胃液对BIU-87细胞系细胞凋亡的影响

为探讨胃代膀胱术抑制膀胱肿瘤复发的机制 ,我们采用体外实验方法 ,观察胃液对膀胱癌细胞系ＢＩＵ 87细胞凋亡的影响 ,报告如下。材料与方法　细胞培养及处理 :将ＢＩＵ 87细胞系置于 37℃、5 %ＣＯ2 、含10 %胎牛血清的ＲＰＭＩ 16 40培养基中培养 ,待细胞生长旺盛、进入指数增殖期时 ,收获培养瓶中的细胞 ,调配成 2 .5×10 5个 /ｍｌ细胞悬液 ,接种至预先置有玻片的 2 4孔培养板和Ｔ 75培养瓶 ,实验各组分别加入胃液 (终浓度 7.6 μｍｏｌ/ｍｌ)、稀盐酸 (终浓度 7.6 μｍｏｌ/ｍｌ)、阿霉素 (终浓度 2 μｇ/ｍｌ)和无药培养液 ,继续置于 …     

雅胆子油乳诱导膀胱癌BIU—87细胞凋亡的研究

目的：研究雅胆子油乳对膀胱癌细胞的作用。探讨其抑制膀胱癌的机制。方法：将5ul/ml雅胆子油乳作用于人BIU-87膀胱癌细胞,利用流式细胞仪和透射电子显微镜分析和观察作用结果。结果：鸦胆子油乳阻止ＢＩＵ-87膀胱癌细胞由G0/G1周期进入S期,并诱导人BIU-87膀胱癌细胞的凋亡。结论：鸭胆子油乳抗癌作用机制之一是诱导人BIU-87膀胱癌细胞的凋亡。     

人膀胱癌BIU—87细胞系多重抗药性的形成

应用阿霉素，大剂量短暂冲击结合低浓度持续递增法，逐步诱导人膀胱癌移行上皮细胞系ＢＩＵ－８７，在体外持续培养６个月，获得了具有多重抗药性的ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞。该细胞能在浓度为２．０ｇ／Ｌ的ＡＤＭ中持续增殖。通过测定抗癌药物５０％抑制浓度发现，ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞对阿霉素的敏感性下降了２１倍同时对表阿霉素，长春新碱，足叶乙甙，也具有显著的交叉抗药性，对顺铂，丝裂霉素，５氟尿嘧啶和氨甲喋呤无抗     

三氧化二砷抑制人膀胱癌细胞BIU-87体外生长的实验研究

目的：观察三氧化二砷对人膀胱癌细胞的生长抑制作用,并探讨其机制。方法：采用ＭＴＴ法检测不同浓度的Ａｓ２Ｏ３对人膀胱细胞株ＢＩＵ＿８７的生长抑制率,原位末端转移酶标记技术检测细胞凋亡,ＳＡＢＣ免疫组织化分析ＢＩＵ－８７中ｂｃｌ－２的表达。结果：Ａｓ２Ｏ３可有铲地抑制ＢＩＵ＿８７细胞生长,具有时间、浓度依赖性特点;经药物作用后,膀胱癌凋亡细胞明显增多,凋亡率随作用时间的延长而增高,ＢＩＵ－８７细胞中的     

胃液对膀胱癌细胞系生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

目的 探讨胃液对膀胱癌生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。方法 采用细胞培养、四唑盐比色试验（MTT）、DNA提取及电泳、流式细胞仪和免疫组织化学等方法,观察胃细胞培养、四唑盐比色试验（MTT）、DNA提取及电泳、流式细胞仪和免疫组织化学等方法,观察胃液对膀胱癌细胞系生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。结果 高浓度胃液（19-38mmol/L）抑制膀胱癌细胞系的生长繁殖,低浓度胃液（0.594-9.500mmol/L)则促进膀胱癌细胞系的生长繁殖,胃液能诱导体外培养的膀胱癌细胞凋亡,膀胱癌细胞系BIU-87中bcl-2、bax均有表达（分别为63.5%和41.4%),经胃液、稀盐酸或阿霉素处理后,bcl-2表达下降（分别为34.8%、37.3%和29.6%),bax表达上升（分别为49.3%、47.1%和52.2%),bcl-2/bax比值小于1。结论 胃液能抑制膀胱癌的生长,诱导其凋亡。     

干扰素对膀胱肿瘤细胞膜TNFR表达的影响

目的：探讨用干扰素治疗膀胱肿瘤时对膀胱肿瘤细胞膜肿瘤坏死因子受体（ＴＮＦＲ）表达的影响。方法：用放射配基结合分析法检测α和γ干扰素分别作用于膀胱癌ＢＩＵ－８７细胞前后细胞膜ＴＮＦＲ的变化。结果：膀胱肿瘤细胞膜存在的ＴＮＦＲ，受体的特异性结合量与干扰素深度和作用时间关系密切；γ干扰素对受体表达的影响大于α干扰素。结论：干扰素可以使膀胱肿瘤细胞膜ＴＮＦＲ的表达增加，从而使免疫治疗后高表达的ＴＮＦ可以与     

5‘—FITC标记的PCNA反义寡核苷酸在人膀胱癌细胞BIU—87中的分？…

目的 观察硫代修饰型及天然型ＰＣＮＡ反义寡核苷酸在脂质体介导下或直接转染人膀胱癌细胞ＢＩＵ－８７后在细胞内的分布及其稳定性。方法 将异硫氰酸荧光素（５＇－ＦＩＴＣ）标记的１８ｍｅｒ硫代磷酸化修饰型及未修饰型ＰＣＮＡ反义寡核苷酸在脂质体介导下或直接转染人膀胱癌细胞ＢＩＵ－８７,应用荧光显微镜观察转染细胞及细胞内的时相分布。结果 修饰型反义核酸直接转染细胞后３０分钟,少数细胞胞浆荧光呈离散型、点状分布     

蟾酥酯质体对人膀胱移行细胞癌BIU—87作用的体外实验研究

不同剂量的蟾酥脂质体对体外培养的有膀胱移行细胞癌ＢＩＵ－８７细胞生长有明显抑制作用，且存在药物剂量依赖性，应用图像分析仪（ＩＡＳ）对癌细胞核ＤＮＡ原位定量测定，结果随药物剂量的增加，癌细胞核ＤＮＡ原位含量逐渐减低，ＤＮＡ指数（ＤＩ）由对照组４．０９降为２．５５，从ＤＮＡ的倍体分布直方图上可见癌细胞由高异倍体向低异倍体转化，经统计学分析有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。光镜下发现：癌细胞有明显的空泡样变     

膀胱癌细胞凋亡检测方法的比较研究

目的 比较几种检测羟基喜树碱（ＨＰＴ）诱导的膀胱癌细胞凋亡的方法。方法 通过流式细胞分析观察ＨＰＴ诱导Ｔ２４膀胱癌细胞凋亡的量效关系;通过荧光染色对凋亡细胞的形态特征进行分析;直接使用苏木素染色进行细胞凋亡的检测;应用ＤＮＡ分析进行ＤＮＡｌａｄｄｅｒ检测。结果 （０．０１￣１０）μｇ／ｍｌ的ＨＰＴ在体外能够诱导Ｔ２４细胞凋亡,其最佳诱导时间在３小时以后。流式细胞（０．０１￣１０）μｇ／ｍｌ的ＨＰ     

转染XIAP基因对丝裂霉素诱导膀胱癌细胞凋亡的影响

目的：探讨XIAP基因对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导膀胱癌细胞凋亡的影响。方法：脂质体介导XIAP基因转染膀胱癌T24细胞3天后．用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测XIAP基因的表达．用低剂量MMC诱导细胞凋亡启动,用MTT比色法分析检测癌细胞生长活性．用3末端脱氧核苷酰转移酶介导生物素标记法检测细胞凋亡率。结果：各组癌细胞在低剂量MMC的诱导下发生凋亡、与单用MMC组比较．转染XIAP基因的癌细胞组的凋亡率显著降低。结论：XIAP基因在癌细胞中的过度表达可以明显降低化疗药物诱导的膀胱癌细胞凋亡,其可能在膀胱癌多药耐药中起一定作用。     

抑制端粒酶活性诱导膀胱癌细胞凋亡的研究

目的 探讨抑制端粒酶粒酶活性各市县导膀胱癌细胞凋亡的可能性。方法 采用具有5′-d(TTAGGG)-3′序列的硫代磷酸反义寡核苷酸（PS-ODN）与膀胱癌EJ细胞共培养,观察细胞内端粒酶活性变化。细胞生长状态及细胞凋亡形态学变化。结果 经PS-ODN处理的膀胱癌细胞内端粒酶活性下降或消失,细胞生长状态受到明显抑制,并出现细胞凋亡特有的形态变化。结论 具有5′-d(TTAGGG)-3′序列的PS-ODN能够抑制膀胱癌细胞内的端粒酶活性,抑制膀胱癌细胞生长,诱导膀胱癌细胞凋亡。     

p16基因转染对膀胱癌细胞系BIU-87体外生长的抑制作用

为探讨ｐ16基因在膀胱癌发生、发展过程中的作用及其在膀胱癌基因治疗中的应用前景 ,我们将野生型ｐ16基因导入缺失 ｐ16基因的ＢＩＵ 87细胞中 ,观察 ｐ16基因的肿瘤抑制功能。一、材料与方法1.ｐ16基因重组表达载体的构建与鉴定 :质粒 ｐＧＲＥ5 1含全长 0 .96ｋｂ的人 ｐ16ｃＤＮＡ基因片段 ,用ＥｃｏＲＩ和ＸｈｏＩ双酶切 ｐＧＲＥ5 1分离出ｐ16ｃＤＮＡ基因片段 ,将其插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ3( 5 .4ｋｂ)的ＥｃｏＲＩ/ＸｈｏＩ酶切位点间 ,构建成重组质粒 ,命名为 ｐｃＤＮＡ3 ｐ16,酶切、电泳鉴定。2 .ｐ16基因转染ＢＩＵ 87细…     

X射线照射诱导膀胱癌细胞凋亡的研究

目的 探讨Ｘ射线照射对膀胱癌细胞系存活状态的影响。方法 应用荧光染料（ＥＢ和ＡＯ）染色、荧光显微镜观察法，对膀胱癌ＥＪ和ＢＩＵ－８７细胞用不同剂量Ｘ射线照射及照射后不同时间收集细胞检测。结果 Ｘ射线照射可诱导诱胱癌细胞凋亡和坏死，细胞凋亡和坏死的多少与照射剂量及照射后的时间长短有关。在照射１００－１０００ｃＧＹ时凋亡细胞数明显增多，照射１０００￣２０００ｃＧＹ时坏死细胞数明显增多，随照射剂量增加和     

VEGF-C对膀胱癌T24细胞增殖与丝裂霉素诱导T24细胞凋亡影响的研究

目的:探讨VEGF-C对膀胱癌T24细胞增殖及抑制丝裂霉素(MMC)诱导T24细胞凋亡的影响。方法:采用MTT及流式细胞术(FCM)等方法观察不同浓度(0、50、100、200μg/L)VEGF-C对T24细胞生长及MMC诱导的T24细胞凋亡的影响。所有实验重复3次。结果:随着预处理VEGF-C浓度的增加,T24细胞的增长率由27.3%上升到65.0%;MMC诱导的T24细胞凋亡率由29.5%下降至14.0%。结论:VEGF-C促进膀胱癌T24细胞的增殖和抑制MMC诱导的细胞凋亡;抑制VEGF-C作用通路可能防治膀胱癌复发。     

8-溴-环腺苷酸对人膀胱癌BIU-87细胞生长相关基因表达的影响

目的　探讨8-溴-环腺苷酸（8-Br-cAMP）对人膀胱癌BIU-87细胞生长相关基因表达的影响。方法　体外培育的人膀胱癌BIU-87细胞受终浓度为1×10-5mol/L的8-Br-cAMP处理后,用RNA斑点印迹技术研究与细胞生长相关的几种基因表达的变化。结果　实验组较对照组c-erbB-2基因表达减弱（478.50±221.64对1404.00±342.25,P＜0.005)、H-ras基因表达减弱(559.00±267.72对2363.25±324.00,P＜0.01)、突变型p53基因表达减弱(1444.83±353.70对365.0±52.13,P＜0.02);而野生型p53基因表达增强(853.33±73.31对1318.25±353.70,P＜0.001)。结论　8-Br-cAMP可通过影响有关信号传递和细胞周期进程基因的表达而抑制细胞生长。     

NOB1基因对膀胱癌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的探讨干扰NOB1基因对膀胱癌细胞凋亡和Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将膀胱癌T24细胞分为对照组(CON组),不进行转染、siRNA阴性对照组(siRNA-CON)、NOB1-siRNA组。分别采用RT-PCR和Western blot检测转染后三组细胞中NOB1 mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测细胞活力;流式细胞技术检测细胞凋亡情况;Western blot检测β-catenin和c-Myc蛋白表达水平。用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535处理NOB1-siRNA组细胞,设置为NOB1-siRNA-FH535组,检测细胞活力、细胞凋亡情况和β-catenin、c-Myc蛋白表达水平。结果NOB1-siRNA组NOB1 mRNA和蛋白表达水平均低于siRNA-CON组和CON组,差异有统计学意义(P<0.05)。NOB1-siRNA组细胞活力低于siRNA-CON组和CON组,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞检测结果显示,NOB1-siRNA组细胞凋亡率高于siRNA-CON组和CON组,差异有统计学意义(P<0.05)。NOB1-siRNA组β-catenin和c-Myc蛋白表达水平均低于siRNA-CON组和CON组,差异有统计学意义(P<0.05)。NOB1-siRNA-FH535组细胞活力低于NOB1-siRNA组(P<0.05)。流式细胞技术检测结果显示,NOB1-siRNA-FH535组细胞凋亡率高于NOB1-siRNA组(P<0.05)。Western blot检测结果显示,NOB1-siRNA-FH535组β-catenin及c-Myc蛋白表达水平低于NOB1-siRNA组(P<0.05)。结论干扰NOB1表达可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活而促进膀胱癌细胞的凋亡。     

羟基喜树碱诱导膀胱癌T24细胞凋亡的研究

目的探讨羟基喜树碱（HCPT）诱导膀胱癌T24细胞凋亡与氧化应激的关系。方法体外培养人膀胱癌T24细胞,以0.10～100.00 mg/L的羟基喜树碱处理6～48 h后,MTT法测定细胞抑制率,得出HCPT的IC50和最佳作用时间,DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测细胞凋亡情况。HCPT 10.00 mg/L作用细胞24 h后,采用生物化学方法检测SOD、MDA、LDH、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、活性氧以及谷胱甘肽（glutathione,GSH）与谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase,GR）的水平并与正常值对照,分析HCPT对T24细胞氧化与抗氧化系统的影响。结果0.10～100.00 mg/L的HCPT均能抑制T24细胞增殖并诱导调亡,其作用具有时间及浓度依赖性。细胞生化指标分析HCPT明显提高了培养上清液LDH的活力,降低了细胞内LDH的活力;细胞内SOD、T-AOC、GSH及GR的水平明显减少（P〈0.05）,MDA、活性氧的水平显著升高（P〈0.05）。结论通过诱导激活氧化应激致使凋亡抑制细胞增殖可能是HCPT抗肿瘤作用机制之一。     

吡柔比星诱导膀胱癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨吡柔比星诱导膀胱癌细胞凋亡的机制.方法 采用MTT法、流式细胞术、透射电子显微镜和RT-PCR技术,研究不同浓度的吡柔比星对人膀胱癌细胞株T24的抑制作用,并检测Survivin mRNA表达的变化.结果 吡柔比星浓度为10.0和100.0 mg/L时,对T24细胞生长的抑制率分别为89.48%和90.89%,G期前出现明显的凋亡峰.吡柔比星能明显下调Survivin蛋白的表达水平,具有浓度依赖性.结论 吡柔比星诱导膀胱癌细胞凋亡是通过抑制Survivin蛋白的表达,且在一定剂量范围内具有浓度依赖性.     

全反式维甲酸诱导人膀胱癌细胞T24凋亡的研究

目的　探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ） 诱导人膀胱癌细胞Ｔ２４ 凋亡的可能性。方法　应用细胞和分子生物学技术检测不同浓度ＡＴＲＡ 对Ｔ２４ 细胞生长和凋亡的影响。结果　３ ×１０－５ ～３ ×１０－ ７ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ可显著抑制Ｔ２４ 细胞增殖。用３×１０－５ ｍｏｌ／Ｌ和３×１０－ ６ ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ 作用细胞６ 天,可出现典型凋亡特征;３ ×１０－５ 、３×１０－ ６ ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ 组及对照组的细胞凋亡率分别为２０ ．１６ ％ 、１５ ．３１％和１ ．４９ ％ ;ＤＮＡ 琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡特征性的ＤＮＡ 梯形带。结论　ＡＴＲＡ对人膀胱癌细胞Ｔ２４ 有剂量生长抑制作用,且可成功地诱导人膀胱癌细胞Ｔ２４ 发生凋亡。