p130Cas在膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义

目的:探讨p130Cas在膀胱尿路上皮癌(BUC)中的表达及其临床意义。方法:78例手术标本中有70例BUC组织和8例癌旁正常膀胱黏膜组织。在BUC组织中包括非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌(NMIBUC)27例,肌层浸润性膀胱尿路上皮癌(MIBUC)43例;其中低度恶性倾向尿路上皮乳头状瘤(PUNLMP)和低分级尿路上皮癌共38例,高分级尿路上皮癌32例。采用量子点免疫荧光组织化学方法检测所有标本中p130Cas的表达情况。结果:p130Cas在NMIBUC和MIBUC组织中表达的阳性率分别为40.7%和65.1%(P<0.05);在PUNLMP及低分级尿路上皮癌和高分级尿路上皮癌中的阳性表达率分别为44.7%和68.8%(P<0.05)。此外,p1 30Cas在BUC中的表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤的数目、大小无显著相关性(P均>0.05)。结论:p130Cas与膀胱肿瘤的浸润和转移存在联系,有可能作为评估膀胱肿瘤恶性程度和预后的有效参考指标。     

E- cadherin、CD44v6、MMP2在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

目的：研究钙黏附分子E- cadherin（E- cad）、CD44变异体6（CD44v6）和基质金属蛋白酶（MMP2）在膀胱尿路上皮癌（bladder urothelial carcinoma）中的表达及对预后的意义。方法应用免疫组化Envision法,检测105例膀胱尿路上皮癌患者和20例正常体检者膀胱黏膜E- cad、CD44v6及MMP2的表达情况。结果20例正常膀胱黏膜中E- cad、CD44v6均正常表达,MMP2均阴性表达,105例膀胱尿路上皮癌中E- cad及CD44v6的异常表达率分别为43.8％（46/105）和58.1％（61/105）,MMP2阳性表达为53.3％（56/105）。E- cad、CD44v6的异常表达率和MMP2的阳性表达率与患者肿瘤的病理分级、临床分期及生存率相关。结论E- cad、CD44v6的异常表达和MMP2的阳性表达在膀胱尿路上皮癌的演变过程中起着重要作用,可作为监测肿瘤恶性程度和预后有效的分子生物学指标之一。     

Talin和Paxillin在膀胱尿路上皮癌中的表达及其意义

目的:检测膀胱尿路上皮癌(BUC)中踝蛋白(Talin)和桩蛋白(Paxillin)的表达情况,探讨其表达的临床意义。方法:采用量子点免疫荧光组织化学方法检测62例膀胱尿路上皮癌和10例癌旁正常膀胱黏膜组织中Talin及Paxillin的表达情况,并分析两种蛋白与其临床病理特征及两种蛋白之间的相关性。结果:1Talin和Paxillin在BUC中呈高表达,阳性率分别为56.45%(35/62)、51.61%(32/62),在10例癌旁正常黏膜组织中均无阳性表达;2Talin和Paxillin蛋白的表达与BUC的淋巴结转移、临床分期、病理分级有关(P<0.05);3两者的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小与数目均无明显相关(P>0.05);4Talin和Paxillin之间的表达呈正相关(P<0.05)。结论:Talin和Paxillin的过表达与BUC的发展、侵袭转移有关。     

膀胱尿路上皮癌Fas相关死亡结构域蛋白表达及意义

目的 研究Fas相关死亡结构域 (FADD) 蛋白在膀胱尿路上皮癌(BUC)组织的表达,并探讨其与肿瘤生物学行为之间的关系.方法 采用免疫组化SP法检测68例BUC及13例正常膀胱黏膜组织FADD蛋白表达.原位杂交法检测其中34例BUC组织FADD mRNA 表达水平.结果 正常膀胱黏膜FADD蛋白呈阳性表达.FADD的阳性率在不同组织学分级、不同临床分期的BUC组织中差异均有极显著性(χ2=15.38、11.34,P<0.01);复发组与未复发组FADD的阳性率分别为36.84%和53.33%,差异无显著意义(χ2=1.85,P>0.05).BUC组织中FADD mRNA阳性率为44.12%, FADD蛋白阳性率为47.06%,两者差异无统计学意义(χ2=0.06,P>0.05).结论 FADD表达异常在BUC的发展中可能起着重要作用, FADD阳性表达与BUC病理分级、浸润关系密切,但与BUC复发无关.     

膀胱尿路上皮癌组织中生存素基因的表达及临床意义

目的 探讨膀胱尿路上皮癌组织(BUC)中生存素(Survivin)基因的表达及临床意义。方法 选取2010年7月～2018年12月病理科存档的BUC标本60例,采用En Vision二步法免疫组化检测Survivin基因的表达。另选取其他手术切下的正常膀胱黏膜标本20例作对照。分析BUC组织与正常膀胱黏膜组织中Survivin基因表达的差异。结果 60例BUC中Survivin基因的表达阳性43例(71.67%)。20例正常膀胱黏膜组织中Survivin基因表达均为阴性。BUC组织中Survivin基因的表达阳性率较正常膀胱黏膜组织更高(χ~2=30.99,P0.01)。BUC组织中Survivin基因表达与患者的性别和年龄无关(P0.05),与肿瘤是否复发、浸润深度和病理分级等密切相关(P0.05)。结论 BUC组织中Survivin基因的表达存在明显上升趋势,Survivin基因的高表达极有可能促进BUC的发生和发展;且其表达与肿瘤的复发情况、恶性程度及病理浸润深度存在一定的相关性,可能参与BUC病情的转移和浸润的过程。     

c-myc和p27在膀胱尿路上皮癌中的表达及其相关性

目的:观察膀胱尿路上皮癌(BUC)中c-myc和p27的表达及其相互关系。方法:应用免疫组织化学S-P法检测63例BUC中c-myc和p27的表达情况。结果:BUC组织中p27阳性率明显低于正常膀胱组织(P<0.01);BUC组织中c-myc阳性率明显高于正常膀胱组织(P<0.01);p27和c-myc蛋白表达与肿瘤的组织学分级及病理分期相关(P<0.05～P<0.01),p27与c-myc表达呈负相关关系(P<0.01)。结论:p27和c-myc可以作为判别膀胱癌分化程度的标志物,并可作为判断预后的指标。     

CD44v6和上皮钙黏蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨CD44v6和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)在膀胱移行细胞癌(TCCB)中的表达及其与肿瘤生物学行为间的关系。方法采用免疫组化SP法检测68例TCCB和10例正常膀胱黏膜标本中CD44v6和E-cadherin的表达。结果正常膀胱黏膜CD44v6呈阴性表达,不同病理分级和不同临床分期的TCCB组织中CD44v6阳性表达率间差别均有显著性意义(P<0.01)。在复发组与未复发组CD44v6阳性表达率间差别有显著性意义(P<0.01)。正常膀胱黏膜E-cadherin呈阳性表达,不同病理分级和不同临床分期的TCCB组织中E-cadherin阳性表达率间差别均有显著性意义(P<0.01)。在复发组与未复发组E-cadherin阳性表达率间差别有显著性意义(P<0.01)。在TCCB中,CD44v6表达与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.37,P<0.05)。结论CD44v6和E-cadherin表达与TCCB病理分级、浸润及复发关系密切,二者可以作为判定TCCB恶性程度及复发的参考指标。     

膀胱尿路上皮癌组织MAD2的表达及其意义

目的探讨膀胱尿路上皮癌(BUC)组织中有丝分裂阻滞缺陷蛋白(MAD2)的表达及其与膀胱癌病理分级、临床分期和预后的关系。方法采用免疫组化方法(SP法)检测47例BUC组织和12例正常膀胱黏膜组织中MDA2的表达,并分析MDA2表达与BUC病理分级、分期和肿瘤复发的关系。结果 BUC组织中MAD2阳性表达率明显高于正常膀胱黏膜组织,差异有显著性(χ2=13.68,P<0.01)。高级别和浸润性BUC组织中MAD2的阳性表达率明显高于低级别和浅表性BUC组织(χ2=12.25、4.33,P<0.05),复发BUC组织中MAD2阳性表达率与初发BUC组织比较差异无显著性(P>0.05)。MAD2高表达组病人中位生存期明显短于MAD2低表达组,差异有统计学意义(P=0.048)。结论 MAD2可作为BUC诊断的一个重要的免疫标记抗体,其检测可为BUC恶性程度的判定、预后分析及临床治疗提供有效的依据。     

卵巢癌组织中骨桥蛋白和CD44v6的表达及临床意义

目的 探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和CD44v6在卵巢癌组织中的表达及与卵巢癌的临床病理特征关系.方法 采用免疫组织化学法检测64例卵巢上皮癌组织、24例卵巢良性肿瘤组织及16例正常卵巢组织中OPN、CD44v6的表达.结果 OPN在以上组织中的阳性表达率分别为79.69%、20.83%和18.75%,CD44v6的阳性表达率分别为75.00%、16.67%和12.50%.OPN、CD44v6在卵巢上皮癌组织中的表达与在卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中的表达相比,均有显著性差异(P<0.01).卵巢上皮癌组织中OPN和CD44v6的表达均与肿瘤临床分期及病理分化程度有关,而与卵巢癌组织类型无关.OPN与CD44v6之间的表达有显著正相关(r=0.955,P<0.01).结论 OPN和CD44v6可能在卵巢癌的发生、进展中起重要作用,联合检测OPN、CD44v6可作为判断卵巢癌患者预后和术后复发的重要指标.     

膀胱尿路上皮癌中胸苷磷酸化酶的表达及其与微血管密度的关系

目的 研究胸苷磷酸化酶(TP)在膀胱尿路上皮癌(BUC)中的表达,探讨 TP 癌组织血管生成的关系.方法 采用免疫组化 SP 法,检测 48 例膀胱尿路上皮癌及 8 例正常膀胱黏膜组织中 TP 的表达和微血管密度(MVD).结果 ①随肿瘤分期、分级的增加,TP 的表达和 MVD 值显著增加(均P<0.05);② MVD 值增加同 TP 高表达显著相关(P<0.01).结论 TP 在膀胱尿路上皮癌中过度表达,并对膀胱尿路上皮癌的血管生成有明显的促进作用.     

鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

目的建立一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原蛋白的方法。方法通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、醋酸溶液复溶进行鼠尾胶原蛋白的纯化。超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定。结果本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯。与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件,胃蛋白酶用量:1∶500,酶解时间:72 h,盐析浓度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.05mol/L醋酸溶液。结论为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础。     

P53、Caspase-3和凋亡调节蛋白FasL在乳腺癌的表达及其意义

目的:通过在人乳腺癌组织和癌旁(相对正常)乳腺组织中观察p53、Caspase-3和FasL凋亡调节蛋白的表达,探讨p53、Caspase-3及FasL在乳腺癌疾病发生、发展过程中的作用及关系,为提高生物治疗乳腺癌疾病提供一定的实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检测21例收集于手术切除患者的乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织中的p53、Caspase-3及FasL。结果:P53蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为61.9%明显高于癌旁组织(相对正常)乳腺组织的0%;而Caspase-3蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.0%明显低于癌旁乳腺组织的80.9%;FasL蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为57.1%明显高于癌旁乳腺组织的19.0%。结论:在乳腺癌发生、发展过程中p53、Caspase-3和FasL蛋白发挥着既独立又协同的作用。     

肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及意义

目的　探讨肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 6 2例肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达。结果　肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达阳性率分别为 5 3.2 %和6 4 .5 % ,PCNA蛋白表达阳性肺癌Fhit蛋白阳性率明显低于PCNA蛋白表达阴性肺癌 (P <0 .0 1)。Fhit蛋白和PCNA蛋白在肺癌中表达与肺癌的分化程度、淋巴结转移、3年生存期均密切相关 ,PCNA蛋白与肺癌病理类型亦有关。结论　Fhit蛋白和PC NA蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关 ,二者相互抑制 ,呈明显负相关     

子宫腺肌病中PTEN和Akt的表达及其相关性研究

目的探讨子宫腺肌病病灶中10号染色体缺失张力蛋白磷酸酶(PTEN)和蛋白激酶B（PKB/Akt）的蛋白表达情况,旨在为子宫腺肌病的发生发展以及治疗提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测子宫腺肌病异位内膜(30例)、在位内膜（27例）、正常子宫内膜(20例)的腺上皮细胞和间质细胞中PTEN、Akt、磷酸化Akt （P Akt）蛋白的表达并进行比较。结果PTEN蛋白在腺上皮细胞中的表达,正常子宫内膜表达高于在位内膜和异位内膜（P＜0.05,P＜0.01）,子宫腺肌病在位内膜的表达高于子宫腺肌病异位内膜的表达（P＜0.01);Akt、P Akt蛋白在子宫腺肌病异位内膜的腺上皮细胞中的表达强度高于在位内膜（P＜0.05）和正常子宫内膜(P＜0.01),其在位内膜腺上皮细胞中的表达强度高于正常子宫内膜(P＜0.01)。PTEN蛋白在间质细胞中的表达,正常子宫内膜明显高于子宫腺肌病的在位内膜和异位内膜（P＜0.05）,但在位内膜与异位内膜之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）;Akt、P Akt蛋白在间质细胞中的表达,异位和在位内膜明显高于正常内膜,异位内膜和在位内膜两组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。PTEN与Akt、PTEN与P Akt在子宫腺肌病异位内膜、在位子宫内膜和正常子弓内膜中的表达均呈负相关（r＝-0.444;r＝-0.546）。结论PTEN蛋白表达在子宫腺肌病的在位、异位内膜中减少;Akt、P Akt蛋白表达增加。PTEN蛋白低表达不能有效的抑制Akt的激活,从而对子宫腺肌病的发生与发展起重要的作用。     

星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达及意义

目的研究人脑星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白的差异表达，探讨它们之间、它们与病理分级及复发之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测了50例星形细胞瘤中不同级别的FHIT、、PCNA蛋白的表达水平，以10例非肿瘤脑组织作对照。结果非肿瘤脑组织FHIT、PCNA蛋白阳性表达率分别为100％、0，星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白阳性表达率分别为40％、86％；尽管在星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达总体差异有显著性（P〈0．05），Ⅱ级与Ⅲ级、Ⅱ级与Ⅳ级间比较差异有显著性（P〈0．05），但Ⅲ级与Ⅳ级比较差异无显著性（P〉0．05）；经统计学分析FHIT、PCNA蛋白呈皿著负相关（P〈0．01）；8例复发病例中复发前后FHIT、PCNA蛋白表达差异有显著性（P〈0．05）。结论星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达之间的显著负相关，提示FHIT、蛋白可能对细胞增殖具有负性调控作用。FHIT、PCNA蛋白的表达水平可能与星形细胞瘤的病理分级和复发有关，推测FHIT、PCNA蛋白的表达可能与星形细胞瘤的肿瘤侵袭性相关。     

绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达

目的：构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl2)的融合蛋白表达载体，在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达，为mfgl2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段。方法：用PCR从mfgl2cDNA文库中扩增出mfgl2cDNA片段，插入到GFP表达载体pEGFP—N2中GFP基因序列的上游，构建成GFP—mfgl2融合基因表达载体pEGFP—mfgl2，将该载体转染到CHO细胞后24—48h，通过荧光显微镜观察并摄片。结果：扩增出长约1．3kb的基因片段，经双酶切鉴定和测序鉴定无误；重组载体转染CHO细胞后，在荧光显微镜下可观察到GFP的表达。结论：成功构建了pEGFP．mfgl2融合基因表达载体；重组载体可在CHO细胞中表达出GFP—mfgl2融合蛋白，为下一步进行mfgl2RNA干扰研究提供了简便的判断手段。     

Survivin、Her-2、P16和PTEN在膀胱癌中的表达及意义

目的研究Survivin、Her2、P16和PTEN蛋白在膀胱癌中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学SP法检测43例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织中以上4种蛋白的表达。结果4种蛋白在膀胱癌中的表达与在正常膀胱黏膜比较差异均有显著性意义(均为P<0.01)。不同临床分期间Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05);不同病理分级间Survivin、Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。Her2和Survivin蛋白表达间存在正相关(r=0.821,P<0.05)。结论Her2和Survivin的高表达是膀胱癌预后不良的指征;P16可作为早期诊断的标记物;PTEN则可作为膀胱癌预后不良的独立性指标。     

cAMP—依赖性蛋白激酶的提纯及活性测定

用ＤＥＡＥ－纤维素层析和羟基磷灰石层析方法,从牛心中提取了ｃＡＭＰ－依赖性蛋白激酶。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定分子量为３８ｋＤａ,并测定了其活性,为ｃＡＭＰ代谢途径的研究打下了基础。     

WWOX与c-jun在胃癌中表达及其临床意义

目的研究WWOX与c-jun在胃癌中表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测60例原发性胃癌及其癌旁组织中WWOX与c-jun蛋白的表达情况。结果胃癌组织中WWOX蛋白阳性表达率(28.3%)显著低于在癌旁组织中的表达率(81.7%)(P<0.01)。胃癌组织中c-jun蛋白阳性表达率(68.3%)显著高于其癌旁组织中的表达率(23.3%)(P<0.01)。WWOX蛋白的阳性表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),与其他临床病理参数无关。c-jun蛋白阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。两者的表达存在相关性(χ2=4.96,P<0.01)。结论WWOX蛋白和c-jun蛋白在胃癌组织和癌旁组织的表达均有明显的差异,WWOX蛋白在胃癌中低表达,而c-jun蛋白在胃癌中高表达。     

Ki67、P53蛋白在人喉组织中的表达及临床意义

目的 探讨Ki67和P53蛋白表达在人喉癌发生、发展及预后中的作用.方法 采用免疫组织化学Envision法检测182例喉不同病变组织标本(喉癌141例,喉癌前病变18例,声带息肉15例和癌周正常喉组织8例)中Ki67和P53蛋白的表达.结果 Ki67、P53在人喉癌组织中表达阳性率均显著高于喉癌前病变、声带息肉组织及癌周正常喉组织(P＜0.01);中晚期(Ⅲ～Ⅳ期)、伴颈淋巴结转移及术后3年或5年死亡的喉癌组织中PD4、Ki67阳性表达率均显著高于早期(Ⅰ～Ⅱ期)、无颈淋巴结转移及3年或5年存活病例(P＜0.01或0.05);Ki67和P53蛋白在人喉癌组织中联合表达阳性率显著高于喉其他不同病变组织中联合表达阳性率(P＜0.01).结论 Ki67和P53联合表达与人喉癌的发生、发展及预后有一定的相关性.