观察晶体上皮及囊膜的一种眼球特殊制片法

观察晶体上皮及囊膜的一种眼球特殊制片法中山医科大学中心眼科中心（５１００６０）郑湖铃李绍珍近年来为了观察在晶体囊外摘除术中注入各种物质（如高三尖杉酯碱）对晶体上皮细胞及囊膜的影响，需要通过动物实验对术后眼球进行制片观察。由于晶体囊外摘出术后，只剩下很...     

白内障术后后囊浑浊发生机制的研究--老年性白内障晶状体上皮细胞的体外培养

目的观察老年性白内障晶状体上皮细胞体外培养的生长特点。为研究老年性白内障及术后后囊浑浊的发生机制及防治奠定基础。方法应用改良组织块培养法对超声乳化术中老年性白内障晶状体前囊上皮细胞进行体外培养，在倒置显微镜下观察其生长和分化的规律。结果前囊接种3—5天，有新生上皮细胞自囊片的边缘长出并向四周延伸，第3-4周部分细胞内出现空泡和颗粒等结构改变，生长近于停止；传代培养细胞不能增生。结论老年性白内障晶状体前囊上皮细胞体外增生能力有限。改良组织块培养法培养晶状体上皮细胞简单有效。     

晶体上皮细胞与后囊混浊

本综述了晶体上皮细胞在体内和体外培养条件下的特性以及晶体上皮细胞在白内障囊外出术后的移行、增殖、化生和分泌细胞因子、产生细胞外基质在后囊浊形成过程中的作用，介绍了几种研究较多的清除和抑制这种细胞的方法和药物。     

晶体上皮细胞与后囊混浊

本文综述了晶体上皮细胞在体内和体外培养条件下的特性以及晶体上皮细胞在白内障囊外摘出术后的移行、增殖、化生和分泌细胞因子、产生细胞外基质在后囊混浊形成过程中的作用，介绍了几种研究较多的清除和抑制这种细胞的方法和药物。     

晶体上皮细胞清除和抑制与后囊混浊

后囊混浊是白内障囊外摘出术后最常见的并发症。本文综述了晶体上皮细胞增殖与晶体后囊混浊及纤维化形成的关系，介绍了白内障囊外摘出术中及术后清除晶体上皮细胞的方法以及抑制晶体上皮细胞生长繁殖的研究进展，包括超声波，激光，冷冻，β射线及生物制剂和抗代谢药物的应用，虽然这些方法的临床应用尚待进一步研究，但为临床解决后囊混浊提供新的途径。     

晶体上皮细胞清除和抑制与后囊混虫

后囊混浊是白内障囊外出术后最常见的并发症，本综述了皮细胞增殖与晶体后囊混浊及纤维化形成的关系，介绍了白内障囊外出术中及术后清除晶本上皮细胞的方法和以及抑制晶体上皮细胞生长繁殖的研究进展，包括超声波，激光，冷冻，β射线及生物制剂和抗代谢药物的应用，虽然这些方法的临床应用尚待进一步研究。但为临床解决后囊混浊提供新的途径。     

正常及白内障晶体上皮的细胞生物学研究现状

晶体上皮细胞是晶体内代谢最活跃的部位，它与晶体的病理生理、白内障的病因学及白内障术后晶体囊的混浊密切相关。本综述了正常晶体及白内障晶体上皮细胞的密度、形态学以及晶体上皮细胞的增殖与损伤修复，介绍了晶体上皮细胞体外组织培养的研究现状。     

巨噬细胞对培养兔晶体上皮细胞增殖率及DNA合成率的影响

采用细胞计数及Ｈ＾３ＴＤＲ液闪测定的方法，观察巨噬细胞对体外培养兔晶体上皮细胞增殖率的影响。结果表明，在巨噬细胞调理液作用２４小时后，晶体上皮细胞增殖率及ＤＮＡ合成率均较对照组明显增高（Ｐ〈０．０５），并保持至作用后第５天。由此证实，巨噬细胞及其活性因子可促进晶体上皮细胞增殖。该机制可能与白内障术后后囊混浊有关。     

巨噬细胞对体外培养兔晶状体上皮细胞增殖的影响

目的探讨白内障术后后囊混浊的发病机制。方法观察巨噬细胞对兔晶状体上皮细胞（rabbitlensepithelialcells，RLEC）增生的影响。结果实验组加有巨噬细胞，BLEC增殖活跃。巨噬细胞上清液48及72小时能明显促进BLEC的生长。结论巨噬细胞促进晶体上皮细胞的增生，可能是引起白内障术后后囊混浊的原因之一。     

人晶体上皮细胞体外培养的细胞生物学特性

对体外培养的人晶体上皮细胞（LEC）进行研究，观察细胞的增生分化规律、细胞的超微结构、细胞的生化合成、物质转化及年龄等对细胞增殖的影响，为探讨老年性白内障的发病机制、对抗白内障药物的筛选、白内障术后的晶体后囊混浊形成机理以及研究细胞的衰老和细胞间亡现象等生命科学的基本问题提供理论依据．本文就此加以综述．     

The Biological Study of the Cultured Human Lens Epithelial Cells in Vitro

The human lens epithelial cells (HLE) cultured in vitro was established in normal and cataractous lenses. The biological feature, histological characteristics and the ultrastructure of the cultured HLE cells were investigated. The results reveal that the proliferative capacity of the culutured HLE cells is reversely proportional to the donour age; the cultured HLE cells has the limited proliferative capacity in vitro. The relieve of the contact inhibition is the effective trigger of the HLE cell proliferation. This research work is possible to make a basis for the further study of the regeneration of the lens and the roles of the lens epithelial cells in the development of the cataract. Eye Science 1994; 10:27-31.     

碱性成纤维细胞生长因子对牛眼晶体上皮细胞的促增殖作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对牛眼晶体上皮细胞的作用。方法首先进行牛眼晶体上皮细胞原代与传代培养；在第２代培养细胞中添加ｂＦＧＦ，浓度１０－２～１０２ｎｇ／ｍｌ，借助甲基噻唑基四唑（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）测定方法观察ｂＦＧＦ对晶体上皮细胞增殖的影响。结果牛眼晶体上皮细胞体外具有易于贴附、细胞融合较快以及生长迅速等特点。添加ｂＦＧＦ后，可促进晶体上皮细胞的增殖，尤其是１０２ｎｇ／ｍｌ显示出明显的促增殖作用。结论ｂＦＧＦ在促进白内障术后晶体上皮细胞的增殖及后囊混浊上起了重要作用。     

人晶状体上皮细胞的组织块培养

目的建立人晶状体上皮细胞体外培养的简单有效方法,观察不同年龄人晶状体上皮细胞的体外生长规律和特点。方法应用改良组织块培养法对胎儿、成人和年龄相关性白内障的晶状体上皮细胞进行体外培养,在倒置显微镜下观察其生长、分化规律。结果胎儿、成人和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞都具有增殖能力,胎儿和成人晶状体上皮细胞可传3代,年龄相关性白内障晶状体上皮细胞传代培养基本不能增殖。结论人晶状体上皮细胞体外培养困难,不同年龄人晶状体上皮细胞体外均能增殖,但增殖能力均很有限;改良组织块培养法是晶状体上皮细胞体外培养的较好方法。     

类肝素、甘糖酯对体外培养的晶状体上皮细胞的影响

目的　观察类肝素及甘糖酯 (PGMS)对体外培养的大鼠晶状体上皮细胞 (LECs)增殖的影响。方法　将质量浓度为 0 .2 ,0 .4,0 .8mg/ml的类肝素和PGMS作用于培养细胞 ,72h后行结晶紫染色比色测定 ,并对 2 4h内的 3H TdR掺入率进行测定。结果　类肝素、PGMS可使LECs增殖明显降低 (P <0 .0 5 ) ,DNA合成明显受抑 (P <0 .0 1) ,相同质量浓度下类肝素的作用强于肝素。结论　类肝素、甘糖酯对体外培养的大鼠晶状体上皮细胞有明显抑制作用     

人外伤性白内障晶状体上皮细胞的组织块培养

目的建立人外伤性白内障晶状体上皮细胞体外培养的简单有效方法，观察晶状体上皮细胞的体外生长规律和特点。方法应用改良组织块贴附培养法对儿童及成人外伤性白内障的晶状体上皮细胞进行体外培养，倒置显微镜下观察其生长规律。结果儿童和成人外伤性白内障晶状体上皮细胞都具有增生能力，晶状体上皮细胞均可传3代，晶状体上皮细胞多次传代后生长缓慢。结论儿童和成人外伤性白内障晶状体上皮细胞体外培养增生能力有限，儿童晶状体上皮细胞增生能力较强。改良组织块贴附培养法简单易行，重复性好，是晶状体上皮细胞体外培养的较好方法。     

Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡的防护作用

目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase-3)及其抑制剂Ac-DEVD-CHO对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响，为进一步研究晶状体氧化损伤机制及其防护提供实验依据。方法 采用大鼠离体晶状体器官培养的方法，用Western blot法分析氧化损伤后晶状体上皮细胞内caspase-3蛋白酶活性，流式细胞AnnexlnV-PI双染色法定量检测caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对晶状体上皮细胞凋亡率的影响。结果 氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡过程中，细胞内caspase-3酶活性明显增强，caspase-3特异性抑制剂Ac-DEVD-CHO可有效降低晶状体上皮细胞凋亡率。结论 caspase-3蛋白酶在氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡过程中占有重要地位，caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO可有效防护体外品状体上皮细胞氧化损伤。     

蛋白酶体β5过表达对人晶状体上皮细胞抗氧化能力的影响

目的:研究蛋白酶体β5(PSMB5)过表达对人晶状体上皮细胞抗氧化能力的影响。方法:实验研究。构建重组质粒pcDNA3.1-PSMB5,将其转染入人晶状体上皮细胞株SRA01/04中,形成稳定表达(作为实验组),设pcDNA3.1空载体作为对照组。将2组细胞置于40 μmol/L H 2O 2环境下,Hoechst 33342荧光染色观察2组细胞核形态的变化;流式细胞仪检测2组细胞凋亡率的变化。数据采用独立样本 t检验。 结果:40 μmol/L H 2O 2环境下,Hoechst 33342荧光染色可见,与实验组相比,对照组的细胞核明显皱缩、变形;流式细胞仪检测发现,实验组和对照组的细胞凋亡指数分别为(9.3±0.9)%和(15.7±1.9)%,均高于处理前的(5.9±0.8)%和(7.1±1.1)%,对照组凋亡指数比实验组的凋亡指数更高( t=3.742, P=0.008)。 结论:PSMB5基因过表达能有效提高人晶状体上皮细胞的抗氧化能力。     

晶状体上皮细胞凋亡与过氧化氢诱导白内障形成研究

目的 探讨晶状体上皮细胞凋亡与皮质性白内障形成的关系。方法用200μmol／L过氧化氢(H2O2)诱导离体兔晶状体白内障形成,TUNEL法检测H：0：作用1,6,18,24,48h的晶状体上皮凋亡细胞,同时测定晶状体超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果H2O2作用1h,晶状体保持透明,未发现凋亡上皮细胞。随着作用时间的延长,凋亡上皮细胞数量逐渐增多,晶状体逐渐变混浊。SOD活性早期无变化,18h后逐渐降低。结论晶状体上皮细胞凋亡是皮质性白内障形成的细胞学基础,其发生先于晶状体抗氧化机制的变化。     

靶向5-氟尿嘧啶纳米微球对体外培养的人晶状体上皮细胞作用的研究

目的评价靶向人晶状体上皮细胞免疫载药纳米微球HILE6-PLA（5-FU）-NP的免疫学特征及体外对靶细胞的特异性结合和杀伤作用.方法采用碳二亚胺法将5-氟尿嘧啶（5-FU）聚乳酸纳米微球PLA（5-FU）-NP与抗人晶状体上皮细胞单克隆抗体HILE6连接,制备免疫载药纳米微球.测定其中5-FU与HILE6物质的量之比;ELISA法检测连接后单克隆抗体HILE6的活性变化.设免疫纳米微球组、HILE6与载药纳米微球混合组、载药纳米微球组、空白对照组,MTT法检测对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用.间接免疫荧光法观察单克隆抗体HILE6、免疫纳米微球和载药纳米微球对兔晶状体上皮细胞的附着、内化过程.结果免疫纳米微球中5-FU与HILE6物质的量之比约为1809：1,单克隆抗体HILE6保留免疫活性可达原抗体的84%.免疫纳米微球对晶状体上皮细胞作用2 h的半数抑制剂量IC50为5.0μg/ml,抑制作用较载药纳米微球组、单克隆抗体与微球混合组有明显提高.免疫纳米微球在30 min内可识别并附着于兔晶状体上皮细胞;2 h进入细胞质均匀分布;4 h后集中于细胞核区.结论免疫纳米微球HILE6-PLA（5-FU）-NP可携带大量药物,保持特异的免疫活性,在体外识别并进入晶状体上皮细胞有效抑制其增殖.