牡蛎活性肽的制备及其理化性质的初步研究

目的从牡蛎蛋白质的酶解物中分离制备活性肽并对其理化性质进行初步研究。方法采用胰蛋白酶对牡蛎蛋白质进行酶解,使其释放出具备特殊活性的活性肽,将含有活性肽的粗提物分别用Sephadex G25凝胶柱层析,DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析和C18反相柱进行分离和纯化。结果牡蛎活性肽粗提物经过分离纯化制备出3个组分F31,F32,F41。组分F32,F41的等电点分别是7.12和7.08;组分F31,F32,F41的相对分子质量分别为885,810及409;其蛋白含量分别为51.9%,80.2%及99.8%;其糖含量分别为19.2%,4.3%及0%。结论以胰蛋白酶作用的最佳条件采用一步酶解的工艺,牡蛎蛋白质可以得到良好的酶解,同时得到的牡蛎活性肽粗提物活性较高。     

牡蛎肽生物活性最新研究进展

功能肽是指具有特异性生理活性或对生命活动有保护作用的复合肽类物质,又称生物活性肽。牡蛎中含有大量蛋白质,可以作为生物活性肽开发的优质材料,具有巨大的功能性食品潜力,在制药和医疗行业具有很大的应用价值。伴随着现代生物医药科技的革新,牡蛎肽萃取方法学的创新发展,牡蛎肽的生物活性和吸收率不断提高,使得对牡蛎肽生物学功能的认识不断深入,同时为其广泛应用提供了更加广阔的前景。概述牡蛎肽多样化活性的相关研究,为牡蛎肽的进一步发展应用提供新的线索和方向。     

厚壳贻贝抗氧化肽的分离、鉴定及活性评价

目的：以厚壳贻贝(Mytilus coruscus)为原材料,以抗氧化活性为筛选指标,运用酶解技术和现代分离纯化技术,制备抗氧化多肽。方法：以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH?)、羟自由基(HO?)及2,2"-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基(ABTS?)清除率为指标,优化酶解条件。通过超滤、凝胶过滤层析和反向高效液相色谱分离抗氧化肽,并评价其抗氧化活性。结果：最佳酶解条件为：木瓜蛋白酶、酶解时间3 h、加酶量3%、料液比1：50。通过反相高效液相色谱及测序,鉴定4条多肽分别为HK1：Gln-Thr-Asp(362.34 Da);HK2：His-Gln-Glu-Glu(541.52 Da);HK3：Leu-Glu-Gly-Asp-Thr(533.54 Da);HK4：Thr-Gln-Glu(376.37 Da)。其对DPPH?自由基清除率的EC₅₀分别为0.523±0.002 mg/mL,0.419±0.002 mg/mL,0.467±0.007 mg/mL,0.626±0.011 mg/ mL;对HO?自由基清除率的EC₅₀分别为0.587±0.027 mg/mL,0.866±0.034 mg/mL,1.009±0.018 mg/mL,1.014±0.036 mg/mL)、对ABTS?自由基清除率的EC₅₀分别为0.218±0.001 mg/mL,0.117±0.002 mg/mL,0.121±0.001 mg/mL,0.415±0.003 mg/mL。结论：木瓜蛋白酶酶解厚壳贻贝蛋白,可以产生具有显著自由基清除活性的酶解肽,可为厚壳贻贝抗氧化肽的开发利用提供理论依据和参考。     

牡蛎酶解工艺的研究

目的 获得最佳牡蛎蛋白的酶解工艺及以期提高酶解液水解度和蛋白回收率.方法 综合考虑蛋白回收率、水解度和腥、苦味及澄清度,进行最佳酶的筛选;正交试验确定酶的最佳水解条件;以水解度和蛋白回收丰为指标,研究热处理、超声处理和微波处理对酶解的影响.结果 与结论菠萝蛋白酶比较适合牡蛎蛋白质的水解,其最佳条件为:pH6,温度55℃,料水比为1:3,加酶量为800U/g,酶解时间4h,在此条件下酶解产物水解度为29.86%,蛋白回收率为67.55%;热处理、超声处理和微波处理不利于牡蛎蛋白的水解.     

海洋生物活性肽研究进展

综述几种海洋天然生物活性肽的研究进展，阐明酶解生物活性肽的理论基础和海洋生物活性肽的吸收理论。对活性肽在养殖业中的作用、当前海洋生物活性肽研究的不足及研究前景作了评述。     

肝水解肽的制备及相对分子质量分布研究

目的研究肝水解肽的制备方法及相对分子质量(Mr)分布。方法采用碱化-酶解法制备肝水解肽,采用高效液相色谱法测定肝水解肽的Mr。结果采用碱化-酶解法制备肝水解肽收率稳定,优化的酶解法工艺参数为胰酶用量为0.5%、温度为55℃、pH为7.5、水解时间为6 h,在此条件下酶解多肽提取率平均为4.82%;肝水解肽Mr400～10 000的组分占73%左右。结论碱化-酶解法制备肝水解肽工艺简便可靠,能保持大部分多肽结构。     

牡蛎肽通过NF-κB/iNOS信号通路改善肝纤维化(英文)

本文研究探讨牡蛎肽(OP)改善肝纤维化的机制可能是通过NF-κB/iNOS信号通路。将50只雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分为5组:对照组、模型组、低剂量(0.5 g/kg) OP组、中剂量(1.0 g/kg) OP组、高剂量(2.0 g/kg) OP组,每组10只。皮下注射50%四氯化碳(CCl₄)建立肝纤维化大鼠模型6周。结果发现,OP治疗组中,CCl₄诱导的肝纤维化大鼠肝脏中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和TGF-β1表达水平均显著低于模型组(P<0.05)。OP可以下调大鼠的肝组织NF-κB和iNOS的表达,可能是通过介导NF-κB/iNOS信号通路改善大鼠肝纤维化。     

灵芝多糖肽的抗氧化作用

目的 研究灵芝多糖肽(GLPP)的抗氧化作用及其机制。 方法 Cu²⁺诱导人血清低密度脂蛋白(LDL)氧化及iv四氧嘧啶(75 mg·kg^-1)引发小鼠氧自由基损伤。结果GLPP使LDL氧化修饰减少,氧化产物REM降低。GLPP 50,100,200和400 mg·kg^-1 ip 20 d,使血清和心肌匀浆的丙二醛(MDA)水平下降, 谷胱甘肽过氧化物酶(GSHpx)升高,超氧化物歧化酶(SOD)减少,过氧化氢酶(CAT)不变。结论GLPP具有体内外抗氧化作用,其抗氧化作用与清除氧自由基或提高GSHpx水平有关。     

扇贝边酶解物抗氧化作用研究

目的探讨不同蛋白酶酶解扇贝边所得酶解物对羟自由基(·OH)的清除效果及酶解物的体内抗氧化作用。方法通过胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合风味酶、枯草杆菌蛋白酶的扇贝边酶解物对·OH的清除活性筛选酶种,并优化其酶解条件。用酶解物灌胃小鼠,测定小鼠血液中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力和肝脏中的丙二醛(MDA)含量。结果枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解扇贝边所得酶解物具有较好的·OH清除效果,其清除率分别为84 .37%和79.93% ,这两种酶解物均可提高小鼠血液中GSH-PX活力和SOD活力,并降低小鼠肝脏中的MDA含量。结论扇贝边酶解物具有不同程度的体内抗氧化活性作用     

多管藻蛋白质酶解多肽的抗氧化活性研究

目的 研究多管藻蛋白质酶解多肽的抗氧化活性.方法 采用超声破碎、提取、酒精沉淀等步骤获得多管藻水溶性蛋白质、碱溶性蛋白质和盐溶性蛋白质,分别经胃蛋白酶、中性蛋白;酶和胰蛋白酶酶解处理获得相应多肽,分别采用邻二氮菲-Fe<'2+>氧化法和DPPH·清除法评价其抗氧化活性.结果 与结论经胃蛋白酶处理后,水溶性蛋白质酶解多肽...     

酶解法提取虎杖中白藜芦醇

目的研究酒曲对虎杖中白藜芦醇的酶解提取效果的影响。方法采用单因素实验及正交试验进行优选,考察酶解温度、酶解时间、酒曲用量等因素的影响,优化提取条件;采用HPLC法测定提取液中白藜芦醇含量,计算提取率,比较提取效果。结果虎杖通过酒曲酶解后,能提高白藜芦醇的提取率。结论较优工艺为酒曲用量0．5％,40℃酶解3h。该工艺对比直接提取法提取率提高近2倍,且重现性好,适宜工业化生产。     

赤魟软骨黏多糖的制备

探索利用碱浸提和酶法去蛋白从赤魟软骨中提取分离纯化黏多糖的技术，并对该多糖进行了含量测定。结果表明：当NaOH浓度为6％，40℃提取6h，利用中性蛋白酶在40℃下酶解7h，三氯醋酸沉淀去蛋白，加入4倍体积的95％乙醇沉淀多糖时，黏多糖提取率可达21％以上，产品纯度约84．53％，白色粉末，同时对黏多糖的理化性质进行了鉴别。     

Effects of low‐dose exposure to pesticide mixture on physiological responses of the pacific oyster,Crassostrea gigas

This study investigated the effects on the physiology of Pacific oyster, Crassostrea gigas, of a mixture of pesticides containing 0.8 μg L^?1 alachlor, 0.6 μg L^?1 metolachlor, 0.7 μg L^?1 atrazine, 0.6 μg L^?1 terbuthylazine, 0.5 μg L^?1 diuron, 0.6 μg L^?1 fosetyl aluminum, 0.05 μg L^?1 carbaryl, and 0.7 μg L^?1 glyphosate for a total concentration of 4.55 μg L^?1. The total nominal concentration of pesticides mixture corresponds to the pesticide concentrations in the shellfish culture area of the Marennes‐Oleron basin. Two varieties of C. gigas were selected on the foreshore, based on their characteristics in terms of resistance to summer mortality, to assess the effects of the pesticide mixture after 7 days of exposure under controlled conditions. The early effects of the mixture were assessed using enzyme biomarkers of nitrogen metabolism (GS, glutamine synthetase), detoxification metabolism (GST, glutathione S‐transferase), and oxidative stress (CAT, catalase). Sublethal effects on hemocyte parameters (phagocytosis and esterase activity) and DNA damages (DNA adducts) were also measured. Changes in metabolic activities were characterized by increases in GS, GST, and CAT levels on the first day of exposure for the “resistant” oysters and after 3–7 days of exposure for the “susceptible” oysters. The formation of DNA adducts was detected after 7 days of exposure. The percentage of hemocyte esterase‐positive cells was reduced in the resistant oysters, as was the hemocyte phagocytic capacity in both oyster varieties after 7 days of exposure to the pesticide mixture. This study highlights the need to consider the low doses and the mixture of pesticides to evaluate the effects of these molecules on organisms. © 2011 Wiley Periodicals, Inc. Environ Toxicol 28: 689–699, 2013.     

硒化紫球藻胞外多糖毒性及抗氧化活性的研究

目的 研究硒化紫球藻胞外多糖的毒性及抗氧化活性.方法 采用在培养液中添加亚硒酸,制备硒化紫球藻胞外多糖(Se-PSP);在体外培养条件下,测量其对细胞代谢活力的抑制率;建立小鼠动物模型,测量各项抗氧化功能指标.结果 Se-PSP对LO-2的半抑制浓度为80ìg·mL-1;Se-PSP(80,160 mg·kg-1)对小鼠不仅无毒性,而且还有促进其生长、抗氧化等保健功能.结论 Se-PSP在80,160 mg·kg-1低浓度范围内,可以发挥硒多糖的抗氧化等活性.     

牡蛎中糖蛋白成分的分离纯化与理化性质的初步分析

目的 从牡蛎蛋白质中分离糖蛋白并对其理化性质进行初步研究.方法 以青岛牡蛎为原料,通过低温水提取工艺得到牡蛎糖蛋白粗提物,用凝胶柱层析(Sephacryl s-100 HR)进行纯化,最后用高效液相色谱制备得到3个组分F22,F33,F42.结果 理化性质的研究表明组分F22等电点分别是5.5.其相对分子质量为34230Da,F22,F33,F42的蛋白含量分别为34.1%、19.7%及12.5%,其糖含量分另q为35.9%、28.8%及40%.结论 本研究将为牡蛎中活性物质的研究提供参考.     

海洋生物中抗氧化活性成分的研究进展

近30年来，从海洋生物中分离到许多具有抗氧化活性的物质，本文按这些抗氧化活性物质的种类。综述了来自海洋生物的抗氧化活性物质的研究进展。     

Study of atrazine effects on Pacific oyster,Crassostrea gigas,haemocytes

Shellfish farming is an important economic activity around the world. This activity often takes place in areas subjected to various recurring pollutions. The recrudescent use of herbicides in agriculture including atrazine implies pollutant transfer towards aquatic environment in estuarine areas. Harmful effects of such substances on animals in marine environment, particularly on cultured bivalves, are poorly documented. Bivalve molluscs such as mussels and oysters have been postulated as ideal indicator organisms because of their way of life. They filter large volumes of seawater and may therefore accumulate and concentrate contaminants within their tissues. Moreover, development of techniques allowing effect analysis of such compounds on bivalve biology may lead to the development of diagnosis tools adapted to analyze pollutant transfer towards estuarine areas. In this context, influence of atrazine on defence mechanisms was analyzed in Pacific oysters, Crassostrea gigas. Atrazine was tested in vitro and in vivo on oyster haemocytes, and its effects were analyzed by flow cytometry. Haemocyte viability, cell cycle and cellular activities were monitored. Atrazine induced no significant effect in oyster under tested conditions except for peroxidase activity.     

非标记定量蛋白质组方法分析牡蛎多糖抗D-半乳糖导致的小鼠衰老作用的研究

目的 研究牡蛎多糖抗衰老作用机制。方法 利用非标记定量蛋白质组方法分析牡蛎多糖抗衰老作用机制。将去除高丰度蛋白后的小鼠血清样本经酶解后进行LC-MS/MS分析,利用Maxquant软件(版本号1.3.0.5)查库,进行LFQ非标定量分析。结果 本研究共鉴定到4624个肽段,541个蛋白质。将模型组与牡蛎多糖治疗组进行t-test分析,得到20个差异表达蛋白质。对在小鼠数据库中查找到的19个差异蛋白质进行分析,发现这些差异蛋白质参与15个生物过程、具有8类分子功能、存在于5个细胞组分中(Level 2)。这些差异表达蛋白质中,peroxiredoxin-2(AC：Q61171)和malate dehydrogenase(AC：P14152)的上调以及xanthine dehydrogenase/oxidase(AC：Q00519)的下调可以提高机体清除自由基的能力。结论 牡蛎多糖是通过提高机体清除自由基的能力来发挥其抗衰老作用的。