小鼠哮喘模型中白细胞介素5等对嗜酸细胞凋亡的调控作用

先前我们已证实在小鼠哮喘模型中白细胞介素 5 (ＩＬ 5 )和ＩＬ 10分别上行和下行调节气道炎症 ,二者的动态平衡是决定嗜酸细胞 (ＥＯＳ)浸润与消散的重要因素[1] 。我们的研究进一步动态观察哮喘动物模型气道炎症全过程的变化 ,旨在探讨炎症促进因子ＩＬ 5和炎症抑制因子ＩＬ 10对ＥＯＳ凋亡的调节作用。对象与方法　哮喘模型制作 :10周龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 10只 ,雌雄不限 ,体重 (10± 2 )ｇ ,由华西医科大学动物中心提供。所有动物随机分配为对照组 (11只 )、致敏激发 (ＳＣ)组(77只 )。ＳＣ组小鼠腹腔注射 10 %卵白蛋白 (ＯＶＡ) 0 1ｍｌ…     

哮喘气道炎症粘附机制的实验研究

目的评价细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）、Ｐ选择素在哮喘气道炎症粘附机制中的作用,进一步阐明哮喘的发病机理。方法用酶联免疫吸附试验、肺组织免疫组化检查和呼吸生理学方法系统观察正常组和哮喘组豚鼠各项指标。结果（１）哮喘组豚鼠肺潮气量、动态肺顺应性（Ｃｄｙｎ）和肺气道阻力与对照组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１及Ｐ＜０．０５）。（２）哮喘组豚鼠血浆和肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）可溶性ＩＣＡＭ１（ｓＩＣＡＭ１）、可溶性Ｐ选择素、血清和ＢＡＬＦ嗜酸粒细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）与对照组比较,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）;ＢＡＬＦ中白细胞介素８（ＩＬ８）与对照组比较差异也有显著性（Ｐ＜０．０１）。（３）哮喘组豚鼠肺组织（气道上皮和血管内皮）ＩＣＡＭ１和ＩＬ８表达与对照组比较,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论ＩＣＡＭ１、Ｐ选择素、ＩＬ８、ＥＣＰ参与介导了哮喘气道炎症的粘附过程     

共刺激信号与支气管哮喘大鼠γδT细胞活化关系的研究

我们以前的研究表明[1,2 ] ,γδＴ细胞在支气管哮喘 (简称哮喘 )患者支气管肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中明显活化 ;γδＴ细胞可能存在Ｔｈ1/Ｔｈ2模式 ,并表现为Ｔｈ2优势应答。为进一步阐明γδＴ细胞活化的细胞和分子机制 ,我们探讨了单核 /巨噬细胞 (Ｍｏｎ/Ｍ)与γδＴ细胞间共刺激分子Ｂ7∶ＣＤ2 8/ＣＴＬＡ 4的改变。材料与方法　 2～ 3月龄雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 0只 ,体重(2 0 0± 5 0 )ｇ。随机分为正常组和哮喘组 ,每组各 10只。哮喘模型的建立、鉴定及标本的收集和处理按文献 [1]方法。用补体攻击结合洗淘法进行γδＴ细胞选择…     

支气管哮喘大鼠气道重构与平滑肌肌动蛋白α表达的关系

平滑肌肌动蛋白α(ＳＭＡ α)是平滑肌的主要标志物 ,可反映平滑肌数量及其收缩能力的改变[1] 。为了解气道平滑肌在哮喘气道重构时的变化 ,我们的研究通过逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)检测支气管哮喘 (简称哮喘 )大鼠气道重构中肺部ＳＭＡ αｍＲＮＡ表达 ,旨在阐明气道平滑肌在哮喘气道重构中的作用。材料与方法　健康ＳＤ大鼠 2 4只 ,由四川大学动物实验中心提供。ＴＲＩｚｏｌ试剂购自美国ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ公司。ＳＭＡ α与ＧＡＰＤＨ引物由美国ＧＩＢＣＯＢＲＬ合成。ＲＴ ＰＣＲ试剂盒购自瑞士Ｒｏｃｈｅ公司…     

黄芪对豚鼠哮喘模型核因子κB表达作用的研究

支气管哮喘是一种慢性气道炎症性疾病 ,多种炎症细胞及其产生的细胞因子等炎症蛋白参与了哮喘的发病机制。核因子κＢ(ＮＦ κＢ)作为一种转录因子调节多种炎症蛋白基因的表达 ,从而参与了哮喘的炎症机制[1] 。近来有研究发现黄芪能降低哮喘患者的气道高反应性 ,并能调节哮喘患者的免疫功能。本研究观察豚鼠哮喘模型ＮＦ κＢ表达的特点及相关的肺功能和气道炎症程度 ,并观察黄芪对ＮＦ κＢ表达的影响。材料与方法　选健康雄性豚鼠 30只 ,体重 2 0 0～ 35 0ｇ,随机分为 3组 ,每组 10只。腹腔内注射 10 %卵清蛋白(ＯＶＡ)溶液 1ｍｌ致敏 ,2…     

小剂量三氧化二砷对哮喘豚鼠气道嗜酸细胞凋亡和核因子κB表达作用的相关性研究

哮喘是一种慢性气道变应性炎症 ,嗜酸细胞 (ＥＯＳ)浸润是其主要的病理特征。核因子κＢ(ＮＦ κＢ)是一个具有广泛生物学活性的核转录因子 ,激活后可促进细胞因子、粘附分子和趋化因子等基因转录 ,与炎症性疾病密切相关[1] 。我们的研究观察小剂量三氧化二砷 (Ａｓ2 Ｏ3 )对哮喘豚鼠气道ＥＯＳ凋亡和ＮＦ κＢ表达的影响 ,探讨ＥＯＳ凋亡和ＮＦ κＢ表达之间的相关性。材料与方法　健康雄性豚鼠 30只 ,体重 (30 0± 5 0 )ｇ ,随机分为 3组 ,每组 10只。哮喘组 :第 1天和第 8天腹腔内注射 10 %卵白蛋白 (ＯＶＡ ,美国Ｓｉｇｍａ公司 ) 1ｍｌ…     

白细胞介素10对小鼠哮喘模型气道炎症作用的研究

白细胞介素 (ＩＬ) 10是一种具有广泛免疫抑制活性的细胞因子 ,主要由Ｔｈ2细胞分泌。目前ＩＬ 10能否用于支气管哮喘治疗存在较多争议 ,我们的研究旨在探讨ＩＬ 10对呼吸道合胞病毒 (ＲＳＶ)诱导的小鼠哮喘模型气道炎症是否有抑制作用。材料与方法　雌性清洁级Ｂａｌｂ/ｃ小鼠 30只 ,体重 14～17ｇ(第一军医大学实验动物中心 ) ,分为三组 ,每组 10只小鼠。对照组 (Ａ组 ) :致敏和激发均用无病毒的Ｈｅｐ 2细胞株培养上清液。气道炎症组 (Ｂ组 ) :用灭活的ＲＳＶ病毒为抗原 ,致敏后激发 ;ＩＬ 10治疗组 (Ｃ组 ) :同Ｂ组予ＲＳＶ致敏后激发 ,…     

基质金属蛋白酶在哮喘大鼠气道结构重建中的作用

气道结构重建是慢性哮喘病理生理特征之一 ,与哮喘肺功能损害及气道高反应性密切相关[1] ,但其降解机制远未阐明。基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)主司细胞外基质 (ＥＣＭ) ,其活性受内源性抑制物金属蛋白酶组织抑制物 (ＴＩＭＰｓ)特异性调节。有人提出 ,ＭＭＰ 9与ＴＩＭＰ 1的比例可作为一种显示气道组织破坏与修复之间平衡的标志[2 ] 。本研究通过建立大鼠哮喘模型 ,探讨ＭＭＰｓ/ＴＩＭＰｓ平衡在哮喘气道结构重建中的作用。一、材料与方法1.动物模型建立及分组 :健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 0只 ,随机分为 2组 ,每组 10只。哮喘组 :第 1天…     

低分子肝素对哮喘小鼠气道黏液高分泌和炎症反应的影响

目的探讨低分子肝素对哮喘小鼠气道黏液高分泌和炎症反应的影响。方法 30只健康雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组和低分子肝素干预组,每组10只,检测三组小鼠气道上皮细胞黏液分泌量、气道内炎症细胞浸润、黏蛋白基因MUC5AC的表达、细胞因子IL-13、IL-4和IL-5的表达。结果 (1)哮喘小鼠气道黏液细胞化生、黏液过度分泌,气道内炎症细胞浸润增多,经鼻腔滴入低分子肝素后,黏液过度分泌受抑制,气道内炎症细胞浸润减少。(2)哮喘组小鼠气道黏液细胞MUC5AC mRNA相对表达量(26.43±0.47)及气道内炎症因子IL-13[(16.03±0.53)ng/ml]、IL-4[(603.68±50.32)pg/ml]和IL-5[(1308.80±224.84)pg/ml]表达的水平均高于正常组[(1.17±0.18)ng/ml、(17.56±3.01)pg/ml和(33.09±5.92)pg/ml];经鼻腔滴入低分子肝素后,上述指标[16.26±2.07,(11.50±0.89)ng/ml,(409.56±46.25)pg/ml,(874.65±32.833)pg/ml]均下降,P0.05,差异有统计学意义。结论低分子肝素抑制哮喘小鼠气道黏液高分泌和气道炎症反应。经鼻滴入的低分子肝素可能为哮喘过敏性炎症的治疗提供新的方法。     

支气管哮喘患者外周血T淋巴细胞凋亡及相关基因的表达

我们对哮喘患者的外周血Ｔ淋巴细胞的活化诱导细胞凋亡 (ＡＩＣＤ)及影响细胞凋亡的分子调控机制进行了检测和分析 ,以期为揭示哮喘的慢性气道炎症机制提供依据。对象与方法　按 1997年《支气管哮喘防治指南》[1] ,选择初治哮喘患者 10例为哮喘组 ,男、女各 5例 ,平均 (35 8±10 3)岁。选择 10名无吸烟史的健康人为对照组 ,男、女各 5例 ,平均 (35 9± 11 0 )岁。于淋巴细胞分离液中分离外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ) ,尼龙毛柱分离出Ｔ淋巴细胞。一部分加入ＰＨＡ Ｐ液 (终浓度为 10 μｇ/ｍｌ)和ＩＬ 2 (终浓度为 5 0Ｕ/ｍｌ) ,另一部分…     

慢性支气管炎患者肺泡巨噬细胞胞浆游离钙的变化及CD11c、CD14和白细胞介素～15的表达

慢性支气管炎缓解期气道内常存在不同程度的慢性非特异性炎症 ,许多研究证明 ,肺泡巨噬细胞 (ＡＭ)为气道局部炎症反应的主要始动细胞[1] 。我们通过观察慢性支气管炎患者ＡＭ胞浆游离钙水平的变化和ＣＤ11ｃ、ＣＤ14 及白细胞介素(ＩＬ) 15的表达 ,探讨其间的关系及对气道内慢性非特异性炎症的影响。一、对象与方法1.对象 :Ａ组 :老年慢性支气管炎缓解期患者 10例 ,男 7例 ,女 3例 ,年龄 6 1～ 74岁 ,平均 (6 6± 4)岁。经结合临床病史、体征、Ｘ线胸片及肺功能检查确诊 ,符合 1979年全国慢性支气管炎临床专业会议制定的诊断标准。Ｂ组 :…     

过敏性哮喘与骨髓反应

过敏性哮喘是以嗜酸细胞在气道浸润为主的慢性炎症 ,激活的嗜酸细胞可分泌多种前炎性蛋白和脂质介质 ,在白三烯 (ＬＴＢ4 )和血小板激活因子 (ＰＡＦ)刺激下 ,它还可释放基质蛋白酶、嗜酸细胞阳离子蛋白、嗜酸细胞神经毒素等引起气道上皮破坏、平滑肌痉挛 ,粘液分泌增多[1 ] ,形成慢性气道炎症和气道高反应性 ,介导迟发性哮喘反应 (ＬＡＲ) [2 ] ;在哮喘患者外周血和气道中嗜酸细胞及其祖细胞明显增多 ,最近发现 ,由于抗原刺激气道后引起炎性介质释放或气道中炎细胞趋化至骨髓 ,引起骨髓中炎细胞的祖细胞 (主要是嗜酸 /嗜碱细胞祖细胞 )扩增…     

致敏大鼠肺组织白细胞介素10mRNA表达及一氧化氮对其？…

近年来抗炎细胞因子白细胞介素 10 (ＩＬ 10 )在哮喘中的作用已引起关注 ,我们的实验拟探讨致敏大鼠肺组织ＩＬ 10基因水平表达的变化及与内源性一氧化氮 (ＮＯ)的关系 ,提供ＮＯ对哮喘炎症调控作用的实验依据。材料与方法　 (1)动物模型建立及分组 :雄性ＳＤ大鼠2 0只 ,随机分为 4组 :Ａ组 (6只 )为正常对照组 ;Ｂ组 (6只 )为阳性对照组 ,给予卵蛋白 (ＯＶＡ)致敏和刺激 ,但不用硝基左旋精氨酸甲酯 (Ｌ ＮＡＭＥ)或左旋精氨酸 (Ｌ ａｒｇ)腹腔注射 ,以生理盐水代之 ;Ｌ ａｒｇ组 (Ｃ组 )、Ｌ ＮＡＭＥ(Ｄ组 )各 4只 ,每天于ＯＶＡ雾化吸入…     

L-精氨酸对实验性哮喘治疗作用的研究

一氧化氮 (ＮＯ)具有舒张气道平滑肌缓解哮喘症状和免疫调节作用。但直接吸入ＮＯ易造成气道损伤和加重气道炎症[1] ,Ｌ 精氨酸 (Ｌ Ａｒｇ)是产生ＮＯ的前体或供体 ,我们的实验通过雾化吸入Ｌ Ａｒｇ治疗哮喘动物模型 ,观察Ｌ Ａｒｇ对其作用 ,并探讨其作用机制。材料与方法　选择健康豚鼠 36只 ,体重 (4 5 0± 2 5 )ｇ ,应用 10 %卵清蛋白 2ｍｌ注入 2 4只豚鼠腹腔内使其致敏 ,2周后再吸入 5‰卵清蛋白制成哮喘模型。随机分为两组。实验组 12只 :每日诱发 1次 ,诱发前 2ｍｉｎ吸入Ｌ Ａｒｇ 10ｍｌ(1 0ｇ/ｋｇ) ,共 7ｄ ;空白对照组 12只 …     

慢性阻塞性肺疾病大鼠模型支气管肺组织细胞间粘附分子1及部分中性粒细胞炎症因子的研究

我们探讨细胞间粘附分子 1(ＩＣＡＭ 1)、中性粒细胞趋化因子巨噬细胞炎症蛋白 2 (ＭＩＰ 2 )及中性粒细胞活性产物髓过氧化物酶 (ＭＰＯ)在慢性阻塞性肺疾病 (ＣＯＰＤ)模型大鼠气道炎症中的作用。材料与方法　雄性二级Ｗｉｓｔａｒ大鼠 48只 ,体重 2 70±2 0ｇ,随机分为 4组 ,每组 12只。 (1)模型组 :用每日熏香烟及两次气管内滴入 2 0 0 μｇ脂多糖法制作ＣＯＰＤ大鼠模型[1] 。布地奈德组和异丙托溴铵组先按模型组制备模型。 (2 )布地奈德组 :第 8天起每日雾吸布地奈德溶液 0 5ｍｇ/ｍｌ× 4。(3)异丙托溴铵组 :第 8天起每日雾吸异丙托…     

哮喘患者外周血单个核细胞核因子-κB活化水平的研究

淋巴细胞的作用在哮喘的炎症机制中尤为关键 ,我们以往的研究也表明 ,哮喘患者外周血淋巴细胞的活化与患者病情密切相关[1]。有研究发现 ,主要成分是淋巴细胞的外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)的活化与核因子 κＢ(ＮＦ κＢ)的激活有关[2 ]。本研究通过观察哮喘患者ＰＢＭＣ中ＮＦ κＢ的活化是否增加以及与患者病情的关系 ,意在从细胞内转录因子活性变化的角度探讨哮喘的发病机制。一、对象和方法1 .对象 :哮喘组 :急性发作期哮喘患者 1 6例 ,男、女各 8例 ,平均年龄 3 3岁 ,均符合中华医学会呼吸病学分会制定的诊断标准 ,抽血前 1周内未用…     

长期咀嚼槟榔者气道高反应性的变化

湖南长沙、湘潭、株州市地区的人群普遍有长期咀嚼槟榔和吸烟的习惯。咀嚼槟榔可诱发和加重支气管哮喘 (简称哮喘 )的发作[1,2 ] 。咀嚼槟榔时其槟榔碱可导致支气管平滑肌收缩 ,但发病机制仍不清楚。气道高反应性 (ＢＨＲ)是哮喘的重要特征之一 ,其基础是气道的炎症 ,长期吸烟可诱发和加重气道的慢性非特异性炎症[3] ,其中一部分患者可表现出ＢＨＲ[4 ] 。长期咀嚼槟榔者是否存在ＢＨＲ的变化 ,目前尚不清楚 ,对此我们进行了研究分析。对象与方法　长期咀嚼槟榔组 :48例 ,男 44例 ,女 4例 ,平均年龄 (4 0± 11)岁 ,每人每天咀嚼槟榔为 2 0～…     

哮喘患者外周血单个核细胞肿瘤坏死因子α转换酶的表达

肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ α)是支气管哮喘炎症过程中重要的前炎因子 ,具有生物活性的可溶性ＴＮＦ α是由肿瘤坏死因子α转换酶 (ＴＡＣＥ)蛋白水解其无活性的膜结合前体而来[1] 。我们的研究观察了哮喘患者外周血单个核细胞(ＰＢＭＣｓ)ＴＡＣＥｍＲＮＡ和蛋白的表达 ,及其培养上清ＴＮＦ α的水平 ,同时观察了吸入糖皮质激素对ＴＡＣＥｍＲＮＡ和ＴＮＦ α的影响 ,旨在探讨ＴＡＣＥ在哮喘发病中的可能作用地位。对象与方法　哮喘组 16例 :男 5例 ,女 7例 ,平均年龄(32± 5 )岁 ,为本院呼吸科门诊患者并符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组…     

糖皮质激素对哮喘炎性基因的调节机制

哮喘是以多种炎性基因过度表达或异常表达为特征的慢性炎症。这些炎性基因包括细胞因子基因 [白细胞介素 4(ＩＬ 4 )、5、13、粒 巨噬细胞集落刺激因子 (ＧＭ ＣＳＦ) ]、炎性酶基因 [诱生型一氧化氮合酶 (ｉＮＯＳ)、环氧合酶 (ＣＯＸ 2 ) ]、趋化因子基因 [嗜酸细胞活化因子 (ｅｏｘｔａｉｎ) ]、粘附因子基因 [细胞间粘附因子 (ＩＣＡＭ 1)和受体基因 (ＩＬ 2Ｒ)、速激肽 (ＮＫ)受体 ]等。糖皮质激素是用于哮喘的首要抗炎药物 ,它可作用于大多数炎细胞和结构细胞 ,尤其是吸入糖皮质激素可下调气道上皮细胞表达炎性基因 ,但迄今为止 ,糖皮…     

卡介菌多糖核酸对哮喘小鼠Th1/Th2类某些细胞因子分泌的影响

通过观察小鼠支气管肺泡灌洗液 (ＢＬＡＦ)中干扰素γ(ＩＦＮ γ)和白细胞介素 4(ＩＬ 4)水平来反映气道炎症的变化 ,并与地塞米松的疗效比较 ,探讨卡介菌多糖核酸对Ｔｈ1/Ｔｈ2反应的调节作用机制。对象与方法　试剂 :小鼠ＩＦＮ γ酶联免疫吸附测定(ＥＬＩＳＡ)试剂盒、ＩＬ 4ＥＬＩＳＡ试剂盒 (深圳晶美公司 )、卵白蛋白干粉剂 (ＯＶＡ ,上海华美公司 )、卡介菌多糖核酸注射液 (湖南九芝堂公司 )、地塞米松磷酸钠注射液 ,氢氧化铝凝胶。选 8～ 10周龄、体重 18～ 2 2ｇ的雄性ＢＡＢＬ/ｃ小鼠 32只 ,随机分成正常对照组 (Ａ组 )、哮喘组 (…