胃、十二指肠疾患血清抗幽门弯曲菌抗体IgG的检测及其临床应用

本文采用间接 ELISA 方法检测胃,十二指肠疾病患者血清中抗幽门弯曲菌(CP)抗体 IgG,以检测各型胃、十二指肠疾病患者的 CP 感染情况,并对检测结果与细菌培养和/或涂片(培养30例、涂片48例进行分析对比。探讨胃炎、胃及十二指肠溃疡病患者血清抗 CP 抗体 IgG 测定的临床应用价值。     

血清抗HP抗体IgG滴度与十二指肠球部溃疡的相关性观察

目的:探讨血清抗幽门螺杆菌(HP)抗体IgG滴度与十二指肠球部溃疡(DU)的关系。方法:54例DU患者与54例慢性胃炎患者均经胃镜确诊,活检HP尿素酶检测,并应用ELISA法测定血清抗HP抗体IgG滴度。结果:球溃疡组活检HP检出率81.48％,慢性胃炎组HP检出率为83.33％,统计学处理差异无显著性(P>0.05);球溃疡组的血清抗HP抗体IgG滴度与慢性胃炎组比较差异显著(P<0.01)。结论:血清抗HP抗体IgG滴度明显升高者(>3000)以球溃疡者显著多于慢性胃炎者,提示血清抗HP抗体IgG显著增高者(>3000)即使胃镜检查未发现病变者可能仍需抗HP治疗。     

适合结核病实验室检查的替代策略研究

目的探讨适合实验室直接厚涂片显微镜检查结核杆菌的替代策略。方法世行贷款/英国赠款灵台县结核病控制项目确诊230例活动性肺结核患者,用酶联免疫吸附试验检测230例活动性肺结核患者血清结核分枝杆菌抗体(主要是IgG)与直接厚涂片显微镜检查患者痰中的结核杆菌进行对比,比较两者的检测结果。结果 ELISA法检测230例活动性肺结核患者血清结核杆菌抗体阳性196例,阳性率为85.2%;直接厚涂片显微镜检查阳性59例,阳性率为25.6%,经x2检验,ELISA检测结核杆菌抗体阳性率明显高于痰涂片阳性率(P<0.01)。结论 ELISA法检测患者血清结核杆菌抗体可替代痰涂片检查结核杆菌,ELISA法检测血清结核杆菌抗体简便、快速、阳性率高,是目前结核病实验室显微镜检查最理想的替代策略。     

血清幽门螺杆菌抗原检测方法比较

目的 :对血清幽门螺杆菌抗原检测的两种方法进行对比分析。方法 :取 42例患者胃粘膜组织块 ,应用尿素酶(HPUT)试剂盒进行检测 ,操作步骤按产品说明书进行。另外 ,采用夹心ELISA法做对比检测 ,简要过程是以抗HP特异性抗体包被固相支持物 ,依次加入封闭蛋白 (覆盖非结合点 ) ,试样及酶标记的HP抗体 ,TMB显色 ,以肉眼观察定性结果。每批试剂均设阳性及阴性对照。包被及酶标记抗HP抗体的效价为 1∶5 12 0 0。结果 :42例中 ,HPUT的阳性检出率为 2 8.5 7% ,夹心ELISA法检出血清HP抗原的阳性率为 30 .95 %。两法的符合率达 90 % ,两者无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :夹心ELISA方法简单 ,无痛苦 ,适合于大规模的筛查。夹心ELISA法检测血清HP抗原与用HPUT检测胃内尿素酶的符合率高 ,且配对进行 χ2 检验表明 ,两法间无显著性差异 ,提示应用夹心ELISA检测血清HP抗原 ,有可能替代HPUT诊断HP现症感染 ,但仍需扩大观察的例数 ,进一步考验这一方法的特异性、敏感性及稳定性     

牛乳中抗幽门螺杆菌特异性抗体的间接ELISA法的建立

目的 建立抗幽门螺杆菌(Hp)特异性抗体的ELISA检测方法,用于牛乳中抗Hp特异性抗体的检测.方法 超声Hp全菌抗原接种奶牛,按多克隆抗体制备技术制备牛抗Hp抗血清.用纯化牛IgG免疫家兔.制备兔抗牛IgG多克隆抗体.硫酸铵盐析,DEAE-32柱层析分别纯化牛与兔IgG.兔抗牛IgG以辣根过氧化物酶标记.用Hp全菌抗原包被反应板,建立间接ELISA法用于牛乳抗Hp抗体的检测.结果 建立的抗Hp间接ELISA法的最佳包被抗原量为1.47μg/孔,HRP-兔抗牛IgG 1∶600稀释,标准曲线方程为A=0.0124 0.3988 lnC,相关系数r=0.999 8,线性范围为1.8～145μg/ml,回收宰在86.4%～92.8%,变异系数为9.4%～12.3%.结论 初步建立牛乳中抗Hp抗体的间接ELISA测定法,可用于Hp免疫牛乳中抗Hp特异性IgG的检测.     

子宫内膜异位症患者血清抗转铁蛋白抗体的表达及意义

目的建立一种ELISA方法 ,检测患者血清中抗转铁蛋白抗体 ,评价其对子宫内膜异位症诊断的价值。方法用转铁蛋白抗原包被 ,间接ELISA方法检测患者血清中抗转铁蛋白抗体。采集患者血清 ,分 3组 :盆腔内异症组 38例 ,Ⅰ、Ⅱ期 2 0例 ,Ⅲ期 9例 ,Ⅳ期 9例 ;妇科良性疾病对照组 30例 ;正常对照组 4 0例。结果内异症患者血清中抗转铁蛋白抗体阳性率高达 94 .7% ,正常对照组阳性率为 2 .5 % ,良性疾病对照组阳性率为 0 % ,内异症组与两对照组比较差异有显著意义 (P均 <0 .0 1 )。间接ELISA法诊断内异症临床敏感性为 94 .7% ,特异性为 98.6 % ,诊断符合率为 96 .5 %。内异症各组阳性率比较差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论用转铁蛋白抗原包被的间接ELISA法检测血清中抗转铁蛋白抗体诊断内异症敏感性、特异性强 ,诊断符合率高 ,可试作为内异症辅助诊断及疗效检测的一种非创伤性的指标     

慢性肺部疾病患者接种23价肺炎链球菌多糖疫苗后抗荚膜多糖抗体的特异性

目的 探讨慢性肺部疾病患者接种23价肺炎链球菌多糖疫苗(PPV)后血清中抗肺炎链球菌荚膜多糖(CPS)IgG抗体的特异性.方法 以39例慢性肺部疾病患者为研究对象,分别用第二代和特异性更高的第三代ELISA测定疫苗接种前、后血清中的肺炎链球菌6B、19F和23F三种血清型的特异性IgG抗体浓度.结果 用第三代ELISA测得的患者血清中血清型特异性IgG抗体水平比用第二代ELISA测得的抗体水平显著降低.无论是PPV接种前的自然感染,还是PPV接种后的主动免疫,慢性肺部疾病患者血中产生的抗CPS-IgG中都有大约一半的非特异性抗体.结论 PPV接种并不能提高慢性肺部疾病患者血中的特异性抗CPS-IgG的比例.     

检测抗HAV抗体的敏感ELISA

灵敏的免疫学检测是测定抗甲型肝炎病毒(HAV)抗体(HAVAB)的合适方法.作者用阻断ELISA、竞争抑制ELISA和抗HAVIgM捕获ELISA来检测总抗-HAV,并与美国Abbott实验室的HAVAB放射免疫法(RIA)和酶免疫法(EIA)的测定结果进行比较.阻断ELISA法是待测血清与被固相上抗-HAV捕获的HAV反应,随后加入辣根过氧物酶标记的抗HAV IgG.竞争抑制     

1型糖尿病患者血清中抗IA-2与抗GAD65抗体的比较

目的：研究成人1型糖尿病患者血清中抗IA-2抗体和抗GAD65抗体的水平并进行分析。方法：用ELISA法检测了48例20-45岁，病程小于2年的1型糖尿病患者组血清中的IgG型抗IA-2抗体和抗GAD65抗体，并以110例正常人血清作对照组。结果：患者组血清中抗IA-2抗体和抗GAD65抗体的水平与对照组差别均有统计学意义，而且患者组血清中抗IA-2抗体较抗GAD65抗体有更高的阳性率。结论：成人新发1型糖尿病患者血清中IgG型抗IA-2抗体和抗GAD65抗体均有不同程度明显升高，而且对两者进行联合检测会更有助于临床上1型糖尿病的早期诊断。     

ELISA法定量测定食蟹猴血清中的抗CTLA-4单克隆抗体

目的:建立酶联免疫吸附法(ELISA法)用于测定食蟹猴血清中的抗CTLA-4单克隆抗体(伊匹单抗,YERVOY?)的浓度.方法:建立间接ELISA方法对待测抗体药进行浓度测定,将Human CTLA-4蛋白包被于酶标板中,封闭后加入稀释后样品,采用HRP标记的羊抗人IgG作为酶标抗体,用TMB底物进行显色并用2 mol...     

过敏原特异性抗体IgE和IgG检测分析

目的探讨过敏性疾病患者的过敏原特异性抗体IgE和IgG的意义。方法使用间接酶联免疫吸附法(ELISA)对研究对象血清中的最常见的过敏原抗体IgE和IgG进行检测分析。结果通过研究检测可以统计到14种过敏原特异性抗体IgE和IgG的阳性率结果,而且食物过敏原中检测出的IgG阳性率与IgG和IgE同时存在的阳性率比吸入物过敏原的高。结论对特异性抗体IgE和IgG进行联合诊断对过敏性疾病的预防以及治疗,尤其是针对食物过敏原,可以更清楚地检测出究竟是哪种因素导致的过敏,对患者能更有针对性的进行治疗,具有很高的临床治疗意义。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ自身抗体间接酶联免疫吸附分析法的建立

目的建立以重组心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)融合蛋白为包被抗原的间接酶联免疫吸附分析法(ELISA),检测人血循环中的抗cTnI自身抗体,为判断心肌损伤的预后提供依据。方法采用自行构建表达的cTnI-C融合蛋白作为包被抗原,以棋盘法优化实验条件,建立检测人血清cTnI自身抗体的间接ELISA方法。采用建立的间接ELISA法在121例急性心肌梗死(AMI)中筛查抗cTnI自身抗体,并用蛋白印迹法(WB)进行确证。结果 121例AMI血清抗cTnI抗体的阳性率为10.74%,ELISA试验的灵敏度100%,特异性95.37%,Kappa值为0.815。结论以cTnI-C融合蛋白作为包被蛋白建立的间接ELISA法具有良好的敏感度、特异性,可用于人血清抗cTnI自身抗体的筛查。     

风湿性心脏瓣膜病患者幽门螺杆菌感染的临床分析(附89例报告)

目的探讨风湿性瓣膜病患者幽门螺杆菌(Hp)感染状况及与血清同型半胱氨酸水平的关系。方法对89例风湿性瓣膜病患者,采用美国ABI公司Sure StepTM HP Assay试剂测定血清抗Hp IgG;采用ELISA方法检测血清抗CagA IgG和同型半胱氨酸水平。结果抗Hp IgG阳性患者61例(68.5%);抗CagA IgG阳性患者36例(40.4%);抗CagA IgG阳性患者血清同型半胱氨酸较抗Hp IgG阴性的患者明显升高(P<0.05)。随访2年,抗Hp IgG阳性的风湿性瓣膜病患者术后3例发生出血并发症。结论抗CagA IgG阳性Hp感染的风湿性瓣膜病患者与血清同型半胱氨酸水平升高有一定关联。     

血清抗风疹IgG抗体检测方法的比较研究

目的  比较微量血凝抑制 （micro-hemagglutination inhibition,HI）试验与酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测血清抗风疹IgG抗体的敏感性和特异性,确定ELISA法检测血清抗风疹IgG抗体的可行性。方法  采集江苏地区506名8~15月龄健康儿童免疫前和麻疹-腮腺炎-风疹联合疫苗免疫后1个月的血清,共1012份血清,分别采用HI法和ELISA法检测血清抗风疹IgG抗体,并采用卡方检验对两种方法的检测结果进行比较。结果  HI法和ELISA法的血清抗风疹抗体阳性检出率分别为50.30%和47.33%,两种方法的阳性检出率之间的差异无统计学意义（χ²=1.780,P=0.182）。两种方法检出同为阴性的血清495份,同为阳性的血清476份血清,两种方法的检测符合率为95.95%。相关与回归分析显示,两种方法具有高度的正相关性（r=0.806,P＜0.001）。结论  可用ELISA法替代HI法进行血清抗风疹IgG抗体检测。     

酶联免疫吸附试验在囊虫病诊断中的应用

囊虫病的诊断,除了病人的临床表现外,还必需结合特异、灵敏的血清学方法检查病人血清抗囊虫抗体才能确诊。为此,我们应用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法,检测59例囊虫病人40例非囊虫病人及50例健康人血清中抗囊虫抗体。我们用国产聚苯乙烯塑料管为固相支持物。首先向管内加猪囊虫液抗原,洗涤,加病人血清,洗涤,加辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗人 IgG 标记抗     

利用酵母重组抗原U1RNP-70K建立间接ELISA法检测抗U1RNP-70K抗体

目的利用纯化的酵母重组U1RNP-70K抗原建立间接ELISA法,用于检测抗U1RNP-70K抗体。方法将巴斯德毕赤酵母菌重组表达的U1RNP-70K抗原包被于聚苯乙烯微量反应板,与待检血清中抗U1RNP-70K抗体反应后,经洗涤,再加入辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG与之结合,然后用四甲基联苯胺（TMB）作用显色。结果间接ELISA法与欧蒙斑点酶免疫法的阳性符合率为94.74%（54/57）,阴性符合率为98.00%（49/50）,总符合率为96.26%（103/107）;两者差异无统计学意义（P=0.617,P〉0.01）。结论本研究利用酵母重组U1RNP-70K抗原成功建立了用于检测抗U1RNP-70K抗体的间接ELISA法,具有良好的临床诊断应用前景。     

大鼠肺炎支原体感染的ELISA实验研究

目的 探讨支原体感染大鼠的血清抗体反应及其间接ELISA检查与诊断方法.方法 将肺炎支原体疫苗分别以滴鼻、腹腔注射、尾静脉注射方式免疫大鼠,收集动物血清,以方阵滴定法和间接法确立ELISA检测实验的最适条件,用间接法检测不同方法与时间免疫动物的血清特异性IgG抗体.结果 ELISA系统的最适工作条件包括抗原包被浓度10×10-4g/ml、血清稀释度1:40、酶结合物1:5000.以该系统检测滴鼻免疫大鼠共21只,免疫6次2只大鼠血清抗体阳性(66.67%),免疫7次后阳性率达100%;腹腔免疫和静脉免疫大鼠各18只,免疫2次后2只大鼠可检出特异性抗体(66.67%),免疫5次后全部动物均为血清抗体阳性(100%).结论 肺炎支原体0.0016g/只以滴鼻、腹腔注射、尾静脉注射的方法均能够使大鼠产生特异性抗体,以间接ELISA检测法检查腹腔免疫组和静脉免疫组大鼠血清免疫2次后即有部分大鼠血清抗体检测即呈阳性,5次后阳性率达100%,而滴鼻免疫组大鼠直至免疫6次后部分血清抗体检测才可呈阳性其阳性率与腹腔免疫和静脉免疫2次阳性率相当.间接ELISA法可有效检测支原体感染动物的血清特异性抗体,是一种具有较高特异性的快速简便方法.     

抗核抗体对不同抗原的免疫应答

目的　探讨体内产生抗核抗体的抗原。方法　分别以羊红细胞、伤寒沙门菌及鸡血清免疫小鼠 ,同时设立生理盐水对照组 ,每组 10只 ,采用商品化酶联免疫法检测抗核抗体试剂盒 ,将酶结合物 (酶标抗人IgG)换成酶标金黄色葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,建立检测抗核抗体的SPA ELISA法 ,并使其性能保持不变 ,用其检测小鼠的抗核抗体。结果　新建立的检测抗核抗体的SPA ELISA法与原法检测同一批标本 ,相关系数为 0 931,P <0 0 1。小鼠血清抗核抗体检测结果 (阳性率 ) :羊红细胞组为 90 % (9 10 ) ,伤寒沙门菌为 70 % (7 10 ) ,鸡血清组为 10 0 % (10 10 ) ,生理盐水对照组未检出抗核抗体。各实验组与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　体内抗核抗体可能是一类由不同抗原刺激非特异产生的抗体。     

幽门螺杆菌相关性疾病血清抗Hp IgG IgM和IL-8含量的检测及意义

目的研究幽门螺杆菌(Hp)感染与慢性胃炎;胃、十二指肠球部溃疡;冠心病;酒糟鼻的关系.方法以金标免疫斑点法(金标法)检测血清抗Hp抗体,用放射免疫法检测血清白细胞介素-8(IL-8)浓度.结果 Hp感染阳性慢性胃炎组86.3%,胃溃疡组87.5%,十二指肠球部溃疡组90.7%,冠心病组85.9%,酒糟鼻组91.3%;Hp感染阴性组血清IL-8浓度为0.52±0.04ng/ml,慢性胃炎抗Hp IgG(+)组为0.74± 0.23ng/ml、IgG(+)IgM(+)组0.86±0.15ng/ml、胃、十二指肠球部溃疡抗Hp IgG(+)组1.11±0.32ng/ml、 IgG(+)IgM(+)组1.22±0.28ng/ml、冠心病抗Hp IgG(+)组0.85±0.22ng/ml、IgG(+)IgM(+)组1.12+0.22ng/ml组间差异有显著意义(P＜0.01).结论 Hp感染可引起多种胃肠道疾病,同时与一些胃肠道外疾病密切相关,Hp感染与血清IL-8水平呈正相关,在基层医院可广泛开展金标法检测血清Hp抗体,明确Hp感染,若同时检测血清IL-8浓度,可协同诊断Hp感染并判断Hp根治情况.     

672例慢性荨麻疹血清食物特异性IgG抗体检测分析

目的：了解常见的血清中7种食物特异性IgG抗体与慢性荨麻疹的相关性,探讨检测食物过敏原特异性IgG抗体在一些慢性疾病的诊断与预防的意义。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测672例慢性荨麻疹患者血清中7种食物特异性IgG抗体水平。结果：患者血清食物特异性IgG抗体总阳性率65.1%,7种食物特异性IgG抗体有不同程度增高,其中蛋清/蛋黄最高。不同年龄组过敏食物比较有一定特异性。结论：对慢性荨麻疹以及其他慢性病的病人应做食物不耐受抗体的检测。