人类β-防御素-1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病关系的研究

目的 探讨人类β-防御素-1(hBD-1)基因多态性与慢性阻塞性肺病(chronic obstuctive pulmonary disease,COPD)之间的关系.方法 采用病例对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测COPD患者hBD-1基因型频率分布.结果 COPD组C、G等位基因频数分别是85.25%和14.75%,对照组 C、G等位基因频数分别是73 33%和26 67%, C等位基因在COPD组的频数明显高于健康对照组 (χ2＝5 237,P<0 05, OR:2 101,95% CI:1 104～3 998).结论 hBD-1基因668C/G位点基因多态性与中国北方汉族人群COPD易感性有相关性,C等位基因可能是COPD的高危险基因.     

脓毒症与Toll样受体基因多态性研究*

脓毒症是机体对严重感染的全身反应,研究表明其易感性和临床转归与机体的遗传背景等多种因素有关.笔者对与脓毒症相关的Toll样受体基因多态性进行如下综述.     

人类β-防御素-1（hBD-1）基因多态性与COPD的相关性研究

目的探讨中国北方汉族人人类β-防御素-1（humanβ-defensin-1,hBD-1）基因多态性与慢性阻塞性肺疾病（COPD）易感性的关系。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性法（PCR-RFLP）检测hBD-1基因外显子2（exon2 Val38Ile）基因型在84例中国北方汉族人COPD患者和90例健康对照者中的分布特点。结果 hBd-1基因exon2 Ile38等位基因在COPD及健康对照组中突变频率分别为14.28%、5.00%,2组比较差异有统计学意义（P=0.017）。结论 hBD-1 exon2 Val38Ile基因多态性是中国汉族人群COPD发病的危险因素（OR=2.776）,hBd-1 exon 2基因Ile38突变与吸烟对COPD的发生存在正协同作用。     

人β防御素3研究进展

人β防御素3是近年研究发现的一种内源性抗生素。它是一种存在于人皮肤和黏膜组织的小分子阳离子抗菌肽,具有广谱的抗微生物活性,可连接先天和获得性免疫应答,在各种疾病中起抗感染作用。Toll样受体在人β防御素3表达调控中起重要作用。本文就人β防御素3的分布、表达调控、生物学功能及其在疾病中的作用予以综述。     

脓毒症与Ton样受体基因多态性研究

脓毒症是机体对严重感染的全身反应,研究表明其易感性和临床转归与机体的遗传背景等多种因素有关。笔者对与脓毒症相关的Toll样受体基因多态性进行如下综述。     

Toll样受体4基因多态性与2型糖尿病的研究进展

2型糖尿病(T2DM)是一种多基因遗传病,多种基因和环境因素共同参与T2DM的发病。免疫在胰岛素作用、血糖稳态和T2DM中发挥重要作用。固有免疫反应是连接外界环境与机体相互作用的重要系统,固有免疫相关炎性途径的基因突变可能影响到T2DM危险因素的代谢表型,参与疾病的发病。Toll样受体4(TLR4)是固有免疫系统的核心介质,在T2DM中起着重要的作用。TLR4基因Asp299Gly及Thr399Ile的突变,可影响TLR4蛋白的结构,引起感染风险增加的同时也会降低慢性炎症相关疾病(如T2DM)的患病风险。     

广西壮族和汉族人群Toll样受体4基因启动子区遗传多态性研究

目的探讨广西壮族和汉族健康人群Toll样受体4(TLR4)基因启动子区rs10116253C/T、rs10983755G/A位点多态性的分布情况及其与不同地区、不同人群间的差异。方法采用单碱基延伸PCR技术及DNA测序方法检测123例广西壮族和汉族健康人群TLR4基因启动子区rs10116253C/T、rs10983755G/A位点的基因型和等位基因,并对比分析其与北京人、日本人、欧洲人、非洲人的基因型和等位基因频率的分布差异。结果广西人群TLR4基因启动子区rs10116253C/T位点存在CC、CT、TT三种基因型,分布频率分别为13.82%、44.72%、41.46%,三种基因型在广西地区男女组间相比,差异有统计学意义(P<0.05),而等位基因在广西地区男女组间相比,差异无统计学意义(P>0.05);其基因型及等位基因分布频率与欧洲人群相比,差异有统计学意义(P<0.05)。rs10983755G/A位点存在AA、AG、GG三种基因型,分布频率分别为4.07%、32.52%、63.41%,其基因型和等位基因在广西地区男女组间相比,差异均无统计学意义(P>0.05);其基因型及等位基因分布频率与欧洲、非洲人群相比,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论广西人群TLR4基因rs10116253C/T、rs10983755G/A位点多态性在不同的人群和地区之间存在差异。     

Toll样受体基因多态性与幽门螺杆菌感染及其相关疾病关系的研究进展

Toll样受体(TLRs)是近年来发现的跨膜信号转导受体,它作为模式识别受体(PRRs),能通过识别病原体相对保守的病原相关分子模式(PAMPs)激活相关炎症级联反应,诱导细胞因子和化学因子的表达,在幽门螺杆菌(Hp)感染及其所致的相关疾病中起重要作用。TLRs的基因多态性能够影响机体对疾病的遗传易感性,本文拟从TLRs家族的生物学特征、信号传导途径及其基因多态性与Hp感染及相关疾病的关系作一综述。     

人β防御素-2研究进展

内源性抗生素肽(endogenous antibiotic peptides)是动、植物天然免疫的重要介质,在哺乳动物(包括人)中,由于对革兰氏阳性菌、阴性菌、真菌、螺旋体、分枝杆菌及某些包膜病毒等均有很强杀伤活性,故将其命名为防御素(defensin).迄今为止,在人体中已发现的防御素共有两类(α、β)10种.其中β防御素家族共发现3种,分子量为4～5kD,含38～47个氨基酸残基阳离子,分别为人β防御素-1,2,3(human β-defensin-1,2,3. hBD-1,2,3).德国Harder J等[1]于1997年首先发现hBD-2,他们用大肠杆菌亲和柱结合高压液相层析法在牛皮癣病人皮肤中分离并纯化到约4.3kD的多肽,经氨基酸序列分析表明与牛的TAP(气管抗菌肽)、LAP(舌抗菌肽)及hBD-1同源,属于人β抗菌肽成员之一,命名hBD-2.已证实hBD-2是黏膜和上皮细胞抵抗微生物入侵的重要介质,在持续暴露在病原微生物的器官表面发挥重要的抗菌作用.     

糖皮质激素受体β-防御素与肾阳虚证的研究现状

肾阳虚证已证实为下丘脑-垂体-靶腺（肾上腺、甲状腺和性腺）轴功能减退所致,研究发现地塞米松可抑制人β-防御素-3（hBD-3）的表达,肾阳虚时此抑制解除可能使气道及肺组织局部防御功能提高。此外,研究还发现肾阳虚时血浆内皮素水平升高,肾阳虚慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者存在性腺-免疫-内分泌轴的严重衰退,肾阳虚肺纤维化大鼠肺组织糖皮质激素受体（GR）mRNA表达下调,但肾阳虚与GR、hBD之间的关系还有待进一步揭示,为温阳药防治气道及肺组织炎症性疾病提供理论依据。     

广西人群Toll样受体4及其rs10116253C/T位点多态性与冠心病的相关性研究

目的探讨广西人群Toll样受体4(TLR4)及其rs10116253C/T位点多态性与冠心病(CHD)的相关性。方法选取278例CHD患者为CHD组,123例健康体检者为对照组。采集两组入选者7 ml外周静脉血,检测两组外周血TLR4基因rs10116253位点的多态性和血清TLR4的表达水平。结果广西人群CHD组和对照组三种基因型(CC、CT、TT基因型)和等位基因(C和T等位基因)频率分布趋势相同,rs10116253位点携带CT基因型(OR=0.372,95%CI:0.191~0.722,P=0.003)和C等位基因(OR=0.440,95%CI:0.257~0.752,P=0.002)的女性较携带相同等位基因的男性患CHD的风险低,携带TT基因型(OR=0.505,95%CI:0.257~0.991,P=0.045)的汉族人较携带相同基因型的壮族人患CHD的风险低;CHD组血清TLR4表达水平明显高于其对照组[(4.29±1.55)ng/ml对比(1.07±0.43)ng/ml,t=31.969,P<0.05],且在CHD组内随着病变累及血管支数的增加,TLR4也随之升高,其差异均具有统计学意义(P<0.05),rs10116253位点不同基因型CHD患者组内血清TLR4水平、病变累及血管支数间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在中国广西人群中,TLR4基因rs10116253C/T位点多态性可能是CHD发病的一个遗传易感因素,外周血TLR4的表达水平在CHD患者中明显升高,且可能与病变累及血管支数有关。     

Toll样受体与HIV-1病毒感染

感染人类免疫缺陷病毒(HIV)后,引起免疫系统的持续激活,进而导致CD4+T细胞数目不断减少,最终导致人类免疫缺陷综合征(AIDS)的发生。阻断免疫系统的持续激活,可能是减缓AIDS发展进程的重要途径。有研究表明,Toll样受体(TLR)与HIV感染后免疫系统的持续激活密切相关。同时,TLR是重要的模式识别受体,在抗微生物的非特异性免疫中发挥重要作用并参与调节特异性免疫。本文综述了TLR与HIV-1的关系,以给HIV-1治疗及疫苗的研究提供参考。     

慢性扁桃体炎中人β-防御素-3的表达及意义

目的 探讨慢性扁桃体炎中人β-防御素-3 (hBD-3)的表达及意义.方法 应用HE染色,逆转录聚合酶链式反应、SP法、蛋白印迹法观察和检测15例扁桃体炎组和10例对照组组织的病理变化及组织中hBD-3的表达.结果 HE光镜下显示对照组病理特点固有层纤维结缔组织反应性增生为主,非角化复层扁平层内未见炎性细胞浸润;扁桃体炎组淋巴滤泡增生,生发中心扩大,非角化复层扁平层内炎性细胞浸润,蛋白渗出明显.逆转录聚合酶链式反应结果显示扁桃体炎组观察到目的片段;对照组未见hBD-3的特异片段.免疫组织化学光镜下显示扁桃体炎组非角化复层扁平上皮细胞胞浆中hBD-3阳性表达;对照组非角化复层扁平上皮细胞胞浆中呈阴性表达.蛋白印迹法检测结果显示扁桃体炎组可见阳性条带;对照组未见阳性条带.结论 hBD-3在慢性扁桃炎中的表达,表明hBD-3可能在扁桃体和上呼吸道抗感染中发挥重要作用.     

Rs4129009基因多态性与慢性HBV感染的相关性研究

目的探讨Toll样受体10（TLR10）基因多态性位点Rs4129009（Ile775Val）与慢性HBV感染的关系。方法采集428例慢性HBV感染患者、210例健康对照人群外周血并提取全基因组DNA。采用聚合酶链反应（PCR）法扩增特定基因多态性位点,产物经纯化后直接测序分析。结果两组均符合Hardy-Weinberg平衡（均P＞0.05）,即研究对象具有群体代表性。与健康对照组比较,HBV感染组变异型（AG+GG）、等位基因G频率均较低（均P＜0.01）。高病毒载量（＞106IU/ml）、HBeAg阳性的变异型基因比例较高（均P＜0.01）,而HBV感染程度、乙肝家族史与基因多态性无关（均P＞0.05）。结论TLR10基因Rs4129009可能与慢性HBV感染相关。     

系统性红斑狼疮患者Toll样受体9基因多态性的初步研究

目的 研究Toll样受体9(TLR9)基因在系统性红斑狼疮(SLE)中是否存在多态性.方法 提取26例SLE患者mRNA并逆转录为cDNA,扩增产物经3730 DNA自动测序仪测定TLR9基因序列.结果 TLR9 mRNA自起始位点起第1783、2269和3222位碱基存在二态性(A或G),这3个位点为单核苷酸多态性(SNP)位点,分别称之为SNP1、SNP2和SNP3,其中SNP1是我们新发现的多态性位点,SNP2和SNP3为美国国立生物技术信息中心(NCBI)SNP数据库中公布的位点,它们均不改变氨基酸编码.SNP2在人群中可表现为AA纯合、GG纯合或AG杂合3种基因型,在SLE患者中以AG型为主(50%),而在正常人中以GG型为主(75%)(P＜0.05);SNP1和SNP3只在一名男性SLE患者中发现,表现为AG杂合,其余个体均为GG纯合.结论 TLR9基因编码区中的一个单核苷酸多态性与SLE发病相关联.     

系统性红斑狼疮患者Toll样受体9基因多态性的初步研究

目的研究Toll样受体9(TLR9)基因在系统性红斑狼疮(SLE)中是否存在多态性。方法提取26例SLE患者mRNA并逆转录为cDNA,扩增产物经3730 DNA自动测序仪测定TLR9基因序列。结果TLR9 mRNA自起始位点起第1783、2269和3222位碱基存在二态性(A或G),这3个位点为单核苷酸多态性(SNP)位点,分别称之为SNP1、SNP2和SNP3,其中SNP1是我们新发现的多态性位点,SNP2和SNP3为美国国立生物技术信息中心(NCBI)SNP数据库中公布的位点,它们均不改变氨基酸编码。SNP2在人群中可表现为AA纯合、GG纯合或AG杂合3种基因型,在SLE患者中以AG型为主(50%),而在正常人中以GG型为主(75%)(P<0.05);SNP1和SNP3只在一名男性SLE患者中发现,表现为AG杂合,其余个体均为GG纯合。结论TLR9基因编码区中的一个单核苷酸多态性与SLE发病相关联。     

湖南汉族人群中Toll样受体2和4基因遗传多态性与冠心病的关系

目的：探讨湖南地区汉族人群Toll样受体(Toll-like receptor 2,TLR2)及TLR4基因多态性与冠状动脉粥样 硬化性心脏病(冠心病)的关系。方法：运用Sanger测序技术检测180例正常对照组及167例无血缘关系湖南汉族人 群冠心病组中TLR2 SNP 2258A>G及TLR4 SNP896A>G和SNP1196C>T的多态性。结果：TLR2 SNP 2258A>G及TLR4 SNP896A>G基因型频率和等位基因频率在冠心病组和正常对照组之间的分布差异无统计学意义(P>0.05),TLR4 SNP1196C>T在两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论：湖南地区汉族人群TLR4基因多态性位点SNP1196C>T与 冠心病有关。     

胰岛素样生长因子-1受体基因多态性与系统性红斑狼疮相关性研究

目的:研究胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)基因rs2229765位点多态性与湖北汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)易感性之间的关系。方法:SLE患者22例及70名健康对照者,采取聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法对IGF-1受体基因rs2229765位点多态性进行检测。结果:SLE组患者IGF-1受体基因rs2229765位点AA、AG、GG基因型频率分别0.182,0.636,0.182,正常人对照组为0.042,0.928,0.028。SLE组与对照组相比基因型频率具有统计学差异(χ2=3.891,P<0.05),A、G等位基因频率无统计学差异(χ2=0.544,P>0.05)。结论:IGF-1R基因rs2229765位点单核苷酸多态性与SLE明显相关,IGF-1R基因可能是SLE的易感基因。     

人β-防御素4基因在COS-7细胞中的转染表达

目的探讨人β-防御素4（HBD4）基因在真核细胞COS-7中表达的可能性。方法用脂质体转染法将实验室已构建的重组真核表达载体pcDNA3.1＋/HBD4导入COS-7细胞,采用RT-PCR、Western-blot法检测HBD4的mRNA和蛋白表达水平,并对表达的HBD4进行抗菌活性的初步研究。结果 pcDNA3.1＋/HBD4转染的COS-7细胞中检测到HBD4mRNA表达。Western blot分析显示,在pcDNA3.1＋/HBD4转染的COS-7细胞及细胞培养液中检测到了HBD4蛋白的表达。Kirby-Bauer纸片扩散法证实表达的HBD4蛋白对大肠杆菌ATCC25922具有较强的杀伤作用。结论在COS-7细胞中成功表达具有抗菌活性的HBD4多肽。     

人β-防御素3的研究新进展及其与疾病的关系

防御素是近年来发现的一类内源性小分子多肽,人β-防御素-3(HBD-3)是在银屑病患者皮损组织中首先发现,HBD-3在人体上皮细胞和黏膜组织中广泛表达,分子结构稳定,具有广谱的抗微生物活性,能促进伤口愈合,发挥免疫调节及抗肿瘤等多种作用。HBD-3在呼吸系统疾病、消化系统疾病、囊性纤维化、肿瘤等疾病中发挥重要作用,应用前景广阔。