光波-微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的应用

目的探讨光波．微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的作用。方法用8％硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波,微波组合Ⅰ和光波-微波组合Ⅱ的条件下脱钙，同时以室温脱钙作为对照；应用光波-微波-LSAB免疫组织化学染色技术检测不同脱钙条件下ANP、CD31、CD34、5-HT、S-100、NF、GFAP和Vimentin的表达。结果8％硝酸室温脱钙时间最长，光波．微波组合脱钙时间最短；微波组、光波组、光波．微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显比对照组好；光波．微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显优于单纯微波、单纯光波法；光波-微波组合Ⅱ-LSAB免疫组织化学染色技术比常规免疫组织化学染色所用时间短、染色效果好。结论光波．微波辐射脱钙及免疫组化染色所用的时间明显缩短，染色效果好。     

骨组织脱钙技术及在免疫组化染色中的应用

与一般的软组织不同 ,骨组织石蜡切片在脱水、透明等制片前需要使用脱钙剂除去骨组织中的钙盐才能制备成 4～ 5 μm厚的切片。为了更好地了解脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色质量的影响 ,本文根据骨组织及其免疫组织化学染色的特点 ,结合文献对影响骨组织免疫组织化学染色质量的组织的固定、常用的脱钙方法及脱钙液、低温 微波快速脱钙技术及注意事项等方面进展进行了综合分析。     

甲酸脱钙液加微波辐射对大鼠磨牙及牙槽骨脱钙效果的研究

本文对大鼠牙齿及其依附之上下颌牙槽骨在组织学、组织化学研究中的几种脱钙,方法进行比较。结果表明用微波辐射可大大缩短甲酸脱钙液的脱钙时间,而且对组织的各种成分保存良好。脱钙后可进行各种组织学和组织化学染色。     

骨组织电镜脱钙技术在免疫组化中的应用

骨组织的免疫组化一直是病理技术中的一大难题。由于骨组织中60％以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶，因而骨组织固定、脱钙都是制备标本的重要环节。一些强酸如盐酸、硝酸等虽能快速有效除去骨组织中的钙盐，但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏；近几年发展的微波辅助EDTA脱钙技术，虽然可实现较好地保护组织抗原性且快速的效果，但操作程序复杂。骨组织的电镜制片技术对组织固定与脱钙要求均远高于常规染色与免疫组化，其脱钙液与固定液均与其他方法有较大差别，本实验用该方法进行骨组织免疫组化，取得了较理想的效果，现报道如下。     

骨组织脱钙技术及其应用

<正>骨组织不同于一般的软组织,是一种坚硬的结缔组织,由粘多糖和一些胶原纤维样骨胶纤维构成的骨样组织和沉着于其中的无机盐(骨盐)形成的。无机盐以羟基磷灰石结晶的形式存在,其中绝大部分为水合磷酸钙,此外还包括微量碳酸盐和柠檬酸盐等[1,2],因此骨和其他一些已钙化的组织在脱水、     

脱钙液加微波技术在骨组织脱钙中的应用

骨和含钙组织脱钙法是影响临床病理检查时间和效果的一个较为重要的环节。以前种种脱钙技术时间均较长，组织细胞结构很难保持完整清晰，从而影响病理学的诊断和研究，也难以保证在规定的时间发出报告，直接影响了患者的治疗。随着微波技术在病理检验中的普遍应用，我们在工作中尝试使用微波技术对骨和含钙组织进行脱钙处理。为此，我们做了这方面的实验。     

不同成份脱钙液对骨组织脱钙效果的比较

目的 比较不同成份脱钙液对骨组织脱钙的效果.方法 选取2019年3—10月在四川省八一康复中心手术室送检的股骨头标本20例为研究对象.将新鲜离体股骨头组织制成大小约1.0cm×1.0cm×0.3cm标本,所有骨组织均分成3份,分别放入甲、乙、丙3种新鲜脱钙液中(甲液:10％ 硝酸甲醛液;乙液:30％ 盐酸甲醛液;丙液:...     

抗原修复技术在脱钙组织冰冻切片免疫组化染色中的应用

目的　探讨抗原修复技术在脱钙组织冰冻切片免疫组织化学染色中的作用 ,并寻找最佳的抗原修复方法。方法　将“低温微波 硝酸快速脱钙方法”处理的骨及其软组织冰冻切片分为 4组 :Ⅰ对照组 (不处理 )、Ⅱ组(胰蛋白酶 )、Ⅲ组 (微波 枸椽酸 )、Ⅳ组 (微波 TritonX 1 0 0 )。应用LSAB技术检测ANP、5 HT、S 1 0 0、NF、GFAP、Vimen tin、CD31、CD34、FⅧ和VEGF和 1 0种抗体在I～Ⅳ组中的表达 ,图像分析各组阳性细胞的平均吸光度 (A)值 ,结果进行统计处理。结果　Ⅱ～Ⅳ组的吸光度值 (分别为 0 87± 0 4 1、2 .4 3± 0 35、和 2 .4 9± 0 4 3)明显高于I组 (0 4 1±0 37) ;Ⅲ～Ⅳ组明显高于Ⅱ组 ,差异有非常显著性 (P <0 0 1 ) ;Ⅲ、Ⅳ组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　用微波 TritonX 1 0 0或微波 枸椽酸缓冲液对脱钙组织冰冻切片进行微波抗原修复是必要的 ,能明显提高免疫组化染色的敏感性。     

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。方法选择12例骨组织,随机分为3组。A组用14%硝酸脱钙液进行处理,B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理,同时对CD3、CD68、Ki-67和TTF-1染色。结果室温条件下,硝酸脱钙液的脱钙时间最短,但对组织损伤最大。PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好,组织结构完整,形态清晰,免疫组化染色较好。结论室温条件下,三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长,PLANK脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合用于临床病理检查。硝酸脱钙液脱钙最快,但是免疫组化染色效果较差。     

"低温微波-硝酸快速脱钙"技术研究及应用

目的 探讨低温微波-硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法 根据实验条件分为4组：①低温(10℃)微波硝酸；②室温(20℃)微波硝酸；③室温(20℃)硝酸，硝酸脱钙液的浓度分别是5％、8％、10％和13％；④10％乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)脱钙液。应用免疫组织化学LSAB染色，光镜观察免疫组化染色结果。结果 以硝酸作为脱钙剂时，①组和④组的阳性细胞相近，均显著高于②、③组，经8％和10％硝酸脱钙的免疫组化染色阳性细胞明显多于5％和13％的硝酸。低温微波硝酸快速脱钙技术能显著缩短脱钙时间。结论 低温微波．硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

骨组织快速脱钙法

在外检、教学、科研工作中,对骨组织进行镜下观察,必须脱去钙盐,才能制成切片进行镜检。一般使用的脱钙剂为强酸(如硝酸、盐酸)、有机酸(如甲酸、三氯醋酸等)或为混合液。但是不管使用何种脱钙剂,都必须保证彻底脱钙,如有钙盐残留,会影响切片的完整和损伤切片刀刃。一般骨组织脱钙法需时间较长,酸液致细胞核结构破坏,因而影响病理诊断,所以改进常规脱钙方法,缩短骨组织     

改良骨髓脱钙液对免疫组化染色结果的影响

目的 探讨酸脱钙液对骨髓活检组织免疫组化染色的影响.方法 对445例骨髓活检组织经混合酸脱钙及EDTA双重脱钙固定、免疫组化染色.结果 组织结构、细胞形态清晰完整,免疫组化染色定位准确、背景清晰.结论 混合脱钙液与EDTA联合应用有助于免疫组化染色,是骨髓活检病理诊断的有效方法.     

微波在免疫组化染色中的应用

我们对微波炕内的免疫组化标记,与常温下的常规免疫组化标记进行观察比较。结果：利用微波进行免疫组织化学染色方法,缩短了标记染色时间,微波处理标记在阳性强度上有显著判别,而阳性分布与染色背景无明显差异。结论：利用微波技术不仅缩短了免疫标记的时间,而且可提高免疫标记的质量。     

脱钙骨免疫组化染色方法的构建

在对骨骼生理和病理的研究过程中，经常需要制备脱钙的骨免疫组化标本，然而由于骨骼组织的特殊性，制备好的骨组化标本也并不是一件容易的事。由于骨组织中60％以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶，脱钙是标本制备中至关重要的过程。一些强酸如盐酸，硝酸等虽能快速有效除去骨组织中钙盐，但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏，使接下来的工作无法进行；我们仿照目前国外方法：EDTA低温脱钙^[1]，得到的结果比较满意，现总结如下。     

骨组织脱钙方法的改良

骨组织必须经过脱钙才能制作切片。选择适当的脱钙液、脱钙方法以及脱钙时间与骨组织的制片质量有密切关系。我们运用超声波技术及两种传统的脱钙方法对不同的骨性组织分组进行脱钙制片,并进行比较,发现该方法在不破坏组织结构及影响染色的同时,缩短了诊断时间,保证了切片质量。现将方法介绍如下。     

骨组织标本脱钙法的改进

骨组织是一种坚硬的结缔组织，骨基质中有机成分和无机盐紧密结合，使骨组织十分坚硬。因此，在制作骨组织切片时，必须经过脱除钙盐的过程，就是通常说的“脱钙”。传统的脱钙方法常常使用硝酸、盐酸等强酸溶液，尽管脱钙效果好，但能引起组织结构的严重破坏，     

骨组织甲酸脱钙浓度探讨

<正>骨组织是一种坚硬的结缔组织,它由细胞、基质、纤维组成。基质中含有大量的固定无机酸盐,骨盐主要是羟基磷灰石的结晶,即磷酸钙和碳酸钙,其中大部分为水合磷酸钙[1],组织质硬,不能直接制片,必须经过脱钙处理后,才能进行常规苏木素-伊红(HE)制片、特殊染色及免疫组织化学检查。以     

不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原性的影响

目的:探讨不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原活性的影响。方法:用8%硝酸分别在冰箱(4℃)、室温(2 0℃)、温箱(37℃)、温箱(6 0℃)、超声波、微波、光波、光波/微波组合Ⅰ组、光波/微波组合Ⅱ组条件下脱钙,应用LSAB免疫组织化学染色技术检测ANP、5 HT、S 1 0 0、NF、GFAP、CD3 1 、CD3 4 和Vimentin的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理。结果:8%硝酸脱钙从4℃、2 0℃、37℃到6 0℃随着脱钙液温度的温度升高,脱钙时间逐渐缩短,光波、微波和超声波中脱钙所用的时间比2 0℃、37℃、6 0℃明显缩短,比光波/微波组合Ⅰ、Ⅱ中所用的时间长。光波/微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色结果均明显比2 0℃、37℃、6 0℃、微波组、光波组和超声波组的好(P <0 .0 1 ) ,而光波/微波组合Ⅰ组和Ⅱ组之间,微波组、光波组和超声波组之间的免疫组化染色结果均无明显差异(P >0 .0 5 )。结论:光波/微波组合Ⅱ 8%硝酸脱钙所用时间最短,免疫组化染色效果最好。