苏拉明联合顺铂对肺腺癌小鼠移植瘤生长和转移的影响

背景与目的:新近研究发现新生血管生成在肿瘤生长、转移以及转移灶的生长过程中起重要作用。本研究观察苏拉明联合顺铂对肺腺癌细胞LA795的T739小鼠异体移植瘤生长和转移的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:建立肺腺癌细胞LA795的T739小鼠异体移植瘤模型,将32只接种LA795细胞T739小鼠随机分成4组,每组8只。对照组:每只小鼠每天生理盐水0.2ml腹腔注射;顺铂组:顺铂2mg·(kg·d)-1于接种后第4、11、18天各一次;苏拉明组:苏拉明10mg·(kg·d)-1;顺铂 苏拉明组:顺铂2mg·(kg·d)-1于接种后第4、11、18天各腹腔注射一次 苏拉明10mg·(kg·d)-1。用药16日,用药中观察肿瘤生长情况,于接种后第24天处死各组小鼠,取出双肺并剥离皮下肿瘤,计算出肺转移发生率,计数各组小鼠肺表面转移结节数并算出肺表面结节转移抑制率。收集移植瘤标本行光镜观察,采用免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织微血管密度(microvesseldensity,MVD),血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)及核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)的表达和原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果:顺铂组、苏拉明组、顺铂加苏拉明组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组,其抑瘤率分别为23.0%、34.4%、56.3%,而联合用药组抗瘤作用进一步增强。光镜观察顺铂组、苏拉明组、顺铂加苏拉明组肿瘤细胞出现坏死,苏拉明组和顺铂加苏拉明组肿瘤间质中血管数减少。各用药组NF-#B的表达都比对照组减少,凋亡指数比对照组明显提高,差异有显著性(P<0.01);苏拉明组及联合组与对照组和顺铂组相比肺表面转移结节数明显下降,同时肺转移发生率、皮下肿瘤MVD、VEGF的表达也明显下降,相反顺铂组对此则无明显改变。结论:苏拉明可明显抑制肺腺癌细胞在小鼠体内的生长和转移,与顺铂联用有协同作用,其作用机制可能与抑制其微血管形成、促进细胞凋亡有关。     

苏拉明对肺腺癌小鼠移植瘤生长的影响及其机制

背景与目的:有研究表明,苏拉明对恶性肿瘤有明显抑制作用,但有关其对肺腺癌体内抗瘤作用的报道很少。本实验观察苏拉明对肺腺癌LA795细胞的T739小鼠移植瘤生长和转移的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:将32只接种LA795肺腺癌细胞T739的小鼠随机分成4组:对照组、顺铂组、苏拉明组、联合组(苏拉明加顺铂组),每组8只。用药16d,观察肿瘤生长情况,于接种后24d处死各组小鼠,取出双肺并剥离皮下肿瘤,计算出肺转移发生率,计数各组小鼠肺表面转移结节数并算出肺表面结节转移抑制率;收集移植瘤标本,称重和测量体积,免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、P-选择素和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果:顺铂组、苏拉明组、联合组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组,其抑瘤率分别为34.9%、23.8%、57.3%;苏拉明组及联合组与对照组和顺铂组相比肺转移发生率、肺表面转移结节数明显下降(P<0.05),而顺铂组与对照组比较差异则无统计学意义。EGFR和P-选择素的表达对照组高于顺铂组、苏拉明组、联合组,对照组、顺铂组、苏拉明组、联合组EGFR表达的灰度值分别为157.7±6.1、130.7±5.9、110.3±5.8、89.2±5.4,P-选择素表达的灰度值分别为134.5±5.7、117.9±5.1、96.2±5.4、78.3±4.5,各用药组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);对照组、顺铂组、苏拉明组、联合组增殖指数(S phase fraction,SPF)分别为(89.7±3.8)%、(68.8±4.0)%、(65.2±4.2)%、(51.3±4.2)%,各用药组SPF都比对照组低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:苏拉明可明显抑制肺腺癌细胞在小鼠体内的生长和转移,其作用机制可能为通过调控肿瘤细胞中的EGFR和P-选择素表达,从而抑制肿瘤细胞增殖和减少肿瘤细胞的粘附而防止转移。     

槲皮素联合苏拉明对肺腺癌小鼠移植瘤HIF-1α和P-选择素表达的影响

目的研究槲皮素联合苏拉明对小鼠肺腺癌移植瘤内缺氧诱导因子-1α(hypoxiainduciblefactor-1α,HIF-1α)和P-选择素(P-Selectin)表达的影响,及其抑制肿瘤生长和转移的作用机制。方法复制肺腺癌LA795细胞的T739小鼠移植瘤模型,将40只小鼠按随机数字表法分成对照组(A)、顺铂组(B)、槲皮素组(C)、苏拉明组(D)和槲皮素 苏拉明组(E)。实验3周后,处死全部小鼠,计算抑瘤率和肺转移发生率,计数各组小鼠肺表面转移结节数及肺表面结节转移抑制率。免疫组化和图象分析系统检测皮下移植瘤中HIF-1α和P-选择素表达并定量分析。结果B、C、D和E组肿瘤抑制率分别为23·03%、39·77%、34·40%和54·7%,A、B、C、D和E组肺表面转移结节数分别为11·00±1·927、8·75±1·642、6·00±1·600、3·00±2·000和1·37±1·187,HIF-1α灰度值分别为85·1±3·72、86·9±4·31、96·1±4·78、97·9±5·02和111·9±5·48,P-选择素灰度值分别为77·20±4·37、80·20±4·74、96·10±5·23、111·90±5·04和127·40±5·96。D组中肺表面转移结节数、皮下肿瘤内HIF-1α和P-选择素表达与A组相比明显下降,相反B组对此则无明显影响,E组则显著抑制肿瘤的生长和肺表面转移结节数,且具有协同作用。结论槲皮素和苏拉明对LA795肺腺癌移植瘤的生长和肺结节转移具有协同抑制作用,其机制与其抑制肿瘤内HIF-1α和P-选择素表达相关。     

烟曲霉醇联合环磷酰胺对小鼠LA795肺腺癌转移的抑制作用

背景与目的:血管生成抑制剂联合化疗药物治疗肿瘤成为目前研究热点之一。本研究旨在观察烟曲霉醇(fumagillol,TNP-470)联合环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对肺腺癌小鼠异体移植转移的协同抑制作用,并初步探讨TNP-470抑制肿瘤转移的相关机制。方法:将40只接种高转移性LA795肺腺癌细胞的T739裸小鼠随机分成5组:对照组、溶剂组、TNP-470组(30mg/kg)、CTX组(40mg/kg)、联合组(TNP-47030mg/kg CTX40mg/kg)。实验3周后,处死全部小鼠。剥离皮下肿瘤称瘤重并计算抑瘤率;取出双肺观察表面肿瘤转移情况,计算肿瘤肺转移发生率,计数各组小鼠肺表面转移结节数及计算出肺表面结节转移抑制率。免疫组化和图像分析系统检测皮下移植瘤中微血管密度(microvesseldensity,MVD)、P-选择素表达并定量分析。结果:联合组抑瘤率(81.5%)明显高于其他各组(P<0.01),Q值等于1.21,说明两药合用具有协同作用。与对照组(12.13±4.02)相比,联合组(1.75±1.71)、TNP-470组(4.75±3.34)、CTX组(8.50±2.67)肺表面转移结节数明显下降;同时TNP-470组和联合用药组皮下肿瘤内MVD、P-选择素表达与对照组相比均下降,差异有显著性(P<0.01),而CTX组对此则无明显影响。结论:TNP-470与CTX对LA795肺腺癌的肺结节转移具有协同抑制作用;TNP-470抑制LA795肺腺癌转移与其抑制肿瘤内P-选择素表达有关。     

槲皮素联合苏拉明对肺腺癌小鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察槲皮素联合苏拉明对肺腺癌LA795细胞的T739小鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:将40只接种LA795肺腺癌细胞T739小鼠随机分成5组:A对照组、B顺铂组(DDP)、C槲皮素组、D苏拉明组、E槲皮素 苏拉明组。用药16d,观察药效、不良反应及肿瘤生长情况,于接种后24d处死各组小鼠,收集移植瘤标本行光镜观察,免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)及增殖核抗原(PCNA)的表达,原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果:①B、C、D、E各用药组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤质量明显低于A组(P<0.05),其抑瘤率分别为23.03%、39.77%、34.40%、54.70%,联合用药组抑瘤作用明显者增强(P<0.01)。②光镜观察:B、C、E组肿瘤细胞出现坏死,D、E组肿瘤间质中血管数减少。③免疫组化:D、E组MVD值明显低于A、B、C组,各用药组都能减少VEGF、PCNA表达,与对照组相比均具有差异显著性;各用药组的凋亡指数都比对照组明显提高(P<0.01)。④不良反应:B组有不良反应。结论:槲皮素联合苏拉明可明显抑制肺腺癌细胞在小鼠体内的生长,其作用机制可能是抑制其微血管形成、抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。     

JCS对LA795肺腺癌小鼠移植瘤转移的抑制作用研究

目的对金刺参九正合剂（JCS）防治肺癌转移的能力及机制进行探讨。方法JCS/顺铂（DDP）作用于荷LA795高转移肺腺癌小鼠模型,观察药物对荷瘤小鼠抑瘤率、肺转移抑制率的影响,并应用免疫组化方法观察药物对实验小鼠皮下移植瘤体血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮细胞因子（CD34）、移植瘤黏附因子（CD44V6）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶抑制酶（TIMP2）的表达及移植瘤微血管密度（MVD）变化的影响。结果JCS组/DDP＋JCS组瘤重抑制率、肺转移抑制率分别为18.2%、42.4%和60.6%、64.4%;MVD、VEGF、CD44V6、MMP2表达均明显低于其它组,TIMP2表达明显高于其它组（P〈0.01）。结论JCS对LA795高转移肺腺癌小鼠模型有较好抑制肿瘤生长、抑制转移的作用,其抑制基质降解及肿瘤血管生成,调节肿瘤转移相关黏附分子的表达可能是JCS抑制肿瘤转移的机制之一。     

槲皮素联合顺铂对肺腺癌小鼠移植瘤Bcl-2和Bax表达的调控及意义

目的：观察槲皮素联合顺铂对肺腺癌LA795细胞的T739小鼠移植瘤的抑制作用，检测移植瘤中Bcl-2和Bax的表达水平及肿瘤细胞凋亡指数，探讨其作用机制。方法：将32只接种了LA795肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成对照组（A组）、顺铂组（B组）、槲皮素组（C组）、槲皮素＋顺铂组（D组）。用药16d后，观察肿瘤生长情况，接种后24d活杀各组小鼠，移植瘤标本称瘤体质量和测量体积，免疫组织化学和图像分析系统定量检测肿瘤组织的Bcl-2和Bax表达，原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果：B、C、D各用药组肿瘤的生长受到明显抑制，瘤体质量明显低于A组，其抑瘤率分别为38．57％、26．03％和51．58％，联合用药组抗瘤作用进一步增强。Bcl-2表达在A组高于B、C、D组，Bax表达在A组明显低于B、C、D组，各用药组与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；肿瘤细胞的凋亡指数在各用药组都比对照组明显提高，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：槲皮素联合顺铂可明显抑制肺腺癌细胞在小鼠体内的生长，其作用机制可能是通过调控肿瘤中Bcl-2和Bax的表达，从而抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。     

肺一丸对小鼠移植瘤VEGF的表达及肺转移相关性研究

目的 :探讨血管生成因子的表达对荷瘤小鼠肿瘤生长及肺转移的影响 ,以及肺一丸对其干预作用。方法 :采用LA795肺腺癌皮下接种T73 9小鼠模型。灌胃及腹腔给药法 ,观察中药肺一丸对肿瘤血管生成、VEGF的表达及肺转移的抑制作用。结果 :肺一丸能够抑制荷瘤小鼠肿瘤生长 ,高剂量抑瘤率为 49 6% ;降低血管密度 ,肺转移抑制率为 47 62 %。结论 :肺一丸能够通过调控肿瘤VEGF的表达 ,抑制肿瘤血管生成 ,起到抑制肿瘤生长和抗转移作用。     

肺一丸对小鼠移植瘤VEGF的表达及肺转移相关性研究

目的：探讨血管生成因子的表达对荷瘤小鼠肿瘤生长及肺转移的影响．以及肺一丸对其干预作用。方法：采用LA795肺腺癌皮下接种T739小鼠模型。灌胃及腹腔给药法，观察中药肺一丸对肿瘤血管生成、VEGF的表达及肺转移的抑制作用。结果：肺一丸能够抑制荷瘤小鼠肿瘤生长，高剂量抑瘤率为49．6％；降低血管密度，肺转移抑制率为47．62％。结论：肺一丸能够通过调控肿瘤VEGF的表达．抑制肿瘤血管生成．起到抑制肿瘤生长和抗转移作用。     

人参皂苷Rg3对小鼠Lewis肺癌生长和转移的抑制作用及其与肿瘤相关巨噬细胞的关系

目的研究人参皂苷Rg3(ginsenoside Rg3,Rg3)对肺腺癌小鼠异体移植瘤生长和转移的抑制作用及其相关机制。方法构建高转移肺腺癌小鼠移植瘤模型,将24只接种高转移性Lewis肺癌的C57BL/6J小鼠随机分成3组：对照组、顺铂(Cisplatin,DDP)组和Rg3组。给予相应药物干预,于接种后24日处死各组小鼠,剥离皮下肿瘤,取出双肺,计算肺转移发生情况,免疫组织化学检测皮下移植瘤中肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）和微血管密度（microvessel density,MVD）的表达并定量分析。结果DDP组、Rg3组抑瘤率分别为39.20%、54.86%,与对照组比较,瘤重差异有统计学意义（P<0.01）,肺表面结节转移抑制率分别为30.25%,58.57%,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）,对照组、DDP组和Rg3组TAMs分别为(47.21±12.06)、(45.67±11.90)、(16.11±6.32),MVD分别为(24.57±4.59)、(23.52±4.74)、(14.17±2.43)。结论Rg3对肺腺癌移植瘤的生长和转移具有抑制作用,其机制可能与其抑制肿瘤内TAMs在肿瘤基质中浸润及抑制微血管生成有关。     

毕赤酵母表达重组人内皮抑素对小鼠肺腺癌LA795生长和转移的抑制作用

背景与目的：肿瘤的生长和转移有赖于新生血管的生成,内皮抑素能抑制肿瘤的血管生成。本研究旨在观察毕巴斯德酵母（pichia.pastoris.GS115)分泌表达的重组人内皮抑素（recombinant human endostatin,rhES)对小鼠肺腺癌LA795生长和转换的抑制作用。方法：挑取一株高效分泌表达rhES的毕赤巴斯德酵母菌株,利用甲醇进行大量诱导表达;用肝素亲和层析的方法纯化目的蛋白;将接种LA795肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成两组,分别给予rhES和PBS皮下注射,每日1次,连续14天;观察两组小鼠肿瘤生长情况,测量肿瘤体积大小,并观察两组小鼠肿瘤肺部转移情况。结果：经甲醇诱导的毕赤巴斯德酵母菌株高效分泌表达了rhES;动物实验研究发现rhES能显著抑制小鼠肺腺癌LA795的生长,rhES治疗组肿瘤大小与对照组比较具有显著性差异（P＜0．001）,抑瘤率达到66．4％,并且有效抑制了肿瘤的肺部转移。结论：利用毕赤酵母作为宿主分泌表达的rhES具有良好的生物学活性,可显著抑制小鼠肺腺癌LA795的生长和转移。     

内皮抑素对小鼠肺腺癌LA795生长和转移抑制作用的初步研究

目的：观察人内皮抑互对小鼠肺腺癌ＬＡ７９５生长和转移的抑制作用。方法：对重组人内皮抑素高效表达克隆ｐＣＸ的表达产物进行纯化,得到重组人内皮抑素（ｒｈＥＳ）。用亲和层析及胰弹性蛋白酶消化法从过期人血浆纯化得到人血管抑素（ｈＡＳ）。将接种ＬＡ７９５肺腺癌细胞的Ｔ７３９小鼠随机分成３组,分别给予ｒｈＥＳ,ｈＡＳ或等体积ＰＢＳ皮下注射,１次／日,共１４ｄ。观察３组肿瘤生长情况、肺湿重、肺表面转移结节数、动物生存期,分别进行ｑ检验。结果：ｒｈＥＳ组及ｈＡＳ组肿瘤生长缓慢,８ｄ后肿瘤逐渐回缩;肺湿重、肺表面转移结节数明显减少,动物生存期明显延长。结论：ｒｈＥＳ与ｈＡＳ均可明显抑制ＬＡ７９５所致的小鼠实验性肿瘤的生长与转移,延长动物的生存期。     

ANTITUMOR EFFECTS OF HUMAN IL-15 GENE MODIFIED LUNG CANCER CELL LINE

ＡＮＴＩＴＵＭＯＲＥＦＦＥＣＴＳＯＦＨＵＭＡＮＩＬ－１５ＧＥＮＥＭＯＤＩＦＩＥＤＬＵＮＧＣＡＮＣＥＲＣＥＬＬＬＩＮＥＳｈｅｎＹｏｎｇｑｕａｎ１沈永泉ＣｕｉＬｉａｎｘｉａｎ２崔莲仙ＨｅＷｅｉ１何维ＸｕｅＬｉ１薛莉ＢａＤｅｎｉａｎ１巴德年１Ｉｎｓｔ...     

T739小鼠LA795肺腺癌皮下移植瘤氩氦刀冷冻消融前后基因表达谱芯片分析

[目的]用基因芯片技术分析、筛选氩氦冷冻消融前后肺腺癌相关基因谱的差异表达。[方法]建立T739小鼠LA795肺腺癌皮下移植瘤动物模型,行氩氦刀冷冻消融。分别抽提、纯化冷冻前后肿瘤组织mRNA,逆转录Cy3、Cy5标记cDNA探针,应用小鼠表达谱芯片CSC-ME-10,分析差异表达的基因。[结果]发现氩氦刀冷冻治疗前后T739小鼠LA795肺腺癌皮下移植瘤组织有显著性表达差异的基因共有26个,治疗后17条表达降低,9条表达增高。[结论]氩氦刀冷冻消融前后T739小鼠LA795肺腺癌皮下移植瘤组织部分功能基因存在着显著的表达差异,多数差异表达的基因与细胞生长因子调节、代谢酶类以及转录因子等相关。     

沉默TIPE2基因对T细胞共培养肺腺癌细胞LA795的免疫杀伤作用

目的 利用特异性小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）技术沉默T细胞TIPE2基因表达,体外观察转染T细胞对肺腺癌细胞LA795的免疫杀伤作用。方法 磁珠分选小鼠脾脏T细胞,筛选并验证能有效沉默T淋巴细胞TIPE2基因的siRNA序列,转染48 h后,利用酶联免疫吸附法（ELISA）比较各分组细胞上清液中IFN-γ分泌水平;转染72 h后,观察对比单纯T细胞（空白组）、阴性对照T细胞（阴性对照组）及转染T细胞（实验组）与小鼠肺腺癌细胞LA795共培养时肿瘤杀伤率。结果 我们筛选出一条能有效抑制TIPE2基因表达的siRNA序列,细胞转染率79.63%,蛋白表达抑制率达到79%,转染48 h后,检测实验组、阴性对照组、空白组细胞因子IFN-γ分泌水平分别为（678.96±26.91）pg/ml、（401.69±13.67）pg/ml、（387.03±15.14）pg/ml（P<0.001）;转染72 h后,与空白组及阴性对照组T细胞相比,在不同的效靶比水平（20:1、40:1、80:1）,转染T细胞杀瘤活性均更高。当效靶比为80:1时,实验组肿瘤细胞杀伤率达到（47.91±3.25）%。结论 利用特异性siRNA技术能有效沉默TIPE2基因,并促进抗肿瘤活性细胞因子IFN-γ分泌,增强T细胞对小鼠肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用。