叶酸偶联金纳米棒靶向探针制备及体外肝癌细胞对其摄取状况的研究

目的 探讨叶酸偶联的二氧化硅包覆的金纳米棒(GNRs@SiO2-FA)探针制备方法和其光学性质,检测探针靶向性,并观察其进入细胞过程.方法 采用种子生长法制备出金纳米棒,以SiO2作为壳材,制备出GNRs@SiO2,最后偶联叶酸得到GNRs@SiO2-FA.(1)利用透射电镜、紫外光谱对制备出的GNRs@SiO2-FA探针进行检测.(2)取对数生长期肝癌HepG2细胞随机分为2组,分别加入金元素浓度为40.0×10-6、20.0×10-6、10.0×10-6、5.0×10-6、2.5 ×10-6的GNRs@SiO2-FA和GNRs溶液,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法测得吸光度值(A值),以此判断其细胞毒性.(3)将细胞随机分为2组,分别加入相同金元素浓度的GNRs@SiO2-FA和GNRs@SiO2溶液,然后孵育2、4、8、16、24 h时,应用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)监测GNRs@SiO2-FA细胞摄入的靶向性.(4)用透射电镜观察GNRs@SiO2-FA进入细胞过程.所得数据用(-x)±s表示,单因素方差分析进行两两组间比较,P ＜0.05为差异有统计学意义.结果 紫外图谱证实成功制备GNRs@SiO2-FA.对2组金浓度相同细胞的A值进行方差分析比较,差异均有统计学意义,金元素浓度从高到低(40.0×10-6、20.0×10-6、10.0×10-6、5.0×10-6、2.5×10-6),2组比较F值分别为191.876、265.419、77.987、52.061、18.745,P值均＜0.01.ICP-MS监测结果显示,GNRs@SiO2组细胞在孵育2、4、8、16、24 h时细胞固体金元素含量分别为(256.7±3.3)、(602.8±2.4)、(1067.1±3.6)、(1998.5±4.3)、(2078.5±1.3) mg/kg,GNRs@SiO2-FA组分别为(693.1 ±2.0)、(1432.0±2.6)、(2331.3±3.5)、(2484.5 ±5.0)、(2589.7±2.1)mg/kg,组间两两比较差异有统计学意义(F值分别为3278.070、34287.199、85434.870、18333.454、42412.973,P值均＜0.01),证明叶酸偶联的探针具有很强的靶向性.透射电镜观察到,GNRs@SiO2-FA与细胞共同培养1h后,细胞质内见少量纳米探针;4 ～24 h,细胞质内见大量探针,但细胞核内未见.结论 制备出的GNRs@SiO2-FA探针具有很好的生物安全性和靶向性.     

金纳米棒联合125I粒子诱导肝癌HepG2细胞凋亡的实验研究

目的探讨叶酸偶联二氧化硅包覆的金纳米棒(GNRs@Si O2-FA)联合125I粒子诱导肝癌Hep G2细胞凋亡及其可能的机制,为临床提高肝癌125I粒子组织间植入疗效提供理论依据。方法将体外培养的肝癌Hep G2细胞随机分成空白对照组,单纯金纳米棒组,单纯125I粒子照射组及金纳米棒联合125I粒子照射组,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,PT-PCR检测bax m RNA、bcl-2 m RNA表达水平,免疫细胞化学检测凋亡相关基因bax、bcl-2表达水平及肿瘤细胞核增殖性抗原Ki67表达情况。结果流式细胞仪检测4组肝癌Hep G2细胞凋亡率,单纯金纳米棒组、单纯125I粒子照射组较空白对照组均有升高(P<0.05);联合组较单纯金纳米棒组和单纯125I粒子照射组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组bax m RNA表达明显高于单纯金纳米棒组与单纯125I粒子照射组,bcl-2 m RNA表达明显低于单纯金纳米棒组与单纯125I粒子照射组。肝癌Hep G2细胞bax表达于胞质,bcl-2表达于胞质和胞膜,Ki67表达于胞核,均表现为棕黄色细颗粒状沉淀。4组肝癌Hep G2细胞凋亡相关基因bax、bcl-2及增殖核抗原Ki67蛋白表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);联合组较单纯金纳米棒组和单纯125I粒子照射组Bax蛋白阳性表达率明显升高,Bcl-2、Ki67蛋白阳性表达率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论金纳米棒与125I粒子联合应用能更有效增加肝癌细胞凋亡率,其机制可能是通过增加Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达来实现。     

瘤内注射臭氧治疗兔VX-2肿瘤的疗效研究

目的 研究不同浓度臭氧瘤内直接注射对兔VX-2瘤的治疗效果.方法 新西兰大白兔120只,随机分为4组,对照组30只为A组(模拟穿刺),治疗组3组(B～D组)各30只:B组瘤内注射20 ug/ml浓度臭氧、C组瘤内注射40 ug/ml浓度臭氧及D组瘤内注射60 ug/ml浓度臭氧,于肿瘤种植后2周后直视下进行治疗,A组仅模拟穿刺,B、C、D三组按肿瘤体积2倍量不同浓度的O3多点穿刺直接注入瘤体内,术前均行CT灌注扫描,术后第4、8天行CT灌注扫描,测量肿瘤大小计算肿瘤生长率,并于第8天CT灌注后后全部处死取肿瘤进行病理观察.结果 A、B、C、D4组肿瘤生长率V4/V0分别为:2.06±1.10,1.43±0.80,1.54±0.82,1.62±0.92;V8/V4分别为:2.34±1.93,1.80±0.72,1.98 ±1.28,1.56 ±0.86;V8/V0分别为:4.58 ±3.14,2.64±1.59,2.93±1.56,2.27±1.34.V4/V0结果显示A、B两组P=0.05,其余各组间比较P＞0.05;V8/V4各组间比较P＞0.05;V8/V0结果显示A、B两组P =0.008,A、C两组P=0.029,A、D两组P=0.001,B、C、D各组比较P＞0.05.结论 经皮穿刺瘤内直接注射20 μg/ml、40 μg/ml及60 μg/ml浓度的臭氧均可效抑制兔VX-2肿瘤生长.20 μg/ml、40 μg/ml及60 μg/ml不同浓度的臭氧对兔VX-2瘤的抑瘤效果虽无显著性差异,但60 μg/ml的臭氧作用持续时间更长,抑制肿瘤生长的效果更明显.     

兔VX-2骨肿瘤早期骨膜反应的影像学研究及病理对照

目的研究兔VX-2骨肿瘤模型早期骨膜改变的影像学表现及其病理基础。材料与方法将VX-2肿瘤细胞悬液注入20只新西兰大白兔的右侧胫骨骨髓腔内制成骨肿瘤模型,种植后每隔5天对所有兔进行X线及MRI检查直至骨膜新生骨形成,每次影像检查之后处死4只实验兔取其胫骨制成病理标本,进行影像学与病理学观察及对照。结果肿瘤种植后第5～15天,MRI显示20只实验侧胫骨骨膜水肿;第20天,MRI发现8只实验侧胫骨骨膜增厚;第25～30天,MRI显示4只骨膜新生骨及其外缘增厚的骨膜。结论兔VX-2骨肿瘤中骨膜水肿及骨膜增厚是发生在骨膜新生骨形成之前的早期骨膜反应,MRI可显示这两种骨膜异常。     

建立兔移植性Vx-2肝癌模型的改进

目的 建立Vx-2兔移植性肝癌改良模型。方法 将Vx-2瘤粒经剖腹直接种植于肝实质内,依观察时间不同分成3组,每组10只,种植后分别观察2、3、4周,对比观察其病理形态学和影像学表现。结果15只种植成功,种植2周组各项观察指标最为满意。结论 以瘤粒肝内种植方式、2周后可成功建立Vx-2兔移植性肝癌模型。     

金纳米棒制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联

目的金纳米棒的制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联。方法利用种子调制生长法制备了金纳米棒,采用化学桥联方法对金纳米棒进行m-SH-PEG修饰及与靶向定位乳腺癌细胞的寡核苷酸适配子的耦联。结果成功制备了金纳米棒,以CTAB包裹的金纳米棒表面光滑、尺寸均一、分散性和稳定性良好;Zeta电位检测表明m-SH-PEG已成功修饰金纳米棒,琼脂糖电泳证实寡核苷酸适配子与金纳米棒成功耦联。结论成功地进行了金纳米棒的制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联。     

177Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA靶向可降解纳米粒子腹腔灌注治疗小鼠卵巢癌伴腹膜转移的实验研究

目的 观察放射性核素¹⁷⁷Lu标记的叶酸-二乙烯三胺五乙酸-聚乙二醇-聚乳酸共聚物(¹⁷⁷Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA)纳米粒子的体内靶向分布,评价腹腔灌注纳米粒子治疗小鼠卵巢癌腹膜转移瘤及腹水疗效。方法 制备¹⁷⁷Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA纳米粒子,向人卵巢癌移植瘤荷瘤小鼠尾静脉注射纳米粒子后4、24、72 h和7 d,行微型单光子发射计算机断层显像仪(micro-SPECT/CT)显像,观察纳米粒子体内分布情况。将12只人卵巢癌腹腔转移瘤裸鼠模型按随机抽签法分为阴性对照组(生理盐水)、化疗组(顺铂3 mg/kg,2次/周)和粒子组(¹⁷⁷Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA粒子18.5 MBq),每组4只,腹腔灌注给药。7 d后行活体荧光成像评价腹腔肿瘤生长情况,计算相对抑瘤率,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率,免疫组织化学法检测肿瘤Ki67增殖活性,比较治疗后各组腹水体积。结果 micro-SPECT/CT显像显示,移植瘤放射性浓聚,24 h肿瘤肌肉摄取比值(T/M)最高,为2.81±0.49。活体荧光成像显示,腹腔给药治疗后,粒子组、化疗组和阴性对照组的腹腔肿瘤荧光强度分别为(1.45±0.19)×10¹⁰、(2.21±0.36)×10¹⁰和(2.63±0.79)×10¹⁰,差异有统计学意义(F=6.09,P=0.029);粒子组和化疗组的相对肿瘤抑制率(TGI)分别为35.6%和18.6%。粒子组和化疗组的肿瘤细胞凋亡率(AI)均高于阴性对照组(F=9.96,P=0.009),粒子组和化疗组的Ki67指数均低于阴性对照组(F=9.93,P=0.013),粒子组和化疗组腹水体积均小于阴性对照组(F=13.43,P=0.006)。结论 ¹⁷⁷Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA纳米粒子可行小鼠卵巢癌靶向显像,腹腔灌注后局部滞留和降解吸收,抑制卵巢癌腹膜转移瘤和腹水生长,为晚期卵巢癌伴腹膜转移患者诊疗提供新思路。     

新型纳米金材料的合成及其对HepG2细胞放射增敏的影响

目的 合成新型纳米金复合物GAL-PEG-GNPs,探讨其体外放射增敏效应及增敏机制。方法 制备GAL-PEG-GNPs并进行表征。将HepG2细胞分为对照组、GNPs组和GAL-PEG-GNPs组。CCK-8法检测GAL-PEG-GNPs的细胞毒性,并计算IC₅₀值;TEM和ICP-MS检测细胞对2种纳米材料的摄取;克隆形成实验检测放射增敏水平;流式细胞术分析细胞周期的变化;免疫蛋白印迹分析细胞凋亡相关蛋白变化;酶标仪检测细胞内过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、总还原型谷胱甘肽（GSH）的表达水平。结果 GNPs和GAL-PEG-GNPs溶液的紫外可见吸收峰分别位于520和530 nm,GNPs和GAL-PEG-GNPs的直径分别为（22.6±2.12）和（32.0±1.41）nm。GAL-PEG-GNPs的细胞毒性与GNPs类似（P>0.05）,IC₅₀值分别为5.001和4.997 μg/ml。GAL-PEG-GNPs被HepG2细胞的摄取量高于GNPs。GNPs和GAL-PEG-GNPs的放射增敏比（SER）分别为1.46和1.95。细胞经过处理后,处于G₂/M期的比例明显提高（t=14.20,P<0.05）。GNPs组和GAL-PEG-GNPs组Cytochrome C、Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达水平较对照组明显提高,而Bcl-2的表达呈现降低趋势。GAL-PEG-GNPs组CAT、SOD、总GSH较对照组均明显减少（t=12.34、29.39、12.85,P<0.05）。结论 GAL-PEG-GNPs对HepG2细胞具有较好的放射增敏效应,增敏机制可能与GNPs诱导大量自由基产生,进而启动凋亡基因程序有关。     

兔Vx-2移植性肝癌模型的建立及其影像学表现

目的　用 3种不同植瘤方式建立稳定的兔Vx 2移植性肝癌模型 ,分析移植性肝肿瘤的DSA影像特征。方法　 6 0只新西兰白兔随机分成 3组 ,每组 2 0只。第 1组 ,将Vx 2瘤细胞 (约 5× 10 7个 )经肝动脉灌注入兔的肝脏 ;第 2组 ,将Vx 2瘤细胞 (约 5× 10 7个 )经剖腹途径接种于兔的肝左叶 ;第3组 ,将瘤组织块 (约含 10 6～ 10 8个瘤细胞 )经剖腹途径植入兔肝左叶。之后 ,对 3组兔比较观察 :1.不同方式植瘤的成活率 ;2 .肝内肿瘤体积变化和肿瘤生长率 ;3.大体及镜下 (光镜和电镜 )瘤组织形态特征 ;4 .成熟模型的DSA表现。结果　 1.3组植瘤成活率分别为 7/ 2 0、10 / 2 0、19/ 2 0 ,第 3组植瘤成活率最高 (P <0 .0 5 ) ,其瘤体呈指数性生长 ;2 .病理学及CT表明该瘤在肝组织中呈浸润式生长 ,其性状与移植于兔其它部位的Vx 2鳞状细胞癌特征相似 ;3.DSA影像示移植性肝肿瘤具有丰富的血供。结论　成功建立了兔Vx 2移植性肝癌模型 ,瘤组织块种植方式成功率明显高于其他两种方法 ,为肝癌介入治疗的实验研究提供了可靠的大型动物模型     

内生型转铁蛋白-金纳米簇探针的合成及其对前列腺癌的靶向成像研究

目的 以转铁蛋白(transferrin,Tf)为模板,氯金酸为原料,原位合成靶向荧光探针-内生型转铁蛋白-金纳米簇(gold nanoclusters,AuNCs),并以前列腺癌(prostate cancer,PCa)为模型,探讨该荧光探针的靶向成像效果.方法 利用场发射透射电子显微镜及粒度分析仪分析所合成的荧光探针的形貌、水合粒径及分布;利用紫外-可见分光光度计及荧光分光光度计对其光学性能进行表征;MTT法检测细胞毒性;并通过细胞荧光成像及竞争抑制实验表征其肿瘤的特异性靶向效果;静脉注射Tf-AuNCs至PC-3种植瘤鼠体内,进行连续荧光成像,评价其肿瘤靶向成像效果;通过组织病理学明确其活体毒性.结果 本研究制备的Tf-AuNCs粒径约为3 nm,荧光发射峰为700 nm,保留了Tf及金纳米簇的性能;细胞成像结果显示Tf-AuNCs对前列腺肿瘤细胞(PC-3)特异性靶向效果好;小动物活体成像结果显示Tf-AuNCs探针仅需15 min即可准确显示肿瘤部位,至2h时肿瘤区荧光强度达峰值,表明其具有良好的活体肿瘤成像能力;病理学结果表明Tf-AuNCs具有良好的生物相容性.结论 Tf-AuNCs荧光探针具有良好的光学性能、特异靶向能力,并具有优异的荧光成像能力及良好的生物相容性,将有望应用于PCa的早期影像学分析.     

不同活度125I粒子植入抑制兔VX2肝癌机制研究

目的：探讨125I粒子组织间植入诱导肝癌细胞凋亡的机制。比较不同活度125I粒子组织间植入诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖的作用强度。方法将24只兔VX2肝癌模型随机分为3组,分别植入不同初始活度的125I粒子：0 mCi组（对照组,n=8）、0.7 mCi组（n=8）及1.0 mCi组（n=8）。5周后处死实验兔,取出肿瘤病灶,检测125I粒子对肿瘤细胞凋亡、肿瘤生长相关因子表达的影响及caspase-3活性改变。结果不同初始活度125I粒子均可使肿瘤细胞凋亡率上升, Bcl-2、VEGF表达下调,Bax表达上调,1.0 mCi 125I粒子组作用均更加明显（P＜0.05）。不同初始活度125I粒子可增加肿瘤组织中caspase-3活性,两治疗组间差异无明显统计学意义（P＞0.05）。结论125I粒子植入后不仅通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤生长、增殖,还影响凋亡相关基因及编码蛋白表达,抑制肿瘤细胞新生血管生成。     

兔VX2肝癌模型的移植方式及生长特性的研究

目的　探讨不同植瘤方式建立兔VX2 肝癌模型的成功率 ,并分析该肿瘤的生长特性。方法　 60只新西兰白兔随机分 3组 ,每组 2 0只。将VX2 瘤细胞 (5× 10 7个 )经肝动脉或经肝包膜分别接种于 2组兔的肝左叶 ,第 3组经肝包膜植入瘤组织块 (约含 10 6 ～ 10 8个瘤细胞 )建立肝癌模型。观察 :①不同组植瘤的成活率。②肿瘤 7d、10d、14d、17d、2 1d时的体积 (B超测 ) ,并计算肿瘤生长率。③大体及镜下 (光镜和电镜 )瘤组织形态特征。④VX2 移植性肝癌的DSA影像特征。结果　 3组植瘤成活率分别为 7/ 2 0、10 / 2 0、19/ 2 0 ,第 3组瘤块植瘤成活率最高 (Ρ <0 .0 5 ) ,瘤体呈指数性生长 ,组织病理及电镜表明该瘤在肝组织中浸润式生长 ,其性状与VX2 鳞状细胞癌特征相似。DSA影像示该移植性肝癌具有丰富的血供。结论　瘤块种植是建立兔肝癌模型的首选方式 ,该模型是肝癌的基础及临床的理想动物模型     

介入性灌注化疗与热灌注化疗对兔VX2肝癌模型的作用比较研究

目的观察热灌注化疗对兔VX2肝癌模型疗效及安全性。方法新西兰大白兔20只,制备兔肝VX2模型,随机分为对照组(A)和实验组(B),分别A组给于常温(22～25℃)5%葡萄糖100ml+5-Fu(20mg/kg),B组给于60℃5%葡萄糖100ml+5-Fu(20mg/kg),用B超观察处理前后肿瘤大小,抽血查ALT变化。结果A组肿瘤体积由(1627±473)mm3缩小为(1334±641)mm3,B组肿瘤体积由(1682±397)mm3缩小为(1130±559)mm3,两组差别有统计学意义(P<0.05);ALTA组由(755±203)u/L增加为(834±262)u/L,B组由(781±197)u/L增加为(865±237)u/L,组间差异无统计学意义。结论介入性热灌注化疗比常温灌注化疗对兔VX2肝癌模型有更高的抑制作用。     

DWI应用于兔VX2肝癌模型HIFU治疗的价值

目的研究兔VX2肝癌模型在高强度聚焦超声(HIFU)治疗前后肿瘤扩散的变化。材料与方法 45只兔VX2肝癌模型HIFU治疗前及HIFU治疗后1、3、7、14、21天5个观测点进行磁共振扩散加权成像(DWI),观察术后5个观测点肿瘤与术前表观扩散系数(ADC)值的变化,并与病理结果对照分析。结果兔VX2肝癌模型HIFU术后1、3、7、14、21天,ADC图上呈高信号的肿瘤病理为坏死组织,ADC值较术前相应区域升高(P<0.05);术后3、7、14、21天,ADC图上呈混杂信号的肿瘤,高信号区病理为坏死组织,ADC值较术前相应区域升高(P<0.05);而低信号区病理为肿瘤组织,ADC值较术前相应区域无差异性(P>0.05)。结论磁共振DWI ADC值能够准确反映兔VX2肝癌模型HIFU治疗后的肿瘤坏死组织及存活组织,并能够作为HIFU治疗兔VX2肝癌疗效的重要监测手段。     

碘油磁液经肝动脉栓塞热疗兔VX2肝癌的实验研究

目的 探讨碘油磁液经肝动脉栓塞热疗术对荷瘤兔肝、肾功能的影响及其疗效.方法 VX2兔肝癌模型32只,数字表法随机等分成4组:碘油磁液栓塞热疗组(A组)、碘油磁液栓塞组(B组)、单纯碘油栓塞组(C组)、对照组(D组).A、B两组实验兔经肝动脉注入碘油磁液0.5～0.8 ml栓塞病灶,C组实验兔仅用碘油栓塞.栓塞后仅A组实验兔在交变磁场下诱导热疗.实验兔分别于栓塞或栓塞热疗术前1 d和术后1、7、14 d经耳缘静脉取血,行肝、肾功能检查.肝功能指标选取丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),肾功能指标选取血清尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr).栓塞术前、术后即刻、术后7、14 d行CT扫描并随访,观察碘油磁液或碘油在瘤内沉积分布情况并分别测量肿瘤大小.术后14 d处死实验兔,完整切取肝脏、脾、肾和肺,作病理检查.各组测量数据以重复测量方差分析进行统计学分析.结果 A组实验兔术前1 d和术后1、7、14 d ALT分别为(43.9±19.0)、(795.1±327.1)、(67.0±9.3)、(41.9±10.8)U/L,AST分别为(50.2±13.6)、(1011.2±655.9)、(62.4±24.1)、(51.6±7.9)U/L;B组ALT分别为(45.0±19.1)、(580.8±160.4)、(67.2±31.0)、(47.6±7.8)U/L,AST分另U为(52.9±20.3)、(735.2±186.1)、(57.9±24.8)、(50.9±9.8)U/L;C组ALT分别为(47.4±14.6)、(558.5±167.8)、(63.5±21.9)、(48.0.±9.3)U/L,AST分别为(51.8±9.5)、(752.5±112.0)、(56.5 ±20.6)、(51.4±8.6)U/L;术后1 dALT和AST较术前和D组明显升高(P值均<0.01),术后7、14 d所测值与术前比较差异无统计学意义.栓塞术前后4组实验兔BUN和Cr值组间和组内比较,差异均无统计学意义.术后7 d CT示A、B、C 3组瘤区碘油磁液和碘油沉积分布与栓塞或栓塞热疗前相比无明显变化.术后14 d CT示A组瘤区碘油磁液沉积更集中、密实,B、C两组共5例肿瘤瘤周碘油磁液或碘油移位、部分消失.术后14 d,A组肿瘤体积[(6.1±0.6)cm~3]较术前[(7.8±1.4)cm~3]平均缩小约21.7%(F=17.56,P<0.01),而术前B、C两组肿瘤体积分别为(7.9±1.1)、(7.8±0.9)cm~3,治疗后14 d分别为(9.1±0.8)、(9.3±1.0)cm~3,较术前平均增大16.2%、18.9%(F值分别为25.23、55.50,P值均<0.01).病理检查,栓塞14 d后,A组肿瘤坏死均达80%以上,B、C两组肿瘤坏死约30%~50%.结论 碘油磁液对兔VX2肝癌行选择性肝动脉栓塞热疗是安全有效的,具有可行性.     

不同浓度乙醇消融VX2兔移植性肝肿瘤的实验研究

目的探讨不同浓度乙醇经皮瘤内注射(PEI)疗法对兔移植型肝癌的治疗效果。方法31只新西兰兔肝内植入VX2瘤块(1 mm3),移植后14 d行CT扫描,测量肿瘤体积。然后采取以下治疗:A组经皮瘤内注射无水乙醇(9只)、B组注射75%乙醇(9只)、C组注射50%乙醇(9只)、D组未予任何处理(对照组,4只)。治疗后7、14、21 d分别行CT、MRI扫描,观察病灶的变化并测量大小,每组处死2只取病理观察肿瘤大小、光镜下观察肿瘤的凝固性坏死与对照组比较,治疗后60d内观察各组生存期的长短。结果PEI治疗前和治疗后21 d肿瘤体积之比分别为:A组1.68、B组1.75、C组5.81、D组8.72。与对照组相比,C组抑制肿瘤生长的无显著性差异(P>0.05),A、B组均能抑制肿瘤的生长(P<0.01,P<0.01),且A组与B组抑制肿瘤生长的无显著性差异(P>0.05)。平均生存时间为:A组(53.7±6.3)d,B组(52.8±7.4)d,C组(46.3±5.2)d,D组(34.1±3.7)d。治疗组病理切片光镜下肿瘤凝固性坏死范围随乙醇浓度的增加而增大。结论PEI可抑制肿瘤的生长,延长荷瘤兔的生存期,且随着乙醇浓度的升高生存期延长,75%以上浓度乙醇治疗效果的差异无统计学意义,但高浓度(≥75%)乙醇比低浓度(<75%)乙醇能明显抑制肿瘤的生长,延长生存期。     

槐耳清膏联合化疗栓塞治疗兔VX2肝癌的实验研究

目的 观察槐耳清膏联合经肝动脉化疗栓塞(TACE)对兔VX2肝癌生长及转移的影响.材料与方法将VX2瘤粒直接种植于新西兰大白兔左肝内2周,MRI证实已成功接种VX2的荷瘤兔随机分为3组,每组12只,开腹经肝动脉穿刺分别给予不同处理:A组为生理盐水对照组,经肝动脉注入0.2 ml/kg体重生理盐水;B组为TACE组,经肝动脉注入超液态碘化油0.2 ml/kg+丝裂霉素0.5 mg/ks乳剂;C组为TACE+槐耳清膏灌服组,TA-CE方法同B组,同时术后每天灌服槐耳清膏500 mg/kg.每天观察动物生长情况,术后2周处死动物,测量动物体重、肿瘤体积、坏死区面积,计算肿瘤生长率、坏死率;观察肝、肺及腹腔淋巴结转移情况.结果 术前1天3组动物体重、肿瘤体积差异无统计学意义(P>0.05).术后2周,B组动物体重下降明显,与A组、C组相比差异均有统计学意义(P<0.05);A组与C组相比差异无统计学意义(P>0.05).治疗后2周肿瘤体积、肿瘤生长率和肿瘤坏死率B组、C组与A组相比差异均具有统计学意义(P<0.01),B组与C组相比差异亦具有统计学意义(P<0.05).肝和肺的转移:B组与A组相比差异无统计学意义(P>0.05),C组与B组、A组相比差异均具有统计学意义(P<0.05);腹腔淋巴结转移3组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 槐耳清膏可以改善动物TACE术后的生存质量;抑制肿瘤生长,促进肿瘤坏死;抑制肿瘤转移.     

经动脉灌注纳米微粒治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究

目的:研究羟基磷灰石纳米微粒(nHAP)对兔肝VX2肿瘤的治疗作用.方法:将成功接种肝VX2肿瘤的模型兔随机分成3组,每组15只,用显微外科手术临时阻断肝总动脉血流,经胃十二指肠动脉插管给药行介入治疗,术毕结扎胃十二指肠动脉.A组为生理盐水组(对照组),注射生理盐水5 ml;B组为碘油组(疗效对比组),注射超液化碘油0.5～1.0 ml;C组为nHAP组,注入0.5% nHAP 0.5～1.0 ml.3组实验动物分别于治疗前、治疗后7、14天行多层螺旋CT肝脏扫描,测量肿瘤的大小,并计算肿瘤生长率.治疗前,治疗后第1、7天测血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT);记录各组术后生存天数.结果:术后7、14 d,A组动物的肿瘤生长率分别为(350±116)%和(1098±337)%、B组为(234±18)%和(730±32)%,C组为(233±15)%和(723±30)%.B、C两组与A组相比差异有显著性意义(P＜0.05), B组与C组相比差异无明显意义(P＞0.05).术前各组血清AST、ALT水平差异无统计学意义(P＞0.05),术后1天,A、B、C组血清AST、ALT均升高,B、C组上升幅度稍高,但与A组相比差异无统计学意义(P＞0.05).术后7天,各组AST、ALT均降至正常范围.A、B、C组瘤兔的生存期分别为(38.0±5.4) d、(54.0±8.1) d、(56.0±8.2) d,B、C两组与A组相比生存期明显延长(P＜0.05).结论:经动脉灌注nHAP治疗兔肝VX2肿瘤能有效抑制肿瘤生长,延长瘤兔的生存期,而无明显肝功能损害.     

COX-2抑制剂塞来昔布对诱导性肝癌Bax、Bcl-2表达影响的实验研究

目的探讨选择性COX-2抑制剂—塞来昔布对诱导性肝癌细胞凋亡基因Bax、Bcl-2表达的影响及其可能的机制。方法将25只雄性Wister大鼠随机分为对照组(n=5)、模型组(n=10)和塞来昔布组(n=10)。模型组和塞来昔布组大鼠均每周一次腹腔注射二乙基亚硝胺,同时塞来昔布组每天给与塞来昔布溶液灌胃,模型组每天给与相同体积的生理盐水灌胃,对照组不做任何处理。20周后行MRI扫描后处死大鼠,取大鼠肝组织行HE染色、免疫组化检测和Western blot检测。结果1)模型组大鼠存活率为40%(4/10),塞来昔布组大鼠存活率为70%(7/10);2)MRI平扫显示模型组肝脏肿瘤直径为(1.064±0.441)cm,塞来昔布组大鼠肝脏肿瘤直径为(0.415±0.154)cm(P<0.05),另有3只为重度肝硬化;3)免疫组化结果显示,正常组大鼠肝组织中COX-2、Bcl-2阳性细胞数(48.352±25.300)个/mm^2、(314.286±78.323)个/mm^2明显少于模型组(970.696±138.246)个/mm^2、(953.686±69.910)个/mm^2,而Bax阳性细胞数则降低(956.040±61.381)个/mm^2 VS(681.319±50.600)。应用塞来昔布后,COX-2、Bcl-2阳性细胞数明显降低(513.736±127.309)个/mm^2、(703.300±56.033)个/mm^2,Bax阳性细胞数则升高(767.399±53.120)个/mm^2,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果表明,正常组大鼠肝组织中COX-2、Bcl-2蛋白相对表达量(0.089±0.042)、(0.181±0.043)明显低于模型组(0.663±0.102)、(0.617±0.069),而Bax蛋白相对表达量则降低(0.768±0.180)VS(0.328±0.034)。应用塞来昔布后,COX-2、Bcl-2蛋白相对表达量明显降低(0.333±0.120)、(0.411±0.075),而Bax蛋白相对表达量明显升高(0.428±0.027),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论塞来昔布可以通过降低Bcl-2的蛋白表达,增加Bax的蛋白表达抑制肝癌的生成和促进HCC细胞的凋亡。     

载药微球加载贝伐珠单抗介入栓塞治疗兔VX2肝癌的抗血管生成效果

目的 探讨载药微球加载贝伐珠单抗经导管动脉化疗栓塞(TACE)治疗兔VX2肝癌模型的抗血管生成效果.方法 构建30只新西兰大白兔VX2肝癌模型,随机分为HepaSphere载药微球加载贝伐珠单抗组(A组,n=10)、Embosphere微球联合贝伐珠单抗组(B组,n=10)、单纯HepaSphere载药微球组(C组,n...