两种方法检测ALT的比较

目前，随着全自动加样系统在血站的应用，ALT的测定多采用微板速率法。但其在实验温度、反应时间和读板条件等方面所规定的实验检测状态受到手工操作的限制，不能达到全自动生化仪所具备的良好反应环境．使实验结果的重复性、特异性差，影响了检测的准确性。为寻求一个稳定可靠的批量测定ALT的检测方法，笔者尝试应用微板赖     

ALT ELS微板检测与赖氏法检测结果的比较

应用酶动力学对ALT进行检测，较目前血站常采用的赖氏法测定具有操作标准化，检测灵敏度高，易于实现自动化操作等优点，现将两种不同方法的检测结果进行了比较，结果如下。[第一段]     

酶法与赖氏法检测献血者ALT结果差异分析

长期以来,血站系统对ALT的检测以酮体酚法和赖氏法为主,随着全自动检测设备的使用,许多血站以酶法替代赖氏法检测ALT,但在工作中,我们发现两种方法的检测结果存在差异,现分析如下。     

两种方法测定血清ALT的比较

血清丙氨酸氨基转氨酶（ALT）的检测采用赖氏试管法,费时、操作繁琐,不适宜大批量标本的检测。随着全自动加样系统的应用以及新的《血站管理条例》的实施,本站以微孔赖氏法为初检方法,以微板丙酮酸氧化酶速率法为复检方法。笔者对2005年6月份的标本2373份进行检测,结果微孔赖氏法25卡门氏单位以上59例,阳性率为2．49％;微板丙酮酸氧化酶速率法25卡门氏单位以上52例,阳性率为2．19％。现将结果分析如下。     

酶标速率法与赖氏法测定ALT的比较

本站1999年引进自动加样系统及温控酶标仪用于ALT的测定，由于酶标仪测定ALT影响因素较多，因此笔对酶标仪初筛ALT升高的标本用赖氏法复查对照，现将检测情况报告如下。     

应用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆ALT活性

目的　用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆丙氨酸氨基转移酶 (ALT)活性 ,并对其可行性及适用性进行研究。方法　用赖氏法和丙酮酸氧化酶法 (酶标板法和试管法 )分别测定不同ALT值的血浆标本 ,并对结果进行统计分析。结果　 96孔酶标板法具有较好的精密度 ;线性范围达 135卡门氏单位 ;与赖氏法结果比较 ,可将 5 8份阳性标本全部检出 ,无阳性漏检。但酶标板法结果存在假阳性 (假阳性率为 0 .2 5 %) ,使用试管法进行复检后 ,结果与赖氏法完全一致。结论　使用丙酮酸氧化酶法ALT检测试剂盒可进行大批量ALT筛查 ,该方法具有快速、简便的优点 ,特别适用于标本量大手工操作的实验室。检测结果可用赖氏法的卡门氏单位表示 ,可以代替赖氏法。     

应用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆ALT活性

目的用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,并对其可行性及适用性进行研究.方法用赖氏法和丙酮酸氧化酶法(酶标板法和试管法)分别测定不同ALT值的血浆标本,并对结果进行统计分析.结果 96孔酶标板法具有较好的精密度;线性范围达135卡门氏单位;与赖氏法结果比较,可将58份阳性标本全部检出,无阳性漏检.但酶标板法结果存在假阳性(假阳性率为0.25%),使用试管法进行复检后,结果与赖氏法完全一致.结论使用丙酮酸氧化酶法ALT检测试剂盒可进行大批量ALT筛查,该方法具有快速、简便的优点,特别适用于标本量大手工操作的实验室.检测结果可用赖氏法的卡门氏单位表示,可以代替赖氏法.     

赖氏法ALT测定的微量化结果分析

目的　探讨献血者血样ALT微量赖氏法检测及其规范化的有关问题。方法　试用酶标仪及微量酶标板判读ALT赖氏试管法检测结果 ,将该方法与试管反应分光光度计判读以及微量板反应酶标仪判读方法进行了对比研究 ,并进一步评估了该种方法的精密度、准确性、重复性。结果　 3种方法检测ALT的标准回归直线趋近一致。本法检测ALT的变异系数低于 10 % ,该法对卫生部室间质评样品的盲法实测值与靶值经配对t检验无统计学差异。结论　用酶标仪判读ALT检测结果比全微量方式的误差小 ,比常量方式快捷 ,并且便于实现规范化。     

微板速率法与赖氏法测定ALT活性的对比分析

ALT活性检测是献血者初筛和血液复检的常规检测项目，目前已经有许多大中型血站采用微板速率法取代了赖氏法测定ALT活性，笔者对这两种方法进行比较分析，现报告如下。     

溶血对干化学法和赖氏法检测ALT的影响

目的　探讨溶血对干化学试纸条法以及赖氏法检测ALT的影响。方法　采用ALT临界值系列溶血标本进行实验。结果　溶血对干化学试纸条法检测ALT呈负相关 ,1%红细胞溶血导致ALT值的下降率为 7.9%。而溶血对赖氏法检测ALT呈正相关 ,1%红细胞溶血导致ALT值的上升率为 2 6 .2 %。结论　溶血对干化学法和赖氏法检测ALT都有影响。     

全自动加样器作微板赖氏法ALT检测加样参数的选择

血站自动化检测仪器,可以自动化加样、孵育、读板,极大降低了检验者劳动强度.本站对ALT采用微板赖氏法检测,用TECAN加样,后续由 BEPⅢ孵育、加2,4-二硝基苯肼、加NaOH、读板.TECAN加血样准确,但在加ALT丙酮酸标准品(简称标准品)时,标准品OD值仪器比手工偏低.为此,笔者在TECAN加样编程上进行了一系列实验,找到了仪器最佳加样参数,手工和仪器加标准品无显著差异,现报告如下.     

影响速率法检测血清ALT的因素

笔者在实际工作中对血清ALT测定中诸多因素作了讨论，认为试验中样品与试剂比1：10为佳；反应延迟时间应随环境温度的变化做适当更改变；每批测定均应做空白试验以检测试剂及仪器测定的稳定性及试剂是否变质；对高值血清对下一相邻标本可能产生的污染应引起重视，对标本测定中初始光密度小于1．0或更低时的情况，应酌情稀释标本，重作测定，以免使活性很高的标本误诊。室内质控适应用临界水平血清作平行测定，最佳测定范围为30至600u.     

全自动酶免分析仪用于ALT微板赖氏法检测

<中国输血技术操作规程>所规定的ALT的检测方法为:初检酮体酚法,复检赖氏法.以往试管赖氏法检测反应体积大,操作繁琐.已有不少血站将反应体积缩小若干倍采用微板法检测.大大减少了工作量,同时适应全自动加样设备的样本处理.全自动酶免分析仪有精确的温度控制系统,各组分试剂的分配精确,结果的判读较少受到外界的影响,笔者所在实验室将ALT的检测与其他检测项目进行组合同时检测,极大的方便了实验工作的安排,而且与传统的试管法及速率法检测结果一致.     

赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小的选择

目的　探讨赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小选择的依据。方法　利用赖氏微板法 ,采用正交试验的方法进行优选。结果　液体总量由赖氏试管法的 6 1 0 0 μl缩小为微板法的 2 70 μl,其中样本、基质、2 ,4 二硝苯肼加液量依次为 1 0、5 0、5 0 μl,NaOH(0 .72mol/L)加液量为 1 6 0 μl,结果判断 :Cutoff =[32×Mw(B) +2 5×Mw(Q) ]/5 7。利用微板赖氏法分别检测 2 0 0 3年卫生部临检中心和上海血液中心的ALT质控品 ,准确率均为 1 0 0 %。结论　 0 .1倍试管的加液量 (除NaOH外 )是微板赖氏法的最佳缩小量 ,选择 1 0 μl丙酮酸标准品作为结果判断标准的换算公式     

速率法测定血清铜氧化酶活力

我们设计了一种血清铜氧化酶速率法测定的方法,适合于自动分析.用本法对我院大量病例作了观察.认为可以作为临床诊断参考和病情监测的一种广泛使用的生化指标.1 材料和方法1.1 试剂1.1.1 0.1 mol/L 醋酸盐缓冲液pH 5.0 取13.608 g     

丙酮酸氧化酶法测定血清ALT的应用评价

丙氨酸氨基转移酶(ALT)是血站对血液的必检项目之一,目前我国按卫生部规定多使用赖氏法或速率法测定血清ALT活性,笔者对新近推出的丙酮酸氧化酶法进行应用评价,现报告如下.     

双波长微孔板赖氏法测ALT含量

献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定,目前多采用赖氏试管法,费工、费时.随着血站自动化加样系统的使用,国内一些血站采用单波长微孔板赖氏法测定ALT含量,但该法检测结果受脂血、板孔差异、板底划痕等因素干扰.