非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶2与核因子-κB在糖尿病牙周炎牙周组织破坏中的作用研究

目的观察糖尿病牙周炎条件下小鼠牙周组织中非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶2（PTPN2）、核因子-κB（NF-κB）的表达与牙周组织破坏的关系。方法将4周龄健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组（N组）、单纯牙周炎组（P组）及糖尿病牙周炎组（DP组）,每组6只。采用口内接种牙龈卟啉单胞菌法在P组建立牙周炎模型,采用腹腔注射链脲佐菌素结合高脂高糖食物与口内接种牙龈卟啉单胞菌法在DP组建立糖尿病牙周炎模型。各组动物于P、DP组末次细菌接种4周后处死,通过体视显微镜观察牙槽骨形态和附着丧失面积,采用苏木精-伊红（HE）染色法观察牙周附着丧失的高度,免疫组织化学法检测牙周组织中PTPN2与NF-κB的表达强度。结果P、DP组牙槽骨的附着丧失面积和牙周附着丧失高度均高于N组（P<0.05）,PTPN2的表达量低于N组（P<0.05）,而NF-κB的表达量则高于N组（P<0.01）。结论在糖尿病牙周炎的发生发展过程中,NF-κB可能有促进作用,而PTPN2可能有抑制作用;PTPN2的表达减少可能导致NF-κB表达增强而加重牙周组织破坏。     

釉基质衍生物对牙周炎症组织中凋亡发生的影响

目的：探讨釉基质衍生物（EMD）对牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Pg—LPS）龈沟内注射形成的牙周炎症组织中细胞凋亡的影响。方法：隔日向SpragueDawley大鼠双侧上颌第一及第二磨牙间腭侧龈沟内注射Pg—LPS2wk建立牙周炎模型;牙周炎形成后,龈沟内注射EMD或磷酸盐缓冲液;截取上颌骨标本,行HE染色观察牙周组织破坏情况,TUNEL染色观察牙周组织中细胞凋亡,免疫组织化学染色观察凋亡酶caspase--3和波形蛋白的表达。结果：在大鼠龈沟内注射Pg—LPS后,牙周组织形成明显的炎症和附着丧失;TUNEL染色显示EMD可以抑制Pg—LPS所致牙周组织中的细胞凋亡;免疫组织化学染色显示EMD降低凋亡酶caspase--3的表达,并且促进牙周组织中波形蛋白的表达。结论：EMD可以抑制Pg—LPS所致牙周组织中的细胞凋亡,从而促进牙周组织再生。     

TNF-α、sICAM-1在慢性间歇低氧条件下大鼠牙周炎发病机制中的作用

目的：探讨慢性间歇低氧和常氧条件下大鼠血清和牙龈组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）在牙周炎发病机制中的作用。方法：将32只雄性 SD 大鼠随机分为4组（n ＝8）：常氧对照组（A 组）、常氧牙周炎组（B 组）、低氧对照组（C 组）、低氧牙周炎组（D 组）。采用正畸丝结扎双侧上颌第二磨牙和牙周炎食谱的方法建立牙周炎模型,常氧组和低氧组分别在常氧和模拟阻塞性呼吸暂停低通气综合征条件下饲养8周,检测各组动物牙周组织各项临床指标,用 ELISA 法检测动物血清和牙龈组织中 TNF-α、sICAM-1表达。结果：低氧牙周炎组中 TNF-α、sICAM-1浓度显著高于其余各组 P ＜0．05。血清和牙龈组织中 TNF-α、sICAM-1与附着丧失（AL）成正相关（P ＜0．05）。结论：慢性间歇低氧条件下 TNF-α、sICAM-1在牙周组织中的表达水平升高,加重了牙周炎症破坏程度,同时促使炎症反应向外周血管扩散。     

细胞凋亡在糖尿病大鼠牙周炎中参与牙槽骨吸收的实验研究

目的研究糖尿病伴牙周炎牙槽骨破坏机制,初步探讨牙周组织细胞凋亡在该类疾病中所起的作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素（Streptozocin,STZ）制备SD大鼠糖尿病模型,并利用0.2mm不锈钢丝环扎大鼠磨牙颈部制备牙周炎动物模型。观察牙周组织细胞在高血糖状态及正常血糖状态下的组织形态并检测细胞凋亡情况。结果高血糖状态下大鼠牙周炎发病程度明显高于血糖正常大鼠。牙周组织中成骨细胞及牙周膜成纤维细胞凋亡数量高血糖组高于血糖正常组,而破骨细胞数量则相反。结论高血糖状态下牙周炎病损程度较正常血糖状态下严重,牙周组织细胞凋亡参与和加重病程。     

牙周炎牙龈组织基质金属蛋白酶活性及蛋白表达的研究

目的：探讨来源于宿主的基质金属蛋白酶（MMPs)在牙周炎发病机制中的作用。方法：利用明胶酶活性分析（zymography)和免疫组化方法，检测15例牙周炎患者牙龈组织中和4例健康牙龈中MMP－2、MMP－9的酶活性及蛋白表达。结果：牙周炎牙龈组织以及正常的牙龈组织中均能检测到MMP－2、MMP－9的前体形式（pro-MMP-2和pro-MMP-9)，只有在牙周炎牙龈组织中发现活化形式的MMP－2，没有见到活化形式的MMP－9。免疫组化结果显示：15例成人牙周炎牙龈组织中MMP－2在炎性结缔组织中较正常牙龈阳性表达，而且经图像分析较正常牙龈组织MMP－2阳性细胞表达显著增强（P＜0．05）。结论：提示基质金属蛋白酶MMP－2参与牙周组织破坏过程，在细胞外基质的降解、牙周组织破坏过程中起重要作用。     

牙周炎大鼠正畸牙齿移动中牙周组织内iNOS的表达变化

目的:研究牙周炎大鼠正畸牙齿移动中组织内诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达变化。方法:48只10周龄SD大鼠随机分为牙周炎组和正常组,每组24只。近中移动上颌第一磨牙,分别于加力后1、2、3、7、14、21d,2组各处死4只动物,制作切片进行iNOS免疫组织化学染色,观察比较牙周组织中iNOS的表达变化。结果:加力2、3、7、14、21d时,实验组iNOS阳性表达显著高于对照组。结论:大鼠牙周组织炎症使牙齿移动过程中iNOS表达升高,影响牙周组织改建。     

壳寡糖对骨质疏松伴牙周炎大鼠骨代谢及IKK/NF-κB通路的影响

目的：探讨壳寡糖对骨质疏松伴牙周炎模型小鼠骨代谢和IKK/NF-κB通路的影响。方法：将30只大鼠随机分为3组，每组10只，分为对照组、去势牙周炎组和壳寡糖治疗组。除对照组外，其余2组大鼠均切除卵巢并涂抹牙龈卟啉单胞菌液，建立骨质疏松伴牙周炎模型。结扎手术后4周，以200 mg/kg灌胃壳寡糖治疗组大鼠，另2组灌胃等体积生理盐水，每天1次，连续90天。观察各组牙周组织变化，给药前、给药结束后检测大鼠骨密度。给药结束后，尾静脉采血，采用酶联免疫吸附法测定各组血清碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（BGP）和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)的含量。采用视诊和探诊相结合的方法得到各组大鼠的牙龈指数和牙周附着丧失；处死大鼠，取出上颌骨，测量釉-牙骨质界到牙槽嵴顶的距离，得到牙槽骨吸收值。采用H-E染色，对各组大鼠上颌骨牙体、牙周组织进行病理学观察。采用RT-PCR和蛋白免疫印迹法分别检测各组大鼠牙周组织中核因子κB (NF-κB)、IκB激酶（IKK）mRNA和蛋白表达水平。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果：对照组大鼠牙龈呈粉红色，探诊不出血；去势牙周炎组大鼠牙龈红肿，...     

雌激素受体和孕激素受体在女性牙周炎患者牙龈组织中的表达

目的观察比较女性牙周炎患者及正常女性牙龈组织雌激素(ER)和孕激素(PR)的表达分布,为进一步阐明ER和PR与女性牙周炎的关系提供实验依据。方法收集正常对照组牙龈标本30例,中、重度牙周炎组34例,按年龄各自分成3组,标本行免疫组化处理(Envision法),显微镜下观察,统计分析。结果ER和PR在细胞胞浆及胞核中均有表达,无规律地分布于牙龈上皮层中,阳性样本的染色强度强弱不一。正常女性牙龈组织中ER及PR阳性率较低,女性牙周炎患者牙龈组织中ER阳性率明显升高(P<0.01),PR阳性率无明显改变(P>0.05),与年龄无明显关系。结论女性牙龈组织中ER的表达可能与牙周炎相关,雌激素对牙龈组织除了起间接作用外,还可通过ER直接影响牙周组织;而孕激素对牙周组织可能以间接影响为主。     

间歇性低氧对牙周炎大鼠牙周组织中 NF-κB、IL-6及 PGE2含量的影响

目的：建立慢性间歇性低氧（CIH）及牙周炎大鼠模型,研究 NF-κB、IL-6及 PGE2水平的变化。方法：将32只普通级6周龄雄性 SD 大鼠随机分为4组（n ＝8）：A：常氧空白组、B：常氧牙周炎组、C：CIH 组、D：CIH 合并牙周炎组。B、D 组大鼠上颌第二磨牙进行结扎处理,辅以高糖饮食;A、C 组正常饮食。C、D 组置于低氧舱8 h／d。8周后处死,HE 染色,免疫组化检测牙周组织 NF-κB 含量,ELISA 检测牙龈组织 IL-6、PGE2。结果：HE 染色：8周后 B 组、D 组牙周炎症表现明显。免疫组化：B、C、D 组 NF-κB 表达均高于 A 组（P ＜0．05）;ELISA 检测：B、C、D 组 IL-6、PGE2含量高于 A 组（P ＜0．05）,且 D 组 IL-6、PGE2和NF-κB 表达较其他各组明显升高。结论：CIH 导致炎症因子升高,加重牙周组织破坏,使牙周炎症加剧。     

Etanercept作用下糖尿病Wistar大鼠牙周炎变化的实验研究

[摘要] 目的 观察肿瘤坏死因子α抑制剂Etanercept对实验性糖尿病Wistar大鼠牙周炎的影响。方法 12周龄Wistar大鼠45只,腹腔内一次性注射STZ诱导糖尿病。结扎糖尿病大鼠牙颈部建立牙周炎模型。将实验糖尿病大鼠分为糖尿病组,糖尿病牙周炎组和糖尿病牙周炎+Etanercept组。观察大鼠的牙龈指数、牙周袋深度、松动度。免疫组化观察IL-1β、IL-6在牙周组织中的表达。结果 糖尿病组大鼠牙龈指数、牙周袋深度、松动度与糖尿病牙周炎组和糖尿病牙周炎+Etanercept组有差别(P<0.05);糖尿病牙周炎组和糖尿病牙周炎+Etanercept组相比有差别(P<0.05)。糖尿病牙周炎组中IL-1β、IL-6表达高于糖尿病组(P<0.05),各时间段糖尿病牙周炎+Etanercept组牙周组织中IL-1β、IL-6表达低于糖尿病牙周炎组(P<0.05)。结论 肿瘤坏死因子α抑制剂Etanercept对实验性糖尿病Wistar大鼠牙周炎有抑制作用。     

老年牙周炎牙龈组织诱导型一氧化氮合酶分布研究

目的 :观察慢性老年牙周炎患者牙龈组织中诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)分布。方法 :采用免疫组织化学方法对 10例慢性老年牙周炎患者、10例慢性成人牙周炎患者、10例青少年牙周炎患者和 10例健康老年人牙龈组织中诱导型一氧化氮合酶分布进行了检测并比较研究。结果 :(1)牙周炎时牙龈组织中诱导型一氧化氮合酶主要在鳞状上皮细胞胞浆核周区颗粒状阳性表达 ,毛细血管壁内皮细胞、老化的胶原纤维及上皮下基底膜共同形成了一种乳头状轮廓样阳性表达形态 ,结缔组织和肉芽组织中各类炎症细胞也显阳性表达 ;(2 )慢性老年牙周炎组血管壁内皮细胞、结缔组织内炎症细胞、上皮乳头阳性表达例数明显低于青少年牙周炎组和慢性成人牙周炎组 (P <0 .0 5 )。血管壁内皮细胞和胶原纤维阳性表达例数低于健康老年人组 (P <0 .0 5 )。结论 :慢性老年牙周炎患者牙龈组织中诱导型一氧化氮合酶的表达明显降低 ,造成了局部一氧化氮(NO)合成减少 ,引起了局部牙龈组织免疫功能降低和免疫调节功能紊乱     

慢性牙周炎患者牙龈组织内诱导型一氧化氮合酶表达的研究

目的:研究牙周健康者和慢性牙周炎患者牙龈组织中诱导型一氧化氮合酶的表达强度,探讨一氧化氮在牙周病发病过程中的作用.方法:选择牙周健康组、慢性牙周炎活动期组,慢性牙周炎静止期组各20例,采取免疫组织化学的方法染色,光镜下观察牙龈组织内诱导型一氧化氮合酶的表达强度.结果:慢性牙周炎时牙龈组织中诱导型一氧化氮合酶主要在鳞状上皮和间质组织的细胞胞浆中阳性表达,正常组表达强度弱于慢性牙周炎静止期组和活动期组,慢性牙周炎静止期组表达强度弱于慢性牙周炎活动期组.结论:一氧化氮参与了慢性牙周炎的发生和发展过程,牙龈组织中诱导型一氧化氮合酶的表达强度与慢性牙周炎的炎症程度密切相关.     

Effects of ethanol consumption on periodontal inflammation in rats

Studies suggest a correlation between ethanol consumption and periodontal disease. We hypothesized that elevated levels of blood reactive oxygen species following ethanol consumption may increase inflammation in periodontal tissue. Rats were divided into 4 groups (6-7 rats/group). Two groups were fed an ethanol-containing liquid diet, and 2 groups were fed a pair-fed control diet. In one of each dietary group, periodontitis was ligature-induced, while the other group was left unligated. Chronic ethanol feeding alone decreased the ratio of reduced/oxidized glutathione and increased 8-hydroxydeoxy-guanosine and tumor necrosis factor (TNF)-alpha levels in the gingiva. Blood hydroperoxides were also increased. In ligature-induced periodontitis lesions, ethanol feeding enhanced polymorpho-nuclear leukocyte infiltration and TNF-alpha expression. The results suggest that chronic alcohol consumption increased periodontal inflammation, oxidative damage, and TNF-alpha production and had an additive effect on polymorphonuclear leukocyte infiltration and gingival oxidative damage, increasing the severity of periodontal inflammation in the ligature model.     

白细胞介素-6在大鼠慢性牙周炎合并动脉粥样硬化模型中的表达

目的探讨大鼠慢性牙周炎（CP）合并动脉粥样硬化（As）模型中牙周组织、As斑块中血清白细胞介素-6（IL-6）的表达。方法60只成年Wistar雄鼠随机分为4组：正常对照组（A组）、CP组（B组）、As组（C组）、CP加As组（D组）,每组15只,各组接受相应的建模处理。观察牙周组织及动脉血管病理改变,免疫组织化学方法半定量分析牙周组织及As斑块中IL-6表达,酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清IL-6水平。结果牙周病理学观察：B、D组实验牙牙周炎症表现明显,附着丧失（AL）水平较A、C组有明显增加（P〈0.05）。动脉病理学观察：C、D组主动脉形成粥样硬化病变。免疫组化染色：B、D组IL-6在牙周组织及血清中的表达均高于其他组（P〈0.05）,D组As斑块中IL-6表达高于其他组（P〈0.05）。相关性分析显示,D组IL-6在牙周组织与As斑块中的表达呈正相关。结论CP与As的发生发展可能与IL-6表达升高有关。     

Involvement of vascular endothelial growth factor, CD44 and CD133 in periodontal disease and diabetes: an immunohistochemical study

Aim: The aim of this study was to investigate the relationship between expression of angiogenic and regeneration markers and periodontal disease in subjects with/without diabetes mellitus.
Material and Methods: Immunohistochemical detection of vascular endothelial growth factor (VEGF), CD44 and CD133 was performed in 16 samples each of (1) healthy gingiva from non-diabetic subjects (controls), (2) gingiva from non-diabetic subjects with periodontitis, (3) gingiva from subjects with type 1 diabetes and periodontitis, (4) gingiva from subjects with type 2 diabetes and periodontitis.
Results: Diseased gingivae from patients with diabetes and periodontitis had greater clinical measures of periodontal disease than those with periodontitis only. VEGF expression was significantly enhanced in epithelial and endothelial cells from patients with periodontitis compared with controls ( p <0.05). Epithelial CD44 expression was strong in all groups, while CD44 was significantly enhanced ( p <0.05) in connective tissue cells from both diabetic groups. Epithelial and endothelial CD133 expression was comparable in all patients except those with type 2 diabetes and periodontitis, where it was not detected. Stromal CD133 expression was significantly lower in patients with type 2 diabetes and periodontitis and was increased in periodontitis patients ( p <0.05).
Conclusions: The involvement and high expression of VEGF, CD44 and CD133 in periodontal disease may predict a greater regeneration capacity of gingival tissue.     

Immunoglobulin concentration in gingival tissue of type 2 diabetic patients with periodontitis.

BACKGROUND: Diabetes mellitus is considered as a risk factor for the initiation and progression of periodontal disease. The diabetic patients often exhibit decreased immune response and increased susceptibility to infection. In the present study, a quantitative estimation of the gingival tissue immunoglobulin concentrations in diabetic and non diabetic subjects with periodontitis was assessed and compared with that of clinically healthy gingiva. METHOD: 40 gingival tissue samples obtained from 20 diabetic (Type 2) and 20 non-diabetic subjects were subjected to quantitative estimation of immunoglobulins G, A, and M. The data thus obtained were compared to the level of immunoglobulin found in clinically healthy gingiva. RESULTS: The IgG and IgA level in the tissues of both diabetic and non-diabetic subjects with periodontitis were found to be significantly higher than that of healthy subjects. The diabetic group also showed a significantly higher IgG and IgA levels compared to the non-diabetic group with periodontitis. CONCLUSION: These findings support the concept that the humoral immune response plays an important role in the pathogenesis of periodontal disease in diabetics. The significantly higher levels of immunoglobulin in the gingival tissues might be a protective mechanism against the increased bacterial challenge in diabetic subjects.     

人牙周膜细胞及炎症龈组织中mCD14表达的免疫组化研究

目的研究人PDLC及炎症龈组织中mCD14表达情况。方法采用免疫组化SABC方法。结果正常人牙周膜细胞mCD14染色为阳性反应，但细胞经脂多糖刺激2天后，胞浆染色要比未刺激的细胞染色深。健康牙龈组织中mCD14表达阴性；边缘性龈炎和牙周炎龈组织上皮棘层细胞mCD14呈强阳性表达，增生性龈炎也呈阳性表达。结论mCD14可在非髓样细胞中表达；mCD14可能在局部作为脂多糖受体参与牙周组织的破坏。     

静止期牙周炎正畸牙周组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ表达的实验研究

目的:对比分析IGF-Ⅰ在静止期牙周炎牙移动和正常牙移动牙周组织改建中的表达变化.方法:72只wistar大鼠随机平分为牙周炎牙移动及正常牙移动1、3、7、14、21 d组及对照组,近中移动各组大鼠上颌第一磨牙,分别测量牙齿移动距离并进行IGF-Ⅰ免疫组化染色分析.结果:在既定时间内,牙周炎组大鼠牙移动距离大于正常组;...