肾病综合征患儿激素治疗前后外周血单个核细胞凋亡的临床意义

目的　观察小儿肾病综合征 ( NS)泼尼松治疗前后外周血单个核细胞 ( PBMC)的细胞凋亡变化 ,探讨泼尼松诱导细胞凋亡关系及临床意义。方法　 5 0例小儿肾病综合征患者分别泼尼松治疗前和治疗后第二、四、六、八周采血 ,进行细胞凋亡形态观察 ,计算百分率。结果　治疗前凋亡率为 ( 9.9± 6.2 ) % ;第二周为 ( 1 7.3± 5 .83) % ;第四周为 ( 1 5 .6± 4.5 8) % ;第六周为 ( 1 3.6± 6.0 6) % ;第八周 (减药两周后 )为 ( 1 0 .1 8± 4.0 1 ) %。治疗前与治疗后二 ,四 ,六周比较均 P <0 .0 1差异有显著性意义 ;与第八周 (减药两周后 )比较 P>0 .0 5差异无显著性意义。结论　小儿 NS患者使用足量泼尼松治疗可诱导外周血单个核细胞 ( PBMC)细胞凋亡增加 ,也诱导大部分患者病情缓解 ,当泼尼松减量后诱导细胞凋亡随之相对减少。由此可见观察外周血单个核细胞 ( PBMC )的细胞凋亡变化对 NS的激素治疗有一定的临床意义     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞肿瘤坏死因子检测

目的通过检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞胞内肿瘤坏死因子生成量和血清HBV DNA含量,探讨慢性乙型肝炎慢性化进程中外周血细胞肿瘤坏死因子生成变化与血清HBV DNA含量关系.方法采用双色荧光分析方法和设门技术,运用流式细胞术分析正常对照人群(11例)、慢性活动性B型肝炎患者(14例)外周血单个核细胞(PBMCs)TNF-α表达率、细胞内TNF-α水平,定量PCR检测HBV DNA滴度、酶法测定患者血清ALT水平.结果 HBV组外周血PBMCs TNF-α阳性率显著高于对照组(P<0.01),胞内TNF-α量对照组和HBV组间无差别;实验组对照组淋巴细胞群TNF-α阳性细胞率统计学分析无显著差异,然而胞内TNF-α的量对照组明显高于HBV组(P<0.01);实验人群CD14+细胞占PBMC总量的2.06%～5.82%,两组间无显著差别;HBV组CD14/TNF-α+细胞率高于对照组(P<0.05),细胞内TNF-α水平与对照组间无差别(P>0.05).HBV患者乙型肝炎慢性轻度组、乙型肝炎慢性中度组和乙型肝炎原发性肝癌组观察的TNF-α相关指标中,CD14+/TNF-α+双阳性细胞占外周血CD14+细胞比率原发性肝癌、乙型肝炎慢性中度患者高于乙型肝炎慢性轻度组、对照组(P<0.01),乙型肝炎慢性轻度组与对照组间没差别.患者PBMCs、T细胞、单核细胞TNF-α阳性率,胞内TNF-α水平各项观测指标与血清HBV DNA拷贝数经统计分析均无相关性.结论随慢性肝炎乙型病情进展TNF-α生成细胞增高,以慢中型、原发性肝癌较高,慢肝轻度次之,TNF-α生成量与血清HBV DNA拷贝数无相关性.     

SLE患者外周血单个核细胞凋亡的研究

目的 探讨ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）凋亡率异常是否与其自身抗体产生高低有关。方法 采用碘化丙锭（ＰＩ）染色法,在流式细胞仪下宣检测２０例ＳＬＥ患者及１０名正常人ＰＢＭＣ体外凋亡情况,同时观察了ＳＬＥ患者自身抗体的表达及与凋亡率的关系。结果 ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ体外培养０、２４、４８、７２ｈ后凋亡率较正常人明显增高（Ｐ〈０．０５）,且活动期ＳＬＥ高于非活动期（Ｐ〈０．０５）。ＳＬＥ患者自身     

外周血单个核细胞DNA不同抽提方法比较

用经典酚醇法、盐析法、碘化钾法、煮沸法提取外周血单个核细胞DNA ,比较这四种方法所获得的DNA模板对PCR检测肿瘤坏死因子 (TNF)的影响 ,结果显示除了煮沸法 ,其余三种方法提取的DNA均有较高的纯度和浓度 ,其中以碘化钾法操作最为简便可靠 ,适合临床推广应用。     

丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞对丙型肝炎的影响

为了研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对丙型肝炎的影响,运用非同位素原位杂交法（ＮＩＳＨ）和链酶亲和素－生物素（ＳＡＢＣ）法分别检测２０例慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ－ＲＮＡ及其Ｔ淋巴细胞亚群,同时检测这些患者的肝功能指标。结果显示８例（４０．０％）ＨＣＶ患者的ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ－ＲＮＡ呈阳性结果。ＨＣＶ－ＲＮＡ呈散在颗粒状或弥漫分布,主要位于胞浆中。ＨＣＶ－ＲＮＡ阳     

B细胞刺激因子在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞上的表达及意义

目的 探讨B细胞刺激因子(Blys)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞上的表达情况及临床意义.方法 应用流式细胞仪技术,检测50例SLE患者(其中活动期和稳定期各25例)外周血单个核细胞上Blys的表达,与25例健康献血人员作比较.并分析SLE患者外周血单个核细胞上Blys的表达与病情活动、其他实验指标及自身抗体的关系.结果 SLE患者外周血单个核细胞上表达Blys的百分率上调(P＜0.001),活动期和稳定期SLE患者Blys的表达率均高于健康对照组(P＜0.001和P＜0.05);其中,活动期和稳定期SLE患者比较,活动期患者Blys的表达更高(P＜0.05).SLE患者外周血单个核细胞上Blys的表达水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.702,P＜0.001),与免疫球蛋白IgG、IgM呈正相关(r=0.695,P＜0.001和r=0.356,P＜0.01),与补体C3、C4呈负相关(r=-0.42,P＜0.001和r=-0.31,P＜0.05).dsDNA抗体( )组患者外周血单个核细胞上Blys的表达较dsDNA抗体(-)组高(P＜0.05).Clq抗体( )组患者外周血单个核细胞上Blys的表达也较C1q抗体(-)组高(P＜0.05).结论 Blys在SLE外周血单个核细胞上的表达率升高.Blys的表达在一定程度上反映了病情的活动,并与自身抗体的产生相关.     

过敏性哮喘患者外周血单个核细胞CD23表达水平改变

探讨ＩｇＥ低亲和力受体（ＣＤ２３）的过敏性哮喘发病中的作用，以及与ＩＬ－２受体（ＣＤ２５）和ＨＬＡ－ＤＲ的关系。ＣＤ２３可能介导过敏性哮喘的慢性气管炎症，活化ＣＤ４＾＋Ｔ细胞对其表达有上调作用。     

肾病综合征患儿激素治疗前后外周血单个核细胞凋亡的临床意义

目的观察小儿肾病综合征(NS)泼尼松治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)的细胞凋亡变化,探讨泼尼松诱导细胞凋亡关系及临床意义.方法 50例小儿肾病综合征患者分别泼尼松治疗前和治疗后第二、四、六、八周采血,进行细胞凋亡形态观察,计算百分率.结果治疗前凋亡率为(9.9±6.2)%;第二周为(17.3±5.83)%;第四周为(15.6±4.58)%;第六周为(13.6±6.06)%;第八周(减药两周后)为(10.18±4.01)%.治疗前与治疗后二,四,六周比较均P<0.01 差异有显著性意义;与第八周(减药两周后)比较P>0.05 差异无显著性意义.结论小儿NS患者使用足量泼尼松治疗可诱导外周血单个核细胞 (PBMC) 细胞凋亡增加,也诱导大部分患者病情缓解,当泼尼松减量后诱导细胞凋亡随之相对减少.由此可见观察外周血单个核细胞( PBMC )的细胞凋亡变化对 NS 的激素治疗有一定的临床意义.     

外周血单个核细胞与HepG2.215细胞共培养体系的研究

目的 建立外周血单个核细胞与HepG2.215细胞共培养体系,探讨不同培养基及效靶比对共培养体系的影响.方法 分离正常人外周血单个核细胞,加人植物血凝素(PHA),置于不同的培养基(DMEM,RPMI1640)中进行培养,采用不同效靶比((5:1、10:1、20:1、40:1)构建PBMCs与HepG2.215细胞共培...     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞中HBV-DNA检测的临床意义

目的 研究HBV感染者血清及外周血单个核细胞(PBMC)中HBV-DNA的感染情况.方法 采用荧光定量PCR技术对112例乙肝患者PBMC及血清中HBV-DNA的感染情况进行检测.结果 PBMC内HBVDNA阳性60例,阴性52例;PBMC内HBV-DNA阳性患者HBeAg阳性率68.3%,较PBMC内HBV-DNA阴性患者显著增高(P＜0.05);血清和PBMC检测结果一致的患者占总检出率的79.5%.肝硬化组PBMC内HBV-DNA阳性率高于急性乙型肝炎组和慢性肝炎组(P＜0.05).结论 血清与PBMC内HBV-DNA阳性率以及HBeAg阳性率存在明显的相关性.PBMC中HBV-DNA的持续存在可能与乙肝易慢性化有关.     

乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒DNA的检测及临床意义

目和：研究乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ检测的临床意义。方法：用聚合酶链反应技术检测６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ。结果：６０例乙肝患者血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率分别为４３．３％，４５％，同时检测血清中ＨＢｅＡｇ，其阳性率为２８．２％，外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检测率与血清乙肝病毒ＤＮＡ具有一致性；急性肝炎患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞TNIP1基因表达

目的 探讨TNIP1 基因在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中的表达情况,以及与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、单核苷酸多态性(SNP)位点rs10036748的相关性.方法 收集61例SLE患者和66例正常对照的临床资料及血样,采用实时荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞中TNIP1 mRNA表达量;应用Sequenom MassArray技术对所有病例对照SNP rs10036748位点进行基因分型.结果 SLE患者TNIP1基因 mRNA表达低于正常对照组(P=0.000 4);TNIP1基因 mRNA表达水平与SLEDAI和SNP rs10036748基因型之间无相关性.结论 TNIP1基因在SLE发生中可能起着某种作用.     

脐血单个核细胞体外扩增的实验研究

目的 :采用集落刺激因子体外扩增脐血单个核细胞 (CBMC) ,研究集落刺激因子对CBMC增殖活性的影响。方法 :用RPMI1 640培养液加入集落刺激因子IL - 3、SCF、GM -CSF及其组合 ,体外扩增CBMC ,健康成人外周血单个核细胞 (PBMC)作为对照组。结果 :加入不同集落刺激因子体外培养CBMC与PBMC后 ,增殖活性均有不同程度的升高 ,以加入IL - 3、SCF、GM -CSF组最为显著 ;CBMC的增殖活性与PBMC比较有显著性差异 (P<0 .0 5)。结论 :集落刺激因子可在体外扩增CBMC ,IL - 3、SCF、GM -CSF之间有明显的协同作用 ;与PBMC相比 ,CBMC有更高的增殖潜能     

丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞的进一步研究

为进一步研究外周血单个核细胞 (PBMC)感染丙型肝炎病毒 (HCV)的状况。用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)、地高辛标记 HCV探针作原位杂交和链酶亲和素 -生物素 (SABC)作免疫组化三项技术 ,检测血清和 PBMC中的 HCV RNA和 HCV NS5 抗原。结果显示 RT- PCR检测的 2 0例慢性丙型肝炎患者 ,除去 4例接受干扰素治疗者 ,余16例中有 14例 (87.5 % )血清 HCV RNA阳性 ,2例血清 HCV RNA阴性者的 PBMC- HCV RNA阳性。对 RT- PCR检测的 9例 PBMC- HCV RNA阳性患者 ,进一步用原位杂交和免疫组化技术 ,分别检测 PBMC中的 HCV RNA和HCV NS5 抗原。显示这几种方法的检测结果是基本一致的 ,呈正相关关系。患者的 PBMC中的 HCV RNA和 HCV NS5抗原呈散在颗粒状或弥漫分布 ,主要位于胞浆中 ,HCV NS5 抗原还分布于胞膜上。证实 HCV可以感染 PBMC,并在其中复制 ,复制部位在胞浆。     

丙型肝炎患者外周血单个核细胞中HCV-RNA含量检测的临床意义

目的:了解丙型肝炎(丙肝)患者外周血单个核细胞(PBMC)中丙肝病毒核酸(HCV-RNA)的存在情况并探讨其临床意义。方法:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,对65例丙肝患者的血清和PBMC中HCV-RNA进行检测。结果:65例丙肝患者血清和PBMC中HCV-RNA阳性分别为41例(63.1%)和35例(53.8%),其中34例急性丙肝患者血清、PBMC中HCV-RNA阳性分别为21例(61.8%)、13例(38.2%),31例慢性丙肝患者血清、PBMC中HCV-RNA阳性分别为20例(64.5%)、22例(71.0%),慢性丙肝患者PBMC中HCV-RNA检出率与急性相比,差异有统计学意义(2χ=5.74,P<0.05)。3例(2例慢性、1例急性)丙肝患者PBMC中HCV-RNA阳性,但血清HCV-RNA阴性。9例(全为急性)丙肝患者PBMC中HCV-RNA阴性,但血清HCV-RNA阳性。32例(12例急性、20例慢性)丙肝患者血清和PBMC中HCV-RNA均阳性,且PBMC中HCV-RNA的含量均低于血清,两者含量呈正相关。结论:PBMC为HCV肝外贮存场所,其HCV含量依赖血清中HCV的含量;PBMC中HCV在丙肝患者的病情慢性化过程中可能起一定作用;实验室可以通过浓聚血液中PBMC的浓度来提高其HCV-RNA的检出率,故临床医生在对丙肝患者进行血清HCV-RNA定量检测的同时开展PBMC中HCV-RNA检测可以减少漏诊,可作为慢性丙肝患者的选择治疗及预后判断的重要指标。     

哮喘患儿外周血单个核细胞IL-13表达与血浆总IgE的相关性

目的：了解IL－13在哮喘发作时水平及其与IgE的相互关系，从而探讨IL－13在哮喘发病中的作用。方法：分别用逆转录－多聚酶链反应（RT－PCR）及ELISA法检测哮喘患儿外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的PHA刺激下IL－13 mRNA表达及培养上清中IL－13蛋白水平的变化，并分析IL－13蛋白水平与IgE的相关性。结果：哮喘发作患儿IL－13 mRNA表达相对强度和蛋白质水平显著高于正常对照组，差异有显著性（P＜0．05）；哮喘发作患儿PBMC培养上清IL－13与血浆总IgE水平呈显著正相关，相关系数（r)为0．593。结论：在哮喘发作期IL－13的产生明显增高，将IL－13水平的变化作为观察病情活动状态的一个免疫学指标具有一定的临床意义。是否能将IL－13moAb用于临床治疗哮喘值得进一步探讨。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中PDCD5 mRNA的表达及意义

目的 通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)凋亡相关基因程序化细胞死亡因子5(PDCD5)mRNA 表达变化,从而探讨PDCD5基因与SLE发生与发展的关系.方法 应用逆转录PCR(RT-PCR)半定量检测67例SLE患者和50例健康者PBMC中PDCD5 mRNA的表达.结果 SLE活动期患者PDCD5 mRNA 阳性表达率明显高于健康者(P＝0.00);SLE活动期患者PDCD5 mRNA表达水平明显高于稳定期患者和健康者(P<0.01),稳定期患者PDCD5 mRNA比健康者也明显升高(P<0.01).SLE活动期患者PBMC中PDCD5的表达与反应SLE疾病活动的指标如SLEDAI、补体C3、抗ds-DNA抗体等呈显著相关(P<0.05).狼疮性肾炎患者和非狼疮性肾炎患者PDCD5表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 SLE患者PBMC中PDCD5表达上调,且与SLE疾病活动相关,提示PDCD5通过增加表达量而导致异常淋巴细胞凋亡,参与SLE的发生、发展.     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞mIL—2R表达

探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中膜白介素－２受体在静息状态和诱导状态的表达水平及其与ＨＢｅＡｇ的关系。方法用生物素－链霉亲和素系统检测１０８例慢性乙肝患者ＰＢＭＣ的ｍＩＬ－２Ｒ,并平行测定患者血清中ＨＢｅＡｇ。结论慢性乙肝患者ｍＩＬ－２Ｒ表达水平低下,且与ＨＢｅＡｇ存在有关。