一氧化氮合酶在门静脉高压大鼠胰腺的分布

一氧化氮(ＮＯ)与消化道疾病的关系日益受到重视。我们采用依赖还原性辅酶Ⅱ硫辛酰胺脱氢酶(ＮＡＤＰＨｄｉａｐｈｏｒａｓｅ,ＮＡＤＰＨｄ)免疫组织化学方法和神经元性一氧化氮合酶(ＮＯＳ)免疫组织化学法对正常和门静脉高压大鼠胰腺组织ＮＯＳ的分布进行研究。一、材料和方法1.实验动物:同批ＳＤ大鼠,雌雄各半,体重200～270ｇ(由同济医科大学实验动物学部提供),分为3组,Ⅰ组为对照组(6只),Ⅱ组为肝硬化组(8只),Ⅲ组为肝前性门静脉高压组(8只)。肝硬化组皮下注射50%ＣＣｌ42ｍｌ/ｋｇ体重,3天1次,共计10周,经病理证实肝硬化形成。肝前性门…     

一氧化氮合酶在门静脉高压症中表达的实验研究

比较肝前(PHPH)、肝内型门静脉高压鼠(IHPH)、门腔分流鼠(PCS)以及正常鼠(SO)内脏组织和血管中原生型(cNOS)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)活性及cNOS mRNA和iNOS mRNA的表达。方法:用分光光度法检测大鼠腹主动脉、门静脉、小肠和大肠组织中cNOS和iNOS活性,并用RT-PCR法半定量测定其cNOS mRNA和iNOSmRNA的表达。结果:门静脉高压鼠的动脉中iNOS活性和iNOS mRNA表达均显著地增加,其表达在转录水平受调节。cN03的活性和cNOS mRNA表达也增加,表达除在转录水平外,尚受到转最后调节。但iNOS活性和iNOSmRNA表达的增加远较cNOS活性和cNOSmRNA表达的增加为明显。结论:在门静脉高压症大鼠中NO过多产生主要是iNOS活性增加的结果。     

一氧化氮合酶、内皮素在门脉高压大鼠肠粘膜中的表达变化

目的探讨一氧化氮合酶和内皮素-1在门脉高压大鼠肠粘膜中的表达情况。方法20只雄性SD大鼠随机分为实验组与对照组，实验组行门静脉两步结扎加左肾上腺静脉结扎；应用免疫组化SP染色法检测iNOS、ecNOS及ET-1在大鼠小肠和结肠粘膜中的表达情况。结果门静脉完全结扎后两周，实验组大鼠门静脉压力较对照组明显增高；iNOS、ecNOS及ET-1在小肠粘膜中表达强度较对照组增强，iNOS及ET-1在结肠粘膜中表达较对照组增强。结论门脉高压大鼠小肠、结肠粘膜局部病变中iNOS、ecNOS及ET-1的表达不完全一致。     

内皮型一氧化氮合酶基因G894T突变与肝硬化门脉高压的相关性研究

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)基因第7外显子G894T点突变与肝硬化门脉高压症之间的关系.方法采用病例对照和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测106例乙型肝炎后肝硬化患者和108名健康对照者eNOS基因第7外显子G894T点突变频率和外周血NO-2/NO-3含量,比较各组间基因型频率与等位基因频率.结果①中国汉族正常人eNOS基因G894T突变GG、GT和TT基因型频率分别为86.1%、11.1%和2.8%;G、T等位基因频率分别为91.7%和8.3%.②乙型肝炎后肝硬化组GT+TT基因型频率高于对照组(24.5%比3.9%),差异有显著性.③门脉高压症组T等位基因频率明显高于对照组,差异有显著性(17.7%比8.3,P<0.05),相关分析呈正相关(r=0.2).携带T等位基因者发生门脉高压症的危险性高于非T等位基因携带者1.76倍(OR=2.76).结论 eNOS基因第7外显子G894T突变与肝硬化门脉高压症形成相关,T等位基因可能是中国人群门脉高压症的遗传易感基因型.     

肝硬变门静脉高压症患者肝组织一氧化氮合酶的检测及意义

目的 探讨一氧化氮在肝硬变门静脉高压症发病中的作用。方法 采用免疫组织化学法对４２例肝硬变患者及２０例胆囊切除术患者的对照肝组织进行染色，检测肝细胞中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）和内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）的表达，运用图像处理及分析系统对肝细胞染色进行定量分析；同时将肝硬变组按白蛋白水平分成小于３．５ｇ／ｄｌ组（２６例）和大于等于３．５ｇ／ｄｌ组（１６例），比较其肝细胞染色情况。结果 肝硬变     

前列环素与门静脉高压症高动力循环的关系

目的　探讨前列环素 (PGI2 )和一氧化氮 (NO)在门静脉高压症高血流动力循环中的作用。　方法　 66只雄性SD大鼠随机分成 :肝内型门静脉高压症组 (IHPH组 )、肝前型门静脉高压症组 (PHPH组 )和假手术组 (SO组 )。模型制备 1周后再随机分为 3个亚组 ,即对照组、一氧化氮合酶抑制剂L NNA组、消炎痛组。用药 1周后测定股动脉血浆 6 酮 前列腺素F1α(6 keto PGF1α)和NO2 - /NO3- 浓度 ,应用同位素微球技术行血流动力学研究 ,并对NO、PGI2 水平与血流动力学参数行Pearson相关分析。　结果　 (1 )在基础状态下 ,血浆 6 keto PGF1α浓度 ,IHPH鼠 [(1 1 2 3 85± 1 53 64)pg/ml]和PHPH鼠 [(891 88± 83 1 1 )pg/ml]均显著地高于SO鼠 [(72 5 53± 1 0 5 54)pg/ml] ,P <0 0 5 ;血浆NO2 - /NO3- 浓度 ,IHPH鼠 [(73 34± 4 31 ) μmol/L]和PHPH鼠 [(75 2 1± 6 89) μmol/L]均显著高于SO鼠[(58 79± 8 47) μmol/L] ,P <0 0 5。 (2 )与对照组比较 ,L NNA与消炎痛均显著地降低IHPH与PHPH 2组鼠血浆 6 keto PGF1α和NO2 - /NO3- 的浓度 ,P <0 0 5 ;降低IHPH、PHPH 2组鼠的心脏指数 (CI)、门静脉压力 (FPP)和门静脉血流量 (PVI) ,P <0 0 5 ;显著地增高这 2组鼠的平均动脉压 (MAP)、总外周血管阻力 (TPR)和内脏血     

热休克蛋白90在门静脉高压症内脏高动力循环中的作用

目的:研究热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP 90)在门静脉高压症(portal hypertension,PHT)内脏动脉中的表达变化,探讨其在高动力循环形成中的作用及可能的机制。方法:检侧四氯化碳(CCl4)诱导的肝硬化PHT组(n=7)和对照组(n=7)大鼠的门静脉血流速度(portal vein blood flow velocity,PBV)、门静脉直径、门静脉血流量(portal vein blood flow,PBF)和门静脉压力(portal vein pressure,PP),离体肠系膜微动脉对去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的反应性、HSP 90特异性抑制剂格尔德霉素(geldanamycin,GA)对离体肠系膜微动脉收缩反应的影响以及肠系膜动脉内HSP 90和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的蛋白表达变化。结果:①PHT组大鼠PBV和PBF明显低于对照组,门静脉直径在PHT组与对照组之间无统计学差异,GA对PHT组PBV及PBF无明显改善;②PHT组大鼠PP明显高于对照组,GA对PHT组PP并无明显降低作用;③PHT组大鼠肠系膜微动脉对NE的收缩反应性明显降低,50%作用浓度明显增大,GA能部分改善这种低反应性;④PHT组大鼠肠系膜动脉内HSP 90和eNOS的蛋白水平较对照组明显上调,GA明显降低PHT组肠系膜动脉HSP 90表达的同时,也降低了eNOS的表达。结论:CCl4诱导肝硬化PHT肠系膜动脉中过度生成的HSP 90可能是通过增加eNOS的表达降低肠系膜动脉对NE的反应性参与内脏高动力循环的形成。     

一氧化氮合酶、内皮素在门脉高压大鼠肠粘膜中的表达变化

目的　探讨一氧化氮合酶和内皮素 -1在门脉高压大鼠肠粘膜中的表达情况。方法　2 0只雄性SD大鼠随机分为实验组与对照组 ,实验组行门静脉两步结扎加左肾上腺静脉结扎 ;应用免疫组化SP染色法检测iNOS、ecNOS及ET -1在大鼠小肠和结肠粘膜中的表达情况。结果　门静脉完全结扎后两周 ,实验组大鼠门静脉压力较对照组明显增高 ;iNOS、ecNOS及ET -1在小肠粘膜中表达强度较对照组增强 ,iNOS及ET -1在结肠粘膜中表达较对照组增强。结论　门脉高压大鼠小肠、结肠粘膜局部病变中iNOS、ecNOS及ET -1的表达不完全一致     

肿瘤坏死因子、内皮素和一氧化氮在肝硬化大鼠门静脉高压高动力循环综合征中作用的研究

目的 了解肿瘤坏死因子（TNF）、内皮素（ET）和一氧化氮（NO）在门静脉高压高动力循环综合征（HCS）中的作用和地位以及门静脉血中含量的高低对HCS的影响。方法 四氯化碳诱导肝硬化大鼠在用抗TNF抗体，一氧化氮合成酶（NOS）抑制剂N^G－甲基－L－精氨酸处理前后测定门脉血TNF，ET和NO含量及肝组织NOS活性，同时监测血流动力学。结果 肝硬化大鼠门脉血中TNF，NO水平显著增高，ET也有轻度上升，肝组织NOS活性显著增高。在注射抗TNF抗体后，门脉血中TNF含量显著下降至对照水平，ET水平无变化，肝组织NOS活性较处理前下降15％－30％，同时HCS部分缓解。在注射N^G-甲基－L－精氨酸后，门脉血NO含量及肝组织NOS活性显著降低至对照水平，HCS明显缓解，门脉压力降至正常范围。结论 NO在HCS形成中起关键作用，TNF可能通过激活NOS使NO升高而发挥作用，ET与HCS形成无直接因素关系。     

抑制一氧化氮生物合成对门脉高压鼠血流动力学的影响

研究一氧化氮(NO)在门脉高压高血流动力学中的作用。方法:用SD大鼠制备肝内型(IHPH)、肝前型门脉高压(PHPH)和门腔分流(PCS)3组模型,并以正常鼠作为对照组。每一组实验动物再分成3个亚组:NO生物合成抑制剂L-NMMA组、L-NMMA NO生物合成底物L-精氨酸组以及生理盐水安慰组。血流动力学研究用放射性微球注射技术。结果:IHPH、PHPH和PCS鼠均具有心输出量和内脏血流量增加,平均动脉压、周围血管总阻力和内脏血管阻力降低等高血流动力学特征。L-NMMA能逆转门脉高压鼠和门腔分流鼠的高血流动力学状态,使之恢复至正常鼠的基础水平,但并未达到正常鼠用L-NMMA后的水平。如先给予L-精氨酸,则使L-NMMA对门脉高压鼠和门腔分流鼠的心血管作用消失。结论:门静脉高压症中NO过多产生是高动力循环重要的、但并不是唯一的介质。     

一氧化氮合酶与急性缺血性肾损伤

一氧化氮合酶是一类复杂的生物合酶，其产物一氧化 机体内发挥广泛而重要的作用。随着对一氧化氮合酶的结构及功能认识的深入，发现一氧化氮及其合酶的变化在急性肾缺血性损伤中有重要作用。     

门静脉部分结扎后大鼠血肿瘤坏死因子和内皮素与高动力循环综合征的关系

目的 探讨肿瘤坏死因子和内皮素在高动力循环综合征（HCS）形成中的作用。方法 门静脉部分结扎大鼠形成稳定的HCS后,检测用抗肿瘤坏死因子抗体处理前后各组的门静脉血肿瘤坏死因子及内皮素含量,同时检测血流动力学。结果 门静脉部分结扎后0．5h,大鼠门静脉血肿瘤坏死因子含量无变化,24h则显著增高,此后保持升高状态,并与HCS启动的时间相一致;门静脉血内皮素含量在门静脉部分结扎后各时相均有轻度升高。在注射抗肿瘤坏死因子抗体后,门静脉血肿瘤坏死因子含量明显降低至对照水平,内皮素含量无变化,HCS有部分缓解。结论 肿瘤坏死因子可能与HCS的启动有关,可能是维持HCS的媒介;内皮素与HCS形成无直接因果关系,可能是对血管张力失常的一种反应。     

内皮细胞型一氧化氮合酶与骨质疏松症

一氧化氮涉及许多生理过程,其对骨细胞的功能也有重要作用.研究发现一氧化氮及其合酶,特别是内皮细胞型一氧化氮合酶在参与和促进骨质疏松症的病理生理过程中占有举足轻重的作用;一氧化氮和内皮细胞型一氧化氮合酶作为骨形成及骨吸收过程中调节因子的作用亦受到广泛关注,为临床应用一氧化氮防治骨质疏松症提供了新思路.目前对一氧化氮和内皮细胞型一氧化氮合酶的骨吸收调控机制及在骨质疏松症发生过程中作用的认识仍以推理性为主,有待进一步研究.     

一氧化氮合酶与急性缺血性肾损伤

一氧化氮合酶是一类复杂的生物合酶，其产物一氧化氮在机体内发挥广泛而重要的作用。随着对一氧化氮合酶的结构及功能认识的深入，发现一氧化氮及其合酶的变化在急性肾缺血性损伤中有重要作用     

前列环素在门静脉高压症内脏高动力循环中的作用及机制

目的:研究前列环素(PGI2)在门静脉高压症(PHT)内脏高动力循环形成中的作用及机制。方法:观察四氯化碳致肝硬化门静脉高压症组(PHT组,n=8)和对照组(N组,n=8)大鼠的门静脉压力(PP)、离体肠系膜微动脉对去甲肾上腺素(NE)的反应性、肠系膜动脉内环氧合酶(COX)表达和下腔静脉血浆6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)浓度,以及吲哚美辛(INDO)对PHT组大鼠的影响。结果:①PHT组PP和6-keto-PGF1α浓度明显高于N组[(14.50±0.87)mm Hg比(7.63±0.48)mm Hg,(78.73±4.57)ng/L比(51.60±5.23)ng/L,P0.05],INDO能使PHT组6-keto-PGF1α浓度明显下降[(76.57±5.58)ng/L比(42.00±8.75)ng/L,P<0.01];②PHT组肠系膜微动脉对NE的反应性明显低于N组,EC50明显增大,INDO能部分改善这种低反应性;③PHT组肠系膜动脉内COX-1表达较N组明显上调,但COX-2在PHT组和N组均未检测到。结论:肝硬化PHT中过度生成的PGI2可通过降低肠系膜动脉对NE的反应性参与高动力循环的形成,并且PGI2合成增多与血管内过度表达的COX-1有关,与COX-2无关。     

先天性心脏病合并肺动脉高压患者肺组织一氧化氮合酶的表达

目的：通过观察先天性心脏病合并肺动脉高压患者肺组织内皮型一氧化屡合酶（eNOS)的表达，了解其肺血管内皮细胞功能有否异常。方法：32例先天性心脏病患者分为2组，组I：合并肺动脉高压患者（n=16);组Ⅱ：未合并肺动脉高压患者（n=16)。在心内直视术下，取少许右肺中叶组织，利用免疫组织化学和逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术，对eNOS进行半定量分析。结果：组Ⅱ患者肺血管内皮细胞内eNOS免疫染色比组I明显增强（F＝93．98，P＜0．01）；组Ⅱ患者肺血管内皮细胞内eNOSmRNA表达比组I明显增高（F＝58．76，P＜0．01）。结论：先天性心脏病合并肺动脉高压患者的eNOS表达减少，造成内源性一氧化氮（NO）生成不足，为该类患者吸入NO治疗肺动脉高压提供了理论依据。     

门静脉部分结扎大鼠门脉血中一氧化氮水平与高动力循环综合征的关系

目的：了解一氧化氮（NO）在高动力循环综合征（HCS）形成中的作用以及NO水平升高或降低时对HCS的影响。方法：结扎大鼠部分门静脉使之形成稳定的HCS模型后，应用一氧化氮合成酶（NOS）抑制剂NG-甲基-L-精氨酸（L-NMMA）处理前、后检测其门静脉血中NO含量及肝组织NOS活性，同时检测左心室功能及血流动力学指标。结果：门静脉部分结扎后大鼠门静脉血中NO含量及肝组织中NOS活性二者呈平行变化，与HCS的形成关系密切；在注射L-NMMA后门静脉血中NO含量及肝组织中NOS活性均明显降低并接近对照水平，HCS明显缓解。结论：NO在HCS形成中起关键作用。降低或消除NO的作用则能明显缓解或阻断HCS，使门静脉压力明显降低直至恢复到正常范围。     

大鼠脑缺血后一氧化氮合酶的时相变化

探讨一氧化氮有脑缺血中的作用。方法 用分光光度法则脑缺血后ＮＯＳ活性，ＲＴＰＣＲ半定量测脑缺血后ｃＮＯＳ，ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达水平，结果 脑缺血后１小时ＮＯＳ活性增加，４小时ＮＯＳ活性开始下降，１２小时 ＮＯＳ活性最低；脑缺血后２４小时，４８小时开始ＮＯＳ活性再镒明显升高。脑缺血后１小时，４小时ｃＮＯＳｍＲＮＡ表达增加，１２小时开始下降，２４小时明显下降，直至４８小时，脑缺血后１小时，４小时ｉＮＯ     

内皮型一氧化氮合酶活化在门静脉高压症内脏动脉重构中的作用机制

目的 探究内皮型一氧化氮合酶活化在门静脉高压症内脏动脉重构过程的作用机制。方法 雄性SD大鼠随机分为3组,正常对照组(CT组)、门静脉高压组(PHT组)、门静脉高压+L-NAME组(PHTL组)。造模结束后,测定大鼠血清NO水平,观察各组大鼠肠系膜微动脉的组织病理学改变,eNOS mRNA、蛋白表达以及活性水平,检测血管重构蛋白tTG的表达量和酶活性,ROCK蛋白的表达量和活性。结果 PHT大鼠肠系膜微动脉存在管腔扩张,血管壁变薄的重构现象,L-NAME抑制eNOS的产生和活化之后,血管重构现象可得到逆转。PHT大鼠中血管重构蛋白tTG的表达量和活性均降低,L-NAME处理可使tTG的表达量和活性回升。PHT大鼠中ROCK蛋白的表达量和活性均降低,L-NAME处理可使ROCK的表达量和活性回升。结论 在PHT动物模型中,eNOS的表达和活化增加,血清NO水平升高,可降低tTG和ROCK的表达量和活性水平,继而减少血管细胞外基质的产生,产生血管重构的现象。