原位小肠移植后肠管吸收功能的研究

目的 观察大鼠原位小肠移植后肠管的吸收功能的变化.方法 60只Wistar大鼠随机分成两组,小肠移植组(采用改良的kort法行二步法大鼠原位小肠移植)和对照组,术后分别于2、4、8周检测移植小肠15N-Gly的吸收和移植小肠功能酶(Na+,K+-ATP酶、双糖酶)活性.结果 对15N-Gly的吸收和小肠功能酶活性在原位移植术后2周下降明显,4周时双糖酶的功能、氨基酸的吸收恢复正常,8周时Na+-K+ATP酶也接近正常.结论 大鼠小肠原位移植后,移植小肠吸收功能在4周左右时接近正常水平.     

猪异体节段性移植小肠吸收功能的研究

猪异体节段性移植小肠吸收功能的研究赵允召，黎介寿，李宁，廖彩仙，吴学豪，李国立，李幼生本实验通过自体小肠前后对照，对二步法移植的小肠在术后不同时期测定其对糖、脂肪酸、氨基酸、吸收功能的恢复情况，系统了解小肠节段性移植后移植肠对三大营养素吸收功能的恢复...     

小鼠小肠移植早期体液免疫功能研究

小肠移植是治疗短肠综合征的唯一理想途径,对免疫排斥反应的早期诊断和高效免疫抑制剂的正确使用是控制小肠移植后排斥反应的关键［１］。因此,了解移植后免疫排斥反应的确切机理具有极为重要的意义。为了解同种异体小肠移植术后受体抗移植物体液免疫应答的表现及其与细...     

肝细胞生长因子对大鼠移植小肠吸收功能及功能酶活性的影响

目的研究肝细胞生长因子(HGF)对移植小肠吸收功能是否具有保护作用。方法20只近交系Wistar(RT1k)大鼠行异位全小肠移植后第2天开始分2组给予肠外营养(TPN)至第10天,常规TPN支持为对照组;常规TPN支持的同时加用HGF(150μg·kg-1·d-1)为HGF组,两组完成小肠移植及TPN支持的大鼠分别测定移植肠对稳定性同位素15N标记的甘氨酸(15N-Gly)的吸收功能和移植肠黏膜功能酶包括双糖酶(乳糖酶、蔗糖酶及麦芽糖酶)及Na+-K+ATP酶活性,观察移植肠对氨基酸吸收能力的变化及功能酶改变。结果HGF组1、2、3h时血浆15N-Gly丰度值分别为1.875%、2.314%和2.479%,对照组分别为0.205%、0.683%和0.823%;HGF组血浆15N-Gly丰度分别为对照组的9.2倍(P=0.006)、3.4倍(P=0.003)和3.0倍(P=0.01)。HGF组及对照组移植肠黏膜Na+-K+ATP酶活性均明显低于正常基准(P<0.05),两组间差异无显著性意义(P>0.05)。对照组双糖酶活性较正常基准明显降低(P<0.05),HGF组双糖酶活性较基准下降不明显(P>0.05),且明显高于对照组(P<0.05)。结论HGF能保护大鼠移植小肠对氨基酸的吸收功能及功能酶活性。     

特殊营养支持对大鼠移植小肠吸收功能的影响

目的 了解n-3脂肪酸(n-3FA)、l，6二磷酸果糖(FDP)和谷氨酰胺(GLN)特殊营养支持对移植小肠吸收功能的影响。方法 196只近交系Wistar大鼠分别作为供、受体行全小肠异位移植，术前和术后应用n-3FA灌胃和TPN中加入FDP、GLN静脉输注10d，用^15N甘氨酸(^15N-Gly)对移植小肠进行灌注，收集不同时间的血液标本，应用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析吸收的^15N-Gly及其丰度。结果 各组^15N-Gly的血浆丰度均在lh最低，3h达到最高峰。其中l、2和3h的丰度值均以n-3FA FDP GLN组为最高，分别是非必需氨基酸(NEAAs)对照组的9倍、3倍和2．5倍，其余各实验组血浆内^15N-Gly的上升速度及丰度值也明显高于NEAAs对照组。结论 外源性n-3FA、FDP和GLN联合应用可明显改善移植小肠的吸收功能。利用稳定性同位素^15N标记氨基酸，GC-MS技术分析移植小肠吸收功能的方法不具放射性，特异性和灵敏度都很高，值得临床小肠吸收功能研究借鉴。     

大鼠移植肠管长度、部位与排斥反应的关系

目的　探讨移植肠管的长度、部位与排斥反应之间的关系。方法　行同种异系原位小肠移植 (SD→Wistar) ,分别移植 3 0 %近端小肠 (A组 )、60 %近端小肠 (B组 )、全小肠 (C组 )、3 0 %远端小肠 (D组 )。观察术后生存时间 ;定期 (1、3、5、7、9d)采血测定血清白细胞介素 2 (IL 2 )、白细胞介素 8(IL 8)水平 ;开腹行麦芽糖吸收实验 ;取移植肠管 ,苏木素 伊红 (HE)染色后光镜检查。结果　A、B组的生存时间 (12 .0 0± 1.67)d、(11.17± 1.94)d与C组 (9.17± 1.17)d及D组 (8.3 3±1.0 3 )d相比差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。麦芽糖吸收实验、血清及病理学结果显示 :A、B组分别于术后 5、7、9d发生轻、中、重度排斥反应 ,C、D组分别于术后 3、5、7d发生轻、中、重度排斥反应。结论　大鼠小肠移植排斥反应强弱与移植肠管的长度无直接关系 ;排斥反应发生的时间与移植肠管的部位有一定关系。     

大鼠小肠移植模型的改进

目的　通过改进技术 ,建立一种简便稳定存活率高的大鼠异位节段小肠移植模型。方法　“无损伤”游离 ,原位冷灌注 ,切取带有腹主动脉和肠系膜上静脉并门静脉的节段小肠 ,4℃乳酸林格氏液保存 1h。游离受体左肾静脉 ,切除左肾。采用显微外科技术行供体腹主动脉对受体腹主动脉的端侧吻合 ,门静脉与受体左肾静脉行袖式吻合。移植肠近端关闭 ,远端外置。结果　共进行 87次移植实验 ,其中 2 6次为正式实验。动脉、静脉吻合时间分别为 2 5～ 30min和 5min。 2 6只受体鼠中2 1只存活超过 3d ,平均存活 (8.93± 2 .5 9)d ,最长存活时间为 14d。结论　良好的血管吻合和充分补充液体是手术成功、移植肠具有良好活力的关键因素     

活体部分小肠移植中移植肠管的植入技术

小肠移植是治疗晚期肠功能衰竭综合征的有效方法[1 3 ] ,在移植肠的植入技术方法上存有争议[1,2 ] 。我院于1999年 5月 2 0日成功地进行了国内首例活体部分小肠移植[4 ] ,2 0 0 1年 1月 6日又施行了第 2例活体部分小肠移植。临床资料例 1男 ,18岁 ,身高 185ｃｍ ,体重 48ｋｇ。因肠扭转坏死切除大部小肠 ,残余空肠 40ｃｍ。 1999年 5月 2 0日行活体部分小肠移植术 ,供体为患者父亲 ,44岁。例 2男 ,15岁 ,身高16 7ｃｍ ,体重 34ｋｇ。因盲肠旁疝嵌顿肠坏死切除大部小肠及盲肠 ,残余空肠 10ｃｍ。 2 0 0 1年 1月 6日行活体部分小肠移植术 ,供…     

表皮生长因子对大鼠移植小肠形态及功能的作用研究

目的：了解表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）对大鼠移植小肠萎缩及功能低下的预防作用。方法：近交系Wistar(RT1^k)大鼠行异位全小肠移植后自第2天开始给予肠外营养至第10天，对照组（n=10）行常规TPN(total parenteral nutrition)支持，实验组（n=10）行常规TPN支持的同时加用表皮生长因子。结果：实验组移植肠绒毛高度、隐窝深度、粘膜厚度及绒毛表面积均明显大于对照组，肠上皮细胞超微结构基因保持完好，对照组则出现明显线粒体肿胀和微绒毛萎缩。实验组血浆^15N-甘氨酸丰度明显于对照组。结论：表皮生长因子能维护大鼠移植小肠粘膜形态与功能，改善肠管对氨基酸的吸收。     

甘氨酰谷氨酰胺二肽对猪自体移植小肠的营养作用

目的 观察甘氨酰谷氨酰胺（Ｇｌｙ－Ｇｌｎ）二肽对猪自体移植小肠的作用。方法 杂种猪１０只,自体小肠移植术后随机分为两组：标准ＴＰＮ组（ＳＴＰＮ组）５只,接受标准ＴＰＮ支持２８天;Ｇｌｙ－Ｇｌｎ二肽组（ＧＴＰＮ组）５只,接受含Ｇｌｙ－Ｇｌｎ的ＴＰＮ支持２８天。分别于术或术后１天和术后２８天测定血浆谷氨酰胺（Ｇｌｎ）,移植小肠粘膜Ｇｌｎ、蛋白质,绒毛ＤＮＡ、ＲＮＡ,肠粘膜绒毛高度、表表面、隐窝深度和肠     

谷氨酰胺肠外营养对大鼠移植小肠营养作用的研究

作者研究了加谷氨酰胺的肠外营养对大鼠移植小肠萎缩及功能低下的预防作用。对Ｗｉｓｔａｒ鼠行近段空肠移植,然后给予肠外营养１０天。实验组给予加３％丙氨酰－谷氨酰胺的营养液,而对照组给予含等氮量非必需氨基酸的营养液。结果显示：实验组移植小肠的绒毛高度、粘膜厚度、腺窝深度和绒毛表面积均明显大于对照组;实验组移植小肠粘膜上皮细胞的超微结构基本保持完好,而对照组则出现线粒体肿胀,嵴断裂和微绒毛萎缩。实验组移植小肠对１５Ｎ－甘氨酸的吸收率明显高于对照组。结果提示：加谷氨酰胺的肠外营养能促进大鼠移植小肠粘膜增生,维持粘膜细胞超微结构的完整,并能改善其对氨基酸的吸收能力。     

早期应用冬眠合剂对严重烫伤大鼠小肠的保护作用

目的 了解早期应用冬眠合剂对严重烫伤大鼠小肠的保护作用.方法 将66只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假伤组6只、烫伤组30只、烫伤+冬眠合剂组30只.麻醉后,将后2组大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,假伤组37℃水浴模拟烫伤.3组大鼠伤后均立即腹腔注射乳酸钠林格液(2 mL·kg-1·%TBSA-1)复苏;同时烫伤+冬眠合剂组皮下注射冬眠合剂(50 mg/mL哌替啶、25 mg/mL氯丙嗪、25 mg/mL异丙嗪各1 mL加入125 mL生理盐水中)12 mL/kg,假伤组和烫伤组注射生理盐水12 mL/kg.分别于伤后3、6、12、24、48 h取烫伤组与烫伤+冬眠合剂组大鼠各6只(假伤组伤后3 h取材),采集血液和小肠组织标本.观察烫伤组与烫伤+冬眠合剂组大鼠伤后24 h、假伤组伤后3 h小肠组织病理变化,并用免疫组织化学法检测小肠组织胞间黏附分子1(ICAM-1)和CD68的表达.采用ELISA法测定各组大鼠血浆D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、IL-1β、TNF-α、IL-10水平.数据行单因素方差分析.结果 (1)伤后24 h,烫伤组大鼠小肠黏膜轻度出血,炎症细胞浸润、上皮细胞脱落;烫伤+冬眠合剂组较烫伤组肠绒毛排列规则,无明显充血、水肿表现.(2)烫伤组小肠ICAM-1和CD68阳性表达率分别为(1.69±0.27)%和(0.80±0.09)%,均显著高于假伤组的(0.77±0.10)%和(0.30±0.05)%(F值分别为77.303、66.933,P<0.05或P<0.01)与烫伤+冬眠合剂组的(0.53±0.09)%和(0.32±0.06)%(F值同前,P值均小于0.01).(3)烫伤+冬眠合剂组大鼠伤后12、24 h D-乳酸水平明显低于烫伤组(F值分别为20.936、19.854,P值均小于0.01).烫伤+冬眠合剂组DAO水平于伤后3、12 h显著低于烫伤组(F值分别为21.930、11.342,P值均小于0.05).(4)烫伤组各时相点IL-1β、TNF-α水平均明显高于假伤组(P值均小于0.01),烫伤+冬眠合剂组伤后6、12、24 h IL-1β、TNF-α水平均低于烫伤组(F值分别为96.517、17.365、79.715与21.328、17.682、28.424,P<0.05或P<0.01);烫伤+冬眠合剂组各时相点IL-10水平均高于烫伤组,并在6、24 h时差异具有统计学意义(F值分别为8.668、19.634,P<0.05或P<0.01).结论 早期应用冬眠合剂可减轻严重烫伤大鼠小肠黏膜水肿和损害,该机制可能与其降低肠道ICAM-1的表达和血液炎症介质水平、减少肠道局部炎症细胞数量有关.     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠小肠缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞( BMSC)移植对其小肠缺血再灌注损伤的影响.方法 获取健康Wistar大鼠骨髓,体外提取、培养BMSC,收获传代培养的第3代细胞并鉴定其表型.在健康Wistar大鼠肠黏膜下注射皮肤黑色素瘤细胞,并用底物荧光素法示踪细胞.另外制作Wistar大鼠肠道缺血再灌注模型,将模型大鼠分为2组:实验组大鼠在肠黏膜下注射BMSC悬液1 ml(含5×106个细胞);对照组大鼠在肠黏膜下注射等量生理盐水.分别于术后0、2、6、24、72和120h处死大鼠,留取血清和小肠组织样本.采用酶联免疫吸附试验检测血清二胺氧化酶( DAO)、D-乳酸和肿瘤坏死因子α(TNF-α),用光镜和透射电镜观察肠组织,蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测紧密连接蛋白-1(ZO-1).结果 体外成功分离培养出BMSC.经肠黏膜移植后的皮肤黑色素瘤细胞定植在肠道.实验组大鼠小肠病理改变较对照组轻,小肠黏膜屏障更完好.术后6h实验组DAO为(11.36±1.89) IU/ml,对照组为(14.27±2.09) IU/ml(P＜0.05);24 h时实验组DAO为(5.04±1.04)IU/ml,对照组为(7.35±1.46) IU/ml(P＜0.05).术后6 h实验组D-乳酸为(1.57±0.25) mmol/L,对照组为(1.93±0.19)mmol/L(P＜0.05);术后24 h实验组D-乳酸为(1.09±0.13)mmol/L,对照组为(1.41±0.07) mmol/L(P＜0.01).术后6h实验组TNF-α为(266.09±8.84)ng/L,对照组为(286.81±11.54) ng/L (P＜0.01);术后24 h实验组TNF-α为(190.39±4.24) ng/L,对照组为(218.49±15.51 )ng/L(P＜0.01).实验组ZO-1的表达高于对照组.结论 肠黏膜下移植BMSC可以减轻小肠缺血再灌注损伤.     

Role of extrinsic innervation in jejunal absorptive adaptation to subtotal small bowel resection: A model of segmental small bowel transplantation

Segmental small bowel transplantation offers theoretic advantages over total jejunoileal transplantation, but the regional ability of the transplanted segment to adapt is unknown. Absorption was measured in an 80 cm jejunal segment via a triple-lumen perfusion technique. Separate experiments measuring absorption of four nutrients (glucose, glutamine, oleic acid, and taurocholic acid) were performed before and 2 and 12 weeks after operative intervention. Control dogs (CON, n = 6) underwent distal 50% enterectomy. Experimental dogs (EXT DEN, n = 6), in addition to resection, underwent complete extrinsic denervation of the remaining jejunum. All dogs developed diarrhea, which rhesolved in all CON dogs but persisted in all EXT DEN dogs. Maximal weight loss was greater in the EXT DEN group. Glucose and oleate absorption was decreased 2 weeks after ileal resection in both the CON and EXT DEN dogs; glutamine absorption was decreased at 2 weeks in EXT DEN dogs only. Taurocholate and water absorption remained unchanged in both groups. Absorption of all solutes returned to baseline at 12 weeks in both groups. Despite greater weight loss and persistent diarrhea in EXT DEN dogs, at 12 weeks there were no differences in net absorptive fluxes between the EXT DEN and the CON group after extrinsic denervation. The extrinsic denervation necessitated by small bowel transplantation does not appear to blunt the net jejunal adaptive response to total ileal resection, but may temporarily alter glutamine absorption. Presented in part at the Forty-Second Annual Meeting of The Society for Surgery of the Alimentary Tract, Atlanta, Georgia, May 20–23, 2001 (oral presentation) and published as an abstract in Gastroenterology 120:A63, 2001. Supported in part by a grant from the National Institutes of Health (NIH RO1 39337 toM.G.S.) and the Department of Surgery, Mayo Clinic.     

不同剂量利多卡因对脓毒症大鼠小肠HMGB1表达的影响

目的 评价不同剂量利多卡因对脓毒症大鼠小肠高迁移率组蛋白B1( HMGB1)表达的影响.方法 成年雄性Wistar大鼠50只,体重200～250 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n=10):假手术组(S组)不行盲肠结扎穿孔术;脓毒症组(Sep组)采用盲肠结扎穿孔术法制备脓毒症模型;不同剂量利多卡因组(L1～3组)于术后即刻、1、2h时分别腹腔注射利多卡因5、10、20 mg/kg,S组和Sep组分别给予等容量生理盐水.于术后24、48 h时各组随机取5只大鼠处死取小肠组织,光镜下观察小肠组织病理学形态,采用PCR技术检测HMGB1 mRNA的表达,ELISA法测定二胺氧化酶(DAO)活性.结果 与S组比较,Sep组和L1～3组各时点大鼠HMGB1 mRNA表达上调,DAO活性降低(P＜0.05);与Sep组比较,L1～3组大鼠HMGB1 mRNA表达下调,DAO活性升高(P＜0.05);各时点L1-3组大鼠HMGB1 mRNA表达依次下调,DAO活性依次升高(P＜0.05).L1-3组小肠组织病理学损伤较Sep组减轻.结论 利多卡因可呈剂量依赖性减轻脓毒症大鼠小肠损伤,其机制可能与抑制HMGB1表达上调有关.     

早期肠道喂养对烧伤大鼠肠道一氧化氮合酶的影响

目的阐明烧伤大鼠经早期肠道喂养后肠组织中一氧化氮合酶(NOS)的变化规律及其与肠粘膜血流量(IMBF)的关系。方法采用30％TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,分为正常对照(C)组,单纯烧伤(B)组和早期喂养(EF)组,分别检测伤前及伤后0,3,6,12,24,48小时肠组织中 NOS 活性,包括原生型 NOS(cNOS)和诱导型 NOS(iNOS),并测定肠粘膜血流量。结果烧伤后各组 cNOS 和 IMBF 呈下降趋势,二者呈显著正相关(r=0.97,P<0.01),而 NOS 总活性和 iNOS 活性都呈上升趋势,IMBF 与 iN-OS 和总 NOS 相关不显著。烧伤后 EF 组 cNOS 和 IMBF 明显高于 B 组,iNOS 则低于 B 组,NOS 总活力两组无显著差异。结论①两型 NOS 中 cNOS 与 IMBF 的关系更加密切。②早期肠道喂养改善烧伤后肠道缺血状况,可能与食物对肠壁神经的刺激从而提高 cNOS 活性有关。     

肠缺血/再灌注损伤时中性粒细胞呼吸爆发活性的变化

目的:研究肠缺血/再灌注(I/R)时中性粒细胞(PMN)呼吸爆发活性的变化.方法:30只成年雄性Wistar大鼠,按照随机数字表法分为假手术,缺血45 min,缺血45 min再灌注60min、120min、360min等5组.阻断肠系膜上动脉血流45min后复流,复制I/R模型:假手术组只进行同样的手术操作但不阻断肠系膜上动脉血流.在各时间点分别取门静脉血测定白细胞计数,并分离PMN进行化学发光(CL)测定.结果:肠I/R损伤过程中,缺血组与假手术组比较,PMN的CL峰值无明显差异(P＞0.05),再灌注组PMN的CL峰值均明显升高(P＜0.01).肠缺血组白细胞数量较假手术组降低,再灌注后开始回升,再灌注360 min时白细胞计数最高.PMN化学发光峰值变化和血白细胞计数的变化趋势呈显著正相关(r=0.748,P＜0.05).结论:肠I/R损伤可激活循环中的PMN,使血中的PMN数量增加,PMN的呼吸爆发化学发光活性明显升高,可能是引起全身炎症反应和器官损害的因素之一.     

n-3脂肪酸、1,6二磷酸果糖和谷氨酰胺改善大鼠移植小肠的吸收功能

目的：探讨n-3脂肪酸（n-3FA),1,6二磷酸果糖（FDP）和谷氨酰胺(GLN）对移植小肠吸收功能的作用。方法：将196只Wistar大鼠分别作为供,受体行全小肠异位移植,手术前后应用n-3脂肪酸和TPN中加入FDP,GLN输注10d。^15N-甘氨酸（^15N-Gly)灌注移植小肠,分析其血浆丰度。结果：^15N-gly1,2和3h的丰度值均以n-3FA FDP GLN组为最高,分别是非必需氨基酸（NEAAs)对照组的9．0,3．0和2．5倍,其余各实验组血浆内^15N-Gly的上升速度及丰度值也明显高于NEAAs(P＜0．05）。结论：外源性n-3FA,FDP和GLN特殊营养支持可明显改善移植小肠的吸收功能。