抗-HCV分片段试剂对抗-HCV阳性标本的确认价值探讨

目的　探讨抗 HCV分片段试剂对抗 HCV阳性标本的确认价值。方法用抗 HCV试剂对献血者初复检中两家常规ELISA抗 HCV阳性、一家试剂单阳的标本进行检测 ,结合HCV PCR RNA、ALT指标及部分献血者半年的回访观察。结果　 2 2例两家ELISA抗 HCV阳性标本 ,抗 HCV分片段试剂阳性 2 0例 ,可疑 2例 ,PCR RNA阳性 1 5例 ;32例甲试剂单阳性标本 ,抗HCV分片段试剂阳性 2例 ,可疑 4例 ,PCR RNA均阴性 ;2 8例乙试剂单阳性标本 ,抗 HCV分片段试剂阳性 2例 ,可疑 2例 ,PCR RNA均阴性。 32例抗 HCV阳性 ,分片段试剂、PCR RNA均阴性的献血者经半年 3次随访 ,4个月随访 7/ 32为原同一家试剂单阳性 ,6个月 9/ 32为原同一家试剂单阳性 ,分片段试剂、PCR RNA、ALT均为阴性。结论分片段试剂比常规ELISA抗 HCV有较高的特异性     

献血者筛选中丙型肝炎病毒的确证

作者使用不同的酶联免疫测定试剂相结合的方法对第二代EIA筛选试剂检测为阳性的血清进行血清学确证。总共收集了508份志愿献血者的血清。为排除同一献血者的重复样品,收集限3个月以内。所有血清先用第二代HCV ELA 试剂筛选(Ab-bott和Ortho)复查。作者选出用这两种试剂测定都为阳性的195份血清,作进一步研究。用HCV EIA补充试剂,Monolisa抗-HCV试剂和Ag520EIA再测定。Monolisa抗-HCV含有核心蛋白(NC-450)和部分NS_3蛋白(409-1-1)。Ag520EIA只有氨基端部分(氨基酸6—77)的核心蛋白。根据初筛试验反应的强弱,将标本分为2组,第     

现行血液筛查策略下HCV反应性结果分析及利用

目的 分析抗-HCV反应性献血者检测结果,甄别献血者HCV感染情况,讨论对反应性献血者分类管理的可行性.方法 按照献血者HCV检测结果(2遍ELISA、1遍NAT),将HCV检测反应性献血者标本分为3组(抗-HCV和HCV RNA均为反应性的标本组、单独HCV RNA反应性标本组、单独抗-HCV反应性标本组).分析20...     

献血者血清中HCV NS3和核心蛋白抗原的检测及临床意义

丙型肝炎病毒(HCV)主要经血液传播, 目前尚无预防疫苗,阻断其传播的主要手段为用抗-HCV试剂检测筛查献血者血及血液制品.然而,抗-HCV-IgG阳性并不能判断献血者或病人是否携带HCV,抗-HCV 抗体阴性者体内仍有可能带有HCV,所以输血后丙型肝炎仍有一定的发生率.笔者利用基因工程表达的HCV NS3蛋白及核心蛋白免疫小鼠所制备的单克隆抗体,建立了检测HCVNS3和核心蛋白的ELISA法,旨在更好地判断献血者和病人的HCV携带情况,减少输血后肝炎的发生.     

抗-HCV初、复检不同试剂检测对比分析

为了提高血液质量 ,保证献血者和受血者的安全 ,按照卫生部《供血者体格检查标准》的要求 ,每袋血液的抗 - HCV必须经过初检和复检 ,确认抗 - HCV阴性后方可用于临床。目前国内的抗 - HCV酶免试剂稳定 ,但是不同厂家在抗原包被上有所差异 ,所以在灵敏度上也有差异。下面笔者对两种不同的试剂检测抗 - HCV的结果分析报告如下。1　对象和方法1.1　对象　街头无偿献血者血样标本 95 15人份。1.2　方法　 1仪器 :Wellwash MK2洗板机 ,Wellscan MK3酶标仪 (芬兰产 )。 2方法 :血清抗 - HCV检测 ,初检试剂盒由洛阳华美公司提供 ,复检试剂…     

2012～2014年无偿献血者抗-HCV筛查结果分析

目的了解盐城地区献血者丙型肝炎病毒(HCV)感染情况。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测献血者抗-HCV,用荧光定量聚合酶链反应检测HCV RNA。结果盐城地区献血者抗-HCV阳性率为0.07%(109/163 782);109例抗-HCV阳性者中,80例为单试剂阳性,29例为双试剂阳性;初次献血者抗-HCV阳性80例,重复献血者抗-HCV阳性29例;符合核酸检测要求的72例单试剂抗-HCV阳性者均为HCV RNA阴性。结论盐城地区献血者抗-HCV阳性率低于普通人群,近三年献血者抗-HCV阳性率没有变化,抗-HCV单试剂阳性者核酸检测均为阴性。     

HCV感染献血者的血小板抗原(HPA)1-18等位基因多态性初步分析

目的探讨HCV感染与血小板抗原基因之间的关系。方法提取114例抗-HCV ELISA双试剂检测均有反应性的献血者血清标本的RNA,做HCV RNA荧光定量检测,随访后将其分为HCV持续感染组(39例)和HCV自限清除组(75例);提取人基因组,用PCR-SSP方法对人血小板抗原(HPA)基因进行分型;比较HCV感染献血者与本地合格献血者和其他地区合格献血者HPA基因分型情况,分析HCV感染与HPA分型之间的关联性。结果与合格献血者相比,HCV感染献血者的HPA分型有不同表现(P0.05);HPA基因多态性在HCV感染不同转归献血者中明显不同(P0.05)。HCV持续感染组和对照组相比,HPA等位基因多态性有明显差异(P0.05);HCV自限清除组和对照组的HPA-3a和HPA-3b基因频率分别为:40.70%vs 61.00%和59.30%vs 39.00%(P0.01)。结论HPA-3的基因多态性与HCV易感性和自限清除是否具有一定的关联性,值得进一步研究。     

丙型肝炎病毒（HCV）携带献血者及丙型肝炎（HC）患者HCV基因分型检测

丙型肝炎病毒 (HCV)具有高度变异性 ,以其核酸序列不同可将其分为不同的型 ,不同型之间的流行特点、致病性、相应的治疗方法及预后情况存在差异。我们采用套式 RT- PCR法对HCV携带献血者及 HC患者进行基因分型检测 ,以了解本地区不同人群 HCV基因型流行情况。1　对象和方法1.1　对象　本中心无偿献血者抗 - HCV检测阳性血样 ,HC患者 (平均年龄 4 7岁 )样品由河南省人民医院检验科提供 ,经荧光定量 PCR检测 HCV阳性。1.2　试剂　献血者抗 - HCV EL ISA(酶联免疫实验 )检测试剂 :初检为北京万泰公司产 ,复检美国强生 ORTHO公…     

两种抗HCV试剂检测献血者结果不符追踪观察

目的探讨两种抗HCV试剂检测结果不符标本在抗HCV分片段试剂不同区抗原的反应性,随访和跟踪该类人员在抗HCV和抗HCV分片段试剂中的反应变化.方法利用抗HCV分片段试剂对国家抗HCV参考品及抗HCV试剂检测不符的标本进行测试,并对可跟踪的献血者在6个月后再进行抗HCV及抗HCV分片段试剂检测.结果国家抗HCV参考品中,29份阳性标本均出现二片段或二片段以上阳性,阴性标本全部阴性;103份抗HCV试剂结果不符标本中有6例为二片段阳性,26例为单片段阳性,以NS3、C区为主;6个月后对可以跟踪的86例献血员进行检测,37例两种抗HCV试剂转阴,16例两种试剂均转为阳性,6例抗HCV分片段阴性者己转为一个或二个片段阳性.结论对抗HCV试剂阳性结果不符标本同时应用HCV分片段试剂检测有利于降低HCV阳性血清漏检率,跟踪和复检有助于了解阳性结果不符标本在抗HCV及抗HCV分片段试剂中的反应变化,排除假阳性.     

RT-PCR分析两厂家ELISA试剂检测血液抗-HCV的效果

目的　观察用两厂家ELISA试剂对血液抗 HCV检测的实际效果。方法　应用两厂家ELISA抗 HCV试剂检测 70 0 0份献血者样本 ,并对阳性的 4 2份血样用RT PCR技术用HCVRNA分析。结果　用两厂家试剂(ELISA法 )同时检测血液抗 HCV ,可提高抗 HCV阳性的检出率 36 %～ 4 3% ;用PT PCR技术对ELISA法检测抗 HCV阳性结果进行确证 ,证实两次检测可提高HCV检出率 31%～ 4 1%。结论　用两厂家ELISA法试剂初复二次检测血液的抗 HCV能提高对HCV的检出率     

献血者抗-HCV及HCV RNA的检测分析

目前,国内采供血机构筛查献血者HCV抗体是采用两种不同试剂进行检测,其中任何一种试剂检测阳性,就淘汰该献血者。为缩短抗HCV检测的“窗口期”,一些发达国家已将HCV核酸检测用于献血者筛选。我国虽未将HCV核酸检测列入献血者的强制筛查项目,但国内一些血站已尝试将HCV核酸检测用于抗HCV阴性的献血者[1]。为进一步探讨献血者抗-HCV及HCVRNA检测状况,笔者对4 912例血液标本进行了酶免疫学及荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,报告如下。1对象和方法1.1对象郑州市无偿献血标本。1.2试剂与仪器HCV PCR荧光定量试剂盒,中山医科大学达安基因诊断中心产;抗-HCV酶免试剂盒,分别购自A、B两家试剂公司;STAR-FAM E自动化酶免分析系统,瑞士H am ilton公司产,PE 570 PCR基因扩增仪,美国PE公司产。1.3方法1.3.1免疫学检测采用自动化酶免分析系统,利用两种酶免试剂检测无偿献血标本,并收集标本,其中两种试剂均阳性标本26份,及一种试剂阳性一种试剂阴性的标本20份,均阴性标本4 866份。1.3.2 HCV核酸检测将两种酶免试剂检测均阴性标本,24份混在一起进行检测[2],其余单份...     

一种国产HCV RIBA试剂性能评价

目的评价国产丙型肝炎病毒抗体重组免疫印迹(HCV RIBA)试剂在检测anti-HCV阳性献血者中应用价值。方法采用国产RIBA试剂对107例进口酶联免疫吸附试验(ELISA)检出的抗-HCV阳性样本进行补充实验。平行HBV/HCV/HIV三联单样本核酸定性检测HCV RNA,对RIBA试剂性能进行评价。结果 RIBA阳性检出率50.47%(54/107),RIBA阳性样本中HCV RNA检出率为59.26%(32/54)。随着RIBA结果中条带数增加,HCV RNA检出率增加。RIBA试剂NS3抗原条带检出率最高(90.91%),33例HCV RNA阳性样本NS3均为阳性,阳性符合率100%,两者中等相关性(Spearman相关系数rs=0.486,P0.01),52.85%NS3阳性样本未检测出HCV RNA(37/70),结果一致性较差(Kappa=0.382,P0.001)。22例RIBA阳性/HCV RNA无反应性样本中2例HCV RNA定量检测阳性,另一进口抗-HCV酶免检测试验结果阳性。结论国产RIBA试剂作为检测献血者HCV感染补充实验具有一定应用价值。RIBA可疑结果可以检出部分极低载量HCV RNA样本。     

两种抗HCV试剂检测献血者结果不符追踪观察

目的 探讨两种抗HCV试剂检测结果不符标本在抗HCV分片段试剂不同区抗原的反应性，随访和跟踪该类人员在抗HCV和抗HCV分片段试剂中的反应变化。方法 利用抗HCV分片段试剂对国家抗HCV参考品及抗HCV试剂检测不符的标本进行测试，并对可跟踪的献血者在6个月后再进行抗HCV及抗HCV分片段试剂检测。结果 国家抗HCV参考品中，29份阳性标本均出现二片段或二片段以上阳性，阴性标本全部阴性；103份抗HCV试剂结果不符标本中有6例为二片段阳性，26例为单片段阳性，以NS3、C区为主；6个月后对可以跟踪的86例献血员进行检测，37例两种抗HCV试剂转阴，16例两种试剂均转为阳性，6例抗HCV分片段阴性者己转为一个或二个片段阳性。结论 对抗HCV试剂阳性结果不符标本同时应用HCV分片段试剂检测有利于降低HCV阳性血清漏检率，跟踪和复检有助于了解阳性结果不符标本在抗HCV及抗HCV分片段试剂中的反应变化，排除假阳性。     

血浆miR-122在抗-HCV阳性献血者中表达的动态分析

目的动态分析抗-HCV阳性献血者血浆miR-122的表达特点及与HCV感染诊断指标的关联。方法对133名抗-HCV阳性献血者、24名健康献血者及15名确证抗-HCV阳性追踪献血者血液标本抽提血浆miRNA,以实时荧光定量PCR法检测血浆miR-122,分析血浆miR-122相对表达量与HCV RNA、抗-HCV临界值指数(COI)等指标关联性。结果 ROC曲线分析:miR-122在抗-HCV+/HCV RNA+组和抗-HCV+/HCV RNA-组中诊断丙型肝炎的AUC(ROC曲线下面积)为0.830(95%CI:0.755-0.889),区分抗-HCV+/HCV RNA+组和抗-HCV+/HCV RNA-组的敏感性和特异性分别为74.7%和82.4%。追踪15例抗-HCV+/HCV RNA+献血者血浆miR-122表达明显降低(P0.05)。结论血浆miR-122与HCV感染密切相关,确证HCV RNA感染献血者血浆miR-122随时间迁移表达降低。     

两厂家试剂检测血液抗-HCV的必要性探讨

根据卫生部颁布的《血站管理办法》献血者血液检查标准的要求 ,对献血者血液检测抗 HCV时 ,要用两厂家试剂进行初检和复检 ,二次检验抗 HCV均阴性表明检验合格。抗 HCV检验主要应用酶联免疫法 (ELISA法 ) ,统计结果证明 ,目前国产抗 HCV酶免疫试剂的厂间差异较大 ,主要是抗原片段包被上有所不同。为进一步了解应用两种不同厂家试剂检验抗 HCV的必要性和可信度 ,对初复检二次检验结果进行统计分析 ,并采用RT PCR技术对两厂家 (ELISA法 )试剂检测抗 HCV阳性样本进行HCVRNA检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1　样本来源　…     

国产ELISA抗-HCV试剂的应用评价

目前 ,我国采供血机构对献血者血液HCV筛查采用两种不同厂家生产的ELISA法抗 HCV试剂 ,在实践工作中两种试剂检测结果可能出现较大差异。为此 ,很多学者对献血者筛查中采用两种试剂检测的必要性作了大量的探讨[1,2 ] 。为了在献血者血液筛查中合理匹配两种不同厂家试剂以确保血液检测质量 ,笔者随机选择 2 7名经ELISA抗 HCV血液检测为阳性的无偿献血者进行了回顾性调查。现将结果报告如下。材料与方法1　标本　待检血清 2 7份 ,系 2 0 0 0年 7月 2 0 0 2年12月经ELISA抗 HCV检测为阳性的无偿献血者血液。所有待检血液均按常规…     

第三代重组免疫印迹试验测定丙型肝炎病毒的可靠性

1993年第三代抗-HCV ELISA试剂(HCV ELISA-3)和第三代重组免疫印迹试剂(RIBA-3)在欧洲已开始使用,这两种试剂均含有NS5区抗原。RIBA-3含有再组c33与NS5蛋白,以及合成肽c100和c22;RIBA-2则均为重组抗原,即c33、c100、c22和5-1-1。为了比较RIBA-3与RIBA-2的敏感性与特异性,作者将593名HCV RNA阳性和1498名HCV RNA阴性试验对象RIBA-2测试资料同220名HCV RNA阳性和530名HCV RNA阴性试验对象RIBA-3测试资料作了对比分析。所有标本均为抗-HCV ELISA-2阳性。在对比分析时,以HCV RNA PCR结果为标准以确定     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的研制及初步应用

目的　研制丙型肝炎病毒核心抗原 (HCV cAg)ELISA检测试剂 ,用于诊断早期丙型肝炎。方法　用基因工程表达的HCV cAg ,免疫Balb/c小鼠 ,制备抗HCV cAg单克隆抗体 ,建立检测HCV cAg双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA) ;以此检测 12 5份抗 HCV、抗 HIV、抗 TP阴性 ,但单项ALT高的献血者血浆。结果　 12 5份单项ALT高的献血者血浆中检出 9份HCV cAg阳性。结论　HCV cAg双抗体夹心ELISA试剂 ,有望用于早期丙型肝炎诊断。     

五种抗—HCV试剂比较

丙型肝炎病毒HCV主要通过血液传播,近几年来,我国献血者,尤其是献浆者中,发生HCV感染时有存在。目前,国内的采供血机构都使用ELISA试剂作献血者的抗－HCV检测,为提高抗－HCV的检出率,需尽可能地选择灵敏度高、特异性强、稳定性好的试剂。我库1999年1月～2000年9月,已使用过五种国内不同厂家生产的抗－HCV ELISA试剂,现将这五种试剂的质量信息情况报道如下： 1 材料与方法 1．1 试剂 选自国内五个厂家抗－HCV的ELISA试剂,并标号为A、B、C、D、E。 1．2 质控血清 2NCU／ml抗－HCV质控血清（9906、0005）从省…     

抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检测分析

目的探讨抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检测状况。方法采用HCV核酸扩增酶免检测技术对76名抗-HCV阳性反应献血者血清做HCV核酸检测。结果76例抗-HCV阳性反应血清中,2种酶免试剂检测抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检出率48.0%,1种试剂检测抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检出率9.80%。结论抗-HCV阳性、HCV核酸检测也呈阳性者为HCV感染者无疑;但抗-HCV阳性而HCV核酸检测阴性者,可能与抗-HCV检测试剂的特异性、HCV核酸检测的灵敏度、病毒血症消退或病毒基因变异等多项因素有关。