整合素β1对卵巢癌细胞耐药的影响研究

卵巢癌（Ovarian cancer）死亡率居妇科恶性肿瘤之首，由于缺乏特异的临床症状及相应的早期诊断手段，约70％的患者发现时已届晚期。尽管目前临床上采取积极而彻底的肿瘤细胞减灭术，辅以顺铂为基础的联合化疗，其临床完全缓解率不过40％-60％，致使5年生存率长期徘徊在15％-30％之间，难望有进一步的提高^[1]。     

人绒毛膜促性腺激素上调滋养层细胞整合素β3和骨桥蛋白表达促进胚胎体外着床

目的探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)影响胚胎体外着床的分子调控机制。 方法选择人滋养层细胞株BeWo及人子宫内膜细胞株RL95-2为研究材料。将BeWo细胞与RL95-2细胞共培养,以制备体外胚胎着床模型。对该模型进行如下研究。①通过间接免疫荧光方法,观察整合素β₃及其配体骨桥蛋白(OPN)在BeWo细胞的定位表达;②采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,分析不同含量hCG作用于BeWo细胞后,对BeWo细胞整合素β₃及OPN的mRNA相对表达量影响;③通过BeWo球状体黏附实验和铺展实验,观察hCG作用于BeWo细胞后,对BeWo球状体在RL95-2单层细胞上黏附和植入的影响。采用单因素方差分析或t检验,对不同含量hCG作用于BeWo细胞后的BeWo细胞整合素β₃及骨桥蛋白mRNA相对表达量,以及hCG处理前、后BeWo球状体黏附率及铺展倍数进行统计学比较。 结果①整合素β₃及OPN均在BeWo细胞的细胞膜表面表达。②1 000 IU/mL hCG作用于BeWo细胞后,整合素β₃及OPN的mRNA相对表达量分别为(2.07±0.57)、(1.95±0.48),均高于10 IU/mL hCG作用于BeWo细胞后的(1.12±0.31)、—(8.44±0.18);1 000 IU/mL hCG作用于BeWo细胞后,整合素β₃的mRNA相对表达量,高于100 IU/mL hCG作用于BeWo细胞后的(1.24±0.19),并且上述差异均有统计学意义(P＝0.007、0.009、0.014)。③采用1 000 IU/mL hCG处理BeWo细胞后,在BeWo球状体＋RL95-2单层细胞共培养0.5 h时的BeWo球状体黏附率为(89.51±6.47)%,显著高于无hCG处理的(50.24±7.73)%,并且差异有统计学意义(t＝90.900、P<0.001)。④采用1 000 IU/mL hCG处理BeWo球状体＋RL95-2单层细胞,共培养24 h时BeWo球状体铺展倍数为(2.28±0.52),高于无hCG处理的铺展倍数(1.93±0.36),并且差异有统计学意义(t＝6.864、P＝0.012)。 结论hCG可能通过上调滋养层细胞表面整合素β₃及OPN的表达水平,促进胚胎体外着床。     

TGF-β1在上皮性卵巢癌间质和上皮中的差异表达及与铂类耐药的相关性分析

目的:检测上皮性卵巢癌间质及上皮中TGF-β1表达情况,探讨其与肿瘤铂类耐药的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测43例术后应用铂类药物化疗的上皮性卵巢癌标本间质和上皮中TGF-β1的表达水平,并追踪调查12个月,记录肿瘤复发情况。结果:①上皮性卵巢癌中TGF-β1在上皮中表达阳性率为58.1%,间质中为81.4%,具有显著性差异(P=0.028)。②12个月内复发组和未复发组中卵巢癌上皮内TGF-β1的阳性表达率无显著性差异(P=0.594);复发组卵巢癌间质中TGF-β1阳性表达显著高于未复发组(P=0.042)。结论:上皮性卵巢癌间质中TGF-β1表达可能提示该患者对铂类药物具有更高的耐药性。     

盆腔器官脱垂患者耻骨宫颈筋膜中转化生长因子-β1和结缔组织生长因子的表达及其意义

目的探讨盆腔器官脱垂(POP)患者耻骨宫颈筋膜中转化生长因子(TGF)-β1和结缔组织生长因子(CTGF)表达的作用。方法选取2009年5月至12月,30例因POP在本院行阴式子宫全切除术患者的耻骨宫颈筋膜组织纳入POP组,再按照盆腔器官垂定量(POP-Q)将其分为POP-QⅡ°组(n=10)、POP-QⅢ°组(n=10)和POP-QⅣ°组(n=10)。选择20例同期在本院行阴式子宫全切除术的非POP患者的耻骨宫颈筋膜组织纳入对照组。应用免疫组化法和蛋白免疫印迹技术检测上述4组患者的耻骨宫颈筋膜组织中TGFβ-1和CTGF的表达情况,分析二者之间及与POP及其分度的关系。POP组与对照组患者均已婚,绝经,无其他结缔组织疾病,无盆腔手术病史,无急、慢性盆腔炎病史,术前3个月内未服用雌激素类药物,术后病理学检查证实无雌激素相关性疾病。两组患者年龄、分娩次数、体重指数(BMI)及其他与POP相关病史(慢性便秘、慢性咳嗽等)比较,差异无统计学意义(P>0.05)(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准)。结果①免疫组化检测结果显示:TGF-β1和CTGF呈阳性染色,主要定位于成纤维细胞的细胞质内。POP组TGF-β1和CTGF的阳性染色很弱,甚至缺失,阳性表达率分别为46.7%(14/30)和50.0%(15/30)。其中,POP-QⅡ°组阳性表达率分别为70.0%(7/10)和80.0%(8/10),POP-QⅢ°组分别为50.0%(5/10)和60.0%(6/10),POP-QⅣ°组分别为20.0%(2/10)和10.0%(1/10),均低于对照组[90.0%(18/20)和85.0%(17/20)],且差异均有统计学意义(χ2=27.242,χ2=23.958;P<0.05)。TGF-β1和CTGF表达与POP-Q分度呈负相关(r=-0.409,-0.572;P<0.05);而TGFβ-1和CTGF两者之间的表达呈正相关性(r=0.401,P<0.05)。②蛋白免疫印迹法检测对照组、POP-QⅡ°组、POP-QⅢ°组和POP-QⅣ°组耻骨宫颈筋膜组织中TGFβ-1和CTGF的相对表达量分别为0.4344±0.097,0.2441±0.060,0.1844±0.041,0.1345±0.033和1.2732±0.180,0.2132±0.028,0.1045±0.023,0.0034±0.001。POP-QⅡ°~POP-QⅣ°组TGFβ-1的表达量,均显著低于对照组,且差异均有统计学意义(P=0.000);而POP-QⅡ°~POP-QⅣ°组之间除POP-QⅡ°组显著高于POP-QⅣ°组,差异均有统计学意义(P=0.001)外,POP-QⅡ°组与POP-QⅢ°组及POP-QⅢ°组与POP-QⅣ°组比较,差异无统计学意义(P=0.068,0.126)。POP-QⅡ°~POP-QⅣ°组CTGF表达量均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P=0.000);POP-QⅡ°~POP-QⅣ°组间比较,差异亦有统计学意义(P=0.000)。结论 POP患者耻骨宫颈筋膜组织中TGFβ-1和CTGF表达下降,与POP的发病和临床分度有关。     

乳铁蛋白通过调节Keap1-Nrf2信号通路改善Aβ25-35诱导的N2a细胞氧化应激和凋亡

目的 探索外源性乳铁蛋白(lactoferrin, Lf)对淀粉样蛋白25-35(β amyloid 25-35,Aβ_25-35)诱导的阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease, AD)细胞模型的相关作用及机制。方法 将N2a细胞随机分为空白对照组,Lf组,Aβ组和Aβ+Lf组,应用CCK-8法检测细胞活力;Western Blot检测细胞Tau、p-Tau、Bax、Bcl-2、Caspase3、Cleaved-Caspase3、Nrf2、Keap1、HO-1等蛋白表达水平;Annexin FITC/PI双染法检测细胞凋亡比率;试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性以及氧化产物活性氧(reactive oxygen species, ROS)荧光强度、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放量、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量。采...