妊娠高血压综合征患者胎盘滋养细胞凋亡基因表达谱的研究

目的　采用基因芯片技术筛查妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者胎盘滋养细胞凋亡基因的差异表达 ,探讨细胞凋亡与妊高征发病的关系。方法　妊高征患者 2 0例为妊高征组 ,正常孕妇 10例为对照组。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)方法检测两组孕妇胎盘组织滋养细胞凋亡情况。同时采用上海博星公司生产的基因芯片进行凋亡基因表达谱的筛查。判断基因差异表达的标准 :(1)cy5 (妊高征组 ) /cy3(对照组 )的自然对数绝对值 >0 6 9,cy3与cy5的信号相差 2倍以上。 (2 )cy3或cy5、cy3和cy5的信号值其中之一必须 >80 0。 结果　 (1)TUNEL检测显示 ,每 10 0 0 0 μm2 绒毛面积中滋养细胞凋亡数 ,妊高征组为 1 5 84个 ,对照组为 0 0 32个 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。 (2 )基因芯片筛查有差异表达的凋亡基因 10个 ,占基因芯片筛查凋亡基因总数的 5 %。妊高征组胎盘组织中的凋亡基因表达均明显下调 ,即cy5 /cy3比值 <1。其中包括具有明显抗凋亡作用的SFRP2 、IAP2 、DHCY2 4及ATPIA1基因。结论　妊高征患者胎盘滋养细胞存在显著的凋亡现象 ,具有抗凋亡作用的基因表达明显下调 ,将可能导致胎盘滋养细胞凋亡 ,从而导致妊高征发病。     

基因芯片研究妊娠高血压综合征患者胎盘组织基因表达的变化

目的 检测妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织和正常妊娠胎盘组织差异表达基因谱。方法 Trizol法抽提组织总RNA并纯化mRNA；应用cDNA阵列人类全基因表达谱分析芯片检测6例妊高征患者胎盘组织和5例正常妊娠者胎盘组织中差异表达的基因，扫描仪分析结果。结果 所检测的17000个基因中，妊高征患者胎盘组织与正常妊娠者胎盘组织之间存在差异表达基因96个，表达上调基因数为78个，下调基因数为18个。初步分析发现，有85个已知功能基因，其中79个功能分类基因，大致分为癌基因和细胞周期蛋白、细胞骨架和运动蛋白、细胞分裂、离子通道和运输蛋白、细胞凋亡和应激反应蛋白、细胞受体、免疫、细胞信号和传递蛋白、转录和翻译系统、代谢、发育、细胞分化相关基因，另外有6个未分类基因、8个未知基因表达序列标签、3个cDNA片段。结论 妊高征发病的分子机制可能涉及了一些基因表达的变化。     

重度妊娠高血压综合征患者胎盘组织细胞凋亡及其调控基因 …

目的　研究细胞凋亡及其调控基因在重度妊娠高血压综合征 (妊高征 )发生、发展中的作用。方法　对 40例正常晚孕妇女 (对照组 )和 40例重度妊高征患者 (观察组 )的胎盘组织进行分析。用DNA缺口原位末端标记 (TUNEL)技术检测细胞凋亡 ;免疫组织化学方法检测促进和抑制凋亡基因 (bax/bcl 2 )的表达。结果　对照组胎盘细胞滋养细胞、合体滋养细胞中凋亡指数分别为 ( 1.1±0 .9) %、( 41.8± 1.5 ) % ;bax阳性率分别为 ( 1.0± 0 .9) %、( 2 8.9± 9.7) % ;bcl 2阳性率分别为 ( 2 .2±0 .8) %、( 2 2 .9± 0 .7) % ,总bax/bcl 2为 0 .7～ 1.7。观察组胎盘细胞滋养细胞、合体滋养细胞的凋亡指数分别为 ( 4.3± 1.2 ) %、( 45 .3± 1.4) % ;bax阳性率分别是 ( 2 .2± 0 .8) %、( 42 .5± 11.7) % ;bcl 2阳性率分别是 ( 3 .2± 0 .8) %、( 2 3 .3± 7.8) % ;总bax/bcl 2为 1.0～ 3.2。即 :对照组胎盘中有一定量的细胞凋亡、bax、bcl 2表达 ,bax/bcl 2表达间呈平衡趋势 ;观察组中细胞凋亡明显增高 (P <0 .0 1) ,bax表达也明显增强 (P <0 .0 1) ,bcl 2表达仅呈增高趋势 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,bax/bcl 2比值明显增高(P <0 .0 1)。结论　细胞凋亡及其调节基因的表达间具有一致性 ;细胞凋亡、bax/bcl 2表达     

细胞凋亡与细胞增殖对重度妊娠高血压综合征的影响

细胞凋亡是自主性的细胞死亡过程，影响着正常妊娠孕卵的着床及胚胎的发育，病理状态下异常的细胞凋亡与多种疾病及妊娠并发症有关^[1]。本研究从细胞存活与凋亡的角度阐述导致重度妊娠高血压综合征(重度妊高征)发生发展的病理生理机制。     

胎盘细胞凋亡与病理妊娠

细胞凋亡是由基因编码决定的细胞主动死亡,参与机体生理过程及疾病发生过程。妊娠作为一个复杂的生理过程,胎盘的形成与发育至关重要,细胞凋亡参与了它的发生发展。现就正常妊娠与病理妊娠时胎盘中细胞的凋亡作一综述。     

细胞凋亡与胎盘的研究进展

细胞凋亡是细胞的主动死亡过程 ,是与细胞坏死截然不同的细胞死亡方式。在机体的非免疫系统中 ,细胞凋亡是组织生长、更新以及清除异常细胞的重要手段 ;在免疫系统中 ,细胞凋亡与淋巴细胞发生、选择、功能的发挥和及时终止密切相关 ;在某些特殊组织 ,细胞凋亡则是形成免疫豁免或免疫耐受的重要机理。胎盘是母、儿在体内直接接触的重要部位 ,已有的研究表明 ,胎盘本身存在细胞凋亡 ,在某些病理妊娠情况下细胞凋亡出现异常。现就细胞凋亡与胎盘的研究进展综述如下。一、胎盘细胞凋亡的观察胎盘的细胞凋亡研究只在近年来才受到重视。胎盘是母儿…     

细胞凋亡的基因表达和调节与妊娠相关性研究

细胞凋亡是细胞的主动死亡过程，方式与细胞坏死截然不同。细胞凋亡受自身基因控制，促细胞凋亡基因表达增多，细胞凋亡；抑制凋亡基因增多则细胞增殖。随研究深入，细胞凋亡基因表达及调控与产科的关系也逐渐被证明，正常妊娠随着孕周增加细胞凋亡比率增加，而各种病理妊娠细胞凋亡比率与正常对照组存在差异，其基因表达水平也相应改变，体现了基因调节与形态变化的一致。深入对其研究对病理妊娠的机制和临床治疗有重要意义。     

细胞凋亡与妊高征的研究

细胞凋亡是一种在基因调控下的细胞主动死亡过程,以形态和生化上出现一定的改变为特征,与机体的生长发育、细胞分化和病理状态有着十分密切的关系,是细胞死亡的一种形式.生理状态下参与正常妊娠孕卵的着床及胚胎的发育,而在病理状态下异常的细胞凋亡又与自然流产、胎膜早破、输卵管妊娠、胎儿宫内发育迟缓等的发病有关.并在妊高征的发病过程中参予了胎盘、脐带血管内皮细胞的脱落、坏死,以及血管的粥样硬化、纤维样坏死和退形性变.     

Necdin基因在妊娠高血压综合征胎盘组织中的表达及其意义

目的：研究Necdin基因在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中的表达和定位，探讨Necdin基因在妊高征发病机制中的可能作用。方法：自1999年12月至2000年6月以消减杂交技术获得的Necdin基因片段为探针，采用斑点杂交检测10例正常妊娠胎盘组织和10例妊高征患者胎盘组织中Necdin基因的表达。并采用原位杂交检测Necdin mRNA在上述组织的定位。结果：正常胎盘组织和妊高征胎盘组织中均存在Necdin mRNA。妊高征胎盘组织Necdin基因的表达显著高于正常胎盘组织(P＜0．05)。在胎盘组织中，Necdin mRNA主要分布于胎盘滋养细胞。结论：胎盘组织中Necdin基因的高表达可能与妊高征的病理生理过程相关。     

妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘细胞凋亡及调控基因的研究

目的　通过观察妊娠肝内胆汁淤积症 (ICP)患者胎盘细胞凋亡调控基因p5 3、bax和bcl 2在胎盘中的表达 ,探讨细胞凋亡基因在胎盘细胞凋亡中的作用。方法　采用原位末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法对 3 1例ICP患者 (ICP组 )的胎盘组织中p5 3、bax和bcl 2基因表达及调亡指数进行检测 ,并以 3 1例正常妊娠妇女的胎盘组织作对照 (对照组 )。结果　 (1)ICP组胎盘组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中细胞凋亡指数分别为 (49 1± 9 1) %、(46 6±9 8) %、(3 5 1± 9 5 ) %、(3 8 7± 9 7) % ,明显高于对照组的 (2 2 5± 6 2 ) %、(2 1 6± 5 2 ) %、(17 9±6 2 ) %、(17 0± 4 7) %。两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。 (2 )而调控基因p5 3的表达 ,ICP组明显高于对照组 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;bax的表达在两组滋养细胞中比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。但在合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中 ,ICP组明显高于对照组 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;bcl 2的表达在ICP组胎盘组织细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中 ,均明显低于对照组 (P <0 0 1)。 (3 )p5 3、bax和bcl 2在ICP组合体滋养细胞中的表达分别是 (75 9± 8 2 ) %、(65     

重度妊娠高血压综合征患者子宫胎盘病理变化及其临床意义

目的 探讨重度妊娠高血压综合征（妊高征）患者子宫胎盘病理变化及其对孕产妇和围产儿结局的影响。方法 选择正常晚孕妇女（对照组）和重度妊高征患者（观察组）各１１７例,常规ＨＥ染色观察胎盘形态学变化,并对两组孕妇进行血液分析、生化检查及肝肾功能检查。结果 观察组胎盘重量明显减轻,细胞滋养细胞增殖,合体滋养细胞结节增多,基底膜增厚,基质纤维素样坏死,绒毛间隙水肿,绒毛内血管数目减少、淤血严重等,蜕膜内血管生理性改变消失,与对照组上述各指标比较,差异均有极显著性（Ｐ〈０．０１）;观察组合并严重贫血、重度血小板减少症、血液高粘度、低蛋白血症、大量腹水、眼底动脉并挛性改变等多于对照组,差异具有极显著性（Ｐ〈０．０１）。结论 重度妊高征患者胎盘形态学病理变化明显,且与病情严重程度呈平行关系。     

妊娠高血压综合征患者蜕膜组织中免疫相关细胞变化的 …

研究妊高征的免疫学发病机制。方法 通过对妊高征患者及正常孕妇胎盘蜕膜组织中免疫相关细胞进行光镜观察,测定淋巴细胞转化率,探讨蜕膜免疫相关细胞的变化与妊高征之间的关系。结果 蜕膜中大颗粒淋巴细胞及凋亡细胞显著增多,ＣＤ５７＾＋细胞数量及ＣＤ４＾＋与ＣＤ８＾＋比例上升,淋巴细胞转化率明显升高。结论 蜕膜中免疫细胞参与了妊高片的免疫学发病机制。     

妊娠高血压综合征相关基因检测的研究

妊娠高血压综合征(简称妊高征)，是导致孕产妇死亡的主要原因之一，目前其病因研究已达到分子水平，且发现妊高征发生和发展与人类白细胞抗原(HLA)密切相关，本研究应用顺序特异性引物聚合酶链反应(polymerase chain reaction-sequence specific primers，PCR-SSP)技术，建立妊高征相关基因的检测方法，探讨其临床价值。     

细胞凋亡的基因表达和调节与妊娠相关性研究

细胞凋亡是细胞的主动死亡过程,方式与细胞坏死截然不同.细胞凋亡受自身基因控制,促细胞凋亡基因表达增多,细胞凋亡;抑制凋亡基因增多则细胞增殖.随研究深入,细胞凋亡基因表达及调控与产科的关系也逐渐被证明,正常妊娠随着孕周增加细胞凋亡比率增加,而各种病理妊娠细胞凋亡比率与正常对照组存在差异,其基因表达水平也相应改变,体现了基因调节与形态变化的一致.深入对其研究对病理妊娠的机制和临床治疗有重要意义.     

妊娠高血压综合征患者胎盘肝细胞生长因子的表达与胎盘血管发生

目的　探讨肝细胞生长因子 (hepatocytegrowthfactor,HGF)在正常妊娠妇女胎盘和妊高征患者胎盘组织中的表达及对妊高征胎盘绒毛血管发生的影响。　方法　不同程度妊高征晚孕和正常妊娠晚孕孕妇共 78例 ,采用免疫组织化学SP法检测胎盘组织HGF的表达强度 ,同时作HE染色 ,选取5个高倍视野 ,计数绒毛血管数。　结果　HGF主要表达于绒毛间质细胞胞浆 ,蜕膜细胞有少量表达。重度妊高征患者胎盘绒毛间质细胞HGF表达强度 ( )为 1例 ,显著低于正常晚孕组的表达强度( )为 4例 (H =7.395 ,P =0 0 0 3) ,而轻度及中度妊高征组HGF表达强度 ( )均为 2例与正常晚孕组比较 ,差异无显著性 (H =0 .86 9,P =0 .35 1,H =0 .0 17,P =0 .896 )。不同程度妊高征胎盘绒毛血管密度均较正常孕妇减少 ,重度妊高征组绒毛血管密度为 (5 7.5 1± 15 .4 9)个 / 4 0 0×与正常晚孕组(6 7.91± 16 .90 )个 / 4 0 0×相比 ,差异有显著性 (F =10 .6 76 ,P =0 .0 0 8)。相关分析显示 ,胎盘间质细胞HGF表达强度与绒毛血管密度呈正相关 (r =2 2 4 6 ,P =0 0 30 )。　结论　HGF在胎盘中主要由绒毛间质细胞分泌 ,妊高征患者HGF分泌减少可能是引起胎盘血管网减少的原因之一。     

胎盘表皮生长因子受体、人绒毛膜促性腺激素及胎盘泌乳素与妊娠高血压综合征相关性研究

妊娠高血压综合征 (妊高征 )是妊娠期发生并严重危害母儿健康的疾病。近年来的研究表明 ,胎盘表皮生长因子受体 (ＥＧＦＲ)、人绒毛膜促性腺激素 (ｈＣＧ)与妊高征发病密切相关。本研究采用逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)技术检测了妊高征患者ＥＧＦＲ、ｈＣＧ及胎盘泌乳素 (ｈＰＬ)的表达情况 ,现将结果报道如下。一、资料与方法1.对象 :选择长春市妇产科医院及白求恩医科大学第三临床医院妇产科 1997年 10月至 1999年 11月住院产妇 119例 ,其中 :妊高征组 77例 (中度 43例 ,重度 34例 ) ;对照组 42例 (正常妊娠晚期孕妇 )。妊高征的诊…     

类胰岛素生长因子2在正常妊娠及妊娠高血压综合征患者胎盘中的印迹及表达

妊娠高血压综合征 (妊高征 )是妊娠期特有的疾病 ,存在着一定的遗传倾向 ,迄今为止其病因仍不清楚。其主要的病理改变是蜕膜及子宫肌层内 1/ 3段螺旋动脉管壁滋养层细胞浸润能力的降低 ,导致了胎盘缺血缺氧 ,继而发生高血压[1,2 ] 。孕卵的着床和胎盘的生长、分化受到父系基因组的调控 ,与基因印迹现象密切相关[3 ] 。类胰岛素生长因子 2(ｉｎｓｕｌｉｎ ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ 2 ,ＩＧＦ2 )是发现最早、研究最深入的印迹基因之一 ,在很多组织中仅表达父系等位基因 ,而且在细胞滋养层细胞中活性很高。本研究检测了正常足月妊娠妇…     

正常及妊娠高血压综合征孕妇胎盘组织中去甲肾上腺素和多巴胺的研究

目的　通过对正常孕妇及妊娠高血压综合征 (妊高征 )孕妇胎盘组织中去甲肾上腺素(NE)及多巴胺 (DA)的定位及定量测定 ,探讨其与妊高征发病的关系。方法　应用免疫组织化学 (免疫组化 )链霉素抗生物素 -过氧化物酶法 ,对 31例正常早、中、晚孕妇女 (正常孕妇组 ) ,及 38例轻、中、重度妊高征孕妇 (妊高征孕妇组 )的胎盘组织进行NE和DA定位 ;并应用电子计算机图像分析系统进行定量 ,其结果以灰度值倒数表示。结果　 (1)两组孕妇胎盘组织NE及DA免疫组化定位 :正常孕妇组中 ,早期孕妇的胚胎绒毛滋养细胞NE及DA免疫反应呈现强阳性 ,呈深棕色 ,定位于细胞滋养细胞的细胞膜及细胞浆中 ;中、晚期孕妇胎盘组织NE及DA免疫反应表现为阳性 ,呈棕色 ,或弱阳性呈浅棕色 ,定位于合体滋养细胞的细胞膜及细胞浆 ,以及毛细血管内皮。妊高征孕妇组的胎盘组织NE、DA定位与正常孕妇组中的晚期孕妇相同。 (2 )两组孕妇胎盘组织NE及DA免疫组化定量 (灰度倒数值 ) :正常孕妇组NE由孕早期的 1 5 95± 0 0 18降至中、晚期的 1 4 88± 0 0 19和 1 4 19± 0 0 14 (P<0 0 1) ;DA由孕早期的 1 5 5 2± 0 0 6 7,降至中、晚期的 1 36 9± 0 0 5 1和 1 30 2± 0 0 13(P <0 0 1)。妊高征孕妇组妊高征轻、中、重度的DA ,依次为 1 37     

妊娠高血压综合征发病相关基因的研究策略

妊娠高血压综合征(简称妊高征)是严重威胁母儿健康的重要产科并发症，其病因至今尚不明确，因此，妊高征病因学研究一直是产科重要的研究课题。近年来，随着分子生物学技术的日趋成熟和人类基因组研究的不断进展，妊高征病因学研究的热点主要集中在寻找与妊高征发病相关的基因，国内该领域的研究也已经逐渐跟上了发达国家的步伐。本期     

妊娠高血压综合征胎盘组织差异表达基因的筛选与确定

目的 了解妊娠高血压综合征(妊高征)胎盘组织基因表达的改变，确定与妊高征发病相关的基因，为研究妊高征的发病机理提供线索。方法 收集2001年3月至2002年9月西安地区以剖官产终止妊娠的42例妊高征患者及22例正常产妇的产前、产后临床资料；收集胎盘组织，制作胎盘组织芯片；建立妊高征患者数据库。采用抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridization，SSH)建立妊高征胎盘组织cDNA消减文库i利用差异筛选技术筛选出妊高征胎盘高表达基因，用RT-PCR和免疫组织化学技术验证部分高表达基因。结果 建立了由42例中、重度妊高征患者和22例正常产妇组成的数据库；用66例胎盘组织制成150点的胎盘组织芯片。利用SSH和差异筛选共分离出103个阳性克隆，测序成功90个。测序结果显示90个cDNA片断与GenBank／EM-BL中36条已知功能基因有95％以上的同源性。结论 妊高征患者胎盘组织基因表达发生较大变化；有必要研究血管内皮生长因子受体、卵巢抑制素、丝氨酸蛋白酶抑制素、细胞角蛋白7以了解妊高征的发病机理。