细胞周期调控基因-P21WAF1/CIP1及抑癌基因失活与膀胱癌的关系

Ｐ２１ＷＡＦ１／Ｃ１Ｄ１基因编码的产物为一种细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白，它通过调控细胞周期的过程，参与细胞的生长、分化、衰老及死亡，在膀胱癌发生中也存在多种抗癌基因（如Ｐ５３、Ｒｂ）的灭活，本文从Ｐ２１基因、蛋白质结构以及参与Ｐ５３、Ｒｂ介导的细胞ＤＮＡ损伤反应与膀胱癌的关系作一综述。     

细胞周期相关调控蛋白在胰腺癌中的表达及其意义

目的 了解细胞周期相关调控蛋白在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞增殖的影响。方法 应用高压锅抗原修复免疫组化ＡＢＣ法，检测４７例胰腺癌标本的细胞周期相关调控蛋白（ｐ５３，ｐ１６，ｐ２１及Ｒｂ蛋白）的表达，并用一种新的ｋｉ－ｓ５抗体检测胰腺癌细胞ｋｉ－６７增殖指数。结果 ｐ５３、ｐ１６，ｐ２１及Ｒｂ蛋白阳性表达均位于细胞核，胰腺癌中ｐ５３、ｐ１６、ｐ２１和Ｒｂ蛋白表达阳性率分别为５５％（２６／４７）、     

p21WAF1/CIP1在膀胱癌中的表达与癌细胞恶性表型的关系

ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１为近年来所发现的新抑癌基因，可被ｐ５３激活而表达。本研究探讨膀胱癌中ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１基因的ｍＲＮＡ和ｐ５３蛋白的表达，二者相关性及与膀胱癌的生物学特性。材料与方法本院１９９３～１９９６年膀胱癌手术切除和钳夹活检标本６７...     

多肿瘤抑制基因(MTS_1/P16/CDKN_2)与泌尿系肿瘤

多肿瘤抑制基因（ＭＴＳ１／Ｐ１６／ＣＤＫＮ２）是１９９４年发现的新型抑癌基因，定位于第九号染色体短臂２区１带，在多种肿瘤细胞系和原发性肿瘤中发生突变与缺失。所编码的Ｐ１６蛋白为细胞周期素依赖激酶４的抑制因子，也是直接控制细胞增殖周期的细胞固有蛋白，Ｐ１６蛋白失活与Ｐ１６基因突变、纯合缺失、５’－ＣＰＧ区甲基化有关。Ｐ１６与肾癌、膀胱癌的发生发展有关。Ｐ１６基因长度仅为Ｐ５３的１４，易于操作，在肿瘤基因治疗方面有应用前景。     

人类睾丸精原细胞瘤组织中P53基因突变和Rb基因蛋白产物表达…

采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹和ＤＮＡ聚合酶链反应－单股构造多态性分析法和１７例人睾丸精原细胞瘤组织标本的抗癌基因Ｒｂ表达的蛋白产物和Ｐ５３基因外显子５～８的突变进行检测，发现有３例标本的Ｒｂ基因表达的蛋白产物缺失，有４例标本的Ｐ５３基因有点突变，对照的正常人睾丸组织和视网膜组织均呈Ｒｂ基因蛋白产物表达阳性，对照的正常人睾丸组织中未发现Ｐ５３基因突变。本结果提示人睾丸精原细胞瘤的发生与抗癌基因Ｒｂ蛋白产物     

人类睾丸精原细胞瘤组织中P_（53）基因突变和Rb基因蛋白产物表达的缺失

采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹和ＤＮＡ聚合酶链反应－单股构造多态性分析法对１７例人睾丸精原细胞瘤组织标本的抗癌基因Ｒｂ表达的蛋白产物和Ｐ_（５３）基因外显子５～８的突变进行检测，发现有３例标本的Ｒｂ基因表达的蛋白产物缺失，有４例标本的Ｐ_（５３）基因有点突变，对照的正常人睾丸组织和视网膜组织均呈Ｒｂ基因蛋白产物表达阳性，对照的正常人睾丸组织中未发现Ｐ_（５３）基因突变。本结果提示人睾丸精原细胞瘤的发生与抗癌基因Ｒｂ蛋白产物表达的缺失和Ｐ_（５３）基因的突变有关。     

rasP21和P53在膀胱癌表达的临床意义

采用免疫组化方法（ＬＳＡＢ法）对５８例膀胱癌和６例非癌膀胱粘膜标本进行ｒａｓＰ２１及ｐ５３蛋白产物检测。结果：５８例膀胱癌标本中３７例Ｐ２１检测阳性（６３．８％），３３例Ｐ５３检测阳性（５６．９％），对照组６例膀胱粘膜均未见阳性着色。Ｐ２１阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为２８．６％、４６．７％和７７．８％，在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为４５．０％和７３．７％。Ｐ５３阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为１４．３％、４０．０％和７２．２％，在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为３０．０％和７１．１％，显示Ｐ２１和Ｐ５３表达阳性率均随着膀胱癌病理分级、临床分期上升而升高，表达强度也随之增强。Ｐ２１和Ｐ５３阳性者的复发率和死亡率均明显高于阴性表达者。认为Ｐ２１和Ｐ５３可作为膀胱癌的生物学瘤标。     

P53基因变异与膀胱癌发生发展的关系

Ｐ５３基因变异与膀胱癌发生发展的关系庞自力，鲁功成，张齐钧，张润清，陈晓春，曾甫清，唐玉珠采用限制性片断长度多态性分析（ＲＦＬＰ）方法检测膀胱癌Ｐ５３基因的结构变化，并讨论Ｐ５３基因异常对膀胱癌发生和发展的意义。材料与方法２１例膀胱癌患者，男性１９例...     

P21、P185、P53蛋白表达及ras、P53基因突变与膀胱癌的关系

为探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为的关系，采用免疫组织化学方法及分子生物学技术，检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例ｒａｓ、Ｐ５３基因突变。结果表明：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性分别为５１例（６２．２％）、４８例（５８．５％）、２６例（３１．７％）。Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期呈正相关（Ｐ＜０．０１）；Ｐ１８５蛋白阳性率与膀胱移行细胞癌分级、分期呈负相关（Ｐ＜０．０５）。膀胱移行细胞癌组织中１５例（３９．５％）有Ｈａｒａｓ癌基因第１２位密码子突变；１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变，其中全部有第２８０位密码子ＧＣ突变；３例合并有２４８密码子突变；１例有２４９密码子点突变。Ｈａｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因点突变与膀胱癌病理分级和临床分期呈显著正相关（Ｐ＜０．０５）；与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）；且死亡率高于点突变阴性者。６例既有Ｈａｒａｓ基因突变，又有Ｐ５３基因突变的病例中４例死亡。     

野生型P53和C-Ha-ras基因在顺铂诱导膀胱癌细胞凋亡中的表达及意义

应用荧光原位杂交技术观察顺铂诱导膀胱癌细胞株ＢＩＵ８７体外细胞凋亡过程中野生型Ｐ５３和ＣＨａｒａｓ基因的表达，探讨抗癌药物诱导膀胱癌细胞凋亡过程中抗癌基因和癌基因的作用。结果显示：顺铂能够明显地诱导膀胱癌细胞凋亡，具有一定范围内的作用时间和药物浓度的依赖性。随凋亡细胞数上升，野生型Ｐ５３表达增强，而ＣＨａｒａｓ基因表达下降，提示膀胱癌细胞凋亡可能是顺铂的杀瘤效应途径之一。Ｐ５３和ＣＨａｒａｓ基因均参与了细胞凋亡的调控过程，野生型Ｐ５３基因可能是通过下调ＣＨａｒａｓ基因的表达而发挥其抑制细胞增殖活性，促进凋亡的发生。     

抑癌基因P53及其蛋白产物表达与膀胱癌发生及病理关系

以光敏生物素－金标链亲和素核酸原位杂交及免疫组化方法检测膀胱癌病理标本中Ｐ５３基因片段及其蛋白表达。１３例原位杂交阳性膀胱癌中，Ｐ５３蛋白表达阳性率５３．９％，提示约半数膀胱癌的发生可能与Ｐ５３基因突变有关；Ｐ５３蛋白表达与病理分级、临床分期无明显关系。     

P53,Ras基因突变及HPV感染与膀胱癌的关系

应用分子生物学方法检测３２例膀胱移行上皮癌中Ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ、ＨＰＶ基因，发现有３４．４％的膀胱癌Ｐ５３基因突变，２１．９％膀胱癌Ｋ－ｒａｓ基因突变，６．３％膀胱癌ＨＰＶ阳性。说明膀胱移行上皮癌的发生与Ｐ５３、Ｒａｓ基因突变及ＨＰＶ感染有关。膀胱癌的发生是多种基因的变化通过多种途径引起的。     

抗癌基因Rb在肾癌在膀胱癌中的表达及其与组织病理的关系

对正常肾和肾细胞癌组织，正常膀胱粘膜和膀胱移行细胞癌组织以及肾癌细胞和膀胱癌细胞株ＢＩＵ－８７和Ｅ－Ｊ中的抗癌基因Ｒｂ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析，肾和膀胱癌细胞都表达正常的Ｒｂ ｍＲＮＡ。１／３例肾癌组织和２／８例膀胱癌组织中发现Ｒｂ基因缺失。此２例Ｒｂ缺失的膀胱癌均为低分化肿瘤，在分化较高的膀胱癌中未发现Ｒｂ基因缺失。结果表明，Ｒｂ苈在缺失与膀胱癌的关系密切。同时与肿瘤的分化程度有关。结     

抗癌基因Rb在肾癌和膀胱癌中的表达及其与组织病理的关系

对正常肾和肾细胞癌组织，正常膀胱粘膜和膀胱移行细胞癌组织以及肾癌细胞和膀胱癌细胞株ＢＩＵ－８７和Ｅ－Ｊ中的抗癌基因Ｒｂ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析。肾和膀胱癌细胞都表达正常的ＲｂｍＲＮＡ。１／１３例肾癌组织和２／８例膀胱癌组织中发现Ｒｂ基因缺失。此２例Ｒｂ缺失的膀胱癌均为低分化肿瘤，在分化较高的膀胱癌中未发现Ｒｂ基因缺失。结果表明，Ｒｂ基因缺失与膀胱癌的关系密切，同时与肿瘤的分化程度有关。结合文献对Ｒｂ抗癌基因与泌尿系肿瘤的关系及其在肿瘤发生中的作用进行讨论。     

膀胱癌组织中p53基因突变的研究

作者应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和直接测序等分子生物学技术，分析检测了２１例膀胱移行上皮癌ｐ５３基因５～８外显子。结果，在１４例浅表性膀胱癌中，发现１例（Ｔ＿１期）ｐ５３基因突变；７例浸润性膀胱癌中，４例发现ｐ５３基因突变，其中Ｔ＿２期１例，Ｔ＿３期２例，Ｔ＿４期１例。４例Ｇ＿１级膀胱癌无一例检出ｐ５３突变，５例Ｇ＿２级膀胱癌１例检出ｐ５３突变，１２例Ｇ＿３级肿瘤４例发现ｐ５３基因突变。结果表明：ｐ５３基因突变在膀胱癌的发生发展中起着重要作用。     

野生型P53基因导入对膀胱癌细胞生长抑制和H—ras基因表达调控

通过逆转录病毒载体的将外源野生型Ｐ５３基因导入膀胱癌细胞ＢＩＵ－８７和ＥＪ，使细胞在体外标准培养条件下生长速率降低，丧失裸鼠致瘤性。细胞周期分析显示Ｇ０＋Ｇ１细胞比率明显增高，已证明，ＢＩＵ－８７和ＥＪ细胞都有ｒａｓ基因突变和表达扩增。     

P53和P21在膀胱腺癌与腺性膀胱炎中的表达

应用免疫组织化学ＡＢＣ法对２０例膀胱腺癌和１６例腺性膀胱炎的膀胱组织进行了Ｐ５３和Ｐ２１基因蛋白表达产物的检测。结果２０例膀胱腺癌中，Ｐ５３基因蛋白表达１０例，占５０．０％，Ｐ２１基因蛋白表达１８例，占９０．０％，１６例腺性腺胱炎占Ｐ２１基因蛋白表达６例，占３７．５％，Ｐ５３基因蛋白表达２例，占１２．５％，且均有结构不良及非典型曾生，表明膀胱腺癌Ｐ５３和Ｐ２１基因蛋白表达率比腺性膀胱炎多，经统计学     

膀胱癌P53基因点突变的观察

为了解Ｐ５３基因突变与膀胱癌的关系，采用扩增突变阻抑系统方法的原理，设计４对分别针对Ｐ５３基因外显子５～８的４个进化保守区内１４６、２４８、２８０、２８５位点的突变引物，测定４６例膀胱癌标本。结果发现：４例标本出现Ｐ５３点突变，其中２４８位点Ｇ→Ａ突变１例、２８０位点Ｇ→Ｃ突变２例、２８５位点Ｇ→Ａ突变１例。４例均为表浅性Ｇ２癌，表明Ｐ５３基因突变在膀胱癌早期即可发生。因膀胱癌Ｐ５３基因的突变点散在，本研究检测范围内未发现突变热点。     

PCR-SSCP银染色法检测膀胱癌患者尿脱落细胞P53基因突变

采用ＰＣＲＳＳＣＰ银染色法检测５８例膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞Ｐ５３基因５８外显子突变。结果发现健康者和非膀胱癌患者的尿脱落细胞均无Ｐ５３基因突变，１９例膀胱癌患者尿脱落细胞存在Ｐ５３基因突变，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱癌分别为０％（０／１６），２５％（７／２８）和８６％（１２／１４），Ｐ＜００１；表浅性（ＰＴｉｓ～Ｔ１）和浸润性膀胱癌（ＰＴ２Ｔ４）分别为１１％（４／３６）和６８％（１５／２２），Ｐ＜００１；初发和复发膀胱癌分别为９％（２／２２）和４７％（１７／３６），Ｐ＜００１；单发和多发膀胱癌分别为３１％（１２／３９）和３７％（７／１９），Ｐ＞００５。结论：ＰＣＲＳＳＣＰ银染色法是一种可靠、快速、实用的Ｐ５３基因突变检测方法。Ｐ５３基因突变主要发生在高级、期的膀胱癌，与膀胱癌的早期复发有密切关系，而与其多灶性无关。Ｐ５３基因突变的检测对预测膀胱癌的进展，复发的早期诊断具有重要的临床意义     

细胞周期相关基因的表达与壶腹癌细胞增殖关系的研究

目的探讨细胞周期调控相关基因ｐ５３、ｐ２１、ｐ１６和Ｒｂ与壶腹癌细胞增殖之间的关系及细胞增殖相关蛋白Ｋｉ－６７与壶腹癌生物学特性和预后之间的关系。方法采用免疫组化ＡＢＣ法对４０例壶腹癌和１０例正常壶腹组织进行染色。结果４种抑癌基因在壶腹癌中的阳性表达率分别为５０％、６２．５％、４７．５％和９２．５％。ｐ２１、ｐ１６的表达与Ｋｉ－６７指数呈负相关（Ｐ＜０．０５）,ｐ５３、Ｒｂ与Ｋｉ－６７指数无相关性（Ｐ＞０．０５）,而Ｋｉ－６７指数与壶腹癌的病理分级、临床分期明显相关（Ｐ＜０．０５）。结论ｐ２１,ｐ１６异常表达与壶腹癌细胞异常增殖有关。Ｋｉ－６７指数可能有助于了解壶腹癌的生物学特性并对预后进行判断。