人肝细胞癌中整合素α5,β1亚基和纤维连接蛋白mRNA表达的生？…

用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交对１５份人肝细胞癌（ＨＣＣ）、５例癌旁肝硬变和３例正常肝组织标本中整合α５、β１亚基和纤维连接蛋白（ＦＮ）ｍＲＮＡ表达作杂交分析。结果：低分化ＨＣＣ癌组织中整合素α５、β１亚基和ＦＮ ｍＲＮＡ表达水平明显低于高分化ＨＣＣ及癌旁和正常肝组织（Ｐ〈０．０１）；ＨＣＣ伴肝内浸润和（或）转移组癌组织内３种ｍＲＮＡ水平较无浸润转移组低，差异有显著性意义（Ｐ〈０．０５）；５例伴肝内转     

尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂PAI-1 mRNAs的表达与人肝细胞癌的关系

为探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）及其抑制剂ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ的表达变化与人肝细胞癌（ＨＣＣ）浸润、转移间的关系,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对３０例新鲜活检肝组织作ｕＰＡ和ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ表达的研究。结果显示：１６例伴肝内浸润和转移癌组织中ｕＰＡ和ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ表达水平明显高于１４例无肝内浸润和转移肝组织;１８例高分化ＨＣＣ癌组织与１２例中、低分化ＨＣＣ相比,ｕＰＡ和ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ含量差异有显著性意义。结果表明,癌组织内ｕＰＡ和ＰＡＩ－１基因转录水平的改变与ＨＣＣ浸润、转移及细胞分化密切相关。     

纤维连结蛋白、Ⅳ型胶原和层粘连蛋白在浸润性乳腺癌组织中的表达及意义

用免疫组化法观察了层粘连蛋白（ＬＮ）、Ⅳ型胶原（Ｃｏｌ）和纤维连结蛋白（ＦＮ）在１１３例浸润性乳腺癌和其中３７例淋巴结转移癌组织中的表达。结果表明，这３种蛋白均可在原位癌结构的基底膜处呈连续状表达。其中ＣｏｌⅣ和ＬＮ平均积分光密度均高于它们在正常小叶基底膜的表达（Ｐ＜０．０５）。３种蛋白在浸润性癌巢周均可表达（表达率为ＬＮ３８．６％，ＣｏｌⅣ２３．９％，ＦＮ８４．１％），ＣｏｌⅣ和ＬＮ的表达有相关性（Ｐ＜０．０５）。ＦＮ在浸润癌间质中表达与患者预后密切相关（Ｐ＜０．０１）。它们在癌细胞内亦可表达（ＣｏｌⅣ１９．４７％、ＬＮ２７．４％、ＦＮ２７．４％），其中ＦＮ与浸润性导管癌和肿瘤体积大小有关。淋巴结转移癌巢旁和细胞内（ＬＮ１３．５％，ＣｏｌⅣ８．５％，ＦＮ３３．３％）也可见到它们表达，ＦＮ在转移癌细胞内的表达率明显高于其它２种蛋白（Ｐ＜０．０１），且与原位癌灶细胞内的表达有关（Ｐ＜０．０２）。表明：癌细胞本身有合成基底膜物质的能力；ＦＮ在乳腺癌间质中的表达与预后较好有联系。     

肝硬变及肝癌癌旁肝组织中小多角肝细胞性质的免疫组化研究

应用免疫组织化学的方法对６０例ＨＣＣ、癌旁肝组织和４７例肝硬变组织中ＨＢｘＡｇ和ＩＧＦ Ⅱ表达进行实验观察，以探讨小多角肝细胞（ＳＰＬＣ）的性质。结果显示，在癌旁肝和肝硬变的ＳＰＬＣ中ＨＢｘＡｇ和ＩＧＦ Ⅱ的阳性表达率分别为６９１４％和６６６７％，其中ＨＢｘＡｇ阳性的ＳＰＬＣ中ＩＧＦ Ⅱ阳性率为８２１４％，而ＨＢｘＡｇ阴性的ＳＰＬＣ中ＩＧＦ Ⅱ阳性率为３２００％。ＩＧＦ Ⅱ在ＨＢｘＡｇ阳性的ＳＰＬＣ中的表达明显高于ＨＢｘＡｇ阴性ＳＰＬＣ组（Ｐ＜００５）。结果表明，ＳＰＬＣ为癌旁肝和肝硬变等病变肝组织中一种幼稚的肝细胞成分，具有肝细胞和胆管细胞分化潜能，其增殖和分化的作用可能与肝细胞再生、胆管增生关系密切     

肠缺血-再灌流大鼠不同组织TNFα和IL-6 mRNA表达的规律及意义

观察大鼠肠缺血－再灌流过程中小肠,肝,肺组织ＴＮＦα和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的规律,发现肠缺血１ｈ小肠ＴＮＦα和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达开始增加,再灌流后０．５－１ｈ表达至峰值,并且与组织及血浆中蛋白水平变化趋势一致;与小肠相比,肝,肺组织ＴＮＦα和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达升高的时相晚,且与血浆ＴＮＦα浓度变化不一致。     

失血性休克时重要器官组织内某些细胞因子表达,释放及其作用探讨

目的：探讨休克后重要器官内几种主要细胞因子的变化规律、产生机制及其作用．方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ、ＥＬＩＳＡ等方法观察失血性休克时肝、肺、肾、肠组织内ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达，ＴＮＦα释放，器官功能损害及内毒素组织移位等变化．结果：（１）失血性休克及复苏后，组织内ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６ｍＲＮＡ可相继表达增加，以ＴＮＦα表达最早，ＩＬ－６虽表达较晚，但持续时间较长；（２）休克及复苏后，肝、肺、肾组织及循环内ＴＮＦα水平均有不同程度升高，其中组织内ＴＮＦα水平在数量和持续时间上大于循环内ＴＮＦα水平；（３）失血性休克时肝、肺、肾功能均有不同程度受损；（４）休克后肝、肺、肾组织内毒素水平先后明显升高，且与休克后组织内细胞因子基因表达、ＴＮＦα释放有一定内在联系．结论：休克后组织内细胞因子表达、释放在局部器官损害中起一定作用，其产生与休克后内毒素的组织移位有关．     

转化生长因子β1在人血液动力学超负荷心肌肥大中的作用

为探讨转化生长因子β_１（ＴＧＦβ_１）在人体血液动力学超负荷性心肌肥厚发生机制中的作用,用天狼猩红特染、免疫组织化学及原位杂交技术检测了３２例（左、右室心肌各１６例）肥大心肌组织中胶原、ＴＧＦβ_ｌ ｍＲ－ＮＡ和蛋白的表达情况。结果显示,压力和容量超负荷都可使心肌组织胶原增生,ＴＧＦβ_１ｍＲＮＡ和蛋白表达水平显著增加。 ＴＧＦβ_１ ｍＲＮＡ和蛋白表达水平与心肌细胞横径增加呈显著正相关, ＴＧＦβ_１ ｍＲＮＡ和蛋白表达水平与心肌胶原总量也呈显著正相关。说明ＴＧＦβ_１表达可能是介导人体超负荷性心肌肥厚发生的因素之一。     

胰腺癌nm23—H1 mRNA表达及其临床意义

应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对２７例胰腺癌及７例正常胰腺组织标本中ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达进行了研究，结果表明，７例正常胰腺组织仅１例表达ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ，占１４．２８％，２７例胰腺癌标标有１９例表达ｎｍ２３－Ｈ１占７０．２５％，经Ｘ＾２检验，ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达与胰腺病理分级，临床分期及伴随局部淋巴结转移呈显著相关（Ｐ〈０．０５），ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达可作为胰腺癌     

山莨菪碱对创伤性肺损伤防治作用的实验研究

目的探讨山莨菪碱（６５４－２）对创伤性急性肺损伤（ＡＬＩ）的防止作用及其可能的机制。方法观察６５４－２对创伤性ＡＬＩ兔血浆和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）和白介素８（ＩＬ－８）含量的影响，同时进行组织病理学的光镜和电镜检查，并用原位杂交法检测肺和其他脏器组织中ＴＮＦ－α和ＩＬ－８的ｍＲＮＡ表达。结果致伤前、后给予６５４－２，可使创伤性ＡＬＩ兔血浆及ＢＡＬＦ中的ＴＮＦ－α、ＩＬ－８明显减少、肺组织损伤程度减轻；ＴＮＦ－αｍＲＮＡ和ＩＬ－８ｍＲＮＡ的基因表达主要定位在内脏组织中的Ｍ、ＰＭＮ和血管内皮细胞（ＶＥＣ）内，表达数量明显减少。。结论６５４－２可降低血浆及ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α、ＩＬ－８的含量，使ＴＮＦαｍＲＮＡ和ＩＬ－８ｍＲＮＡ的基因表达下调，从而减轻或在一定程度上防止创伤性ＡＬＩ的发生和发展     

蒺藜总皂甙对TNF-α及IL-1β诱导内皮细胞粘附的抑制作用

目的：观察蒺藜总皂甙（ｇｒｏｓｓｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍ ＴｒｉｂｕｌｕｓｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓＬ,ＧＳＴＴ） 对肿瘤坏死因子－ α（ＴＮＦ－ α） 、白细胞介素－１β（ＩＬ－１β） 诱导的培养新生牛脑微血管内皮细胞（ＣＭＥＣ） 粘附大鼠血单核细胞（ＭＮＣ） 及中性粒细胞（ＰＭＮ） 的影响。方法：用ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β分别诱导传代的ＣＭＥＣ,计粘附ＭＮＣ及ＰＭＮ的细胞数,并计算粘附率。结果：ＣＭＥＣ 经ＴＮＦ－ α处理４ｈ 后,ＣＭＥＣ与ＭＮＣ及ＰＭＮ的粘附率,分别增加到３１．３±０．５％ 和３２．１±０．５％ （对照组分别为１２ ．５±０ ．２％ 和１３ ．８±０ ．４ ％） ,经ＩＬ－１β处理２ｈ 后,则分别为４４．５ ±１．０ ％ 和４４．８ ±０．７ ％ （ 对照组分别为１２ ．９ ±０．６ ％ 和１４．７ ±０．６％ ）。在ＴＮＦ－ α（ＩＬ－ １β） 处理前,用ＧＳＴＴ与ＣＭＥＣ共孵育,预处理２ｈ,则ＧＳＴＴ可剂量依赖性地抑制ＴＮＦ－ α和ＩＬ－ １β的作用。结论：ＧＳＴＴ可抑制ＣＭＥＣ 与ＰＭＮ及ＭＮＣ的粘附。     

丙型、乙型肝炎病毒在人原发性肝内胆管细胞癌中分布的免疫组化研究

应用原位分子杂交及免疫组化方法，使用地高辛标记ＨＣＶ５＇非编码区探针及抗ＨＣＶＮＳ３区Ｃ３３ｃ单克隆抗体检测３５例人原发性肝内胆管细胞癌，癌旁肝组织内ＨＣＶＲＮＡ及其ＮＳ３抗原，发现ＨＣＶＲＮＡ在肝内胆管细胞癌中的阳性率为８３％。ＨＣＶＲＮＡ定位于肝细胞胞浆中，个别病例在淋巴细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞中发现阳性信号。ＨＣＶＮＳ３区Ｃ３３ｃ抗原在肝内胆管细胞癌中的阳性率为８９％，阳性反应主要位于癌细胞胞浆内或肝细胞胞浆内，阳性细胞在癌组织中以灶性分布为主，在癌旁肝组织以弥漫分布为主。ＨＢ－ｘＡｇ在本组病例的阳性率为７７％。本文结果提示，在肝内胆管细胞癌的发生中，除ＨＢＶ以外，ＨＣＶ感染与其发生也有密切关系，是其致病因素之一。     

丙型,乙型肝炎病毒在人原发性肝内胆管细胞癌中分布的免疫组…

应用原位分子杂交及免疫组化方法，使用地高辛标记ＨＣＶ５＇非编码区探针及抗ＨＣＶＧ ＮＳ３区Ｃ３３ｃ单克隆抗体检测３５例人原发性肝内胆管细胞癌，癌旁肝组织内ＨＣＶ ＲＮＡ及其ＮＳ３抗原，发现ＨＣＶ ＲＮＡ在肝内胆管细胞癌中的阳性率为８３％。ＨＣＶ ＲＮＡ定位于肝细胞胞浆中，个别病例在淋巴细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞中发现阳性信号。ＨＣＶ ＮＳ３区Ｃ３３ｃ抗原在肝内胆管细胞癌中的阳性率为８９％，阳性反     

尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂PAI—1mRNAs的表达与人肝 …

对探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ的表达变化与人肝细胞癌浸润,转移间接关系,应用Ｎｏｒｈｅｒｎ印迹交技术对３０例新鲜活检肝组织作ｕＰＡ和ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ表达的研究。     

人β－干扰素在杆状病毒载体与Sf细胞体系中的表达

采用苜蓿尺蠖核多角休病毒（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ，ＡｃＮＰＶ）ＤＮＡ中多角体蛋白基因启动子及其前后序列作为转移载体，将人β－干扰素（ＨｕＩＦＮ－β基因插入转移载体ｐＵＡｃ－５，构建成ｐＡｃ－ＩＦＮ－β载体。该质粒ＤＮＡ与野生型ＡｃＮＰＶＤＮＡ经ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ共转染秋粘虫（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）传代细胞（Ｓｆ９细胞），利用重组病毒不产生多角体蛋白的特征，进行病毒空斑筛选。用核酸杂交方法鉴定出携带ＨｕＩＦＮ－β基因的主组病毒。用重组病毒感染Ｓｆ９细胞，可表达ｒＨｕＩＦＮ－β。在１．０×１０￣６细胞／ｍｌ感染上清中测定ｒＨｕＩＦＮ－β最高活性为３．０×１０￣６ＩＵ／ｍｌ，抗天然ＨｕＩＦＮ－β抗体能完全中和ｒＨｕＩＦＮ－β的抗病毒活性。     

肝脏Gd-DTPA快速动态增强MRI的临床应用──较小HCC与FNH的动态增强表现

目的：运用梯度回波（ＧＲＥ）的快速场回波（ＦＦＥ）技术，对２０例肝肿块进行Ｇｄ－ＤＴＰＡ动态增强，旨在探明不同肿块的增强规律，提高肝肿块的诊断和鉴别诊断能力。材料与方法：选取经过其他影像学检查未确诊的２０例肝肿块，作常规自旋回波（ＳＥ）平扫后作Ｇｄ－ＤＴＰＡＦＦＥ序列快速动态增强扫描，分别测量病灶信号强度（ＳＩｌｅｓｉｏｎ），灶周正常肝脏信号强度（ＳＩｌｉｖｓｒ），背景噪声信号强度和标准差（ＳＩｎｏｉｓｅｃ±ｓ），计算不同病变不同时相的肝－病灶对比噪声比（Ｃ／Ｎ），描出不同肿块（本文只评价其中手术病理证实的１３例肿块，包括肝细胞癌１０例，局灶性结节增生３例的时间－病灶Ｃ／Ｎ曲线。结果：ＨＣＣ与ＦＮＨ两者曲线较接近（包括强化峰值和升降坡度），但在增强早期，ＨＣＣ的Ｃ／Ｎ值高于ＦＮＨ，３分钟以后二者强化值均下降，且ＦＮＨ的Ｃ／Ｎ值大于０，ＨＣＣ的Ｃ／Ｎ值小于０，此差异可持续１５～２０分钟。结论：不同的肝肿块，动态增强后的时间－Ｃ／Ｎ曲线不同，对ＨＣＣ及ＦＮＨ而言，增强早期（１分钟以内）及３分钟以后曲线差异较大，最有助于鉴别诊断。动态增强ＭＲ成像可作为肝脏常规ＳＥ序列成像的一种有效的补充方法。     

肝细胞癌组织中Fas抗原表达和分布的初步研究

目的 探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中的Ｆａｓ抗原的表达和分布。方法 采用抗－Ｆａｓ多克隆抗体,以免疫组化法检测２４例ＨＣＣ患尸解的肝癌组织。结果 肝癌及其癌旁组织中Ｆａｓ抗原检出率分别为４１．７％（１０／２４）和８３．３％（２０／２４）;癌组织中Ｆａｓ抗原表达强度显低于癌旁组织。结论 Ｆａｓ抗原在ＨＣＣ组织中有表达,并可以介导肝癌细胞凋亡。     

急性颅脑损伤后脑脊液中心钠素、精氨酸加压素的含量变化

对３４例急性脑外伤病人脑脊液（ＣＳＦ）心钠素（ＡＮＦ）、精氨酸加压素（ＡＶＰ）的含量进行放射免疫测定。结果表明，脑外伤后４８ｈ和６～１０ｄＣＳＦ中ＡＮＦ含量均明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）；ＡＶＰ含量较对照组明显升高（Ｐ＜０．０１）。伤后２～３周ＣＳＦ中ＡＮＦ水平升高，与对照组相比无明显差异（Ｐ＞０．０５）；ＡＶＰ水平降低，但仍明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。ＧＣＳ≤８分者ＣＳＦ中ＡＶＰ含量高于ＧＣＳ＞８分者（Ｐ＜０．０５）；ＣＳＦ压力≥１．９６ｋＰａ者ＡＶＰ含量高于ＣＳＦ压力＜１．９６ｋＰａ者（Ｐ＜０．０５）。ＡＮＦ的含量变化与ＧＣＳ计分和ＣＳＦ压力无关。提示，ＡＮＦ和ＡＶＰ可能参与了颅脑损伤的发病机制，ＡＮＦ的分泌减少与ＡＶＰ的释放增加可能是导致脑外伤后继发脑水肿的重要因素。动态观察ＣＳＦ中ＡＮＦ和ＡＶＰ的含量变化，对于探讨颅脑损伤后的病理机制，判断脑水肿的严重程度，指导临床治疗具有重要意义。     

α 粒子诱发人胎气管永生化纤维细胞恶性转化相关基因的分析

目的探索辐射诱发细胞恶性转化相关基因。方法本实验利用３’端引物ＨＴ１１Ｍ（Ｇ，Ｃ，Ａ）与５’端引物ＨＡＰ１７～２４所配的２４对引物同时对ＳＨＴＦ（ＳＶ４０ｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄｈｕｍａｎｆｅｔａｌｔｒａｃｈｅａｌｆｉｂｒｏｂｌａｓｔＳＨＴＦ）细胞和经２３８Ｐｕα粒子照射后能在软琼脂上形成克隆的此细胞（αＳＨＴＦ）的ｍＲＮＡ进行反转录ＰＣＲ扩增，６％测序胶电泳，放射自显影。结果发现有２３条基因片段在αＳＨＴＦ细胞中表达，ＳＨＴＦ细胞中不表达。回收差异的基因片段，随机取其中１２条重新扩增后得到６条扩增片段。其中Ｃ１７－５，Ｃ２３－１两片段经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｄｏｔ杂交后，均与αＳＨＴＦ细胞ＲＮＡ有强阳性杂交信号，与ＳＨＴＦ细胞ＲＮＡ无杂交信号。结论本实验证实了ＳＨＴＦ和αＳＨＴＦ细胞的基因表达有差异存在。     

大鼠油酸肺损伤早期肺组织一氧化氮合成酶活性变化、基因表达及其细胞定位

目的观察油酸肺损伤早期肺组织一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性变化、诱导型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）基因表达变化及其细胞定位。方法３Ｈ－胍氨酸测定法测定ＮＯＳ活性；应用３２Ｐ标记核酸探针狭线杂交技术和地高辛标记核酸探针原位杂交技术检测油酸肺损伤大鼠肺组织。结果正常肺组织ＮＯＳ活性很低且无ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达；急性肺损伤后ｉＮＯＳ活性升高且与ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达相一致；硝基左旋精氨酸（ＬＮＮＡ）可抑制ｉＮＯＳ活性并下调ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达；伤后表达ｉＮＯＳｍＲＮＡ的阳性细胞可能为肺泡巨噬细胞、粒细胞、支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、平滑肌细胞、内皮细胞。结论急性肺损伤后肺组织ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达是一个突然启动的主动合成过程；ＬＮＮＡ抑制ＮＯ产生可能与其下调ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达有关；肺组织表达ｉＮＯＳｍＲＮＡ阳性细胞的多样性可能与ＮＯ损伤肺组织的复杂性有关。     

吞噬细胞释放的氧自由基和肿瘤坏死因子增加α粒子致细胞转化频率的研究

阐明慢性炎症时吞噬细胞释出的某些内源性因子在辐射致癌中的作用。方法以Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２和原代ＳＨＥ为靶细胞，用２３８Ｐｕ为体外α照射源，用转化灶形成法观察ＰＭＡ及其刺激人外周血产生的过量自由基、调理酵母多糖刺激Ｕ－９３７细胞释放的ＴＮＦ－α等炎性因子对α粒子照射细胞转化频率（ＴＦ）的增加效应。结果ＰＭＡ和它刺激的人血使０．５Ｇｙα粒子照射的Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２细胞的ＴＦ分别增高２．１和２．８倍。Ｕ－９３７释放的ＴＮＦ－α炎症因子ＴＦ增高１２倍；用抗ＴＮＦ－α抗体中和后，证明Ｕ－９３７上清中仍有其他促癌因子存在。０．５Ｇｙα粒子照射的ＳＨＥ细胞在体外长期传代生长对ｈｒＴＮＦ－α具有依赖性，由此得到的４０代的细胞具有致瘤性。结论慢性炎症条件下，中性粒细胞和巨噬细胞释出的过量自由基和ＴＮＦ－α等因子在低剂量辐射致癌中起重要作用。