医用羟基磷灰石纳米粒的制备和特性:羟基磷灰石纳米粒的纳米结构及纳米尺寸效应

目的 制备医用羟基磷灰石（HA）纳米粒并观测其纳米结构及纳米尺寸效应；方法 采用常态表面活性剂（水包油）制备HA纳米粒，用电子显微镜、X射线仪、核磁共振仪、分光光度计和傅里叶变换红外光谱仪等对HA纳米粒进行观测。结果 HA纳米粒的平均尺寸为。10-30nm；共振分析表明，磷至少以2种类型存在；在200nm波长处，光谱包含六面体Ca^2＋典型的光谱带；HA纳米粒微晶的Eg值分别为1．60和1．64ev；傅里叶变换红外光谱中包含2种振波；在956．5、1026．1和1．108．7cm光带处的3种PO4^3-曲态分别为v1（PO4）、v3（PO4）、v3（PO4）。在565．2 and 600．0cm光带处的2种PO4^3-曲态为v4（PO4）。结论 纳米尺寸产生的从纳米粒到微晶的边缘能量增加伴随着簇晶体积的下降和Ca^2＋周围配基的变化。这些变化与量子尺寸效应有关。     

碘油羟基磷灰石纳米粒对兔VX2肝肿瘤生长及血管新生的作用

目的 观察碘油羟基磷灰石纳米粒(nHAP)经肝动脉灌注对兔VX2肝肿瘤生长、微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 100只新西兰白兔肝内肿瘤种植后2周,随机分为5组,每组20只,兔上腹正中开腹,胃十二指肠动脉插管固定,经肝动脉灌注给药,实验设生理盐水组(A组)、nHAP组(B组)、单纯碘油组(C组)、阿霉素碘油组(D组)及碘油nHAP组(E组).治疗后1周及2周,采用CT检测并计算肿瘤的生长率,治疗后2周,病理观察肿瘤坏死率,免疫组化方法测定瘤区的MVD及VEGF表达强度.记录各组实验兔治疗后的存活期.结果 治疗后1、2周,碘油nHAP组肿瘤体积及生长率明显小于其它各组(均P<0.05).治疗后2周,碘油nHAP组肿瘤坏死率大于单纯碘油组及阿霉素碘油组(均P<0.05),分别为(80.8±12.5)%、(68.2±10.4)%、(75.3±11.6)%.单纯碘油组及阿霉素碘油组栓塞后,残余肿瘤区的MVD升高,两者分别为(33.6±7.3)和(34.9±7.7),高于生理盐水组的(22.6±6.5)(均P<0.05);两组的VEGF表达强度分别为(0.184±0.018)和(0.180±0.017),高于生理盐水组的(0.140±0.008)(均P<0.05);碘油nHAP组残余瘤区的MVD减低,VEGF表达减弱,两者分别为(16.5±3.6)和(0.104±0.003).和其它组相比,碘油nHAP组治疗后兔的生存期明显延长(均P<0.05).结论 碘油nHAP可抑制肿瘤的生长,增加肿瘤的坏死率,抑制肿瘤血管新生,降低栓塞后残瘤VEGF表达,延长瘤兔的生存时间.     

羟基磷灰石纳米丝水包油乳剂的制备和特性

目的 制备医用羟基磷灰石（HA）纳米丝并观测其特性；方法 采用常态表面活性剂（水包油）制备HA纳米丝，用电子显微镜、X射线仪、核磁共振仪、分光光度计、傅里叶变换红外光谱仪等对HA纳米丝的特性进行观测。结果 HA纳米粒的平均尺寸为：长100nm-230nm，宽3nm-5nm；电子衍射图像显示纳米丝为多晶质。在250nm波长处，光谱包含六面体Ca^2＋典型的光谱带；其他光谱带为O→Ca^2＋的电荷转移。HA纳米丝微晶的Eg值分别为1．60和1．70ev；31P核磁共振谱显示在-0．59ppm处有一个强烈的共振峰和一些副峰，表明至少存在两种磷酸盐。结论 成功制备了一种适合医用的新型羟基磷灰石纳米丝。     

硫酸长春新碱聚乳酸羟基乙酸共聚物纳米粒的制备及其体外性质评价

目的制备硫酸长春新碱（VCR）聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）纳米粒（NPs）,研究其理化性质以及体外抗肿瘤活性。方法采用改良的复乳溶剂挥发法制备负载硫酸长春新碱的PLGA纳米粒,以透射电子显微镜观察纳米粒的形态,以激光粒度仪测定纳米粒的粒径和Zeta电位,以透析袋法研究其体外释放规律,以人乳腺癌细胞（MCF-7）为细胞模型,通过MTT试验考察载药纳米粒的细胞毒性。结果制备的VCR-PLGA NPs外观呈球形,平均粒径为（145.81±4.72）nm,Zeta电位为（-17.50±1.92）mV,包封率为（56.81±3.17）%,载药量为（2.79±0.18）%,体外释放规律符合双相动力学方程：Q=100-（72.19e-0.164 3 t＋29.26e-0.002 971 t）（R2=0.996 8）。载药纳米粒与原药相比可以增加细胞摄取而引起细胞毒性。结论初步建立了负载硫酸长春新碱的PLGA纳米粒系统,为体内抗肿瘤活性研究提供了依据。     

姜黄素PLGA-TPGS纳米粒的制备和质量评价

目的制备姜黄素乳酸羟基乙酸共聚物-水溶性维生素E纳米粒(CM-PLGA-TPGS-NPs,简称CPTN)并评价其质量。方法用自制的PLGA-TPGS为载体材料,采用超声乳化-溶剂挥发法制备CPTN,通过粒径、Zeta电位、载药量、包封率和体外释放度控制其质量。采用RP-HPLC法,色谱柱为KROMASIL柱(4.6 mm×250 mm,5μm),用乙腈-2%冰醋酸溶液(58∶42)为流动相,检测波长为430 nm。结果自制CPTN的平均粒径为(197.9±6.2)nm,Zeta电位为(-22.3±1.8)mV,载药量为(13.2±0.9)%和包封率为(79.3±1.6)%。体外姜黄素在含0.5%十二烷基硫酸钠的磷酸盐缓冲液(pH7.4)中呈两相释放,30 d时累积释放率为91.3%。结论 CPTN质量稳定可控,体外试验显示具有明显的缓释作用。     

姜黄素-PLGA纳米粒的制备及对人前列腺癌PC-3细胞的体外研究

目的:制备姜黄素(curcumin,Cur)聚乳酸-羟基乙酸(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)纳米粒(Cur-PLGA-NPs),并考察其理化性质?体外释药特性及对PC-3细胞的体外影响?方法:运用乳化-溶剂挥发法制备Cur-PLGA-NPs,利用透射电镜观察纳米粒的外观形态;动态激光粒度仪分析其粒径大小及分布;超速离心法测定载药率和包封率;透析法观测体外释放效果;采用CCK-8比色法检测其对前列腺癌PC-3细胞的增殖抑制情况,流式细胞仪(FCM)进行细胞凋亡率检测,透射电镜观察细胞超微结构,并与单纯Cur进行比较?结果:透射电镜下姜黄素纳米粒呈圆形或椭圆形,平均粒径为(165.36 ± 24.21)nm,包封率为(83.05 ± 1.07)%,载药率为(10.87 ± 0.58)%,体外药物释放试验显示,Cur-PLGA-NPs在最初的24 h 内释放率超过44.02%,10 d累计释放率达84.81%? 5~40 μmol/L Cur及Cur-PLGA-NPs作用PC-3细胞24~72 h后细胞的抑制率(9.38%~83.62% vs. 10.56%~89.53%)?浓度为20 μmol/L和40 μmol/L的Cur和Cur-PLGA-NPs组间比较,差异有统计学意义(P < 0.05)?FCM显示同浓度实验组细胞凋亡率与对照组比较,差异具有统计学意义(P < 0.05)?透射电镜显示Cur-PLGA-NPs作用PC-3细胞后出现典型的细胞凋亡形态学特征?结论:Cur-PLGA-NPs具有良好的药物缓释特性,增强了Cur对PC-3细胞的体外杀伤和抑制增殖能力?     

壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究:制备,特征和对DNA的保护

目的:制备载基因壳聚糖纳米粒,研究纳米粒药剂学特征以及对DNA的保护作用。方法:复凝聚法制备纳米粒,对纳米粒的形态、粒径及分布、Zeta电位、包封率、载药量和处方影响因素进行了考察,凝胶阻滞法分析壳聚糖和pDNA的聚合方式,pDNA保护性试验考察壳聚糖纳米粒抵抗核酸酶的能力。结果:制备的pDNA/壳聚糖纳米粒为结构较紧密的不规则球形,平均粒径为(240.4±13.2)nm,多分散指数为(0.173±0.05),Zeta电位为(18.4±0.6)mV,包封率为(95.2±1.9)%,载药量为(30.7±0.8)%。凝胶阻滞分析结果表明,纳米粒荷正电,pDNA与壳聚糖之间通过静电作用而完全结合。纳米粒的粒径、Zeta电位受处方中的壳聚糖相对分子质量、N/P(壳聚糖中伯胺基数目/pDNA中磷酸基数目)比p、DNA浓度、Na2SO4浓度和pH值等因素影响。pDNA保护性试验表明,壳聚糖纳米粒对pDNA有保护作用。结论:壳聚糖可以有效凝聚pDNA,采用复凝聚法可制得200~500 nm范围荷正电的纳米粒,有较高的包封率和载药量,可有效保护pDNA免受核酸酶降解。壳聚糖作为黏膜给药的非病毒基因载体具有应用价值。     

有机溶剂对乳化-溶剂挥发法制备PLGA纳米粒的影响

目的 以生物可降解材料聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物(PLGA)为载体,采用乳化-溶剂挥发法制备包载荧光标记物香豆素-6的纳米粒,考察有机溶剂组成对纳米粒制备的影响.方法 选用不同配比的二氯甲烷与乙酸乙酯混合溶剂作为有机相制备香豆素-6-PLGA纳米粒,测定纳米粒粒径与包封率.结果 纳米粒粒径随着乙酸乙酯比例增加而减小,包...     

罗哌卡因乳酸羟基乙酸共聚物纳米粒的制备及体外释药研究

目的局部麻醉药体内生物半衰期短,且局部组织的高浓度极易造成药物经血管吸收入血产生中枢神经和心血管毒性反应。文中旨在制备罗哌卡因乳酸羟基乙酸共聚物纳米粒,优化工艺,并对其体外性质进行研究。方法以乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,采用O/W乳化溶剂挥发法制备包载罗哌卡因(RVC)的PLGA纳米粒,以纳米粒的粒径、包封率及载药量为考察指标,采用星点设计-效应面法优化制备工艺,进行体外释放研究。结果以优化处方制备的罗哌卡因乳酸羟基乙酸共聚物纳米粒(RVC-PLGA-NPS),外观光滑圆整,平均粒径为(331.21±2.11)nm,载药量、包封率分别为(13.81±1.35)%、(74.82±2.53)%。体外释药研究表示,96 h累积释药率达73%,释放曲线符合Higuchi方程。结论乳化溶剂挥发法适用于RVC-PLGA-NPS的制备,制得的纳米粒形态圆整,在体外具有明显的缓释行为。     

不同孔径的羟基磷灰石对组织工程骨血管化促进效果的研究

目的：探讨不同孔径的羟基磷灰石材料对组织工程骨血管化效果的影响。方法采用 Wistar雄性大鼠,随机分为A、B、C 3组,分别在其背部皮下植入孔径为200~300、350~450、500~600μm 的羟基磷灰石生物陶瓷(复合4μg 骨形态发生蛋白),大小约5 mm×5 mm×1 mm,重约40 mg。分别于植入后第1、2、3、4周后处死动物,取出植入物及周围组织,采用苏木素-伊红染色组织学观察,分析局部新生血管化情况。结果3组不同时间点的血管化面积,组内比较：A 组第2、3周差异有统计学意义、B、C 组不同时间点差异有统计学意义(P <0.05);组间比较：术后1周,仅 C 组有血管化面积;术后2~4周,B、C 组增加的面积高于 A 组(P <0.05),C 组可见大量新生血管并形成清晰可见的骨小梁。结论孔径为500~600μm 的羟基磷灰石生物陶瓷能够更好地促进组织工程骨的血管化。     

壳聚糖纳米基因载体的制备和鉴定

目的 制备载基因壳聚糖纳米粒,研究纳米粒的结构特征以及对细胞的基因转染效率.方法 用表达绿色荧光蛋白的质粒(pGFP)作报告基因,采用复凝聚法制备壳聚糖-pGFP纳米粒.琼脂糖凝胶电泳分析壳聚糖和pDNA的结合能力,通过比色法检测其包封率,用纳米粒度仪和原子力显微镜对纳米粒的形态和粒径分布进行考察;通过荧光显微镜观察壳聚糖纳米粒介导pGFP在体外培养的人结肠腺癌细胞LoVo中的表达.结果 琼脂糖凝胶电泳分析结果表明,pDNA与壳聚糖之间通过静电作用而完全结合,包封率大于90%.制备的壳聚糖-pGFP纳米粒为结构紧密的不规则球形,平均粒径为209 nm,多分散指数为0.15.体外细胞转染的结果表明,壳聚糖-pGFP纳米粒能介导pGFP转染LoVo细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白.结论 壳聚糖可以有效凝聚pDNA,采用复凝聚法可制得100～500 nm范围荷正电的纳米粒,有较高的包封率.壳聚糖纳米粒在体外能将基因递送到细胞内,并且报告基因能在细胞内表达.因此,壳聚糖作为非病毒基因载体具有介导核酸类生物大分子的应用价值.     

具有羟基磷灰石结合活性的拟TGF-β多肽分子的实验研究

目的：基于ECM蛋白和某些细胞因子结构功能的研究，设计合成了具有双功能多肽分子P18，通过此途径改善HA类骨修复材料及种植体HA涂层的生物活性。方法：运用固相多肽合成技术合成了具有双功能基团多肽分子P18，对于其生物活性以及与HA结合的特性进行了初步研究。结果：该分子和HA具有较高的亲和力，在生理条件下不同被洗脱，能够影响凝胶系统体外矿化作用，同时P18具有TGF－β样活性，能够抑制水貂肺上皮细胞的增殖，低浓度促进UMR－106细胞的增殖，但是高浓度作用减弱，该分子增加UMR－106细胞株碱性磷酸酶活性并能缩短ALP活性达到峰值的时间，并能够促进骨钙蛋白和I型胶原的表达。结论：所合成的多肽分子具有所设计的双功能，可以作为HA类骨损伤修复材料以及种植体涂层的生物活性添加成分。     

肿瘤靶向性药物载体叶酸-壳聚糖微球的制备及特性研究

目的 探索叶酸偶联壳聚糖(FA-CTS)纳米粒的合成方法 及对肿瘤细胞的靶向性.方法 利用叶酸活性酯与壳聚糖分子上的氨基反应形成稳定的酰胺键,制备FA-CTS.再利用壳聚糖在偏酸性溶液中带正电荷,在高速磁力搅拌作用下能与阴离子凝集的特性,将紫杉醇(PTX)做模型药物,制备负载PTX叶酸偶联壳聚糖(FA-CTS/PTX)纳米粒.采用荧光标记法和MTT法评价其肿瘤细胞靶向性.结果 所制备的FA-CTS/PTX纳米粒,形态均质规则,无粘连,平均粒径282.8 nm,包封率75.4%,载药量9.0%.荧光标记法结果 表明FA-CTS纳米粒的肿瘤细胞亲和性均高于普通CTS纳米粒.MTT法结果 显示FA-CTS/PTX纳米粒组的肿瘤细胞抑制率均高于普通CTS/PTX纳米粒组.结论 合成的FA-CTS纳米粒可通过叶酸受体途径特异靶向于叶酸受体丰富的肿瘤细胞.     

Synthesis and characterization of surface-modified Fe3O4 super-paramagnetic nanoparticles

Aqueous dispersion and stability of Fe304 nanoparticles remain an issue unresolved since aggregation of naked iron nanoparticles in water. In this study, we successfully synthesized different Fe304 super-paramagnetic nanoparticles which were modified by three kinds of materials [DSPE-MPEG2000, TiO2 and poly acrylic acid （PAA）] and further detected their characteristics. Trans- mission electron microscopy （TEM） clearly showed sizes and morphology of the four kinds of nanopar- ticles. X-ray diffraction （XRD） proved successfully coating of the three kinds of nanoparticles and their structures were maintained. Vibrating sample magnetometer （VSM） verified that their magnetic proper- ties fitted for the super-paramagnetic function. More importantly, the particle size analysis indicated that Fe304@PAA had a better size distribution, biocompatibility, stability and dispersion than the other two kinds of nanoparticles. In addition, using CNE2 cells as a model, we found that all nanoparticles were nontoxic. Taken together, our data suggest that Fe304@PAA nanoaparticles are superior in the applica- tion of biomedical field among the four kinds ofFe304 nanoparticles in the future.     

叶酸修饰的介孔氧化硅纳米粒制备及其负载雄黄研究

以正硅酸四乙酯(TEOS)为硅源,十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为模板剂,乙醇为助溶剂,三乙醇胺为螯合剂在碱性条件下合成了介孔氧化硅纳米粒(MSN),然后在其表面通过后嫁接法键合氨丙基,再修饰叶酸(FA),对其形貌和结构进行表征,利用原子荧光光谱仪测定其对雄黄的负载率。结果表明,MSN具有大的比表面积(973 m²/g)和孔体积(1.01 cm³/g)、孔径分布窄、粒径均匀(90 nm左右)且球形形貌分散,修饰FA后的介孔氧化硅纳米粒(MSN-NH-FA)在0.5 h 对雄黄的负载率最大,达到2.52%。结果表明,制备的MSN-NH-FA具有较好的形貌结构,适合作为药物载体,具有良好的应用前景。     

载表柔比星磁性壳聚糖纳米粒的制备与表征检测

目的制备一种新型磁性纳米高分子聚合物-载表柔比星的磁性壳聚糖纳米粒,并对其表征、载药率进行检测。方法选用可生物降解的壳聚糖作为骨架材料。与具有超顺磁性的Fe3O4纳米粒、丙烯酸单体及抗癌药物表柔比星制备磁性纳米粒,并通过透射电镜、振动样品磁强计等考察磁性纳米粒的理化性质及体外磁场响应性。结果载表柔比星的磁性壳聚糖纳米粒直径约200nm,磁化曲线提示其超顺磁性,测得载药率15%、包封率20％。结论磁性表柔比星纳米粒粒径小,载药率和包封率高,体外具有良好的磁场响应性。     

纳米铂金颗粒Bioplatin的绿色合成、特征及其抗肿瘤作用

目的：研究纳米铂金颗粒的抗癌作用并分析其与小牛胸腺DNA及蜂蜜的相互作用。 方法：使用绿色纳米技术合成纳米铂金颗粒Bioplatin并确定其物理特性如颗粒大小、电动电位及表面形态学。使用圆二色光谱分光光度法及傅里叶变换红外光谱技术以小牛胸腺DNA和蜂蜜作为靶点检测药物-DNA相互作用。使用噻唑蓝、荧光显微镜及DNA片段分析法检测其对外周血单核细胞及A375细胞的体外抗癌作用。 结果：Bioplatin的纳米直径为137.5 nm,表面电荷为－35.8 mV。Bioplatin与DNA相互作用后对DNA的结构产生了明显的作用,使其发生改变,并形成了一种能够提高DNA稳定性的新的化合物。体外实验表明Bioplatin能够抑制细胞增殖,引起细胞核染色质凝固和DNA核小体断裂。 结论：Bioplatin能够引起肿瘤细胞凋亡,因此具有一定的抗肿瘤作用。它能够与DNA相互作用,增加DNA的稳定性,从而抑制DNA的复制。     

聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米球的制备与表征

目的 制备聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)磁性纳米球。方法 乳化聚合法制备磁性纳米球的悬浮液,光子相关光谱仪和透射电镜测定磁性纳米球的粒径及其分布;紫外分光光度法测定磁性纳米球中Fe含量。结果 获得了水溶性正癸酸稳定的Fe₃O₄磁流体的粒径及其分布,以及载体浓度与稳定剂浓度对磁性纳米球粒径及其分布的影响。结论 首次在pH=6.3~6.4条件下用乳化聚合法制备了PBCA磁性纳米球的稳定悬浮液。