芪归解毒汤防治硫酸镍致晶状体上皮细胞损伤的实验研究

目的 观察芪归解毒汤药物血清对硫酸镍损伤正常人晶状体上皮细胞(Lens epithium cells,LEC,细胞编号:SRA01/04)的保护作用.方法 采用血清药理学方法提取芪归解毒汤药物血清,体外培养晶状体上皮细胞,用硫酸镍产生细胞损伤,再加入体积分数分别为5 %、10 %、15 %、20 %的药物血清,倒置显微镜下观察晶状体上皮细胞的形态学改变,MTT法检测细胞活性的变化,试剂盒测量乳酸脱氢酶(LDH)含量的变化.结果 倒置显微镜下观察到硫酸镍损伤的晶状体上皮细胞出现肿胀、体积缩小、折光性下降、贴壁率降低等形态学改变.加入10 %和15 %芪归解毒汤药物血清时细胞生长明显好转,折光性优于硫酸镍组,药物血清浓度为20 %时细胞生长接近正常;MTT法检测药物血清组细胞活力较硫酸镍组明显增强;药物血清组 LDH活性较硫酸镍组明显降低.结论 芪归解毒汤药物血清能明显减轻晶状体上皮细胞的镍性损伤,并呈现剂量依赖关系.     

芪归解毒汤对硫酸镍诱导晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用

目的观察芪归解毒汤对硫酸镍诱导正常人晶状体上皮细胞(Lens epithelium cell,LEC)凋亡的影响。方法体外培养正常人晶状体上皮细胞,用血清药理学方法制备含芪归解毒汤药物血清,用药物血清和硫酸镍处理培养的LEC,采用流式细胞术检测LEC凋亡率;透射电子显微镜观察LEC超微结构改变和凋亡小体形成。结果硫酸镍组LEC凋亡率(26.99±2.58)高于中药组LEC(12.21±2.42),硫酸镍组和中药组LEC凋亡率均高于对照组(0.8±0.16),三组间差异有统计学意义(x2=-20.489,P0.01),两两比较均有统计学意义(P0.01)。透射电镜观察到硫酸镍组LEC各阶段均有细胞凋亡,可见到LEC凋亡后的继发性坏死。中药组LEC呈凋亡早期改变,只有少数LEC呈凋亡改变,未见有凋亡后继发性坏死的LEC。结论芪归解毒汤药物血清可有效地抑制硫酸镍诱导的LEC凋亡。     

芪归解毒汤保护硫酸镍致Wistar大鼠晶状体损伤的实验研究

目的探讨硫酸镍致Wistar大鼠晶状体的损伤情况及芪归解毒汤的保护作用。方法Wistar大鼠随机分为硫酸镍注射组、芪归解毒汤预防组、障眼明预防组及空白对照组。每隔2周在裂隙灯下观察拍照并详细记录晶状体变化情况。给药45天后双盲法在裂隙灯下参照LOCSⅡ、Ⅲ评价Wistar大鼠晶状体的混浊程度,用SPSS16.0统计学软件进行方差分析处理。结果在晶状体P区域中,硫酸镍组晶状体混浊指数得分要高于另外3组,差异有统计学意义(F=35.28,P0.05)。在晶状体N区域中,硫酸镍组晶状体混浊指数得分也高于另外3组,差异有统计学意义(F=78.64,P0.05)。在晶状体A、C两区域,晶状体混浊指数得分各组之间比较,差异无统计学意义。在晶状体A+P区域上,硫酸镍组晶状体混浊指数得分要高于另外3组,差异有统计学意义(F=30.24,P0.05)。晶状体A+C+N+P四个区域混浊指数得分总和分析,硫酸镍组晶状体混浊指数得分要高于另外3组,差异均有统计学意义(F=38.14,P0.05)。结论硫酸镍皮下注射能对Wistar大鼠晶状体造成一定的损伤,芪归解毒汤能有效减轻硫酸镍致Wistar大鼠晶状体的损伤。     

扶正解毒汤防治硫酸镍致大鼠心肌线粒体酶毒性的实验研究

腹腔注射(ip)硫酸镍,可抑制大鼠心肌线粒体酶活性。本文灌胃(PO)扶正解毒汤,检测大鼠心肌线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、细胞色素C和aa3活性的变化,观察扶正解毒汤的疗效。结果表明：扶正解毒汤可提高硫酸镍抑制的大鼠心肌线粒体酶系的活性,并呈剂量一效应关系。     

水蛭提取液对体外培养牛晶状体上皮细胞生长抑制的实验研究

目的观察水蛭提取液对体外培养的牛晶状体上皮细胞（LEC）生长的影响，探讨水蛭用于防治后发性白内障的可能性。方法采用植块培养法，对牛晶状体前囊膜进行培养。利用水蛭水提醇沉提取液，观察传代培养48小时的LEC加入不同浓度提取液培养24和72小时后的生长情况，以MTT法测定OD值，并求出半效抑制量（ID50）。传代的LEC加入提取液高剂量（ID50）及低剂量（1／10ID50）培养24小时，观察贴壁抑制情况。结果水蛭水提醇沉提取液抑制LEC生长的24和72小时ID50分别为31．85mg／ml、30．69mg／ml；与空白组比较，水蛭水提醇沉液对LEC贴壁有明显抑制作用（P〈0．01）。结论水蛭水提醇沉液能同时抑制体外培养的LEC生长及贴壁，为水蛭提取液用于防治后发性白内障提供了实验依据。     

急性高眼压对兔晶状体上皮细胞的影响

目的观察急性高眼压状态下兔晶状体上皮细胞凋亡,Bcl-2、PCNA表达的动态变化,以证实凋亡是青光眼性白内障的早期表现。方法36只健康无眼疾成年灰兔随机分为A、B、C、D4组,每组18只眼。将每组再随机分入对照组、50 mm Hg组、80 mm Hg组,保证每只兔两只眼不在同一组。对照组做玻璃体穿刺,不灌注。50 mm Hg组、80 mm Hg组玻璃体穿刺后灌注乳酸钠林格注射液,调整灌注高度控制相应眼压。A、B、C、D组动物分别在灌注3、6、9、12I小时后处死并摘除眼球,取晶状体前囊膜制作晶状体上皮细胞铺片,进行TUNEL染色,Bcl-2、PCNA免疫组化染色。结果1.对照组极少见凋亡细胞,随眼压升高、灌注时间的延长,晶状体上皮细胞出现凋亡并且数量增加(P<0.01)。2.BCL-2蛋白在对照组中有少量表达,高眼压状态下表达随时间延长、眼压增高而增加、染色增强。与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。3.PCNA阳性染色位于晶状体赤道部,中央区无阳性细胞。对照组与实验组无统计学差异(P>0.05)。结论在急性高眼压状态下,晶状体上皮细胞开始出现凋亡并随眼压程度、高眼压持续时间的延长而增加。认为凋亡也是青光眼性白内障起始的细胞学基础。     

茶多酚对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞影响的研究

目的 探讨茶多酚对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞形态及生长情况的影响. 方法 取第2代对数生长期的大鼠晶状体上皮细胞,给予不同浓度的葡萄糖、茶多酚进行培育24小时,观察高糖条件下及茶多酚干预后大鼠晶状体上皮细胞形态的变化,MTT法检测0.1μM、0.3μM浓度的茶多酚对高糖培养的大鼠晶状体上皮细胞生长情况的影响.结果 在高葡萄糖浓度的培养条件下,大鼠晶状体上皮细胞死亡率增加.生长受到抑制.而用茶多酚干预的高糖条件的大鼠晶状体上皮细胞则较好的保持了上皮细胞的形态,细胞死亡较少,生长良好.大鼠晶状体上皮细胞的存活率和抑制率两两比较差异有统计学意义(P<0.05),不同浓度的茶多酚两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 茶多酚对高糖损伤的晶状体上皮细胞具有保护作用.     

芪归药对治疗糖尿病肾病的理论探讨

芪归药对乃补气生血的经典药对,首载于《内外伤辨惑论》,本治血虚发热,因其配伍精妙,被后世医家广泛用于临床各科。糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症,目前尚无理想措施阻止其发生、发展。研究表明,芪归药对能够通过减少尿蛋白、抑制肾脏炎症反应、抵抗氧化应激等减轻肾损害,延缓糖尿病肾病的进展。因此,作者通过查阅近年来有关芪归药对的文献,从中医基础理论、现代药理研究的角度对其在糖尿病肾病中的运用进行探讨,以期为今后的研究提供依据。     

内障丸加减方对氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的：探讨中药单体与含药血清干预氧化损伤的LECs凋亡作用的异同。从分子生物学水平的变化,阐明内障丸加减方预防或延缓SC发生发展的作用机理。方法：经24小时孵育的SD大鼠晶状体,每组6例,共30例,取囊膜铺片。以TUNEL-AP试剂盒检测LECs的凋亡,光镜下观察凋亡细胞与非凋亡细胞的分布情况,并随机选取10个视野拍摄相片,在光镜下分视野统计各组上皮细胞的凋亡数,计算LECs凋亡率。结果：光镜下显示空白组凋亡细胞数量极少,紫红色非凋亡细胞的排列紧密;氧化损伤各组的细胞排列较疏松,细胞间距离增宽。模型组及空白血清组的凋亡细胞较多;槲皮素组及含药血清组的凋亡细胞数量介于空白组与模型组之间,细胞密度亦优于模型组。结论：以内障丸加减方制备的含药血清具有对抗LEC氧化损伤,抑制细胞凋亡的作用,其作用优于槲皮素。     

内障丸加减方对氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨中药单体与含药血清干预氧化损伤的LECs凋亡作用的异同.从分子生物学水平的变化,阐明内障丸加减方预防或延缓SC发生发展的作用机理.方法 经24小时孵育的SD大鼠晶状体,每组6例,共30例,取囊膜铺片.以TUNEL-AP试剂盒检测LECs的凋亡,光镜下观察凋亡细胞与非凋亡细胞的分布情况,并随机选取10个视野拍摄...     

以血清药理学方法研究黄连解毒汤对小鼠的药效动力学

目的以含药血清对小鼠肝匀浆体外生成丙二醛(M DA)的抑制作用为指标,研究黄连解毒汤及单味药水煎剂的药效动力学。方法测定小鼠ig黄连解毒汤及单味药所得含药血清对M DA生成作用的经时过程,并考察黄连解毒汤含药血清、单味药煎剂及小檗碱、黄芩苷抑制M DA生成作用的剂量-效应关系。结果小鼠ig黄连解毒汤、黄连、黄芩、黄连 黄芩后,含药血清均可抑制体外肝匀浆M DA生成,且作用呈剂量依赖性。各药的Em ax分别为86%、76%、79%及81%;tm ax分别为180、120、5及15 m in;其煎剂对M DA生成抑制作用呈剂量依赖性;小檗碱在0.12~10 ng/mL无明显的抑制作用;黄芩苷在1.11~10μg/mL有抑制作用,且作用亦呈剂量依赖性。结论黄连解毒汤体内抗氧化作用强于各单方。黄芩苷可能是黄芩药液和含药血清中的抗氧化成分之一,而小檗碱可能与含药血清抗氧化作用无关;小鼠ig黄连解毒汤及其单味药所得含药血清对M DA生成呈时间和剂量依赖性。     

黄连解毒汤治疗脓毒症的网络药理学研究

目的：探索黄连解毒汤治疗脓毒症的核心作用靶点、主要活性成分及作用机制。方法：在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)以黄连、黄芩、黄柏、栀子为关键词分别检索,按照口服生物利用度(OB)≥30%,类药性(DL)≥0.18的条件筛选,获得黄连解毒汤各中药的活性成分及其作用靶点;通过在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、GeneCards、治疗靶点数据库(TTD)检索脓毒症的疾病靶点;将预测到的成分及其疾病靶点运用Cytoscape软件进行中药-成分-疾病-靶点网络构建及分析,筛选核心靶点及主要活性成分,通过STRING数据库结合Cytoscape软件绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并进行网络拓扑学分析,通过R语言运行后对核心靶点进行基因本体(GO)分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路注释分析,设定阈值P<0.05,Q<0.05,筛选具有显著性差异的生物过程及信号通路。结果：筛选出黄连解毒汤78个成分和841个药物靶点;这些共同靶点涉及147条生物过程包括TNF信号通路、趋化因子信号通路、HIF-1信号通路、细胞凋亡通路等代谢通路,内分泌抵抗等与内分泌系统...     

解毒护肝饮药物血清对异烟肼致HepG2坏死和凋亡的干预

目的 观察解毒护肝饮药物血清对异烟肼致人肝癌细胞株(human hepatocellular carcinoma cell lines,HepG2)病变的干预,并分析其机制。方法 制备解毒护肝饮和甘草酸二铵的药物血清,建立异烟肼致HepG2细胞损伤模型,以解毒护肝饮和甘草酸二铵药物血清加入HepG2培养液,观察对HepG2坏死和凋亡的干预,以及对HepG2 Fas/FasL表达的影响,以评价解毒护肝饮的疗效机制。结果 解毒护肝饮药物血清对异烟肼致HepG2损伤有明显抑制作用,可以减少HepG2细胞凋亡和坏死,并减少其Fas/FasL表达,效果优于甘草酸二铵胶囊组。结论 以清热利湿解毒兼养阴化瘀为治法的解毒护肝饮有确切的减少异烟肼致HepG2坏死和凋亡的作用,其抗细胞凋亡作用与减少HepG2的Fas/FasL的表达有关。     

基于网络药理学的黄连解毒汤治疗高血压潜在机制研究

目的利用网络药理学技术预测黄连解毒汤治疗高血压的作用机制。方法从中药系统药理学分析平台(TCMSP)中寻找与黄连解毒汤中4味中药相关的所有化学成分和作用靶点,构建化合物靶点相互作用网络图;通过OMIM数据库、TTD数据库以及PharmGkb数据库筛选高血压疾病相关的靶标;PPI数据库构建黄连解毒汤和高血压的交互靶标;筛选药物靶点和疾病靶点相互作用的核心靶点,采用Davidv6.8数据库对核心靶点进行GeneOntology(GO)分析,利用KEGG数据库对核心靶点进行相关通路富集。结果选择口服利用度(OB)≥30%、类药性(DL)≥0.18作为化合物分子的筛选条件,并通过文献查找加以补充,共筛选出黄连解毒汤的61个潜在活性成分和154个潜在靶点;通过度、介度中心度、接近中心度等网络拓扑特征评价筛选出与黄连解毒汤在高血压方面作用核心靶点228个,GO分析共包含118条富集结果,其中生物过程59条,分子功能31条,细胞组成28条。利用KEGG数据库对入选靶标进行相关通路富集,筛选出45条通路在高血压疾病方面具有作用。结论黄连解毒汤具有多成分、多途径、多靶点协同作用的作用特点,预测了黄连解毒汤治疗高血压疾病的可能作用机制,为寻找其有效成分和作用机制及临床应用奠定基础。     

扶正解毒汤对染镍体外培养人支气管上皮细胞抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响

目的:研究灌服中药扶正解毒汤(FJD)后兔血清拮抗硫酸镍(NiSO4)的细胞毒作用及其机制。方法:以NiSO4和不同剂量FJD含药血清共同处理体外培养人支气管上皮(16HBE)细胞,测定其存活率及活力,同时观察细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量的变化。结果:在镍暴露细胞培养体系中加入FJD含药血清,可提高该细胞的存活率和活力,增强细胞内GSH-Px及SOD活性,减少MDA的生成,其中以高剂量FJD含药血清的作用最为明显。结论:NiSO4可诱发细胞氧化应激的产生,FJD具有拮抗硫酸镍细胞毒性的作用,可能与其抗氧化应激功能有关。     

化痰逐瘀解毒汤治疗强直性脊柱炎的临床观察

目的：观察化痰逐瘀解毒汤治疗强直性脊柱炎的临床疗效。方法：100例患者随机分为2组，治疗组60例，口服化痰逐瘀解毒汤煎剂；对照组40例，口服独活寄生汤煎剂。2组均水剪服，每日1剂，1个月为1个疗程，治疗1－3个疗程统计疗效。结果：治疗组近期控制12例，显效29例，好转16例，无效3例，总有效57例（95％）；对照组近期控制2例，显效8例，好转20例，无效10例，总有效30例（75％）。两组总有效率比较差异有显著性（x^2=20.85,P<0.01)。两组治疗后腰背痛显著减轻，脊柱运动(有屈，后伸，侧弯）均有显著改善，胸廓扩张度增加。血沉（（ESR），补体3（C3），免疫球蛋白（IgA),C-反应蛋白（CRP）显著下降，治疗前后上述指标比较差异有显著性（P＜0．05或P＜0．01），但治疗组优于对照组（P＜0．05）。两组治疗后X线征比较，治疗组改善11例，对照组改善4例，组间比较，差异有显著性（x^2=7.99,P＜0．01）。结论：化痰逐瘀解毒汤治疗强直性脊柱炎疗效确切。