热休克因子1的调节及其对心肌和其他组织细胞的作用

人类热休克因子(HSF)基因HSF1、HSF2、HSF4中,HSF1最具特征性,在热休克反应中也非常重要。现已证实,HSF1的活性受HSF1的低聚状态、DNA结合能力、翻译后修饰,转录能力等多水平调控,体内外多种化合物能调节细胞中HSF1的活性与表达。HSF1在心肌细胞和其他组织器官中都有表达,它不仅在心肌细胞保护和抗凋亡、抗炎、抑制心肌纤维化中发挥着不可替代的作用,还在发育,生殖等生命活动中起着一定的作用。本文对HSF1活性的调节及其在不同细胞中的表达和对心肌细胞的保护作用作一简单综述,为临床疾病的研究拓展思路。     

热休克因子1在动脉粥样硬化中的作用

动脉粥样硬化被认为是一种慢性炎症、自身免疫性疾病。热休克因子1（HSF1）在多个组织器官中均有表达,是哺乳动物中调节热休克反应最重要的转录因子,参与调节热休克反应、诱导热休克蛋白（HSPs）的表达。它具有多种生物学功能,不仅能抗炎、抗凋亡、保护缺血心肌细胞、抑制心肌纤维化、参与生长发育过程;而且与动脉粥样硬化亦有紧密关系。该文就HSF1在动脉粥样硬化发生、发展过程中的作用作一综述。     

热休克因子1在动脉粥样硬化中的作用

动脉粥样硬化被认为是一种慢性炎症、自身免疫性疾病。热休克因子1（HSF1）在多个组织器官中均有表达,是哺乳动物中调节热休克反应最重要的转录因子,参与调节热休克反应、诱导热休克蛋白（HSPs）的表达。它具有多种生物学功能,不仅能抗炎、抗凋亡、保护缺血心肌细胞、抑制心肌纤维化、参与生长发育过程;而且与动脉粥样硬化亦有紧密关系。该文就HSF1在动脉粥样硬化发生、发展过程中的作用作一综述。     

从热休克因子1基因敲除小鼠心肌组织中筛选应激反应中受热休克因子1调控的靶基因

采用cDNA芯片（上海博星公司，含15000个基因）分析了热休克因子1（HSF）基因敲除小鼠经热休克反应（42℃ 15min，恢复3h)后心肌组织中基因表达谱的改变，结果共筛选到差异表达基因1142个，其中在HSF^-／-小鼠心肌中表达下调的基因为501个，已命名基因为173个；在HSF^-/-小鼠心肌中表达上调的基因为641个，已命名基因为235个。对基因启动子区转录因子结合位点的分析发现，在HSF^-/-小鼠心肌中表达下调2．5倍的基因中，有Klf4和Sdrfl等5个基因启动子区含有完整的热休克元件（heat shock element,HSE);在HSF^-/-小鼠心肌中表达上调2．5倍的基因中，有Neul、Fgl2等6个基因启动子区含有完整的热休克元件，上述结果表明热休克因子1直接调控了这些基因的表达。本研究还采用生物信息学技术成功克隆了人XLHSRF1基因（GenBank ID:AY221994)及其大鼠同源基因。本实验在国际上首次从热休克因子1基因敲除小鼠心肌组织中筛选到应激反应中受热休克因子1调控的多个靶基因，为从基因水平进一步揭示热休克因子1在调节应激反应中的作用提供了新的信息。     

热休克因子1在支气管哮喘中的表达

目的观察支气管哮喘（简称哮喘）小鼠肺组织中热休克因子1（heatshockfactor-1,HSF-1）的表达及其在哮喘中的作用。方法32只SPF级BALB／c小鼠随机分为正常对照组（N组）、急性哮喘组I（A组）、急性哮喘组Ⅱ（B组）、慢性哮喘组（C组）4组,每组8只。用10％鸡卵白蛋白（ovalbumin,OVA）致敏和1％OVA激发小鼠建立哮喘模型。HE染色鉴定模型;免疫组织化学、Western-blot法分析各组小鼠肺组织中HSF-I的表达和定位情况。结果支气管肺泡灌洗液（bronchoalvcolarlavagefluid,BALF）分析提示哮喘组嗜酸粒细胞绝对计数及分类计数较N组皆有显著增高（Pd0．05）;HE染色提示哮喘组与N组相比出现嗜酸粒细胞浸润增多、纤毛脱失、黏液栓形成等改变;免疫组织化学结果显示HSF-1在哮喘模型各组小鼠表达呈阳性结果,主要定位在支气管上皮细胞、部分肺泡上皮细胞和炎症细胞中,B组表达阳性信号最强,而在N组中表达较弱;Westernblot检测发现HSF-1在哮喘模型组表达量较对照组为高,灰度值通过单因素方差分析,差异具有统计学意义（P〈0．05）,其中B组的表达量较A组高,差异具有统计学意义（Pd0．05）。结论HSF-1在哮喘小鼠肺组织中主要表达于小鼠的支气管上皮细胞,部分肺泡上皮细胞和炎症细胞;HSF-1在哮喘中表达增高,且表达量与炎症的严重程度相关。     

人热休克转录因子1功能反应与其半胱氨酸巯基氧化还原性能的相关性

目的 评价半胱氨酸巯基氧化还原介导剂对人热休克转录因子1(hHSF1)的氧化还原状态、结构和功能的作用，并试图去解释氧化作用在细胞衰老中对hHSF1转录反应的影响。方法 通过改良的Western blot方法检测不同氧化还原介导剂对hHSF1构象的影响；通过凝胶电泳迁移率变动试验检测hHSF1的DNA的结合活性。结果 促进二硫键交联的氧化型介导剂二酰胺(DM)、一氧化氮(NO^ )载体亚硝基谷胱甘肽(GSNO)与含hHSF1的HeLa细胞S100提取液预培育，能在体外形成一个致密的、电泳中移动快速、分子内二硫键交联的氧化型hHSF1(ox-hHSF1)单体构象；在电泳前加入还原型介导剂二硫苏糖醇(DTT)能完全逆转。由于ox-hHSF1形成，使hHSF1在体外不能被热诱导激活形成三体，失去和DNA结合的活性，而且这个作用仅对含半胱氨-酸巯基的转录因子有特异性。结论hHSF1功能反应与其半胱氨酸巯基的氧化还原化学性能相关，氧化作用和hHSF1分子内二硫键交联有可能是衰老细胞热休克转录反应呈渐减性的原因。     

甲状腺滤泡癌中Beclin-1和热休克转录因子1表达及其与临床病理参数的关系

目的通过研究自噬相关蛋白Beclin-1和热休克转录因子(HSF-1)在甲状腺滤泡癌(FTC)及癌旁组织中的表达,探讨两者与FTC临床病理特征的相关性。方法采用SABC法检测53例FTC及癌旁组织中Beclin-1和HSF-1的表达,分析其与FTC临床病理的关系。结果在FTC中Beclin-1和HSF-1阳性表达率明显高于癌旁组织(P0.001)。在广泛侵入型FTC中Beclin-1阳性表达率明显高于微小侵入型FTC(P0.05),在广泛侵入型、伴有远处转移的FTC中HSF-1阳性表达率达100%。Beclin-1与HSF-1在FTC中的表达呈正相关(P0.05)。结论 Beclin-1和HSF-1可作为FTC的治疗靶点,两者相互作用共同参与了FTC的发生、发展。     

人脑胶质瘤中核转录因子-κB及热休克蛋白90的表达及意义

目的 探讨核转录因子-κB(NF-κB)与热休克蛋白90(HSP90 )在人脑胶质瘤中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学法检测11例脑外伤内减压切除正常脑组织和57例不同级别脑胶质瘤组织中NF-κB和HSP90的表达强度.结果 在57例胶质瘤组织中,NF-κB及HSP90的表达阳性率分别为75.4%(43/57)和68.4%(39/57),显著高于正常对照脑组织中的表达水平(4/11和3/11,P＜0.05).胶质瘤组织恶性程度越高,NF-κB及HSP90表达越强(P＜0.05).胶质瘤组织中NF-κB与HSP90的表达水平呈正相关性(r=0.719,P＜0.001).结论 NF-κB与HSP90蛋白在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用.     

转录因子AP-1在肝病中的作用

激活蛋白AP-1(activator protein-1)是一种核转录因子,它与人巯金属蛋白基因的顺式调控元件结合。转录因子AP-1复合物由c-jun,c-fos两个亚单位组成,通过亮氨酸拉链与DNA结合,其结合位点称为TRE即TPA(12-o-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate)反应元件,其共有序列为TGA(C/G)TCA。     

热休克因子1调控的细胞凋亡相关基因的筛选与鉴定

[目的] 观察热休克因子1在热休克反应时对细胞凋亡相关基因表达的调控，同时筛选和初步鉴定热休克因子1调控的下游凋亡相关基因。方法 采用热休克因子1基因敲除小鼠热休克反应模型，抽提热休克因子1基因敲除小鼠和野生型小鼠心肌和肺组织的总RNA进行基因芯片实验，观察凋亡相关基因表达的情况；同时采用生物信息学技术对上述差异表达基因的启动子区进行分析，筛选含有热休克元件的基因；通过逆转录一聚合酶链反应进一步验证热休克因子1对上述基因表达的调控。结果 热休克反应后，野生型小鼠与热休克因子1基因敲除小鼠组织中差异表达的细胞凋亡相关基因有40个。经Genomatix和TESS软件分析发现其中Fasl、Fas、Bim、Bak等8个基因的启动子区含有热休克因子1结合位点。经逆转录一聚合酶链反应证实，热休克反应使Fasl在热休克因子1基因敲除小鼠的表达较野生型小鼠明显增高，而在稳定转染热休克因子1的Raw264.7细胞，Fasl的表达较转空载体细胞明显降低。结论 热休克因子1可调控FasL等多个细胞凋亡相关基因的表达。     

血红素加氧酶-1对大鼠体外循环术后肺组织抗炎性损伤的研究

【】 观察钴原卟啉诱导肺组织血红素加氧酶-1（HO-1）表达在大鼠体外循环术后肺组织损伤中发挥的抗炎性损伤作用,并对其作用机制进行分析。方法 雄性Wistar大鼠144只,随机分为3组：A组（对照组）、B组（钴原卟啉,CoPP）、C组［钴原卟啉（CoPP）+锌原卟啉（ZnPP）］。建立改良大鼠体外循环肺损伤模型。制模前24 h,A组大鼠腹腔注射生理盐水,B组腹腔注射CoPP（5 mg/kg）,C组腹腔注射CoPP（5 mg/kg）和ZnPP（5 mg/kg）。制模成功后采用断颈法分别于体外循环前（T0）,体外循环结束即刻（T1),体外循环后2 h（T2）、6 h（T3）、12 h（T4）、24 h（T5）将大鼠处死,每个时间点8只。取肺组织检测相应的指标。用多聚甲醛来固定部分右肺组织,然后用石蜡包埋, 以用于HO-1蛋白表达的免疫组化方法测定。剩余肺组织置于液氮中冻存备用,用于检测肺组织匀浆胆红素的含量,酶联免疫吸附（ELISA）法检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达。结果 B组大鼠肺组织中HO-1蛋白表达在体外循环（CPB）开始前后均有明显增加,其活性测定结果与蛋白表达结果一致,在各时间点均强于A组和C组（P<0.05）,各组HO-1蛋白表达在T2期最高,A、B、C三组分别为0.1852±0.070、0.2873±0.091、0.1917±0.082。B组大鼠肺组织TNF-α的含量在CPB后各时间点均低于A组和C组（P<0.05）,三组TNF-α的含量在T2期最高,分别为：480.42±41.67 pg/mL、358.19±32.35 pg/mL、466.53±39.42 pg/mL。结论 CoPP可以诱导肺组织HO-1的高表达,而且经过CPB后仍保持较高的表达。内源性HO-1高表达在体外循环肺损伤中具有抗炎作用,可有效抑制TNF-α炎性细胞因子分泌,从而减轻体外循环术后肺的炎性损伤。     

过表达HSF1及ASK1基因对H2O2刺激后心肌细胞内ROS水平的影响

目的研究热休克因子1(HSF1)及凋亡信号调节激酶1(ASK1)对过氧化氢(H_2O_2)刺激后心肌细胞内活性氧簇水平(ROS)变化的影响。方法对不同组培养心肌细胞分别单独转染质粒HSF1,ASK1,及共转染HSF1 ASK1,48h待其充分表达后用1 mmol/LH_2O_2刺激心肌细胞30min,检测细胞内ROS水平,并与相应转染后未刺激组及未转染的对照组比较,观察ROS水平的变化。结果(1)所有H_2O_2刺激组心肌细胞内ROS水平均高于相同转染条件下的非刺激组(P<0.05);(2)相同H_2O_2刺激条件下,各组ROS水平:HSF1组低于对照组(P<0.05),ASK1组与对照组无显著差异,HSF1 ASK1组与单转HSF1组相比有升高的趋势;(3)相同H_2O_2刺激条件下,各组刺激后比刺激前ROS水平增高的幅度:HSF1组低于对照组(P<0.05),ASK1组与对照组无显著差别,HSF1 ASK1组与单转HSF1组相比有升高的趋势。结论在H_2O_2刺激条件下,HSF1可通过降低心肌细胞内的ROS水平来发挥细胞保护作用,而ASK1对细胞内ROS水平无影响,但其可干扰HSF1对ROS的抑制作用。     

血栓素A2与慢性肺部炎症性疾病

在慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘和肺囊性纤维化等气道慢性炎症性疾病中,常伴有广泛的气道结构破坏、重塑和黏液高分泌等病理改变.炎症介质血栓素A2(TXA2)是花生四烯酸的环氧合酶代谢产物之一,因其诱导血小板聚集、收缩血管及呼吸道平滑肌和刺激气道及血管平滑肌增殖而在这些病理改变中起着重要作用.TXA2作为一种重要的炎症介质,能刺激血管收缩,进而引起气道微血管渗漏,气道黏液增多,刺激气道平滑肌收缩进而引起气道阻力增加,并参与多种肺部炎症反应,近来还发现其可能参与杯状细胞化生和黏液分泌.现就其在肺部炎性疾病的作用作一综述.     

血栓调节素-活化蛋白C-内皮细胞蛋白C受体系统抗炎症作用研究进展

血栓调节素-活化蛋白C-内皮细胞蛋白C受体(TM-APC-EPCR)系统除具有传统的抗血栓、促纤溶特性外,最近的研究认为其还在炎症反应过程中相互协调整合,参与抗炎和抗凋亡作用,防止组织细胞受损,发挥保护作用.目前认为该系统作为炎症反应中的重要调节因素,将成为判断严重炎症疾病预后的指标和炎症治疗进程中的新靶点.     

The interplay of YKL-40 and leptin in type 2 diabetic obese patients

Recently, YKL-40 has been identified as a new inflammatory marker of type 2 diabetes mellitus (T2DM), while leptin is one of the most important adipose derived hormones. However, the relationship between them has not been elucidated. Therefore this study aimed to study their correlation in obese T2DM patients.     

The role of MRI in peripartum cardiomyopathy

Cardiac magnetic resonance imaging may be useful in the evaluation of peripartum cardiomyopathy, an inflammatory cardiomyopathy associated with pregnancy. Late gadolinium enhancement may be an indicator of ongoing inflammation and serve as a guide for endomyocardial biopsy for those patients not improving as expected with effective heart failure treatment.     

普罗布考对实验性大鼠急性痛风性关节炎的防治

目的探讨普罗布考防治痛风性关节炎的可行性及机制。方法于大鼠单侧踝关节腔内注射尿酸钠晶体建立急性痛风性关节炎模型,观察普罗布考干预后关节炎症、肿胀指数及关节液白细胞计数和白细胞介素1β的变化。用尿酸盐晶体刺激人单核细胞,普罗布考干预18h后检测培养液中白细胞介素1β的浓度。结果普罗布考各剂量组关节炎症肿胀指数下降幅度由低剂量向高剂量依次增加,与模型组比较,72h时中高剂量组下降程度较明显(P<0.05),关节液白细胞计数和白细胞介素1β的含量均有不同程度的下降。普罗布考中高剂量组关节液白细胞计数较模型组下降明显(P<0.01,P<0.001),普罗布考高剂量组白细胞介素1β较模型组下降明显(P<0.05)。普罗布考各剂量组对单核细胞分泌白细胞介素1β无抑制作用。结论中高剂量的普罗布考可以有效的控制大鼠急性痛风性关节炎的发作,其疗效具有一定的剂量依赖性,但其不是通过直接抑制单核细胞摄取尿酸盐晶体分泌白细胞介素1β来起作用。     

低氧诱导因子-1与炎症

低氧诱导因子-1(HIF-1)是机体的一种重要转录因子,在机体炎症过程中起着重要作用.它是由α和β亚基构成的异二聚体,其中α亚基受低氧调节,在常氧细胞中易被降解.研究发现,即使在常氧条件下HIF-1也能在炎症中发挥重要作用.本文就近年来HIF-1在炎症方面的研究作一综述.     

IL-1 receptor antagonist (IL-1Ra) gene polymorphism in patients with inflammatory bowel disease in India

Objective

An association between polymorphism in the gene coding for the anti-inflammatory cytokine interleukin-1-receptor antagonist (IL-1Ra) and ulcerative colitis (UC) has been reported. To date, there is no report from India confirming this association. In the present study the aim was to assess the allele frequencies and carriage rates of different alleles of 86 bp (base pair) variable number tandem repeat (VNTR) in intron 2 of the IL-1Ra gene in patients with inflammatory bowel disease (IBD) and healthy controls from northern India.

Material and methods

Eighty-two patients with UC, 21 with Crohn's disease (CD) and 141 ethnically matched controls were enrolled in this study. Genotyping was done using a polymerase chain reaction (PCR) amplification of the intron-2 fragment harboring a VNTR nucleotide sequence. The PCR products were separated on 2% agarose gel. Statistical analysis was performed using the chi-squared (χ²) test.

Results

The frequencies of allele 2 in UC, CD and healthy controls were 26%, 50% and 24%, respectively. The frequency of allele 2 in CD was higher than that in UC (p=0.002; OR?=?2.9) and healthy controls (p=0.001; OR?=?3.1; 95% CI?=?1.5--6.3). Alleles 3 and 4 were absent in patients with CD, while allele 5 was absent in all three groups.

Conclusions

The present study demonstrated an association between allele 2 and patients with CD but not with UC. Interestingly, the allele frequency and carriage rates of allele 2 were significantly higher in patients with CD than in patients with UC and in healthy subjects. Ethnic differences, genetic heterogeneity and sample size could be the reasons for such differences in comparison with studies from the West.