甲基硒酸抑制肾癌GRC-1细胞生长与脂质过氧化关系的研究

目的:研究甲基硒酸对肾癌GRC-1的生长抑制效应及细胞内活性氧、脂质过氧化指标的变化。方法:使用不同浓度的甲基硒酸(1.0μmol/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L)对GRC-1细胞进行侵染,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测亚硒酸钠对人脑胶质瘤干细胞的增殖的影响,使用荧光检测仪检测GRC-1细胞内ROS含量,并使用试剂盒检测GSH、SOD、MDA的含量。结果:甲基硒酸对肾癌GRC-1细胞具有明显的抑制作用,且随甲基硒酸浓度的增加,GRC-1细胞生长抑制作用逐渐加强,各染硒组差异均有统计学意义(P<0.05);GRC-1内ROS含量在低、中均显著性增加;GSH的含量在中、高剂量组明显减少,SOD的含量在各剂量组均明显减少,MDA的含量逐渐增加在高剂量组明显增加。结论:甲基硒酸能抑制肾癌GRC-1细胞的生长,伴随着ROS及脂质过氧化指标的变化。     

变应性鼻炎激光治疗后鼻分泌物及血嗜酸细胞的变化

本文报道２０６例变应性鼻炎病人经Ｎｄ：ＹＡＧ激光照射治疗后，显效１１０例（５３％），有效７４例（３６％），无效２２例（１１％）。对其中１５０例患者于照射前、后作了鼻分泌物及血液嗜酸细胞计数。治疗前后的变化表明激光治疗变应性鼻炎是一种有效的方法。     

miR-33 a调控ABCA1表达介导棕榈酸诱导肝细胞脂质代谢损伤研究

目的探讨miR-33a及其下游靶基因ABCA1在肝细胞脂质代谢中的作用。方法刺激棕榈酸(PA)制备肝细胞脂质损伤的细胞学模型。应用油红染色检测细胞内脂质堆积情况。采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法检测miR-33a、ABCA1等表达。结果 PA刺激显著增加肝细胞中脂质成分堆积,同时miR-33a表达增加,而ABCA1表达减少。干预miR-33a表达可以介导PA诱导的脂质损伤,同时调控ABCA1表达。抑制或者增加ABCA1表达可以调控PA诱导的肝细胞代谢损伤。结论 MiR-33a与ABCA1介导PA诱导肝细胞脂质代谢损伤。     

腮腺嗜酸细胞腺瘤的CT表现：1例病例报道及文献复习

患者女,63岁。发现左耳垂下肿块3年,增大2月。查体：左耳垂下下颌骨升支后方肿块,鸡蛋大小,质块稍硬,表面光滑,边界清楚,活动度差,无压痛,尤面瘫等症状。彩超检查：左耳后下方低回声肿块,边界清晰,其内见少许血流信号。     

大黄酸衍生物RH - 01对鼻咽癌KB细胞生长抑制的研究

 目的研究大黄酸衍生物RH-01对鼻咽癌KB细胞的抑制作用.方法体外培养鼻咽癌KB细胞,应用MTT法测定IC50,荧光染色观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布.结果 RH-01明显抑制KB细胞的生长,半数抑制浓度(IC50)约为(0.67±0.20)μmol/L;0.8 μmol/L RH-01作用24h即可明显诱导KB细胞的凋亡;流式细胞仪检测到细胞周期C2期阻滞明显.结论 RH-01对人类鼻咽癌细胞有极强生长抑制和诱导凋亡作用.     

关于钆塞酸二钠及钆喷酸葡胺增强MRI对肝癌诊断效能的1∶1匹配的病例对照研究

目的 通过1∶1匹配的病例对照研究,比较钆塞酸二钠(Gd-EOB-DTPA)和钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)增强MRI对肝癌(HCC)的诊断效能,并且明确Gd-EOB-DTPA增强MRI的肝胆期是否具有补偿作用.方法 搜集行Gd-EOB-DTPA以及Gd-DTPA增强MRI检查且有肝硬化、存在肝占位性病变的患者,按年龄±...     

人肝癌细胞敲低Rab27 B后的差异蛋白质组初步研究

目的：通过分析敲低Rab27B后肝癌细胞蛋白质表达的变化,研究其在肿瘤细胞中的作用及可能的分子机制。方法在人肝癌细胞系MHCC97H中利用Tet-on系统和RNA干扰（RNAi）技术敲低Rab27B 表达,利用iTRAQ定量蛋白质组学技术比较敲低前后肿瘤细胞蛋白表达的差异,并对其进行亚细胞定位、生物过程和分子功能等生物信息学分析。结果 MHCC97H细胞敲低Rab27B后共鉴定到448种差异蛋白[比值（｜Ratio｜）＞1．21, P＜0．05],其中表达趋势与Rab27B正相关的蛋白229种,负相关的蛋白219种。差异蛋白主要涉及囊泡运输、大分子定位、胞内应激等生物过程,有26种差异蛋白分布于8个肿瘤相关信号通路中,其中11种集中在黏着斑（ focal adhesion）信号通路。结论对Rab27B敲低前后MHCC97H细胞全蛋白的iTRAQ分析表明,Rab27B不仅能影响肿瘤细胞的外泌体分泌,还能引起与细胞增殖和迁移等相关的信号通路中重要蛋白的变化,提示Rab27B确实具有调控肿瘤细胞增殖和迁移的分子基础。     

纤溶酶原激活物抑制物-1对棕榈酸刺激后小鼠原代心肌细胞凋亡的作用及机制

目的探讨纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)对棕榈酸刺激后小鼠原代心肌细胞凋亡的作用及其可能机制。方法分离培养小鼠原代心肌细胞,分为对照组与棕榈酸组,Western blotting检测PAI-1及凋亡蛋白剪切型的半胱天冬酶3(cleaved-caspase 3)、BCL2关联X蛋白(Bax)表达。建立PAI-1低表达及过表达的心肌细胞,荧光定量PCR检测PAI-1基因的mRNA表达,Western blotting检测PAI-1、cleaved-caspase 3及Bax蛋白的表达。确定PAI-1小干扰RNA条件后给予棕榈酸刺激,分为对照组、PAI-1低表达组、棕榈酸组、PAI-1低表达+棕榈酸组,Western blotting检测cleaved-caspase 3、Bax及磷酸化核因子κB(p-NF-κB)的表达。最后,将棕榈酸组细胞给予NF-κB抑制剂Bay11-7082处理,分为棕榈酸组、PAI-1低表达+棕榈酸组、Bay11-7082+棕榈酸组、PAI-1低表达+Bay11-7082+棕榈酸组,Western blotting检测cleaved-caspase 3及Bax...     

DSA和钆塞酸二钠增强MRI对肝癌术后复发微小病灶诊断的比较研究

目的 对比研究DSA和钆塞酸二钠(Gd-EOB-DTPA)增强MRI对肝癌术后复发微小病灶的诊断效能,评估其诊断价值.方法 回顾性分析2011年9月至2016年3月收治的肝癌术后怀疑有微小复发病灶的患者38例,所有患者均经过DSA、DSA碘油CT和Gd-EOB-DTPA增强MRI检查,对比分析各检查方法诊断的阳性和阴性病例,计算诊断的灵敏度和特异度,所有病例均由2名放射科副主任医师根据诊断标准独立诊断,以手术或者穿刺病理结果以及至少6个月随访作为最终诊断依据.结果 38例患者,共发现47个病灶,病灶直径0.5～2.0 cm,平均(1.2±0.8)cm,其中41个病灶证实为复发微小肝癌,22个有病理结果,其余19个病灶经过随访证实.6个病灶为非肝癌病灶,全部由随访证实.所有病灶中,常规DSA诊断的灵敏度为73.2％,特异度为80.0％.DSA结合碘油CT诊断的灵敏度为90.2％,特异度为100％.Gd-EOB-DTPA增强MRI诊断的灵敏度为95.1％,特异度为100％.诊断效能之间统计学分析显示,常规DSA-DSA碘油CT以及常规DSA-MRI之间差异有统计学意义(P＜0.05),碘油CT与MRI间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 对肝癌术后的微小肝癌结节,DSA联合碘油CT的诊断效能和Gd-EOB-DTPA增强MRI类似,对于临床上不适合做MRI的患者,可以考虑采用DSA联合碘油CT作为替代检查手段.     

HIV-1耐药性突变位点研究进展

HIV耐药性的产生是抗病毒治疗的瓶颈,而耐药性的发生主要是因为HIV基因组中部分密码子位点发生突变所致。随着HIV耐药性研究的逐步深入,导致HIV耐药的突变位点也逐渐明晰化,尤其是针对高效抗病毒治疗中经常使用的抑制剂的耐药突变位点的研究取得了明显进展。明确HIV耐药突变位点单独存在或与其他位点联合作用下对病毒抑制剂的影响,将使得抗病毒治疗更有针对性。     

钠通道芋螺毒素研究进展

钠通道芋螺毒素是芋螺毒素的重要家族,由17～33个氨基酸、3对二硫键组成.它们能特异作用于神经型或肌肉型钠通道及其亚型,分属δ-、μ-、μO等类型.由于其分子量小、特异性高,是钠通道及其亚型生理、药理功能的优良探针,本身也有潜力发展成为无致瘾镇痛药.本文简要综述δ-、μ-钠通道芋螺毒素的作用机制以及结构与活性关系的最新进展.     

利用双向启动子型RNA干涉载体构建随机RNA干涉文库的初步研究

目的:利用双向启动子型RNA干涉载体pRHU构建随机RNA干涉文库.方法:分别构建基于pRHU载体的绿色荧光蛋白EGFP和p53的干涉质粒,验证双向启动子型RNA干涉载体的可用性.设计合成满足pRHU载体特点的干涉文库随机模板,经PCR扩增克隆入pRHU载体,转化感受态细胞获取随机干涉文库.随机挑选20个菌落测序,评价随机文库质量.结果:双向启动子型RNA干涉载体pRHU能在哺乳动物细胞中对外源基因EGFP和内源基因p53进行有效的干涉,表明该载体是一个有效的干涉载体,可以用于构建随机RNA干涉文库.本研究采用的构建策略可在较短时间内,用50 μg pRHU载体获得4×106个克隆.随机挑选20个克隆测序结果表明均插入了GN17-19序列,并且不存在序列重复性.结论:采用本研究的构建策略可以简便快速地利用双向启动子型干涉载体成功构建随机RNA干涉文库,为进一步筛选功能基因奠定了基础.     

HIF-1α基因沉默对A549肺癌细胞放射敏感性的影响

目的 探讨RNA干扰技术致HIF-1α基因沉默对裸鼠肺癌种植瘤放射敏感性的影响。方法 采用以慢病毒为载体的RNA干扰技术获得HIF-1α基因沉默的A549肺癌细胞株,用Western blot方法检测HIF-1α蛋白的表达。将A549/HIF-1α(-)细胞及A549细胞接种于4～6周BALB/C雄性裸小鼠,观察肿瘤生长情况。肿瘤体积达200～350 mm³时分别给予局部单次5、10、15和20 Gy X射线照射,观察对照组和照射组肿瘤体积和肿瘤生长延缓时间。结果 在常氧和乏氧状态下,A549/HIF-1α(-)细胞HIF-1α蛋白表达水平均显著下降,A549/HIF-1α(-)组裸鼠成瘤潜伏期较长,肿瘤生长慢于A549组(P<0.05),X射线照射对两种裸鼠种植瘤的生长均有抑制作用,但A549/HIF-1α(-)组肿瘤生长延缓显著。结论 RNA干扰技术能稳定阻断人肺腺癌A549细胞HIF-1α表达,HIF-1α基因沉默的肿瘤细胞对X射线照射更敏感。     

模拟HCV HVR1免疫7肽对免疫细胞分泌细胞因子的影响

目的 了解在模拟HCV HVR1免疫7肽(7P)的刺激下,正常人免疫细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素4(IL-4)的细胞频数变化,并探讨其作用机制.方法分离正常人外周血单核细胞(PB-MCs),分为CD4~+ CD8~- T细胞组、CD4~- CD8~+ T细胞组、NK细胞组、NKT细胞组四组,各组设阴性对照及豆蔻酸-佛波醇-乙酸酯(PMA)阳性对照,与7P共同孵育后,应用IL-10、IFN-γ、TNF-α、IL4流式抗体进行细胞内因子检测,采用FAGS Calibur流式细胞仪及FACS Calibur软件进行检测分析.结果 与阴性对照组相比,分泌IFN-γ的细胞频数在NK细胞、NKT细胞以及CD4~+ CD8~-、CD4~-CD8~+ T淋巴细胞均明显增高(P<0.01);分泌IL-4的细胞频数变化不明显;分泌IL-10的细胞频数在CD4~+ CD8~-、CD4~- CD8~+ T淋巴细胞表现为升高(P<0.01,P<0.05),在NK细胞、NKT细胞表现为下降(P<0.01);分泌TNF-α的细胞频数在CD4~+ CD8~- T淋巴细胞表现为下降(P<0.01),在NK细胞表现为升高(P<0.01).结论 7P能够通过调节细胞因子分泌改变免疫细胞的免疫反应方式,这种调节在以NK、NKT细胞为代表的固有免疫细胞和以CD4~+ CD8~-、CD4~- CD8~+ T细胞为代表的适应性免疫细胞之间存在差异,可能有利于在清除病毒的同时缓解炎症反应.     

Alterations of immune functions induced by 12C6+ ion irradiation in mice

Purpose:?To estimate the biological risks to the immune system of the type of space radiation, 12C6+, encountered by cosmonauts during long-term travel in space.

Materials and methods:?The Kun-Ming strain mice were whole-body irradiated by 12C6+ ion with 0, 0.01, 0.05, 0.075, 0.2, 0.3, 0.5, 0.75, 1 or 2 Gy, at a dose rate of 1 Gy/min. At 35 days after irradiation, the thymus and spleen weights were measured, the natural killer (NK) cells activity of spleen was determined by 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)- 2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT), and the interferon-γ (IFN-γ) levels in serum and thymus were detected with enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA).

Results:?The results showed that the thymus weight, IFN-γ levels in serum and the activity of splenic NK-cells had significantly increased at a dose of 0.05 Gy. With further dose increase, the weight of spleen continued to increase but the weight of thymus, IFN-γ level and NK-cells activity declined.

Conclusions:?These results suggest that the dose of 0.05 Gy irradiation has a stimulatory effect on mouse immunity; this effect declined with increasing dose.     

干细胞研究进展

干细胞是近年来医学研究的最热门课题之一 ,由于它对疾病防治潜在的重要性 ,特别是用于组织器官移植的可能性 ,以及伦理上的争议 ,因此引起了社会各界广泛的关注。 1981年Ｅｖａｎｓ等[1] 首次成功地从小鼠胚泡内层细胞团中分离培养出胚胎干细胞(ｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ) ;1998年 ,Ｔｈｏｍｓｏｎ等[2 ] 首次培养出人的胚胎干细胞 ;同年 ,Ｓｈａｍｂｌｏｔｔ等[3 ] 首次从 5～10周胎儿的性腺嵴中培养出人的胚胎生殖细胞 ,目前正研究在体外培养胚胎干细胞并使其直接分化成人类组织 (如胰岛、心肌等 ) ,从而为器官或组织移植的长…     

作用于离子通道的非竞争性N—甲基—D—天冬氨酸受体拮抗剂

综述了作用于离子通道的非竞争性Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸受体拮抗剂的研究进展，包括分离麻醉型ＮＭＤＡ拮抗剂，芴胺和菲胺类化合物以及低亲和力的非竞争性ＮＭＤＡ受体拮抗剂。     

细菌的噬菌体感染耐受机制研究进展

噬菌体是能感染细菌的病毒,在自然界中分布十分广泛。随着发酵工业中的噬菌体污染以及多药耐药菌株的出现,噬菌体越来越受到关注。噬菌体感染细菌包括吸附、注入、复制、组装、释放等环节;细菌在与噬菌体的共进化过程中,针对这些环节产生了不同的抗感染机制。该文围绕抗吸附、超感染排斥、限制修饰系统、CRISPR系统、流产感染、组装感染等细菌的噬菌体感染耐受机制研究进行了简要综述。     

RNA干扰抑制pyk2表达对大肠癌细胞凋亡和增殖的影响

 目的 探讨富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2(proline-rich tyrosin kinase-2,pyk2)对Lovo大肠癌细胞凋亡和增殖的影响.方法 利用两组构建有pyk2 shRNA(短发夹RNA,会在细胞内顺序反应而产生siRNAs)的质粒载体瞬时转染Lovo细胞系,设立空白对照组和阴性对照组,应用PCR 和western blot方法检测转染组和对照组细胞中pyk2 mRNA与蛋白表达水平的变化,通过细胞计数法来绘制细胞生长曲线,利用流式细胞技术(FCM)检测转染组与对照组细胞在凋亡和细胞周期S期分布的差异.结果 转染pyk2shRNA质粒的Lovo细胞凋亡水平明显低于对照组,S期细胞数显著增多,细胞绝对数增加,生长更加活跃.结论 pyk2能够升高Lovo大肠癌细胞的凋亡水平,降低其增殖水平.