p27kip1、p16蛋白和增殖细胞核抗原在鼻咽癌中的表达及其意义

目的 研究p27^kip1、p16蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)在鼻咽癌(NPC)组织中的表达,探讨它们之间的关系及其与．NPC生物学行为及预后的相关性。方法应用免疫组织化学EnVision两步法检测66例鼻咽非角化性癌(NKC)组织和25例鼻咽黏膜慢性炎症(NP)组织中p27^kip1、p16蛋白及PCNA表达水平。结果(1)．NKC组织中p27^kip1、p16阳性表达率分别为65％、68％;与NP组比较,差异有统计学意义(P＜0．05)。(2)＜、p16蛋白在NKC中的表达与NKC颅神经侵犯及治疗后5年生存率有关(P＜0．05),与临床分期、淋巴结转移无关(P＞0．05);PCNA表达与．NKC临床分期及治疗后5年生存率有关(P＜0．05),与淋巴结转移、颅神经侵犯无关(P＞0．05)。(3)p27^kip1、p16及PCNA阳性表达之间有相关性(P＜0．05)。结论检测p27^kip1、p16蛋白及PCNA有助于综合评估NKC的预后。     

吉林人参花总皂甙对NKC-IFN-IL-2调节网的作用及其抑瘤效应

天然杀伤细胞(NKC)是机体抗御肿瘤细胞的第一道防线。许多因素可以调节NKC活性,其中比较受人重视的是干扰素(IFN)和白细胞间素-2(IL-2)。IFN和IL-2皆可增强NKC活性,NKC亦能分泌IFN和IL-2,     

鼻咽癌组织中p16基因的缺失、高甲基化和蛋白的表达及其临床意义

目的探讨鼻咽癌组织中p16基因的缺失、高甲基化和蛋白的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学EnVision法检测90例鼻咽非角化性癌(NKC)组织p16蛋白的表达缺失,聚合酶链反应和甲基化酶切方法检测23例NKC组织p16基因缺失和高甲基化。结果90例NKC中p16蛋白表达阴性率为46.7%(42/90),而对照组的阴性率为0(0/30),P<0.05。p16蛋白表达与NKC患者的5年生存率有明显的相关性,生存期5年内者,其缺失率为60.0%(36/60);生存期5年以上者,其缺失率为20.0%(6/30),P<0.05。有、无远处器官转移的病例p16蛋白阴性率分别为81.8%(9/11)和41.8%(33/79),P<0.05。而有、无颅底破坏和(或)颅神经侵犯病例p16蛋白阴性率分别为41.7%(10/24)和48.5%(32/66),P>0.05。23例NKC中未检测到p16基因外显子1的缺失,但有10例p16基因外显子2的缺失,缺失率为43.4%(10/23);同时检测到2例外显子1的异常甲基化,高甲基化率为8.7%(2/23);总突变率为52.1%(12/23)。结论在NKC的发生发展过程中,p16基因缺失起着重要的作用。p16蛋白表达与NKC患者的5年生存率和远处转移有一定的相关性,而与NKC的局部组织侵犯无明显相关性。     

从IL—2水平探讨黄芪及黄芪多糖的免疫调节作用

本文报道了黄芪及其多糖对正常小鼠和大黄脾虚模型小鼠体内、体外白细胞介素2(IL—2)产生的影响。大黄脾虚模型小鼠IL—2活性比正常小鼠明显降低;25～200%黄芪水煎剂以及50～200mg/ml黄芪多糖均能使大黄脾虚模型小鼠低下的IL—2活性提高;但对正常小鼠则无影响。提示IL—2产生增加可能是黄芪“扶正”的重要机制之一,也是其调节免疫功能的分子免疫学基础之一;IL—2活性有可能是“脾气”的内涵之一。     

健脾补肾药对脾虚大鼠细胞因子水平的影响

目的 :观察健脾补肾方药对实验性脾虚证大鼠细胞因子的影响 ,探讨脾虚证与细胞因子的关系及脏腑相关的意义。方法 :选用SD雄性大鼠 ,随机分为 :正常对照组 ,脾虚模型组 ,健脾补肾方高、低剂量组 ,通过大黄复制脾虚证动物模型 ,并用健脾补肾方药进行防治。采用放射免疫分析观察各组动物血清肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素 - 6 (IL - 6 )、白细胞介素 - 2 (IL - 2 )水平的变化。结果 :脾虚模型组大鼠血清TNF、IL - 6、IL - 2含量均比正常对照组显著降低 (p <0 0 1) ,而健脾补肾方药能明显升高TNF、IL - 6、IL - 2含量 ,使体重增加 ,脾脏和胸腺组织的重量增加。结论 :脾虚证的发生与细胞因子网络调节系统的失衡有关 ,而健脾补肾中药对实验性脾虚证有较好的防治作用 ,脾肾相关理论对实践有指导意义。     

健脾补肾药对脾虚大鼠环核苷酸及甲状腺激素水平的影响

目的 :观察健脾补肾方药对实验性脾虚证大鼠环核苷酸及甲状腺激素水平的影响 ,探讨该方防治脾虚证的作用机理及脾与肾相互关系的意义。方法 :选用SD雄性大鼠 ,随机分为 4组 :即正常对照组 ,脾虚模型组 ,健脾补肾方高、低剂量组 ,采用大黄复制脾虚证动物模型 ,观察各组动物血浆环磷酸腺苷 (cAMP)、环磷酸鸟苷 (cGMP)及血清甲状腺素 (T4)、三碘甲腺原氨酸 (T3 )、促甲状腺素 (TSH)水平的变化。结果 :脾虚模型组大鼠血浆cAMP含量及cAMP/cGMP比值均比正常对照组升高 (p <0 0 1) ,T3 、T4含量比正常对照组下降 (p<0 0 1)。而健脾补肾方药能降低实验性脾虚证大鼠体内cAMP含量及cAMP/cGMP比值 (p <0 0 1) ,提高T3 、T4含量 (p <0 0 1)及脾脏、胸腺比值 ,又可使肾脏组织重量减轻等作用。 结论 :健脾补肾中药可以消除大黄的药物影响 ,防止出现脾虚症候 ,其作用机理与调节cAMP、cGMP及甲状腺激素水平有关。脾肾相关理论对临床有指导意义     

参苓白术散治疗脾虚泄泻模型小鼠肠道局部免疫机制研究

目的探讨参苓白术散治疗脾虚泄泻模型小鼠肠道局部免疫机制。方法SPF级昆明小鼠40只按随机对照的原则分为:A组(正常对照组)、B组(模型组)、C组(参苓白术散治疗组)、D组(思密达阳性对照组),每组10只。计算每组小鼠脾/胸腺指数,光镜检测小鼠肠微绒毛和固有层的病理变化,用ELISA法检测小鼠血清IL-2、IL-12、TNF-α及肠组织s Ig A水平。结果模型组脾/胸腺指数显著降低(P0.05),小鼠肠上皮固有层、微绒毛损伤明显,血清IL-2、IL-12、TNF-α及肠组织s Ig A水平显著下调(P0.05),参苓白术散治疗组以上各种指标较脾虚模型组显著恢复。结论参苓白术散能够显著升高脾虚模型组小鼠脾/胸腺指数,上调其血清IL-2、IL-12、TNF-α及肠组织s Ig A水平,增强小鼠免疫功能,进而修复小鼠肠黏膜损伤,达到治疗脾虚泄泻的作用。     

胃癌病人外周血自然杀伤细胞活性的研究

自然杀伤细胞(简称NKC)在机体免疫监视和抗肿瘤生长中所起的重要作用,已日益引起医学界的关注。然而,参阅近年来有关文献,对于癌肿病人NKC活力强度的     

大鼠实验性脾气虚胃溃疡证病结合模型回肠5-HT及其受体和IL-2、IL-6变化的研究

目的 研究大鼠脾气虚胃溃疡证病结合模型中回肠5-羟色胺 (5-HT)及其受体(5-HTR)、细胞因子IL-2、IL-6的变化,探讨脾虚胃溃疡的发病机制及加味四君子汤治疗脾虚证的机理.方法 采用免疫组织化学技术、图像分析、放射免疫和免疫印迹法.结果 大鼠脾气虚合并胃溃疡模型中5-HT阳性细胞主要分布于回肠黏膜上皮及肠腺细胞;5-HTR免疫反应阳性的细胞主要位于肠绒毛及腺体间结缔组织,在肠壁平滑肌、肌间神经丛也有表达;5-HT及其受体免疫反应阳性产物的含量均增加,免疫印迹法示回肠5-HTR含量增加,且随病程进展,而进一步升高;经过加味四君子汤治疗后,上述异常变化得到纠正.在造模初期,IL-2、IL-6的分泌活性增加,随着脾虚胃溃疡发病的进一步发展,IL-2、IL-6的分泌活性降低.结论 大鼠脾气虚胃溃疡模型中回肠组织5-HT及其受体含量的增高,是大鼠脾虚胃溃疡发病的机理之一,加味四君子汤能通过纠正这些变化而发挥治疗作用.IL-2、 IL-6分泌活性的改变可能与大鼠脾虚胃溃疡的病程发展相关.     

2.74 消积止痛液敷脐对脾虚大鼠胃肠电的影响

目的探讨消积止痛液敷脐对脾虚大鼠胃肠电的影响.方法 Wistar大鼠30只,将3对自制铂金丝电极埋置在胃窦升结场及降结肠, 记录胃肠电.制作脾虚证动物模型.(实验分组对照组、模型组、敷脐+模型组,在制作脾虚模型的5天内,每天在灌饲大黄煎煮液后即在神阙穴、中脘2穴区敷贴消积止痛液(6.0g/d ),于记录胃肠电实验时停止,每组10只.胃肠电记录用RM-85多导生理记录仪.时间常数0.01s,高频滤波30Hz.数据处理,以组间对照配对t检验.)结果用消积止痛液敷脐使脾虚的大鼠胃电频率及振幅升至接近正常的胃电水平;同时也使脾虚大鼠肠电水平恢复至正常状态.结论消积止痛液能促进胃肠动力.     

大鼠实验性脾虚证十二指肠粘膜内分泌细胞的免疫组织化学研究

用正常成年雄性Wistar大鼠46只,分为正常对照组,实验性脾虚组,自然恢复组和四君子汤治疗组.取十二指肠,Bouin液固定,制石蜡切片,进行了以下染色.(1)H.E染色(2)按免疫组织化学PAP法显示粘膜的胃泌素(G)细胞、生长抑素(D)细胞和5-HT细胞.在光镜下按照半定量法将细胞分为强阳性、中等阳性和弱阳性.观察并记录每组动物切片中各级活性细胞数和计算各级细胞的百分比.(3)从正常对照组,脾虚组各随机选择5例动物,对D细胞和5-HT细胞进行显微分光光度计的定量测定.结果表明(1)脾虚组粘膜未见明显的组织学变化.(2)内分泌细胞:与对照组相比,脾虚组G细胞、5-HT细胞内反应物含量减少,表明分泌功能增强.D细胞内反应物含量增多,表明分泌功能减弱.统计学分析表明以上结果有显著性差异(P值<0.01).与自然恢复比较,治疗组接近对照组.本文结果提示,脾虚证的发病与消化道内分泌细胞变化有密切关系;四君子汤对脾虚证有较好的治疗作用.     

大鼠肠道缺血再灌注损伤前后血浆LPS和TNF—α的变化

为了探讨肠源性内毒素 (主要成分为脂多糖 ,ＬＰＳ)血症在继发性肝损伤中的作用 ,我们检测了大鼠肠道缺血再灌注损伤前后血浆ＬＰＳ及肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)的变化 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　实验动物及分组 :36只健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,雌雄不限 ,体重 (2 0 0± 2 5 )ｇ ,由第三军医大学实验动物中心提供 ,随机分为缺血前 30ｍｉｎ、缺血再灌注后 3、6、2 4、48和 72ｈ共六组 (每组 6只 )。后五组复制全肠道缺血再灌注损伤 (ＧＩＲ)模型。1 2　ＧＩＲ模型制作 :大鼠术前禁食 12ｈ ,自由饮水。用 2 %氯胺酮和 6ｍｇ/Ｌ阿…     

实验性脾虚大鼠胃肠电-机械活动协同调节相关的nNOS和VIP研究

目的　研究实验性脾虚大鼠胃肠电 机械活动协同调节相关的nNOS和VIP的作用 ,并对“四君子汤”改善胃肠功能的可能机制进行初步的探讨 ,以期为探究脾虚证的实质以及临床诊断和用药提供新的实验和理论依据。方法　建立实验性脾虚、“四君子汤”治疗脾虚和冷束缚应激大鼠模型。本实验借助westernblot杂交法和免疫组化等生物化学技术 ,重点观察了nNOS和VIP在脾虚大鼠胃窦和结肠组织内的变化。结果　脾虚大鼠nNOS含量升高 (P <0 0 5 ) ,肌间丛nNOS阳性神经元数目也增多 ,经四君子汤治疗后回降。脾虚大鼠VIP含量减少 (P <0 0 5 ) ,经…     

强肌健力饮对脾虚大鼠性激素水平的影响

目的：动态观察强肌健力饮对实验性脾虚证大鼠血清睾酮（T）、雌二醇（E2）、淀粉酶水平的影响及免疫器官组织形态学的改变,以期进一步了解该方药对改善脾虚证的意义及探讨中医脾肾互相关系的物质基础。方法：选用SD雄性大鼠,随机分为正常对照组,脾虚模型组,强肌健力饮高、中、低剂量组,四君子汤组。采用大黄复制脾虚证动物模型,分别给予蒸馏水、大黄、强肌健力饮（剂量分别为23.4g/kg、15.6g/kg、7.8g/kg）、四君子汤（20g/kg）灌胃。观察各组动物T、E2、淀粉酶水平的变化及脾脏、胸腺、肾上腺组织形态学的改变。结果：脾虚模型组大鼠造模10d时血清E2、T含量均比正常对照组显著升高（P〈0.05±0.01）;造模20d后,脾虚模型组动物血清E2含量比正常对照组显著升高（P〈0.01）,T含量则显著下降（P〈0.01）。灌服强肌健力饮10d时能显著降低E2、T含量（P〈0.01）,而E2/T比值无改变;到给药20d时则能显著降低E2含量和E2/T比值（P〈0.05±0.01）。脾虚模型组大鼠造模10d和20d时血清淀粉酶含量均比正常对照组降低（P〈0.05）,经灌服不同剂量强肌健力饮后,其血清淀粉酶含量改变不明显。脾虚模型组动物脾脏和胸腺质量及脏器指数均下降,组织结构均有明显破坏,肾上腺皮质也有不同程度的损伤,强肌健力饮能使已遭损伤的脏器组织得以修复,恢复到正常或接近正常水平。结论：脾虚证的发生与性激素水平紊乱及淀粉酶合成与分泌减少有关。而强肌健力饮能改善下丘脑-垂体-性腺轴功能,并对受损的脾脏、胸腺、肾上腺组织的修复具有显著的促进作用,从而发挥其健脾益气,强肌健力作用。提示T、E2这类物质可能是脾肾相关的重要物质基础之一,而脾脏、胸腺、肾上腺组织形态的改变可能是中医＂脾虚及肾＂病理形态学依据之一。     

参苓白术散对脾虚湿困型UC大鼠结肠组织MKK/JNK通路的影响北大核心CSCD

目的:探讨参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用及其对MKK/JNK通路的影响。方法:采用综合法复建脾虚湿困型UC大鼠模型,给予参苓白术散干预治疗。观察大鼠一般状况;计算大鼠免疫器官指数;对结肠组织进行病理学检测;ELISA法检测血清及结肠中IL-2、IL-17含量;RT-PCR测定结肠MKK4、MKK7、JNK、AP-1 mRNA表达水平;Western blot检测结肠MKK4、MKK7、JNK、AP-1蛋白及其磷酸化蛋白表达水平。结果:与空白组相比,UC大鼠胸腺指数显著降低,脾脏指数明显升高,血清与结肠中IL-2、IL-17含量、结肠MKK4、MKK7、JNK、AP-1 mRNA表达水平、结肠p-MKK4/MKK4、p-MKK7/MKK7、p-JNK/JNK、p-AP-1/AP-1值均显著升高;与模型组相比,干预组胸腺指数均有所上升,脾脏指数均有所下降,其余上述指标均有不同程度的降低,以参苓白术散高剂量组降低最明显。结论:参苓白术散可减轻脾虚湿困型UC大鼠结肠组织炎症反应,其作用机制可能是通过抑制MKK/JNK信号通路激活从而减轻炎症。     

腰椎—骨盆—髋关节有限元模型建立及生物力学分析

背景：髋腰疾病的发病率不断增加,给临床治疗带来一定的挑战,需要完善的腰椎-骨盆-髋关节模型以分析其生物力学特点。目的：建立正常成人腰椎-骨盆-髋关节三维有限元模型进行生物力学分析,为研究髋腰疾病和相关手术治疗提供实验依据和参考。方法：获取正常成人CT数据,利用Mimics、Geomagic、Hypermesh、Abaqus等软件构建正常的腰椎-骨盆-髋关节三维有限元模型,将所得模型进行各个工况分析,得到椎体活动度、椎间盘及股骨头应力分布进行模型有效性验证。之后进一步构建坐位模型,比较分析站立位和坐位2种姿势下的生物力学分布特点和变化趋势。结果与结论：(1)成功建立了正常成人腰椎-骨盆-髋关节三维有限元模型;(2)构建的模型在各工况分析中结果均在既往文献数据的参考范围内,确认模型有效,可进一步用于后续的实验研究;(3)从站立位到坐位姿势变化后,L₄-L₅及L₅-S₁椎间盘的应力呈上升趋势,其中L₅-S₁应力变化最明显;对于髋关节应力分布而言,在站立位时,应力...     

加昧逍遥散对肝癌大鼠脑内多巴胺和5-羟色胺水平的影响

目的:探讨中药方剂加味逍遥散(JWXYP)对肝郁脾虚型肝癌大鼠脑内单胺类神经递质多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)水平的影响。方法:将36只SD大鼠随机分成对照组(control)、肝癌模型组(HCC)、加味逍遥散治疗组(JWXYP)。通过二乙基亚硝胺(DNE)结合不可预见性应激刺激(CUMS)构建肝郁脾虚型肝癌大鼠模型,给子中药加味逍遥散治疗4周。通过症状和体征观察各组大鼠症候变化,利用HE染色观察大鼠肝脏病理学形态改变,高效液相-电化学检测法检测额叶皮质内DA和5-HT水平。结果:与对照组比较,HCC组大鼠病理表现为肝小叶结构破坏,增生细胞有异型性表现,可见双核细胞、病理性核分裂象等,症候评分显示符合肝郁脾虚型症候表现,脑内DA和5-HT显著下降。经过JWXYP治疗,大鼠肝组织病理恶性程度较轻,症候明显改善,脑内DA和5-HT显著增加。结论:加味逍遥散能够改善肝郁脾虚型肝癌模型大鼠症候,其机制可能与增加脑内DA和5-HT有关。     

1．6—2磷酸果糖对脾虚大鼠血液流变学和红细胞变性的影响

目的：观察1．6－2磷酸果糖对脾虚大鼠血液流变学和红细胞变性的影响。方法：24只Wistar大鼠随机分为脾虚组＋FDP组和对照组,采用LG－190型细胞仪测定大鼠红细胞变形性和聚集性,采用锥板式粘度计测全血粘度。结果：FDP治疗2周后,红细胞变形性增强,聚集性聚低,全血粘度、血浆粘度,纤维蛋白原降低,同时可以改善心脏功能。结论:FDP桶明显改善脾虚大鼠红细胞变形性和血液流变学特性。     

大鼠脾气虚胃溃疡证病结合模型胃肠粘膜局部免疫-神经-内分泌网络的变化

目的 探讨脾气虚胃溃疡证病结合模型中胃肠粘膜局部神经内分泌免疫(INE)网络的变化及其作用。方法 免疫组织化学染色和图像分析技术。结果 脾气虚合并胃溃疡模型中胃粘膜D细胞分泌SST的活性显著增强；空、回肠分泌SP、VIP神经元的活性增强；胃粘膜免疫细胞分泌IL-2的活性增强。结论 大鼠脾气虚胃溃疡模型的SST、SP、VIP、IL-2的合成及分泌水平发生了改变，表明胃肠粘膜局部免疫、神经、内分泌网络均发生了一定程度的变化，是脾虚胃溃疡发生的重要因素。     

消化性溃疡患者血浆TXB26—K—PGF1αRIA

近年的研究发现,前列腺素I_2(PGI_2)具有胃粘膜保护作用,但血栓素确有可能造成胃粘膜屏障减弱及损害,消化性溃疡(PU)患者血浆前列腺素代谢产物有何改变,目前报道较少,1995年12月～1997年2月,我们测定了30例胃溃疡患者的血浆血栓素B_2(TXB_2)、6-酮-PGF_(1α)(6-K-PGF_(1α))浓度,以了解它们在消化性溃疡中变化。 材料和方法 一、对象:经胃镜检查及活检病理学检查明确的胃溃疡30例(男26,女4)。年龄32～70岁,平均51岁。其中活动期(A_1期)16例,疤痕期(S_2期)14例。另选择平时无消化道症状,体检健康人30例作为对照,年龄25～69岁,平均48岁。活动期患者在确诊前未曾服用过非甾类抗炎药物。 二、方法: (一)标本采集:所有患者清晨空腹胃镜检查完毕即用一次性注射器肘静脉取血5ml,用消心痛-EDTA-Na_2抗凝,分离血浆,置-30℃保存待检,健康人血标本采集处理同上。 (二)测定:采用放射免疫法,TXB_2、6-K-PGF_(1α)试剂盒由中国人民解放军总医院提供,操作按说明书。测定值用澳大利亚Microsta医学统计软件经AST 386微机处理。 结果 胃溃疡A_1期,S_2期患者及正常对照组TXB_2、6-K-PGF_(1α)测定结果见表1。