IFN-β临床应用研究进展

利用脂质体包被IL-2理论上能达到IL-2用量小、副作用少、疗效提高等效果.们前期应用脂质体IL-2联合CD3AK细胞治疗鼠肝黑色素转移瘤,取得了满意的实验结果.在此基础上,再探讨脂质体IL-2联合TIL、CY抗鼠肝癌的作用,旨在证明脂质体IL-2的优越性.1 材料与方法制备鼠H22肝癌皮下荷瘤模型,然后采用机械、酶消化和不连续密度梯度离心分离获得TIL,体外掺入rIL-2(1000U/ml)后培养、扩增.参照Konno及我所建立的制备脂质体方法制备复层大囊泡rIL-2脂质体(MLV-rIL-2).取昆明鼠40只随机分4组(即对照组、TIL CY组、TIL CY rIL-2组、TIL CY MLV-rIL-2组),每组10只进行体内治疗.后3组治疗开始前3天均用环磷酰胺(CY)腹腔注射,每日1次CY50mg/kg,然后尾静脉注射TIL,每次每只     

MDM2-p53反馈环增强卵巢癌对顺铂敏感性的体内实验研究

  目的 探讨MDM2-p53反馈环对卵巢癌裸鼠移植瘤药物敏感性的影响及其作用机制。方法 将p53 为野生型的人类卵巢癌细胞A2780种植于裸鼠背部皮下形成移植瘤模型，将动物随机分为5组，瘤内注射pCMV-MDM2-脂质体＋顺铂为治疗组，仅注射顺铂为对照Ⅰ组，注射pCMV-MDM2-脂质体为对照Ⅱ组，注射空载体pCMV-脂质体为对照Ⅲ组，注射RPMI1640为对照Ⅳ组；每组6只。观察裸鼠一般情况、肿瘤生长速度，测量瘤体大小及重量；取肿瘤组织进行免疫组化染色，Western blot进行MDM2、p53蛋白表达检测，流式细胞技术进行细胞周期检测。结果 治疗组肿瘤体积[（0.321±0.086）cm3]显著小于对照Ⅰ组[（1.832±0.165）cm3]、对照Ⅱ组[（3.251±0.179）cm3]（t值分别为21.213、26.317，P值均＜0.05）；重量[（0.513±0.089）g]也显著小于对照Ⅰ组[（1.412±0.134）g]、对照Ⅱ组[（2.665±0.153）g]（t值分别为12.543、15.312，P值均<0.05）；对照Ⅰ组与对照Ⅱ组之间差异有统计学意义（P＜0.05）；而对照Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组间差异无统计学意义。治疗组可见明显MDM2蛋白表达，而无p53蛋白表达，并且出现明显S期阻滞，而对照I组主要出现G2／M期阻滞。结论 MDM2基因转染可增强卵巢癌裸鼠移植瘤对顺铂的敏感性，这是通过抑制p53表达并使癌细胞G1检查点丧失而实现的。     

脑转移瘤的X刀治疗与手术治疗疗效比较分析

目的 :探讨X刀在脑转移瘤治疗中的临床价值。方法 :回顾分析X刀治疗的 30例脑转移瘤患者 ( 4 1个病灶 ) ,脑转移瘤直径 ( 2 .0 7± 1.7)cm ,平均剂量 2 2Gy ,肿瘤中心剂量 ( 2 8± 8)Gy ,边缘剂量 ( 16± 4 )Gy。比较分析手术加全脑放射治疗 2 6例 ,直径 ( 3.0 7± 0 .7)cm ,平均放疗剂量 4 6Gy。结果 :X刀治疗组 1年生存率 53% ,手术加全脑放疗组 4 3% ,1年后局部肿瘤控制率分别为 83%和 75% ,1年后因神经系统疾患死亡率分别为 39%和 4 1%。结论 :X刀是一种安全、有效和微侵袭的治疗方法 ,适用于中小体积脑转移瘤的治疗     

脂质体介导VEGF反义寡核苷酸对肺癌微血管密度及VEGF表达的抑制作用

背景与目的血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在肿瘤的血管形成和瘤细胞浸润等生物学行为中发挥了重要作用。本研究的目的是探讨脂质体介导的VEGF反义硫代寡核苷酸对C57BL/6小鼠Lewis肺癌微血管密度及VEGF表达的抑制作用。方法40只C57BL/6小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌细胞后,随机分为4组:VEGF反义寡核苷酸组(ASODN)、VEGF正义寡核苷酸组(SODN)、VEGF错义寡核苷酸组(MODN)及对照组,前三组分别皮下注射经脂质体包裹的ASODN、SODN及MODN进行治疗,对照组只注射脂质体,每周2次,连续4周。观察各组小鼠肿瘤的生长情况,测量肿瘤体积。光学显微镜和电子显微镜下观察肿瘤组织形态学改变及超微结构变化。免疫组化及RT-PCR法检测微血管密度、VEGF蛋白及VEGFmRNA表达水平。结果对照组瘤重为(7.83±0.78)g,ASODN组瘤重为(4.49±0.43)g(P<0.01);SODN组瘤重为(7.73±0.69)g,MODN组为(7.78±0.75)g,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。ASODN组、SODN组、MODN组抑瘤率分别为42.6%、5.1%、3.2%。ASODN组VEGF蛋白、VEGFmRNA表达水平和MVD均明显低于对照组、SODN组及MODN组(P<0.01)。结论肿瘤原位注射反义VEGF硫代寡核苷酸能降低肺癌微血管密度及VEGF的表达,进而抑制肿瘤的生长。     

狼毒蛋煎剂毒性及抑瘤效应的实验研究

目的 :研究狼毒蛋煎剂的毒性和对肉瘤S180 、HepA肿瘤细胞的抑瘤作用。方法 :①半数致死量(LD50 )毒性实验 ;②抑制HepA肿瘤细胞实验 ;③抑制肉瘤S180 实验。结果 :毒性实验 :口服狼毒蛋煎剂组LD50 >12 0 ,腹腔注射狼毒蛋煎剂组LD50 为 4 9113;口服狼毒煎剂组LD50 >12 0 ,腹腔注射狼毒煎剂组LD50 为 1 86 6 8。抑制HepA肿瘤实验 :狼毒蛋煎剂组瘤重 (0 714± 0 149)g ,5 FU组平均瘤重(0 52 1± 0 114)g ,生理盐水组平均瘤重 (9 82± 0 2 13)g。狼毒煎剂组与生理盐水组相比P <0 .0 5。抑制肉瘤S180 实验狼毒蛋煎剂组平均瘤重 1 17g ,生理盐水组平均重 2 4 6g ,两组比较P <0 .0 1。结论 :狼毒蛋煎剂能安全有效地抑制HepA肿瘤细胞和肉瘤S180 。     

紫杉醇对Lewis肺癌抑制作用及机理的研究

目的　探讨紫杉醇对Lewis肺癌生长和转移的抑制作用。方法　将Lewis肺癌细胞接种于C5 7BL/6小鼠皮下 ,腹腔注射紫杉醇 1 0mg/kg ,连续 1 0d。处理动物后测量治疗组及对照组皮下瘤重、肺转移灶计数 ,应用流式细胞术测定肿瘤细胞凋亡率 ,并进行光镜和电镜观察。结果　对照组和治疗组皮下瘤重分别为 (2 .833± 0 .0 74)g和 (0 .5 88± 0 .0 40 )g(P <0 .0 1 ) ,肺转移灶计数分别为 (5 .5 0 0± 0 .92 6 )个和(1 .1 6 7± 0 .75 3)个 (P <0 .0 1 ) ,肿瘤细胞凋亡率分别为 9.0 0 2 %和 2 5 .772 % (P <0 .0 1 )。电镜观察紫杉醇组可见典型的凋亡细胞和凋亡小体。结论　紫杉醇可明显抑制小鼠Lewis肺癌的生长和转移 ,并可诱导肿瘤细胞凋亡     

肺癌胸水中肿瘤浸润淋巴细胞的生物学活性研究

目的 :探讨肺癌胸水中肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)的生物学活性 ,便于更好地应用于临床。方法 :用白细胞介素2 (IL 2 )诱导培养肺癌胸水TIL ,按常规法计数TIL细胞增殖量 ,采用流式细胞仪分析TIL细胞表型及MTT法检测其杀瘤活性。结果 :经IL 2诱导培养TIL 2 1天后 :TIL增殖大于 10 0 0倍的患者有 17例占 77%。CD3差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,CD4、CD8差异有显著性 (P <0 0 1) ,而CD4 /CD8比值高达 3 5 3± 0 82 ,并且在 2 1天时TIL具有较高的细胞毒性。结论 :肺癌胸水中的TIL体外诱导培养 2 1天时TIL具有较强的生物活性 ,此时用于胸水治疗可取得可靠的疗效     

反义VEGF基因及内皮抑素基因转染对人巨细胞肺癌生物学行为的影响

目的　探讨反义VEGF基因和内皮抑素基因联合转染在抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长转移中的作用。方法　反义VEGF12 1cDNA脂质体法转染人肺巨细胞癌细胞 (PG AS VEGF) ,先行转基因细胞裸鼠异种移植 ,之后电脉冲介导PsectagA 内皮抑素基因转染 ,观察反义VEGF基因和内皮抑素转染对肿瘤血管生成和肿瘤生长转移的调节作用。结果　肿瘤内微血管密度在PG AS VEGF、转染空载体组分别为 40 .6 7± 9.35和5 8.34± 10 .5 2 (P <0 .0 5 ) ;裸鼠体内接种PG AS VEGF细胞后 18天 ,PG AS VEGF、转染空载体组肿瘤体积分别为 (0 .9779± 0 .2 42 1)和 (1.5 2 10± 0 .415 0 )cm3(P <0 .0 5 ) ;PG AS VEGF、转染空载体组淋巴结转移率分别为16 .7% (2 /12 )和 5 0 % (6 /12 ) (P <0 .0 5 )。在肿瘤局部行PsectagA 内皮抑素基因转染的PG AS VEGF瘤 ,当肿瘤生长到 2 1天时 ,肿瘤生长受到明显抑制 ,PsectagA 内皮抑素基因转染组与PsectagA空载体转染组肿瘤体积分别为 (1.5 889± 1.1396 )和 (3 .398± 2 .6 42 )cm3(P <0 .0 5 ) ;两者肿瘤淋巴结转移率分别为 12 .5 % (1/8)和 75 %(6 /8) (P <0 .0 5 )。结论　内皮抑素基因转染对反义VEGF基因转染的PG细胞裸鼠体内生长和淋巴结自发性转移有协同抑制作用。     

人血管生成素-1基因转染对胃癌细胞体内致瘤力及血管生成的影响

目的　研究人血管生成素 1 (Ang1 )基因转染人胃癌细胞系SGC790 1后 ,对肿瘤细胞生物学特性以及对小鼠体内致瘤力和血管生成的影响 ,探讨其在胃癌发生及血管生成中的作用。方法构建重组正、反义Ang1真核表达载体 ,采用脂质体转染法 ,将重组载体转染人胃癌细胞系SGC790 1 ,分别得到正、反义载体稳定转染的细胞株 7Ang1 +和 7Ang1 - ,并以半定量PCR及Westernblot方法鉴定转染效果。以MTT比色试验绘制生长曲线 ;以流式细胞仪检测细胞周期分布。通过裸鼠成瘤实验 ,比较转染前后小鼠体内成瘤能力的差别 ,并检测肿瘤组织微血管密度 (MVD) ,判定血管生成程度。结果　 7Ang1 -组细胞Ang1在蛋白及mRNA水平的表达均下调。体内成瘤实验结果显示 ,空载体对照组、7Ang1 +组和 7Ang1 -组瘤体的平均重量 ( x±s)分别为 6 2 4 .0 0± 77.78,6 5 2 .6 7± 1 32 .0 7和2 93.0 0± 95 .5 4 ,7Ang1 -组的细胞成瘤性显著低于 7Ang1 +组和空载体对照组 (P <0 .0 1 )。空载体对照组、7Ang1 +组和 7Ang1 -组肿瘤组织的MVD( x±s)分别为 8.4 4± 1 .33,8.78± 1 .92和 6 .0 0± 1 .73,7Ang1 -组细胞的血管生成显著减少 (P <0 .0 1 )。结论　Ang1在胃癌形成和发展中可能通过诱生血管起促进作用 ,通过反义技术可部分阻断这种作用。     

Celecoxib 在人癌裸鼠移植瘤抗癌与放射增敏的作用机制研究

 目的　探讨选择性环氧化酶-2 抑制剂celecoxib 抗癌及放射增敏作用的可能机制。方法　构建人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,celecoxib 和/ 或移植瘤局部放射干预,检测移植瘤生长延缓、移植瘤组织中环氧化酶-2 与前列腺素E2 含量的变化,并分析此变化与移植瘤生长延缓的关系。结果　移植瘤最大径从8mm 生长至10mm 所需的时间,空白对照组为(4. 42 ±0. 78) d ,单纯放射组为(6. 25 ±0. 70) d ,celecoxib组为(7. 14 ±1. 06) d ,celecoxib + 放射联合组为(10. 62 ±2. 06) d ;Western Blot 显示4 组移植瘤组织中环氧化酶22 水平无明显差异;前列腺素E2 (pg/ 100mg) 含量分别为:空白对照组69. 07 ±5. 42 ,单纯放射组47. 4 ±15. 94 ,单纯celecoxib 组28. 62 ±4. 48 ,celecoxib + 放射联合组为43. 2 ±11. 73 ,与空白对照组比较差异均有显著性( P = 0. 009 、0. 005 、0. 026) ;但celecoxib + 放射联合组与单纯放射组的前列腺素E₂ 含量无显著差异( P = 0. 28) ;celecoxib 引起的移植瘤生长延缓与前列腺素E₂ 含量降低正相关( r = 0. 741) 。结论　Celecoxib及移植瘤局部放射均能延缓移植瘤生长,不影响环氧化酶-2量的表达,但均能引起前列腺素E₂ 含量的降低;celecoxib 引起的移植瘤生长延缓可能与环氧化酶-2 活性被抑制后前列腺素E₂ 含量的降低有关。