不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca^2＋转运功…

应用不同年龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌原代与传代细胞（ＶＳＭＣ），观察Ｃａ＾２＋转运功能障碍及某些相关因素的变化，结果表明：（１）在血压未升高的ＶＳＭＣＣａ＾２＋内流已较同龄对照组ＷＫＹ大鼠明显增加，而Ｃａ＾２＋外流量较ＷＫＹ大鼠显著降低。表明ＳＨＲＶＳＭＣ膜Ｃａ＾２＋转运功能障碍在血压升高前就已发生，并随年龄及血压增高有加重趋势；（２）ＶＳＭＣｃＡＭＰ及钙调素含量变化与细胞膜Ｃａ＾２＋     

不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca~（2＋）转运功能障碍及某些相关因素的变化

应用不同年龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌原代与传代细胞（ＶＳＭＣ），观察Ｃａ２＋转运功能障碍及某些相关因素的变化。结果表明：（１）在血压未升高的ＶＳＭＣＣａ２＋内流已较同龄对照组ＷＫＹ大鼠明显增加，而Ｃａ２＋外流量较ＷＫＹ大鼠显著降低。表明ＳＨＲＶＳＭＣ膜Ｃａ２＋转运功能障碍在血压升高前就已发生，并随年龄及血压增高有加重趋势；（２）ＶＳＭＣｃＡＭＰ及钙调素（ＣａＭ）含量变化与细胞膜Ｃａ２＋转运功能障碍基本同步，提示二者异常与细胞膜Ｃａ２＋转运功能障碍有密切关系；（３）血压升高前ＳＨＲＶＳＭＣ内ＡＮＧⅡ含量与ＷＫＹ大鼠相比无明显差异，但１６周龄５ＨＲＶＳＭＣ内ＡＮＧⅡ含量明显高于其幼鼠（Ｐ＜０．００１），与血压呈正相关。提示ＶＳＭＣ内ＡＮＧⅡ在血压升高过程中可能具有一定作用。以上结果表明高血压时ＶＳＭＣ膜Ｃａ２＋转运功能障碍有明显遗传倾向，ＶＳＭＣ内ＣＡＭＰ、ＣａＭ及ＡＮＧⅡ含量异常与上述障碍密切相关。     

胞内Ca^2＋,Na^＋和ATP的稳定性介导NMDA诱导兴奋保护作用

目的;研究Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）诱导大鼠小脑颗凿神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法：分别用Ｃａ＾２＋和Ｎａ＾＋敏感的染料Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＳＢＦＩ／ＡＭ测定胞内Ｃａ＾２＋和Ｂａ＾＋浓度「（Ｃａ＾２＋）ｉ,（Ｎａ＾＋）ｉ」,并用反向高效液相法测定胞内三磷酸腺苷（ＡＴＰ）的含量。结果：（１）在ＮＭＤＡ预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ｃａ＾２＋反应高峰,两者无显著性差异。而后在ＮＭ     

pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞脊髓内移植对损伤脊髓细胞 …

目的 观察ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰雪旺氏细胞（ＳＣ）脊髓内移植对损伤组织的作用的影响。方法 将脊髓半横断损伤ＳＤ大鼠模型随机分为ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰ＳＣ移植组（Ａ组）、ＳＣ移植组（Ｂ组）、损伤对照组（Ｃ组）和正常对照组（Ｄ组）。８ｈ后一半动物取伤段脊髓标本测水离子含量。另一半动物采用联合行为记分（ＣＢＳ）评价其神经功能。结果 脊髓损伤（ＳＣＩ）后组织水肿,Ｎａ＾２＋、Ｃａ＾２＋离子浓度     

兔脑局部缺血后脑组织ATP酶活性及SEP,TCD改变

建立兔脑ＭＣＡＯ局部脑缺血实验模型。用生化方法分别测定Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性，并行体感诱发电位（ＳＥＰ）及经颅多普勒超声检查（ＴＣＤ）。结果发现：脑缺血早期Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性迅速下降，Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶略有下降。ＳＥＰ的Ｎ１波、Ｐ２波的潜伏期明显延长。ＴＣＤ检查中，ＭＣＡＯ侧不能测出波形，而对侧平均流速（Ｖｍ）显著增快，再通后ＭＣ     

培哚普利对慢性心功能不全大鼠心肌肌浆网Ca^2＋泵功能？…

目的 探讨血管紧张素转移酶抑制剂（ＡＣＥＩ）干预慢性心功能不全对心肌肌浆网（ＳＲ）Ｃａ＾２＋泵活性和Ｃａ＾２＋摄取功能的影响及意义。方法 ８０只大鼠分为心功能不全组（Ｆ组）,培哚普利组（Ｐ组）,对照组（Ｃ组）。通过结扎大鼠左冠脉建立慢性心功能不全模型,以培哚普利进行干预,对照观察血流动力学,左室心肌ＳＲ Ｃａ＾２＋泵活性,ＳＲ Ｃａ＾２＋摄取Ｖｍａｘ、Ｋｄ值和最大摄取量。结果 Ｆ组左室舒张末压（Ｌ     

大鼠脑缺血再灌注时神经细胞游离Ca^2＋与FOS表达

目的 观察大鼠脑缺血再灌注时神经细胞内Ｃａ＾２＋与ＦＯＳ的时空变化。方法 利用大鼠脑缺血再灌注模型,结果 随大鼠脑缺血再灌注时间的延长,细胞内Ｃａ＾２＋增加明显,ＦＯＳ表达较快,再灌注６ｈ即达到高峰。ＦＯＳ蛋白在海马区表达最多,纹状体最少。结论 认为神经细胞内钙超载引起细胞死亡,是通过促进ＦＯＳ的表达完成的。     

血管紧张系Ⅱ受体基因敲除对跨膜钙内流的作用

目的 观察血管紧张素Ⅱ受体亚型（ＡＴ１ａ）基因敲除对跨膜钙内流的影响。方法 培养ＡＴ１ａ基因敲除及其野生型对照小鼠的主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）和应用荧光倒置显微镜及钙荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ动态观测ＶＳＭＣ钙离子（Ｃａ＾２＋）ｉ变化。结果 在血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）刺激下钙内流显著增加,ＡＴ１ａ敲除组ＶＳＭＣ钙净增值为（２０４±２２）ｎｍｏｌ／Ｌ,基础（Ｃａ＾２＋）ｉ为（１０８±９）ｎｍ     

硫酸镁对大鼠脑损伤后线粒体的影响

目的 探讨早期硫酸镁治疗对大鼠颅脑创伤后线粒体的影响。方法 ３０只ＳＤ大鼠随机分为正常对照组,颅脑创伤组及硫酸镁治疗组。对自由落体致颅脑伤的大鼠在致伤同时进行腹腔注射硫酸镁治疗,伤后２４ｈ测定各组大鼠脑线粒体Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋、丙醛（ＭＤＡ）含量及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果 颅脑创伤后线粒体Ｃａ＾２＋和ＭＤＡ含量增加,Ｍｇ＾２＋含量及ＳＯＤ活性必低（Ｐ〈０．０５）。与创伤组相比,硫酸镁     

硫酸镁对大鼠创伤性脑损伤组织Ca^2＋影响的实验研究

采用Ｆ自由落体撞击法造成伤性脑损伤（ＴＢＩ）ＳＤ大鼠模型,原子吸收分光光度法测伤边缘脑皮质Ｃａ＾２＋含量;结果：ＴＢＩ后脑皮质Ｃａ＾２＋含量明显升高,伤后４小时即达最高峰,３－４天后才逐渐接近伤前水平,经ＭｇＳＯ４６００ｍｇ／ｋｇ皮下注射的治疗组Ｃａ＾２＋一升幅较损伤组明显减少,结论：Ｃａ＾２＋作为内源性损害因子在ＴＢＩ继发性脑损害中起重要作用,ＭｇＳＯ４能显著降低Ｃａ＾２＋含量。     

共聚焦激光扫描显微镜技术在研究大鼠海马神经元胞内钙超载中的应用

目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像,以计算机相应软件对胞内钙的荧光强度变化进行分析统计。结果 在 0.5 mmol／L谷氨酸作用下,胞内钙荧光强度迅速升高(P<0.001);0.5 mmol／L谷氨酸与3 mmol／L牛磺酸共同 作用于海马神经元时,胞内钙荧光强度明显降低(P<0.001);灌流液中去除牛磺酸后,胞内钙荧光强度上升(P <0.001)。结论 抑制性氨基酸牛磺酸可抑制由兴奋性氨基酸谷氨酸所致神经元的胞内钙超载;CLSM以其独 特的优势,在高清晰度地显示海马神经元形态的同时,也可动态地观察活细胞在不同环境下胞内钙的快速变化 以及定量分析。该技术在动态观察和二维图像的高分辨率上比传统测钙方法有更大的优越性。     

荧光比率法测量平滑肌细胞内的钙动力学变化

目的建立一种荧光比率方法来测量细胞内钙离子的动力学变化,并研究血管平滑肌细胞钙动力学变化在重症休克血管反应性降低中的作用.方法复制SD大鼠失血性休克模型,分离肠系膜细动脉血管平滑肌(ASMC),使用荧光探针Fluo-3/AM、FuraRed双标记比率方法结合激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞钙动力学变化;评估荧光比率法在动态测定胞内钙离子浓度变化中的应用及其观察ATP敏感钾通道(KATP)特异性阻滞剂优降糖对血管反应性和钙动力学影响.结果休克后2 h(失代偿期),血管反应性明显降低,NE作用带来的平滑肌细胞内钙离子浓度升高的程度明显减弱;加入优降糖可明显提高NE对平滑肌细胞内钙离子的升高作用,改善细动脉对NE的反应性,带来血管反应性部分恢复.在37℃,Fluo-3/AM、FuraRed浓度为5μnol/L的条件下,肠系膜细动脉平滑肌细胞负载40 min左右即可获得良好的标记效果.结论优降糖特异性的阻滞ATP敏感钾通道的开放,增多细胞外钙内流并提高血管反应性;使用荧光比率法可以使胞内钙离子浓度的测量不受荧光探针浓度、细胞大小、激光漂白等因素的影响,可以准确、实时、动态测量细胞内钙离子浓度变化.     

荧光定量法测量平滑肌细胞内钙离子浓度的探讨

目的 研究平滑肌细胞内Ca^2 浓度的动力学变化，建立一种定量测量细胞内Ca^2 浓度的方法。方法 分离肠系膜细动脉血管平滑肌(ASMC)细胞，用荧光探针Indo-1和激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞Ca^2 浓度的动力学变化；首先在37℃环境下标定Ca^2 探针indo-1的解离常数Kd值，根据荧光-浓度换算公式将测量的荧光强度值换算成Ca^2 浓度值。结果 激光扫描共聚焦显微成像技术测量的细胞荧光图像分析显示．平滑肌细胞[Ca^2 ]i在地塞米松的刺激下显著上升，有时会出现自发钙波的现象，并且细胞内出现钙超载的现象(细胞荧光图像呈现白色)。通过测量得到的Kd值结合荧光强度-浓度换算公式可准确地测量细胞内[Ca^2 ]i。结论 荧光定量法结合共聚焦显微成像技术可以简易、快捷地监测细胞内钙离子的动力学变化，不失为一种定量测量细胞内钙离子的方法。     

灯盏花素对氯化钾诱导的培养平滑肌细胞内游离钙的影响

目的:观察灯盏花素对氯化钾诱导的培养的家兔平滑肌细胞内游离钙的影响.方法:用RF_5000荧光光度仪检测Fura-2AM负载的培养平滑肌细胞内游离钙的浓度.结果:在有细胞外钙存在时,静息条件下细胞内游离钙为330±100nmol·L-1,灯盏花素能轻度降低静息状态下细胞内游离钙,但无统计学意义.氯化钾50mmol·L-1将细胞内游离钙增加到420±104nmol·L-1,而灯盏花素10-6、10-5、3×10-5mol·L-1能进一步加强由氯化钾引起的细胞内游离钙的增加.然而,在无细胞外钙时,灯盏花素对细胞内游离钙却没有影响.结论:灯盏花素通过电压依赖性钙通道加强钙离子内流.     

用荧光染料fura-2法测定心室肌细胞内游离钙离子浓度

用fura-2荧光染料测定了静息时的酶解分离心室肌细胞内游离Ca~(2+)浓度,40mMKCI和5mM咖啡因都能使心室肌细胞内游离Ca~(2+)浓度增加,但KCI增加游离Ca~(2+)浓度需要细胞外液中存在Ca~(2+),而咖啡因则否,提示KCl增加细胞内游离Ca~(2+)浓度可能是通过细胞外Ca~(2+)内流,咖啡因则使细胞内贮存Ca~(2+)释放。     

Effects of Arecoline on Calcium Channel Currents and Caffeine—induced Calcium Release in Isolated Single Ventricular Myocyte of Guinea Pig

Summary The effects of Arecoline (Are) on calcium mobilization were investigated. In isolated single ventricular myocyte of guinea pig, patch clamp whole cell recording techniques were used to record the current of L-type calcium channel and cytosolic Ca²⁺ level (Ca²⁺i) labeled with fluorescence probe Fluo-3/AM was measured under a laser scanning confocal microscope. Results revealed that Are (3–100 μmol/L) could inhibit L-type calcium current in a concentration-dependent manner and the value of IC₅₀ was 33.73 μmol/L (n=5). In the absence of extracellular calcium, the resting levels of [Ca²⁺]i was not affected by Are (n=6,P>0.05), but pretreatment with Are (30 μmol/L) could significantly inhibit the [Ca²⁺]i elevation induced by caffeine (10 mmol/L,n=6,P<0.01). It was concluded that Are could inhibit not only calcium influx through L-type calcium channel but also calcium release from sarcoplasmic reticulum. This project was supported by a grant from Natural Sciences Foundation of China (No. 39670661).     

胰腺腺泡细胞钙超负荷在诱发大鼠由水肿性向坏死性胰腺炎转变中 …

OBJECTIVE: To investigate the potential of pancreatic acinar cell calcium overload in the conversion of acute edematous pancreatitis (AEP) to necrotizing pancreatitis (ANP). METHODS: Ninety-six Sprague-Dawley rats were randomized in three experimental groups. Sham-operated control (Group I) AEP (Group II) was induced by pancreatic duct ligation and intravenous injection of bombesin (100 micrograms/kg) and secretin (10 micrograms/kg). ANP (Group III) was induced same as group II but with a large dose of dextran 110,000(500 mg/kg) intravenously. Pancreatic acinar cell Ca2+ overload was studied using fluorescent probe Fura2. Cytosolic free Ca2+ concentration ([Ca2+]i) in isolated pancreatic acinar cells and Ca(2+)-ATPase activity in pancreatic cell plasma membranes were determined 1, 3, 6, 9 h respectively after treatment. RESULTS: The results showed that pancreatic acinar cell [Ca2+]i was elevated at 1 h[(213 +/- 19) nmol/L, P < 0.05] and increased to (464 +/- 29) nmol/L at 6 h(P < 0.05) in rats with ANP, pancreatic cell plasma membrane Ca(2+)-ATPase activity decreased significantly from (29.8 +/- 0.4) nmol.min-1.mgp-1 at 1 h to (18.6 +/- 0.5) nmol.min-1.mgp-1 at 9 h in rats with ANP (P < 0.05). CONCLUSIONS: In ischemia-induced conversion of AEP to ANP, there exists Ca2+ overload in the pancreatic acinar cells. The decreased pancreatic cell plasma membrane Ca(2+)-ATPase activity may be an important reason for acinar cell Ca2+ overload in the development of acute pancreatitis.     

加巴喷丁对SNL模型大鼠损伤DRG神经元细胞内[Ca2+]i的影响

目的:探讨加巴喷丁对脊神经结扎(SNL)模型大鼠损伤背根神经节神经元胞内游离钙浓度的影响?方法:SD大鼠,雄性35只,4~6周龄,采用左侧L5 SNL术制备大鼠神经病理性疼痛模型?于结扎后15 d采用酶消化法急性分离损伤同侧L5背根神经节神经元(SNL组)和假手术组L5背根神经节神经元(Sham组)?采用流式细胞仪检测10?100和300 μmol/L浓度加巴喷丁对损伤侧L5背根神经节神经元基础及高K+激发胞内游离钙浓度的影响?结果:加巴喷丁剂量依赖性地抑制高钾激发的胞内游离钙浓度的增加(P < 0.05或P < 0.01),但对静息钙无作用?结论:加巴喷丁对神经病理性疼痛大鼠损伤背根神经节神经元高钾激发的钙内流的抑制作用,可能与其抗伤害作用的外周机制相关?     

ATP Evokes Calcium Transients in Single Pulmonary Artery Endothelial Cell in

（胡清华）（王迪浔）（张宇）（陈荣三）（王金唏）ＡＴＰＥｖｏｋｅｓＣａｌｃｉｕｍＴｒａｎｓｉｅｎｔｓｉｎＳｉｎｇｌｅＰｕｌｍｏｎａｒｙＡｒｔｅｒｙＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｉｎＰｒｉｍａｒｙＣｕｌｔｕｒｅｓ￥ＨＵＱｉｎｇ－ｈｕａ，ＷＡＮＧＤｉ－...     

Effects of L-THP on Ca2+ Overload of Cultured Rat Cardiomyocytes during Hypoxia and Reoxygenation

Ca2 overloadisoneoftheimportantpathophys-iologicalcharactersofcardiomyocyteinjuryfOllowinghypoxia--reoxygenation.TrlggeredactivitycausedbyCa2 overloadisthemaincauseofreperfusion--arryth-mias[l].L--tetrahydropalmatine(L--THP),alsonamedrotundium,isabiologica1alkaliofcorydalisYanhusuo,aherbalCa' antagonistwhichhasbeenwidelyusedintreatingarrythmias['].Herewedevel-opedacellmodelofhypoxiaandreoxygenationwithculturedratcardiomyocytes,whichwassimilartothemodelofischemia--reperfusioninjuryoftheheart…