：Ｐ－硝基苯醛；ＤＬ－甘油醛，Ｄ     

爬行动物的体液免疫

爬行动物针对颗粒性和可溶性抗原,能够快速、有效的产生抗体。爬行动物血清中的抗体主要包括高分子量的免疫球蛋白(HMWIg)和不止一种的低分子量免疫球蛋白(LMWIg),爬行动物中还有在亲代和子代间传递的免疫球蛋白Ig Y。目前爬行动物免疫球蛋白的纯化方法主要有:硫酸铵沉淀法、联合凝胶过滤层析和离子交换层析法、Protein A亲和层析法。研究爬行动物体液免疫对研究动物免疫的进化及对病原控制具有重要意义。     

高压液相色谱法纯化抗人大肠部单克隆抗体

采用Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司的ＭＡＰＳ１００单克隆抗体纯化系统，利用羟基磷灰石层新 柱对鼠柱对复腹水中抗人大肠癌单克隆抗体进行分离纯化。结果：还原性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示所获抗体为单一组分，ＥＬＩＳＡ证实抗体活性满意，所获抗体收率为２３％－５２％，重复进样收率稳定（３８．６３±２．２６）％，ｎ＝３。     

蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ的分离方法研究

目的：探索蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ的分离和纯化方法：方法：蝎毒经预处理后,分别采用ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离子交换凝胶柱层析法和ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离子交换凝胶柱ｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶柱联合层析法,分离ＡＰ－Ⅲ,用ＨＰＬＣ仪检测２种方法分离出的ＡＰ－Ⅲ的纯度及产率。结果：单独用ｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离了交换凝胶柱分离,ＡＰ－Ⅲ产率为２．２４％,纯度为８９％。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶柱与Ｓｅｐ