O6-苄基鸟嘌呤增强1，3-二（2-氯乙基）-亚硝基脲对人肝癌细胞及其移植瘤的抗肿瘤作用

应用噻唑蓝（MTT）法检测O⁶-苄基鸟嘌呤(O⁶-BG)与1,3-二（2-氯乙基）-亚硝基脲（BCNU）合用的细胞毒作用及透射电镜检测凋亡细胞的方法研究了O⁶-BG对O⁶-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶（O⁶-AGT）阳性的人肝癌细胞SMMC-7721对BCNU细胞毒作用敏感性的影响及其与BCNU合用治疗移植瘤的协同效果. 结果显示：1.5-6.0 mg·L^-1的O⁶-BG预先作用2 h后,SMMC- 7721细胞对BCNU的敏感性明显增加;0.75-6.0 mg·L^-1的O⁶-BG可完全快速地抑制肿瘤细胞的AGT活性并持续12 h; ip 90 mg·kg^-1的O⁶-BG预处理2 h后给予25 mg·kg^-1的BCNU治疗,可使动物sc接种的人肝癌移植瘤生长延迟38.6 d, 诱导肿瘤细胞凋亡,并且可明显抑制肿瘤组织的转移酶活性. 说明O⁶-BG与BCNU合用于AGT阳性的肿瘤将具有明显的治疗效果.     

萘环类姜黄素类似物的合成及其对HepG2细胞株的增殖抑制活性

目的：合成萘环类姜黄素类似物并研究其对人肝癌（ HepG2）细胞的增殖抑制作用。方法以萘酚为原料,合成了4种萘环类姜黄素类似物,并采用噻唑蓝（ MTT）法测定对人肝癌细胞的增值抑制作用。结果6-羟基取代的萘环姜黄素类似物对人肝癌细胞的增殖抑制活性最强,其半抑制浓度（ IC50）达到了20μmol · L-1,与姜黄素相比提高了近2倍。结论6-羟基取代的萘环姜黄素类似物对人肝癌细胞具有良好的增殖抑制活性。     

O~6-苄基鸟嘌呤增强 1,3-二 (2 -氯乙基)-亚硝基脲对人肝癌细胞及其移植瘤的抗肿瘤作用(英文)

应用噻唑蓝 (MTT)法检测 O6-苄基鸟嘌呤(O6- BG)与 1 ,3-二 (2 -氯乙基 ) -亚硝基脲 (BCNU)合用的细胞毒作用及透射电镜检测凋亡细胞的方法研究了 O6- BG对 O6-烷基鸟嘌呤 - DNA烷基转移酶(O6- AGT )阳性的人肝癌细胞 SMMC- 772 1对BCNU细胞毒作用敏感性的影响及其与 BCNU合用治疗移植瘤的协同效果 .结果显示 :1 .5- 6.0 mg· L-1的 O6- BG预先作用 2 h后 ,SMMC- 772 1细胞对 BCNU的敏感性明显增加 ;0 .75- 6.0 mg· L-1的 O6- BG可完全快速地抑制肿瘤细胞的 AGT活性并持续 1 2 h;ip 90 mg· kg-1的 O6- BG预处理 2 h后给予 2 5mg·kg-1的 BCNU治疗 ,可使动物 sc接种的人肝癌移植瘤生长延迟 38.6d,诱导肿瘤细胞凋亡 ,并且可明显抑制肿瘤组织的转移酶活性 .说明 O6- BG与 BCNU合用于 AGT阳性的肿瘤将具有明显的治疗效果     

4-芳氨基-6-溴喹唑啉类化合物的合成及抗肿瘤活性的初步研究

目的 设计合成新的4-芳氨基-6-溴喹唑啉类化合物,并评价其抗肿瘤活性。 方法 以4-氯-6-溴喹唑啉和含有不同取代基的(E)-氨基二苯乙烯或4-[2-（2-呋喃基）]乙烯基苯胺为原料,经过亲核取代反应合成了5种目标化合物。采用MTT法,以人低分化胃癌细胞（BGC-823）和人肺癌细胞（A549）为受试细胞株对目标化合物进行体外抗肿瘤活性评价。 结果与结论 所得化合物的结构利用IR、1HNMR、13CNMR和元素分析进行了确认。5种化合物对BGC-823和A549两种细胞模型的体外抗肿瘤活性测试结果表明,大部分化合物具有较好的抗肿瘤活性。     

薯蓣皂苷类似物的合成及其初步抗肿瘤活性研究

目的 合成薯蓣皂苷类似物并初步研究其抗肿瘤活性.方法 采用直接苷化法合成薯蓣皂苷类似物,并用MTT法筛选其体外抗癌活性.结果 用简单高效的方法合成了化合物,并通过1 HNMR、13CNMR、ESI-Q-TOF-MS和单晶衍射证实其结构.结论 通过MTT法发现化合物Ⅴ和Ⅶ对乳腺癌细胞MDA-MB 231有一定的抑制作用.     

肺癌患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性研究

目的 检测人类O^6－甲基鸟嘌呤－DNA甲基转移酶（MGMT）基因5个外显子的单核苷酸多态（SNPs）及其与肺癌的关系。采用聚合酶链式反应（PCR）－单链构象多态性（SSCP）－DNA直接测序法对100例正常人和60例肺癌患者外周血白细胞进行MGMT基因SNPs研究。结果 在正常人群和肺癌患者中检测到MGMT基因的第3、4外子上存在着SNPs，即第3外显子上第250位碱基C被T所取代，导致错义突变（CTT→TTT，使Leu84Pphe）；第4外显子第280位碱基C被T取代，导致同义突变（TTC→TTT，均编码Phe）。这两个位点的SNPs在两组人群间的检出率差异无显著性（P＞0．05）。结论 MGMT基因第3、4外显子上存在着SNPs，其侈态改变与肺癌形成的关系较弱。     

新型6-芳基茚并异喹啉酮衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

目的合成一系列新型结构6-芳基茚并异喹啉酮衍生物,并考察目标化合物对DNA拓扑异构酶Ⅰ（TopoⅠ）的抑制活性及其体外抗肿瘤活性。方法以茚和间氯苯甲酸为原料,分别合成高酞酸和4-甲氧基高酞酸;高酞酸通过脱水反应、与亚胺加成反应制得中间体6-芳基茚并异喹啉酮;该中间体与各种氨基取代的氯代物反应得到目标化合物。采用TopoGEN公司的Topoisomerase Ⅰ drug screning kit来测试目标化合物对TopoⅠ的抑制活性;选取人乳腺癌细胞（MCF-7）、非小细胞肺癌细胞（NIH-H460）和人神经胶质瘤细胞（U251）对目标化合物进行体外抗肿瘤活性筛选。结果与结论共合成了17个未见文献报道的新化合物,其结构均经MS（EI）、1H-NMR确证。体外活性筛选结果表明：目标化合物对TopoⅠ表现出良好的抑制作用,且对3种肿瘤细胞表现出较好的抗增殖活性。     

“一瓶法”合成鬼臼毒素类似物及其体外抗肿瘤活性

目的探讨天然产物鬼臼毒素类似物表鬼臼毒素（1）和4＇-脱甲基表鬼臼毒素（2）的简易合成方法，并测试其体外抗肿瘤活性。方法采用“一瓶法”合成目标产物，并通过MTT法和SRB法测定2个目标化合物的体外抗肿瘤活性。结果与结论通过对鬼臼毒素进行结构改造，得到合成其衍生物的常见化学反应的简易操作方法，化合物1和2的收率分别为86％和79％，其结构经。H-NMR和ESI—MS谱确证。活性测试结果表明，目标化合物对4种肿瘤细胞（HeLa细胞、SKOV3细胞、K562细胞、耐阿霉素I（562细胞）均具有较强的活性。     

甲酸钠法合成鸟嘌呤的研究

目的研究合成精制鸟嘌呤的方法。方法以2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐和甲酸钠为原料,在3atm压力和甲酸催化下,通过回流反应得到粗品鸟嘌呤,用盐酸酸化后,再用氨水处理得到精制鸟嘌呤。结果当物质的量配比（2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐：甲酸）为1：1．5,反应时间为8h,以铁粉作还原剂时,得率较高。结论甲酸钠法工艺简单。操作容易控制,产品收率较高且反应时间短,易于实现工业化生产,是合成鸟嘌呤的良好方法。     

3-去氮腺苷类似物的合成及抗肿瘤活性

目的探讨3-去氮腺苷类似物的抗肿瘤细胞增殖活性及初步的构效关系和作用机制。方法以2-氯甲基-4-甲氧基-3,5-二甲基吡啶为起始原料设计合成新型3-去氮腺苷类似物,考察化合物的体外肿瘤细胞增殖抑制作用。结果与结论合成了12个目标化合物及中间体,其结构经~1H-NMR,~(13)C-NMR和ESI-MS表征。体外抗肿瘤活性研究显示,活性最好的化合物7a和10a对A549细胞的体外抗肿瘤活性IC_(50)分别是9.23μmol·L~(-1)以及11.44μmol·L~(-1),说明了这两个3-去氮腺苷类似物与阳性对照相比具有更好的抗肿瘤细胞增殖活性。     

4-nitrobenzyloxycarbonyl derivatives of O(6)-benzylguanine as hypoxia-activated prodrug inhibitors of O(6)-alkylguanine-DNA alkyltransferase (AGT), which produces resistance to agents targeting the O-6 position of DNA guanine

A series of 4-nitrobenzyloxycarbonyl prodrug derivatives of O(6)-benzylguanine (O(6)-BG), conceived as prodrugs of O(6)-BG, an inhibitor of the resistance protein O(6)-alkylguanine-DNA alkyltransferase (AGT), were synthesized and evaluated for their ability to undergo bioreductive activation by reductase enzymes under oxygen deficiency. Three agents of this class, 4-nitrobenzyl (6-(benzyloxy)-9H-purin-2-yl)carbamate (1) and its monomethyl (2) and gem-dimethyl analogues (3), were tested for activation by reductase enzyme systems under oxygen deficient conditions. Compound 3, the most water-soluble of these agents, gave the highest yield of O(6)-BG following reduction of the nitro group trigger. Compound 3 was also evaluated for its ability to sensitize 1,2-bis(methylsulfonyl)-1-(2-chloroethyl)-2-[(methylamino)carbonyl]hydrazine (laromustine)-resistant DU145 human prostate carcinoma cells, which express high levels of AGT, to the cytotoxic effects of this agent under normoxic and oxygen deficient conditions. While 3 had little or no effect on laromustine cytotoxicity under aerobic conditions, significant enhancement occurred under oxygen deficiency, providing evidence for the preferential release of the AGT inhibitor O(6)-BG under hypoxia.     

N-芳甲酰基-N’-取代嘧啶基硫脲类 化合物的合成与初步活性研究

目的 合成N-芳甲酰基-N’-取代嘧啶基硫脲类化合物,并初步测试其对血管平滑肌细胞增殖的抑制活性。方法　以2-氨基-5-溴-4-取代嘧啶与芳甲酰基异硫氰酸酯反应,得到一系列N-芳甲酰基-N’-取代嘧啶基硫脲类化合物;采用MTT法测定目标化合物对血清诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制活性。结果与结论　合成的10个目标化合物,均未见文献报道,所有目标化合物结构经1H-NMR及MS确证;活性测试结果表明,化合物6b、6c、6g、6j 具有一定的血管平滑肌细胞增殖抑制活性。     

聚乙二醇化多聚β肽抗肝癌转移的体内外实验研究

目的：观察多聚β肽及其聚乙二醇（PEG）修饰物对肝癌细胞株侵袭黏附能力和对裸鼠移植人肝癌早期切除术后转移复发的影响。方法：以MTT法测量多聚β肽和其PEG修饰物对肝癌细胞与纤连蛋白（FN）黏附的影响。以细胞侵袭实验观察多聚β肽及其PEG修饰物对肝癌细胞侵袭能力的影响。以LCI-D20裸鼠人肝癌转移模型为材料，观察多聚β肽及其PEG修饰物对早期肝癌切除术后转移复发的影响。结果：β2、β2-PEG、β3和β3-PEG对SMMC-7721细胞与FN黏附抑制率分别为31．3％、39．2％、45．7％和57．1％，侵袭抑制率分别为33．6％、35．9％、38．3％和41．2％；对HCCLM6细胞与FN的黏附抑制率分别为48．7％、60．9％、63．4％和79．3％，侵袭抑制率分别为36．8％、46．6％、45．6％和50．8％。多聚β肽及其PEG修饰物组切缘复发肿瘤重量和肺转移灶个数显著低于对照组（P％0．05）。结论：多聚β肽及其PEG修饰物能抑制肿瘤细胞的黏附和侵袭能力，亦能防治裸鼠移植人肝癌早期切除术后的转移和复发。     

羟基喜树碱对C6胶质瘤细胞的抑制作用

目的:研究羟基喜树碱(HCPT)对大鼠脑胶质瘤细胞的抑制作用。方法:采用MTT法检测不同浓度(1～0.03125mg·mL-1)HCPT对大鼠脑胶质瘤细胞的体外细胞毒作用,同时以脑胶质瘤常规治疗药物作对照,并比较开环与闭环HCPT抑瘤活性。结果:HCPT在高浓度时对细胞抑制率高达(69.43±4.5)%,与对照药比较差异无显著性,且其作用呈浓度依赖性。开环与闭环HCPT比较,前者抑瘤效果较低,二者IC50分别为3.626、0.135mg·mL-1。结论:HCPT对C6胶质瘤细胞的增殖具有明显抑制作用,且其闭环形式抑瘤活性更强。     

Synthesis of radiolabeled O6‐benzylguanine derivatives as new potential PET tumor imaging agents for the DNA repair protein O6‐alkylguanine‐DNA alkyltransferase

Novel radiolabeled O⁶‐benzylguanine derivatives, 2‐amino‐6‐O‐[¹¹C]‐[(methoxymethyl)benzyloxy]‐9‐benzyl purines ([¹¹C]p‐O⁶‐AMBP, 1a ; [¹¹C]m‐O⁶‐AMBP, 1b ; [¹¹C]o‐O⁶‐AMBP, 1c ), have been synthesized for evaluation as new potential positron emission tomography (PET) tumor imaging agents for the DNA repair protein, O⁶‐alkylguanine‐DNA alkyltransferase (AGT). The appropriate precursors for radiolabeling were obtained in three steps from starting material 2‐amino‐6‐chloropurine with moderate to excellent chemical yields. Tracers were prepared by O‐[¹¹C]methylation of hydroxymethyl precursors using [¹¹C]methyl triflate. Pure target compounds were isolated by solid‐phase extraction (SPE) purification procedure in 45–60% radiochemical yields (decay corrected to the end of bombardment), and a synthesis time of 20–25min. Copyright © 2002 John Wiley & Sons, Ltd.     

Structural features of substituted purine derivatives compatible with depletion of human O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase.

A series of O6- and S6-substituted purine derivatives were tested for their ability to deplete the human DNA repair protein O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase (AGT) in cell-free extracts from HT29 colon tumor cells and intact HT29 cells. The order of potency was O6-(p-Y-benzyl)-guanine (Y = H, F, Cl, and CH3) > O6-benzyl-2'-deoxyguanosine > O6-(p-Y-benzyl)guanosine (Y = H, Cl, and CH3) > or = a series of 9-substituted O6-benzylguanine derivatives > or = O6-allylguanine > O6-benzylhypoxanthine > O6-methylguanine. A series of 7-substituted O6-benzylguanine derivatives, 2-amino-6-(p-Y-benzylthio)purine (Y = H, CH3), 2-amino-6-[(p-nitrobenzyl)thio]-9-beta-D-ribofuranosylpurine, and 7-benzylguanine were inactive. It is concluded that for efficient AGT depletion, an allyl or benzyl group attached through exocyclic oxygen at position 6 of a 2-aminopurine derivative is required. Activity is preserved with a variety of substituent groups attached to position 9 while substitution at position 7 leads to a complete loss of activity.     

三聚β肽聚乙二醇化后抗肿瘤转移生物活性研究

目的:比较聚乙二醇(PEG)修饰对三聚β肽(β3)抗肿瘤转移活性的影响。方法:采用黏附试验观察β3及其PEG修饰物(β3-PEG)对肝癌细胞株与纤连蛋白(FN)黏附能力的影响;采用人工基底膜胶观察β3和β3-PEG对肿瘤细胞侵袭重组基底膜能力的影响。结果:β3和β3-PEG对肿瘤细胞SMMC-7721和HCCLM6与FN黏附能力均有显著的抑制作用(P<0.05),且呈剂量及时间正相关;PEG修饰可增强β3对2种肿瘤细胞的黏附抑制作用(P<0.05)。β3和β3-PEG对2种肿瘤细胞迁移和侵袭均有显著的抑制作用(P<0.05)。结论:PEG修饰可增强β3抗黏附作用,但对细胞迁移和侵袭的抑制作用无明显影响。     

2-氨基噻唑衍生物的设计、合成及对细胞凋亡的抑制活性

目的研究2-氨基噻唑衍生物对神经细胞凋亡的抑制作用和构效关系。方法以PFT-α为先导物,设计并合成出相应的2-氨基噻唑衍生物,利用MTT法和FCM法测定其对由过氧化氢诱导产生的PC12细胞凋亡的抑制作用,利用Cerius²的QSAR⁺模块,求出其QSAR方程。结果合成了11个新型含2-氨基噻唑母环的Schiff碱化合物II,利用IR,MS,¹H NMR,¹³C NMR等法对上述化合物进行表征。细胞实验结果表明,2-氨基噻唑衍生物对PC12细胞具有一定的保护作用并对由过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡具有一定的抑制作用。优化QSAR方程为Activity＝6.947 68-0.088 72דLUMO”-0.043 018דAlogp98”-0.128 752דRad0fGration”＋0.018 246דDipole-mag”,上述方程的相关统计参数如下, r²=0.970, F-test=49.149,r=0.985,Lse=0.001。结论2-氨基噻唑衍生物对由过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡具有较为明显的抑制作用,部分化合物如I-6,I-9和II-6对于PC12细胞具有细胞保护和细胞凋亡抑制双重活性。QSAR方程提示降低化合物的旋转半径以及化合物最低空轨道的能量有利于提高化合物的活性。