用病毒RNA抽提及分子杂交法检测甲型肝炎病毒

本文报告了从感染甲型肝炎病毒(HAV)标本中抽提病毒RNA(HAV RNA),及用分子杂交法检测HAVRNA的技术,并与免疫电镜(IEM)、放射免疫测定法(RIA)的敏感性作了比较。作者用略经修改的胍盐/热酚法(酚/氯仿多次抽提),从感染HAV HM-175株的培养细胞胞浆、狨猴粪便和肝脏、感染MS-1株病人的粪便和血清中提取HAV RNA,然后进行分子杂交。用插入野毒株HM-175cDNA的重组质粒PBR322制成HAV探针,用[α-~(32)P]dCTP标记。用放射自显影观察杂交结果。作者将感染HAV的培养细胞阳性对照     

甲型肝炎疫苗候选株的性质

本文描述了在人成纤维(HFS)细胞中增殖的甲型肝炎疫苗候选株的生物物理、生化和电镜观察的研究结果。用放射免疫法(RIA)检测HAV抗原,用微量板孔培养的HFS细胞滴定HAV感染性(TCID_(50)),用12烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定HAV蛋白质的分子量。含HAV的上清液取自HAV感染的HFS细胞培养液,待RIA检测HAV抗原滴度达1∶7时,每周收获一次。经硫酸铵沉淀、超速离心6500倍浓缩后,HAV的RIA抗原滴度达1∶     

检测HAV和抗HAV中和抗体的微量细胞病变法(英)

作者用甲型肝炎病毒（HAV）致细胞病变株HM175A.2和 BSC－1细胞建立了测定HAV半数组织培养感染量（TCID_(50)）的微量细胞病变法。     

含灭活的HAV抗原和重组HBsAg的肝炎结合疫苗

一种新型的甲、乙型肝炎结合疫苗由灭活的甲型肝炎病毒(HAV)抗原、乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)和佐剂组成.用培养HAV感染的细胞和灭活所得到的抗原的方法获得灭活的HAV抗原.HBsAg则通过基因重组技术转化的、能产生HBsAg的重组体制得.得到的多价疫苗能同时防御HAV和HBV的感染.该疫     

人淋巴细胞对甲型肝炎病毒感染细胞的应答:干扰素的产生和感染细胞的溶解

试验用的效应细胞系甲型肝炎病毒(HAV)抗体阴性的健康供体的外周血单个核细胞(PBMC)。其非粘连的外周血淋巴细胞(PBL)经间接膜免疫荧光抗体染色后,用荧光激活细胞分类器(FACS 440)进行分类,亚群细胞的纯度大于97%。靶细胞有:感染HAV,HM175株的BS-C-1细胞、未感染的BS-C-1细胞和人红白血病细胞K562。用特异性~(51)Cr释放试验检测自然杀伤(NK)细胞的功能。用人纤维母细胞的细胞病变作用减     

甲型肝炎病毒的血凝作用及血凝抑制抗体试验

本文首次报道甲型肝炎病毒(HAV)HM175株在类似于其他肠道病毒致血凝的条件下,具有使多种红细胞发生凝集(HA)的特性.作者由此特性建立了检测HAV特异性抗体的血凝抑制(HAI)试验.感染HAV的MRC-5细胞培养液经澄清、离心、磷酸盐缓冲液悬浮及100倍浓缩制成血凝素,用同法以未感染细胞培养液制成对照抗原制剂.用人O型红细胞及豚鼠和鹅的红细胞进行检测,结果表明,HAV使人O型红细胞发生凝集的最佳pH为5.4～     

一种简单的组织培养方法测定甲型肝炎病毒的热敏感性

研究甲型肝炎病毒(HAV)热灭活条件的资料,可作为水质是否能安全饮用的基础,而且关系到一些食品的加工方式是否恰当的问题。作者利用HAV能在FRhK-4细胞上生长的有利条件,研究了HAV在PBS和牛奶中的加热灭活条件。从感染性粪便分离HAV、经FRhK-4细胞传代适应后,从感染细胞收集组织培养液(TCF),液体经过冻、融、超声处理和2,000g离心20分钟,其上清用作接     

用细胞培养方法大规模生产甲型肝炎病毒:感染类型对病毒产量和细胞完整性的影响

过去曾报道从持续感染甲型肝炎病毒(HAV)HAS-15株的1×10~6cm~2细胞的细胞溶解物和350L细胞上清液中能获得约5mg纯化病毒.但作者发现在持续感染过程中病毒的得率会明显下降.为此,对大量生产HAV的不同细胞培养条件进行了研究.作者将持续感染HAS-15株的恒河猴胎肾(FRHK4)细胞培养了3年,比较不同胎牛血清(FCS)浓度和培养时间对病毒产量的影响.结果发现培养液中FCS减少至10%,同     

因子IX浓制剂传播甲型肝炎病毒的研究

长期以来,人们一直以为甲型肝炎病毒(HAV)不经血液制品传播.因为:(1)HAV极少经血液传播;(2)在献血员群体中极少见到HAV血症;(3)制备血液制品的混合血浆中存在大量抗-HAV.然而,1989～1994年间,许多国家相继报道了因输用经溶剂/去污剂处理的因子Ⅷ浓制剂感染HAV的病例.本文对两例血友病乙患者因于1985年接受同一批因子Ⅸ浓制剂(未经加热处理,应用离子交换纯化的凝血酶原复合物,批号为90742)治疗而于治疗50天内发生甲型肝炎的病例进行回顾性研究.抽取该厂家1982～1986年间生产的批号90742和其前后生产的共26批制品,采用逆转录-聚合酶链反应检测HAV RNA.     

原位酶免疫法对快速复制并致细胞病变的甲型肝炎病毒HM175A.2株作感染性滴定

作者用甲型肝炎病毒(HAV)HM175A.2株感染BS-C-1细胞,获感染性病毒,经观察细胞致病作用(CPE)测得其感染性滴度为1×10~6半数组织培养感染量(TCID_(50))/ml。分装,-70℃保存。将此HAV纯化后注射豚鼠制备抗-HAV超免疫血清,并预留豚鼠的免疫前血清。在96孔细胞培养板上接种病毒进行原位酶免疫试验(EIA)测定病毒感染性滴度,并以CPE滴定法作对照,以评价EIA的准确性和可靠性。     

一种用于检测甲型肝炎病毒感染性的简化的多孔板分析法

测定培养细胞中甲型肝炎病毒(HAV)的感染性,主要依赖于从感染细胞中抽提抗原,并用放射免疫法或放射免疫灶分析法进行测定,本文所介绍的多孔板分析法(MWPA)采用荧光、酶或同位素标记探针可简化上述方法。     

从感染细胞培养中制备原型甲型肝炎病毒灭活疫苗

本文报道了用福尔马林灭活感染细胞培养制备的原型甲型肝炎病毒(HAV)疫苗的效果及其在实验动物中的安全性和免疫原性研究的结果。作者用在非洲绿猴肾(AGMK)细胞中传10代、在另一AGMK细胞系BS-C-1中传2～4代的HAV HM 175株作为制备疫苗的种子。从无血清199培养液维持的BS-C-1细胞     

甲乙型肝炎病毒的二重感染和混合感染

<正> 甲型肝炎病毒(HAV)和乙型肝炎病毒(HBV)都是我国小儿病毒性肝炎(简称肝炎)的常见病原,无交叉免疫,可以同时存在。如HAV感染和HBV感染同时发生,称“混合感染”;如在HBV感染的基础上又发生HAV感染,称重叠感染。难以辨明者,统称“二重感染”。现就我院两年所见小儿HAV和HBV二重感染病例报道如下。     

在Vero细胞上培养甲型肝炎病毒

美国专利局最近批准了一项在细胞培养中生长甲型肝炎病毒(HAV)的专利.该专利的内容是用HAV接种Vero细胞,在33℃(或低于该温度)中传代.将均质感染细胞培养物的1/100～1/1000再接种于细胞培养物上,然后在含5%     

HBV、HAV、EBV 三重感染一例报告

乙型肝炎病毒(HBV)和甲型肝炎病毒(HAV)重叠感染病例已有不少报告。我们见到1例HBV、HAV 和 Epstein—Barr 病毒(EBV)三重感染患者,报告如下。     

住院精神病病人 2 250例肝炎病毒感染及其影响因素的 logistic回归分析

目的探讨住院精神病病人甲型肝炎病毒( HAV)、乙型肝炎病毒( HBV)、丙型肝炎病毒( HCV)感染发生率,并 logistic回归分析感染影响因素。方法选取新乡医学院第二附属医院 2014年 1月至 2019年 8月 2 250例住院精神病病人作为研究对象。取清晨空腹静脉血检测抗 HAV、HBV、HCV表面抗原,统计 HAV、HBV、HCV感染发生率、感染病人相关指标阳性表达情况,并收集其临床资料,对比不同临床特征病人 HAV、HBV、HCV感染发生率, logistic回归分析病毒性肝炎感染影响因素。结     

用免疫过氧物酶染色和电镜观察证实细胞培养中的甲型肝炎病毒

作者将HM-175株甲型肝炎病毒(HAV)接种单层BS-C-1细胞,6周后,将感染细胞和对照细胞作常规和免疫化学电镜观察。常规电镜检查技术是,将感染细胞用聚甲醛和戊二醛混合液固定,再以橡皮淀帚刮取,用四氧化锇作后固定,Epon 812脱水包埋,最后以枸橼酸铅和醋酸双氧铀进行染色。电镜观察,发现病毒样颗粒仅见于感染细胞的胞     

用异倍体猴传代细胞系制备的甲型肝炎灭活疫苗的特性

本文报告了甲型肝炎灭活疫苗的实验室制备方法及某些特性。选用甲型肝炎病毒(HAV)LBA-86株在健康的非洲绿长尾猴肾传代细胞系上培养,传20代后,HAV水平稳定在10~(7.5)～10~(8.0)。半数组织培养感染量(TCID_(50))/ml。接种病毒后14～21天收获的、与上清液混合的感染细胞裂解物作为原苗,然后经低速离心和进一步提纯,有效地去除细胞和血清蛋白以及底物DNA。每剂疫苗浓度降至50～90pg,即没有超过世界卫生组织专家组推荐的上限为100pg的水平。     

甲型肝炎原型活疫苗在灵长类动物模型中的研究

作者将甲型肝炎病毒(HAV)HM175株在非洲绿猴肾细胞中连续传代,将第21代(P21)和第32代(P32)的两个原型活疫苗经静脉感染黑猩猩和狨猴,发现此两株活疫苗病毒的生物学特性有所不同。接种P21株和P32株的黑猩猩的血清丙氨酸转氨酶(ALT)值均低于接种野型HAV者,接种P32株的黑猩猩的ALT值与接种前无明显差异,但显著低于接种野型HAV者。狨猴接种P21株和野型HAV后,血清异柠檬酸脱氢酶(ICD)值明显升高,接种P32株后ICD值比接种野型HAV者低4倍,但仍比接种P32株     

采用PLC/PRF/5细胞培养甲型肝炎病毒连续生产血清学诊断用抗原

作者以甲型肝炎病毒(HAV)CF53株感染人肝癌细胞系PLC/PRF细胞后,将细胞在含有2.5%胎牛血清(FCS)的RPMI 1640营养液中32℃培育6～12个月。自开始培养后20天起,每周收获培养上清液,总共可收获5～101上清液。上清液经2000×g离心10分钟,澄清后贮存于-70℃。用放射免疫法(RIA)检出每代的HAV抗原(HAAg)滴度约为50;而传染性病毒滴度则由10~(3.7)半数组织培养感染量(TCID_(50))/ml增至10~(6.0)TCID_(50)/ml。