线粒体膜通透性转换孔在非酒精性脂肪肝细胞凋亡中的作用

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种肝组织病理学改变与酒精性肝病相类似但无过量饮酒史的临床综合征.但其发生机制尚不清楚.实验证明,在NAFLD进展过程中,细胞凋亡、坏死的比例亦在不断增加,提示细胞凋亡与NAFLD发生发展密切相关[1].     

山楂叶总黄酮对NAFLD肝细胞凋亡影响的研究

目的探讨山楂叶总黄酮（HLF）对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）肝细胞凋亡的影响。方法采用肝L-02细胞诱导NAFLD模型,分为正常组、低剂量组、高剂量组、模型组4组,采用不同浓度HLF进行干预,低剂量组HLF100滋g/ml,高剂量组HLF400滋g/ml。观察细胞的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,Westernblot检测凋亡蛋白表达的变化。结果模型组细胞形态学发生改变,HLF药物干预后,高剂量组细胞形态学改变明显好于低剂量组及模型组;模型组与HLF高剂量组早期凋亡率[（14.63±1.82）%、（6.75±1.83）%]比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;模型组与HLF高剂量组中晚期凋亡率[（11.36±2.94）%、（3.49±1.03）%]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;HLF高、低剂量组中晚期凋亡率[（3.49±1.03）%、（8.79±1.05）%]比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;模型组与HLF高、低剂量组总凋亡率比较,差异有统计学意义（P＜0.05或0.01）。Bax、Cyt-C和Caspase-9促凋亡蛋白在模型组中表达明显增高,Bcl-2、MitochondriaCytochromeC抗凋亡蛋白在高剂量组及正常组中高表达;模型组与高、低剂量组凋亡蛋白Bax/Bcl-2的比值[（1.999±0.376）、（0.144±0.023）、（0.399±0.045）]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;模型组与高、低剂量组凋亡蛋白Cytosolic/MitochondriaCytochromeC的比值[（0.287±0.037）、（0.041±0.006）、（0.097±0.024）]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;模型组与高、低剂量组凋亡蛋白CleavedCaspase-9的表达[（0.060±0.005）、（0.030±0.003）、（0.030±0.003）]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论NAFLD细胞模型存在凋亡现象,HLF药物可能通过调节Bcl-2、Bax、CytochromeC、Caspase-9等相关凋亡蛋白的表达,干预肝细胞的凋亡。     

非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞凋亡与线粒体膜通透性转换孔开放的关系

目的通过研究肝细胞凋亡及线粒体膜通透性转换孔（MPTP）开放在大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）形成中的作用,
探讨NAFLD的发病机理。方法30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和高脂饲料4、8、12周组;流式细胞仪检测肝细胞凋亡;
紫外分光光度计检测MPTP开放程度;免疫组织化学法检查Bcl-2、Bax在肝组织中表达情况;Western Blot检测肝脏Bax表达及
变化情况。结果与正常对照组比较,高脂4~12周组肝细胞凋亡指数增加;紫外分光光度计检测显示高脂组随着造模时间延
长,MPTP开放增加;免疫组化显示Bcl-2在4、8、12周高脂组表达,但组间比较阳性细胞数增加不明显;Bax在高脂组随造模时
间延长阳性细胞数增加;Western Blot 进一步证实Bax 在高脂组随造模时间延长蛋白表达量增加;并且随着脂肪肝的进展,
Bcl-2/Bax 比率进行性下降。结论NAFLD大鼠模型中存在肝细胞凋亡,线粒体损伤与肝细胞凋亡密切相关,MPTP开放是
NAFLD大鼠重要线粒体损伤机制,而Bax表达量增加、Bcl-2/Bax比率异常是MPTP开放的分子基础。
     

线粒体通透性转换孔与细胞凋亡的最新研究进展

线粒体通透性转换孔(PT)的分子结构目前尚不清楚。最新研究表明,线粒体磷酸盐载体作为线粒体载体家族中的一类,是PT的重要组成,而亲环蛋白D,电压依赖性离子通道与腺嘌呤核苷酸转位酶则参与PT开放的调节。PT开放与细胞凋亡密切相关,但近年来的研究表明,二者之间并不存在必然关联。现针对PT与磷酸盐载体及与凋亡等之间的关系进行综述。     

线粒体通透转换孔与心肌缺血-再灌注损伤

缺血-再灌注会导致线粒体通透转换孔（MPTP）的开放,通道的低水平开放和随后的关闭,会导致线粒体释放细胞色素C及其他前凋亡分子,如果开放无限制继续,会导致离子稳态失衡,引起一系列细胞死亡的瀑布式反应。缺血-再灌注期间直接或间接的抑制MPTP开放,对再灌注损伤产生明显的保护作用。近期发现,MPTP短暂的低水平开放对其后的再灌注损伤也有保护作用。作者着重对MPTP的组成及机制、心肌缺血-再灌注时的通透改变和与心肌缺血预处理的关系作一综述,以寻求防治心肌缺血-再灌注损伤的新策略。     

线粒体膜通透性转换孔与细胞凋亡

众多研究表明 ,线粒体功能改变与细胞凋亡密切相关 ,包括释放促凋亡因子、活性氧过度生成、能量产生障碍、胞浆内钙失衡等。近年来的研究表明 ,线粒体膜通透性转换 (mitochondri alpermeabilitytransition ,MPT)的发生在细胞凋亡中的作用非常关键[1 ,2 ] 。1　线粒体通透性转换     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞凋亡与线粒体膜通透性转换孔开放的实验研究

通过研究肝细胞凋亡及线粒体膜通透性转换孔（MPTP）开放在大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）形成中的作用,探讨NAFLD的发病机理。方法 30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和高脂饲料4、8、12周组;HE染色观察肝组织光镜下的病理改变;电镜观察肝细胞超微结构变化;流式细胞仪检测肝细胞凋亡;紫外分光光度计检测MPTP开放程度;免疫组织化学法检查Bcl-2、Bax在肝组织中表达情况。结果 HE染色结果显示,高脂组肝脏在4周时出现脂肪变,8周出现轻度脂肪肝,12周出现中、重度脂肪肝;电镜下观察高脂组肝细胞线粒体肿胀,嵴变短、减少甚至消失;与正常对照组比较,高脂4~12周组肝细胞凋亡指数增加;紫外分光光度计检测显示高脂组随着造模时间延长,MPTP开放增加;免疫组化显示Bcl-2在4、8、12周高脂组表达,但组间比较阳性细胞数增加不明显;Bax在高脂组随造模时间延长阳性细胞数增加;随着脂肪肝的进展,Bcl-2/ Bax比率进行性下降。结论 NAFLD大鼠模型中存在肝细胞凋亡,线粒体损伤与肝细胞凋亡密切相关,MPTP开放是NAFLD大鼠重要线粒体损伤机制,而Bcl-2/Bax比率异常是MPTP开放的分子基础。     

线粒体-细胞色素C途径在非酒精性脂肪肝兔肝细胞凋亡中的作用

目的 探讨线粒体-细胞色素C途径在兔非酒精性脂肪肝（NAFLD）肝细胞凋亡中的作用。方法 雄性日本大耳兔40只,随机分为正常对照组（8周）和NAFLD模型组（4、6、8周组）,每组各10只。模型组按1.2 ml/kg皮下注射花生油,2 次/周,建立日本大耳兔NAFLD模型。按各组时间点处死兔子,测定兔血清中生化指标水平;HE染色观察肝组织病理形态改变,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率;提取肝脏线粒体,分光光度法检测线粒体通透转换孔（MPTP）的状态变化;免疫组织化学法检查Bcl-2、Bax、细胞色素C和Caspase-3在肝组织中的表达情况;Western blot检测细胞色素C 以及Caspase-3 含量变化。结果 与正常对照组相比,模型组肝脏脂质代谢指标和相关炎症因子表达水平升高,模型组肝细胞凋亡率与对照组比较显著增加(P<0.01)。造模4周时出现肝功能损伤,脂质代谢紊乱,随着NAFLD病程的发展,Bcl-2、Bax、细胞色素C和Caspase-3表达量逐渐增加,线粒体通透转换孔开放率随高脂饮食饲养时间延长明显增加(P<0.01)。结论 线粒体-细胞色素C途径在NAFLD引起的肝细胞凋亡中起到了一定的调控作用。     

线粒体-细胞色素C途径在兔非酒精性脂肪肝肝细胞凋亡中的作用

目的探讨线粒体-细胞色素C途径在兔非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝细胞凋亡中的作用。方法雄性日本大耳兔40只,随机分为正常对照组(8周)和NAFLD模型组(4、6、8周组),每组各10只。模型组按1.2 m L/kg皮下注射花生油,2次/周,建立日本大耳兔NAFLD模型。按各组时间点处死兔子,测定兔血清中生化指标水平;HE染色观察肝组织病理形态改变,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率;提取肝脏线粒体,分光光度法检测线粒体通透转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)的状态变化;免疫组织化学法检查Bcl-2、Bax、细胞色素C和caspase-3在肝组织中的表达情况;Western blot检测细胞色素C以及caspase-3含量变化。结果与正常对照组相比,模型组肝脏脂质代谢指标和相关炎症因子表达水平升高,模型组肝细胞凋亡率与对照组比较显著增加(P0.01)。造模4周时出现肝功能损伤,脂质代谢紊乱,随着NAFLD病程的发展,Bcl-2、Bax、细胞色素C和caspase-3表达量逐渐增加,线粒体通透转换孔开放率随高脂饮食饲养时间延长明显增加(P0.01)。结论线粒体-细胞色素C途径在NAFLD引起的肝细胞凋亡中起到了一定的调控作用。     

线粒体通透性转换孔的研究现状

线粒体是细胞生命活动的控制中心,它不仅是呼吸链和氧化磷酸化的中心,而且是细胞凋亡的控制中心.自从1976年Hunter首先阐述线粒体通透性转换孔（MPTP）以来,由于其在线粒体和细胞存活和死亡中的重要作用而备受广大学者关注,成为目前研究热点,现将MPq甲研究进展综述如下.     

蛋白棕榈酰化修饰在非酒精性脂肪性肝病相关疾病中作用机制的研究进展

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）已成为全球范围内威胁人类健康的重大公共卫生问题，但其发病机制复杂，新药研发困难重重，临床用药依旧匮乏。棕榈酰化是广泛发生的一种由棕榈酰基转移酶催化的蛋白质翻译后修饰，影响其稳定性、胞膜定位及功能发挥。近年来，研究表明蛋白棕榈酰化修饰与NAFLD的病程密切相关。本文对目前已报道棕榈酰化修饰在NAFLD相关疾病中作用机制作一综述，并分析GEO数据库NAFLD肝组织中棕榈酰基转移酶家族表达水平，对探寻NAFLD发病新机制具有重要意义。     

益生菌作用治疗非酒精性脂肪肝

非酒精性脂肪肝（NAFLD）是一种比较常见的慢性肝病,其涵盖范围包括脂肪肝、脂肪性肝炎以及肝硬化。其发病率的增加与肥胖、2型糖尿病等密切相关。越来越多人体试验表明,肠道微生物菌群过度生长与 NAFLD 和非酒精性脂肪肝炎（NASH）有关。最近,已有很多研究表明益生菌在改善 NAFLD 方面有效,已被视为一种治疗 NAFLD 的新方式,但仍需大样本试验和较长周期的临床随访进行深入研究。鉴于此,本文主要对 NAFLD 以及益生菌治疗 NAFLD 的动物实验和临床试验研究进展情况进行综述,从而进一步为益生菌用于 NAFLD 的治疗提供借鉴。     

内质网应激与非酒精性脂肪性肝病

经典的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病机制是“二次打击”学说,但已不能完全解释由肝细胞脂质堆积发展为脂肪性肝炎、肝纤维化等NAFLD进程.近年来提出的“多次打击”学说强调了内质网应激(ERS)在NAFLD发生发展中的重要作用.内质网是细胞内蛋白质、脂质合成的主要场所,内质网功能失衡会引发ERS,造成肝脂质代谢紊乱和肝细胞凋亡,最终导致NAFLD的发生发展.本文综述了ERS及其与非酒精性肝脂质堆积、脂肪性肝炎和肝细胞凋亡的相关性研究进展.     

益生菌对非酒精性脂肪肝治疗的潜在作用

非酒精性脂肪肝(NAFLD)是最常见的慢性肝病之一,其发病率在中国居民中呈迅速上升趋势,但疗效显著的临床治疗手段依旧缺乏.由于肠道与肝脏在结构和功能上存在密切关系,越来越多的证据显示肠道菌群在NAFLD的发生和进展过程中扮演着重要角色.由环境因素引起的肠道菌群失调可造成肝脏受损.目前,多项动物实验结果支持益生菌对NAFLD的预防和抑制作用,采用益生菌对NAFLD患者进行干预的临床随机对照试验数量较少,但现有数据均显示服用益生菌可改善患者症状.今后需开展更大规模的多中心随机双盲安慰剂对照临床试验,为临床应用提供更可靠的依据.     

非酒精性脂肪肝病研究进展

非酒精性脂肪肝病(NAFLD)和非酒精性脂肪肝炎(NASH)的发生与肥胖、2型糖尿病、胰岛素抵抗(IR)、脂代谢异常等有关。肝脏脂联素活性降低、脂联素受体-Ⅱ表达减少以及瘦素抵抗导致NAFLD。肝脏IR、反应氧族(ROS)产生增多以及抗氧化防御机制受损是NASH发生的中心环节。TNF-α、IL-6水平升高诱导IR和肝纤维化发生。减轻体重是预防肥胖者发生NAFLD的基本措施,细胞保护剂、抗氧化剂和降脂药物对NASH有一定治疗作用,噻唑脘二酮类(如罗格列酮)的临床治疗研究已取得可喜的疗效。今后有待进一步研制肝毒性小的能减轻肝脏脂肪蓄积和纤维化的药物。     

Association between non-alcoholic fatty liver disease and coronary artery disease severity

Background  Both non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) and coronary artery disease (CAD) are closely associated with many metabolic disorders. Invasive coronary angiography (CAG) is a common approach as an intervention for CAD. However, the association between angiographic severity of coronary artery and NAFLD remains controversial. This study aimed to evaluate the relationship between NAFLD and CAD.

Methods  Totally 542 consecutive patients who planned to undergo CAG due to a suspected CAD were enrolled. Abdominal computed tomography (CT) was performed before angiography to detect NAFLD. CAD was defined as stenosis of at least 50% in at least one major coronary artery. The severity of CAD was assessed by the number of vessels affected and the vessel score multiplied by the severity score (Gensini score). Significant stenosis was defined as 70% or greater reduction in lumen diameter. A probability value of P <0.05 was considered statistically significant.

Results  Of 542 patients studied, 248 (45.8%) were found to have NAFLD by abdominal CT, and 382 patients (88%) were found to have significant CAD by CAG. Age, diabetes mellitus, waist circumference, body mass index, and obesity were associated with NAFLD. According to the results of Logistic regression analysis, the presence of NAFLD independently increased the risk for CAD, as seen in CAG (odds ratio (OR), 95% confidence interval (CI): 7.585 (4.617–12.461); P <0.001). NAFLD was significantly more common in patients as CAD severity increased (P <0.001).

Conclusions  The presence of NAFLD is associated with high severity of CAD, requiring that patients with abdominal obesity be also investigated for NAFLD. Patients with NAFLD should be closely followed up for the presence and severity of CAD.

     

非酒精性脂肪肝的发病机制和治疗

为进一步认识非酒精性脂肪肝（non—alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的发病机制,寻求NAFLD临床最佳疗效依据,本文作者对近年来NAFLD的发病机制及治疗进行了归纳和分析整理,发现NAFLD与诸多因素有关,其中最为重要的是活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）的产生,在两次打击中,以胰岛素抵抗为基础,Ros为中心环节,并在一系列相关因素如瘦素抵抗、caspase－3、Fas及其配体、外周血自然杀伤T细胞、环氧合酶2、代谢性核受体、肝细胞铁沉积、铁蛋白、结合珠蛋白、视黄醇结合蛋白4、肠道菌群失调、线粒体功能失调以及内质网压力的作用下,共同促进了NAFLD的进展。针对发病机制,临床治疗除常规改善胰岛素抵抗,抗氧化,改善脂质代谢外,还可采用核代谢配体或激活剂、铁螯合剂以及中医辨证论治方法。     

肠道菌群-胆汁酸轴在非酒精性脂肪性肝病中的作用

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是代谢综合征在肝脏的表现,目前尚无有效的治疗方案。胆汁酸（bile acids,BAs）作为肠道菌群代谢产物和信号分子,从不同层面参与NAFLD的发病。本文总结了肠道菌群-胆汁酸轴在NAFLD中的作用机制及相关药物治疗进展。     

代谢综合征与非酒精性脂肪肝的相关性研究

目的探讨非酒精性脂肪肝(NAFLD)及其相关危险因素与代谢综合征(MS)发生发展的关系。方法选取攀枝花第二人民医院2006年1-12月初诊为NAFLD患者158例,以1∶2比例配对一般情况相似的健康人群316名,所有参与者均随访至2013年12月,主要目标评估NAFLD组和健康人群组MS的发生情况,次要目标评估引起患者死亡的终末事件。结果 NAFLD组和健康组分别有115例(72.8%)、268例(84.8%)完成随访,NAFLD组患者腰围、体质指数(BMI)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)高于健康人群组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访结束时,NAFLD组MS患病率显著高于健康组(19.1%vs 5.6%),差异有统计学意义(P<0.05),经COX回归分析发现BMI、TC、HOMA-IR、FBG是影响MS发生的独立危险因素。NAFLD组和健康组发生MS的人群与未发生MS的人群相比,均在腰围、BMI、TG、HDL-C、HOMA-IR方面差异有统计学意义(P<0.05)。随访结束共有10名参与者死亡,其中意外死亡1例,恶性肿瘤5例,心血管疾病4例。结论 NAFLD患者为发生MS的高危人群,提前干预NAFLD有利于减少MS的发生及心血管相关死亡率。