荧光原位杂交技术检测宫颈病变中C-MYC基因的表达及其意义

目的:探讨c-myc原癌基因在宫颈病变中的表达及其临床意义。方法:筛选114例宫颈细胞涂片,按最终病理学结果分组,其中正常宫颈20例,CINⅠ20例,CINⅡ25例、CINⅢ25例、宫颈癌24例;同时选取上述病例的宫颈病理切片,均用FISH方法检测c-myc基因的表达情况。结果:①C-myc基因在不同细胞学分级中即ASCUS、LSIL、HSIL和SCC宫颈脱落细胞中的阳性表达率为0.0%、20.8%、38.9%、61.2%、95.2%,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。②C-myc基因在不同病理学分级中即正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌脱落细胞中的阳性表达率分别为0.0%、10.0%、44.0%、72.0%、90.2%,其组间差异有统计学意义(P<0.01)。③在宫颈病理切片组织中C-myc基因阳性表达率在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌组织中依次为0.0%、20.0%、56.0%、80.0%、95.0%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:c-myc基因在各级CIN和宫颈癌的脱落细胞及组织中均有异常扩增,其扩增率随着宫颈病变程度增加而增加,提示c-myc基因异常扩增在宫颈病变筛查中具有一定的价值和意义。     

自动细胞学检测系统在子宫颈病变筛查中的应用

子宫颈癌及癌前病变是妇科最常见的具有传染性的可治愈疾病，采取有效的检查方法，可提高对宫颈病变的早期诊断率。宫颈涂片筛查异常细胞，是宫颈癌防治学上成熟手段之一。巴氏染色及分类法应用，为早期诊断宫颈癌及降低患者死亡率发挥了重要作用。由于传统巴氏人工阅片会出现较高的假阴性率（文献报道为2％～50％）。因此，该技术的临床应用受到严格限制。近年问世的液基薄层细胞学技术，使宫颈涂片的准确性达97％以上。为了正确处理宫颈病变，我院妇科于2002年12月与华中科技大学附属协和医院联合开展了自动细胞学检测系统（LCT）筛查子宫颈病变，现报道如下。     

计算机辅助细胞检测系统对子宫颈病变筛查的意义

目的对应用计算机辅助细胞(CCT)检测系统进行子宫颈病变的细胞学诊断作出初步评价.方法对妇科病普查中936例宫颈涂片标本采用PAPNET全自动电脑扫描和诊断系统行细胞学筛选,按TBS诊断分类标准诊断,并按不同年龄及宫颈光滑与糜烂程度进行对照.结果正常821例,异常115例,其中不典型鳞状细胞性质未定(ASCUS)87例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)26例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)2例,异常涂片多见30～49岁年龄组,且宫颈光滑组与宫颈糜烂组阳性检出率无显著差异.结论CCT是细胞学诊断的重要革新,有很高的敏感性和特异性,且效率高,适用于宫颈癌患者的大规模普查.     

计算机辅助细胞检测系统对子宫颈病变筛查的意义

目的:对应用计算机辅助细胞(CCT)检测系统进行子宫颈病变的细胞学诊断作出初步评价。方法:对妇科病普查中936例宫颈涂片标本采用PAPNET全自动电脑扫描和诊断系统行细胞学筛选,按TBS诊断分类标准诊断,并按不同年龄及宫颈光滑与糜烂程度进行对照。结果:正常821例,异常115例,其中不典型鳞状细胞性质未定(ASCUS)87例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)26例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)2例,异常涂片多见30~49岁年龄组,且宫颈光滑组与宫颈糜烂组阳性检出率无显著差异。结论:CCT是细胞学诊断的重要革新,有很高的敏感性和特异性,且效率高,适用于宫颈癌患者的大规模普查。     

HPV-DNA检测在宫颈病变筛查中的意义

目的分析宫颈脱落上皮的HPV-DNA表达情况与TCT及宫颈组织病理活检之间的关系,旨在探讨出一种更为敏感与合理的宫颈病变筛查方案。方法 HPV-DNA的检测采用PCR体外扩增和DNA反向杂交相结合的DNA芯片技术,宫颈脱落细胞病变程度检测采用薄层细胞学检测系统（TCT）,宫颈组织病理活检采用经典方法;将HPV-DNA表达结果与TCT结果进行阳性率分析,采用统计学方法行×列χ2检验及χ2分割检验。结果炎症组HPV-DNA阳性率分别与ASC-US组及上皮内瘤变（SIL）组的HPV-DNA阳性率相比,炎症组低于后两组,差异有统计学意义（P〈0.05/3）;HPV联合TCT方案组的敏感性分别与HPV方案组及TCT方案组的敏感性相比,联合组的敏感性高于后两组,差异有统计学意义（P〈0.05/6）。结论宫颈癌前病变的HPV感染率高于宫颈炎症的感染率,HPV-DNA检测联合TCT检测是最有效的宫颈癌筛查手段。     

荧光原位杂交法检测人精子染色体非整倍体

荧光原位杂交法(FISH)是检测精子非整倍体的简便快速的方法.本文综述了国外采用FISH方法检测精子非整倍体的最新进展.最新的研究表明,精子形态特别是某些特殊畸形如巨头或大头伴多尾的精子与精子非整倍体存在相关性;无精症患者中非阻塞性无精症睾丸精子的非整倍体率显著高于阻塞性无精症附睾精子和正常射精精子;化学物质如丙烯腈、吸烟、睾丸癌化疗等均可导致精子非整倍体率增加.     

荧光原位杂交法检测人精子染色体非整倍体

荧光原位杂交法(FISH)是检测精子非整倍体的简便快速的方法。本文综述了国外采用FISH方法检测精子非整倍体的最新进展。最新的研究表明，精子形态特别是某些特殊畸形如巨头或大头伴多尾的精子与精子非整倍体存在相关性；无精症患者中非阻塞性无精症睾丸精子的非整倍体率显著高于阻塞性无精症附睾精子和正常射精精子；化学物质如丙烯腈、吸烟、睾丸癌化疗等均可导致精子非整倍体率增加。     

荧光原位杂交法检测人精子染色体非整倍体

荧光原位杂交法(FISH)是检测精子非整倍体的简便快速的方法。本文综述了国外采用FISH方法检测精子非整倍体的最新进展。最新的研究表明,精子形态特别是某些特殊畸形如巨头或大头伴多尾的精子与精子非整倍体存在相关性;无精症患者中非阻塞性无精症睾丸精子的非整倍体率显著高于阻塞性无精症附睾精子和正常射精精子;化学物质如丙烯腈、吸烟、睾丸癌化疗等均可导致精子非整倍体率增加。     

荧光原位杂交技术(FISH)在宫颈病变检测中的应用

目的:探讨hTERC基因与宫颈病变的关系,协助临床筛查宫颈癌前病变及宫颈癌。方法:取20例正常妇女及82例宫颈病变患者的宫颈脱落细胞,其中CINⅠ11例,CINⅡ26例、CINⅢ22例、宫颈癌23例,用荧光原位杂交方法(FISH)检测hTERC基因的扩增情况。结果:CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌患者的hTERC扩增阳性率分别为9.1%、57.7%、100%、95.7%,CINⅢ及宫颈癌的hTERC基因的扩增率明显高于其它组,hTERC预测宫颈高度病变(CINⅡ/Ⅲ及宫颈癌)的敏感度、特异度分别为83.10%、96.78%。结论:随着组织学病变程度的增加,hTERC的扩增数逐渐增高,FISH技术可协助临床提高宫颈病变的筛查率。     

液基细胞学在子宫颈病变筛查中的价值

目的:评价液基细胞学检查在宫颈病变筛查中的应用价值。方法:对经妇科检查初步诊断为宫颈炎的1800例患者行液基细胞学检查,其中阳性病例158例(ASCUS及以上病例),进一步行阴道镜下活检病理组织学检查,以病理学检查为金标准,细胞学结果与之相对照。结果:液基细胞学诊断为SCC、HSIL、LSIL的病例,病理符合率分别为100.00%、93.33%、60.00%。液基细胞学AGCUS34例中,有3例病理诊断为子宫内膜腺癌。结论:液基细胞学检查有助于宫颈癌、宫颈上皮内瘤变的检出;对细胞学为AGC的患者,有必要内膜分段诊刮,及时发现子宫内膜癌前病变及内膜癌。     

人染色体端粒酶RNA基因、人乳头状瘤病毒、薄层液基细胞学检查联合检测在宫颈癌筛查中的应用价值

目的探讨联合应用hTERC、HPV检测及液基细胞学检查在宫颈癌筛查中的应用价值。方法收集2013年1月-2016年6月因宫颈疾病接受TCT检查的280例患者,进行高危HPV感染检测、hTERC基因扩增FISH检测及阴道镜下病理活组织检查,以病理学结果为金标准,将患者分为5组:炎症组(非CIN)、CIN1组、CIN2组、CIN3组和浸润癌组。比较TCT、hTERC、HPV检测在CIN筛查中的价值。结果 5组TCT检查与病理学结果吻合率分别为90.9%、59.6%、70.5%、66.7%及80.0%;炎症组高危HPV感染率低于CIN组,差异有统计学意义(P0.01),CIN组与宫颈浸润癌组差异无统计学意义(P0.05);hTERC基因扩增率高级别CIN组及浸润癌组明显高于低级别CIN组;联合应用3种检测手段灵敏度和特异度最高,分别为98.5%和92.3%。结论 3种方法联合检测优于单一方案,可以极大地提高宫颈癌高度病变的检出率。     

自然人群子宫颈脱落细胞中人端粒酶RNA组份基因的表达及临床意义

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hTERC基因检测技术在宫颈病变筛查中的地位

子宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤,发病呈年轻化和上升化趋势。宫颈癌三阶梯筛查已经在国内广泛应用,有其不足之处。在宫颈病变筛查及诊治分流中,引入人类染色体端粒酶(human telomerase RNA component,hTERC)基因检测,有以下意义:①宫颈癌筛查手段之一,对三阶梯诊断结果进行分流;②对特殊类型宫颈癌病例的快捷检测,如妊娠期宫颈病变脱落组织的筛查;③协助病理检查确诊宫颈病变,指导对宫颈上皮内瘤变(cervical intra-epithelial neoplasia,CIN)Ⅰ或阴道镜不满意的CINⅠ-Ⅱ级病例分流处理;④预测宫颈病变或宫颈癌治疗后的残留、复发或预后评估。     

原位杂交与免疫组化方法在子宫颈病变中检测HPV效果对比分析

[目的]探讨在子宫颈活检组织中检测人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）较敏感和准确的技术方法。[方法]采用一组子宫颈鳞状细胞癌（cervical squamous cell carcinoma,CSCC）和子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）活检组织病例,分别做原位杂交（In situ hybridization,ISH）技术检测HPV-DNA和免疫组化（immunohistochemical,IHC）技术检测HPV-Ag。在光镜下对比观察,统计分析。[结果]30例CSCC和33例CIN,用ISH方法阳性率分别为56.7%和69.7%;用IHC方法阳性率分别为0.0%和15.2%,ISH与IHC对比,阳性率显著增高（P﹤0.01）。5例IHC的阳性病例,ISH检测全部为阳性;IHC阴性的病例,ISH检测64.3%阳性,在连续切片上显示,ISH比IHC的阳性细胞数明显增多,且强度增加。[结论]用ISH技术检测HPV特异性好,灵敏度高,明显优于IHC方法,提倡在妇科临床病理工作中放弃IHC,应用ISH检测技术,有益于HPV的检出与防治。     

胃癌组织人端粒酶催化亚基hTERT mRNA的原位杂交检测

目的：研究胃癌组织、癌旁及远端正常胃组织中的端粒酶活性,探讨其作为胃癌肿瘤标记物的可能性。方法：采用原住杂交法检测了68例胃癌组织、癌旁及远端正常胃组织的端粒酶活性表达。结果：68例胃癌组织中端粒酶阳性表达61例（89．7％）,癌旁组织为17例（33．3％）,远端正常胃组织未检测出端粒酶活性。结论：端粒酶是特异性较强的恶性肿瘤基因标志,有可能成为胃癌早期诊断和治疗的理想标记物。     

液基细胞学在子宫颈病变筛查中的临床应用

目的:评价液基细胞学在宫颈癌前期病变筛查中的价值。方法:对8407例门诊患者行宫颈/阴道细胞学检查,其中538例异常细胞学进行阴道镜检查及宫颈多点活体组织检查(活检),必要时行宫颈管诊断性刮宫(诊刮)术或LEEP术,送病理检查(病检)。结果:8407例宫颈/阴道细胞学涂片中,检出WNL7605例,占90.46%,检出ASC以上异常802例,占9.54%,其中非典型鳞状细胞(ASC)515例,占6.12%,低度鳞状上皮内病变(LSIL)152例,占1.81%,高度鳞状上皮内病变(HSIL)95例,占1.13%,非典型腺细胞(AGC)40例,占0.48%。对其中538例行病理学检查:检出ClNⅡ、ClNⅢ128例,宫颈癌6例。结论:液基细胞学为一种准确、简便的宫颈病变筛查方法,能够早期发现宫颈癌前期病变及宫颈癌,应大力推广。     

彗星荧光原位杂交技术在检测特定基因损伤与修复中的应用

彗星荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization in combination with the Comet assay,Comet-FISH)是彗星试验(Comet assay,又称单细胞凝胶电泳)和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术的结合,是一种在单细胞水平上检测特定基因损伤和修复的有效方法[1].     

宫颈组织hTERC基因检测在宫颈癌筛查中的意义

目的探讨宫颈组织人染色体端粒酶(human telomerase RNA component,h TERC)基因检测在宫颈癌筛查中的意义。方法收集2008年10月至2011年2月暨南大学附属第一医院166例宫颈石蜡标本,根据病理结果分为对照组18例(正常宫颈、慢性宫颈炎或鳞状上皮化生);宫颈上皮内瘤变(cervical imtrae pithelial neoplasia,CIN)Ⅰ组30例;CINⅠ-Ⅱ组28例;CINⅡ组35例;CINⅢ组35例;宫颈癌组20例,其中初治15例(鳞癌11例,腺鳞癌3例,腺癌1例),治疗后复发5例。应用荧光原位杂交(FISH)技术检测上述标本的h TERC基因表达情况,并与宫颈癌其他筛查方法进行比较。结果 (1)对照组、CINⅠ、CINⅠ-Ⅱ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌组中h TERC基因扩增率分别为5.6%、10.0%、32.1%、65.7%、88.6%及95.0%。对照组和CINⅠ组h TERC基因扩增率均显著低于CINⅠ-Ⅱ、Ⅱ、Ⅲ级和宫颈癌组(均P0.05);宫颈组织中h TERC基因的扩增率随着宫颈病变程度递增而逐渐增加(χ2=12.270,P0.05)。(2)宫颈组织h TERC基因检测对预测宫颈高级别病变的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比及约登指数分别为81.1%、79.3%、80.4%、85.9%、73.0%、3.92、0.24及0.60。结论宫颈组织中h TERC基因检测对宫颈高度病变具有较高的检出率。     

荧光原位杂交法快速检测粪便难辨梭菌

目的 建立量子点标记的荧光原位杂交方法以快速检测粪便中的难辨梭菌.方法 采用量子点-亲和素-生物素-DNA探针直接与粪便中难辨梭菌进行荧光原位杂交,同时与难辨梭菌分离培养、难辨梭菌毒素A、B检测结果比较.结果 20份临床腹泻粪便标本中,10份标本毒素检测结果阳性,此10份中有8份培养与原位杂交结果同时阳性;10份毒素检测结果阴性标本的培养与原位杂交结果均阴性;荧光原位杂交法与培养法的符合率为100%,毒素检测法具有更高的敏感度.结论 荧光原位杂交法检测难辨梭菌具有快速、简便、特异的特点,可用于临床粪便标本的检测.     

膜式液基细胞学结合HPV—DNA检测在子宫颈病变筛查中的应用

目的探讨膜式液基细胞学及HPV—DNA检测结果的相关性,评价两种方法在宫颈早期病变筛查中的应用价值。方法回顾性分析439例同时进行膜式液基细胞学及HPV—DNA检测结果。结果439例样本中HPV．DNA检测阳性者154例（35．1％）,膜式液基细胞学结果阳性者163例（37．1％）;两者均为阳性者65例（14．8％）;二者差异无统计学意义（P〉0．05）,TCT结果的异常程度与HPV的感染数量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论膜式液基细胞学及HPV-DNA检测方法在宫颈早期病变的筛查中不能相互替代或相互验证;但两种方法联合应用可提高阳性检出率（73．9％）。