雷公藤内酯醇诱导淋巴细胞凋亡的作用与细胞活化程度的关系

目的　通过观察雷公藤内酯醇诱导 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠脾细胞凋亡与细胞活化程度的关系,探讨该化合物免疫抑制的作用机理。方法　 以脾淋巴细胞为研究对象, Ｐ Ｈ Ａ Ｐ、 Ｐ Ｍ Ａ 和ｒｈ Ｉ Ｌ２ 为有丝分裂原活化淋巴细胞。结合荧光染色法, Ｄ Ｎ Ａ 凝胶电泳及 Ｄ Ｎ Ａ 片段测定等方法,检测雷公藤内酯醇诱导凋亡的作用。结果　（１） 雷公藤内酯醇能够造成活化的淋巴细胞凋亡,并呈浓度依赖性;（２） 雷公藤内酯醇不能使处于静止状态的脾淋巴细胞凋亡;（３） 雷公藤内酯醇诱导淋巴细胞凋亡的作用,与淋巴细胞的活化程度和增殖反应程度密切。结论　雷公藤内酯醇不能造成静止状态的淋巴细胞发生细胞凋亡,只能够诱导已活化淋巴细胞发生细胞凋亡,并以此影响机体的免疫功能。     

抗人活化B淋巴细胞单克隆抗体制备及鉴定

自儿童手术摘除的新鲜扁桃体分离人Ｂ淋巴细胞，经ＰＭＡ（佛波醇）激活后得到人活化Ｂ淋巴细胞，用于免疫ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠后，取免疫小鼠之脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，融合后细胞于含ＨＡＴ－ＩＭＤＭ完全培养基的２％甲基纤维素半固体培养基选择生长，经细胞酶联免疫吸附（ＣＥＬＩＳＡ）筛选间接免疫荧光流式细胞仪鉴定，获培养上清对活化Ｂ细胞及３Ｄ５细胞株细胞反应阳性，而Ｊｕｒｋａｔ细胞株细胞反应阴必的杂交     

LFA-1/ICAM-1单抗对ConA诱导脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响

通过研究ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１单抗对ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞活化增殖及其分泌细胞因子的影响　，探　讨了ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１分子在Ｔ细胞活化过程中所起的共刺激作用。结果表明，单独应用ＬＦＡ－１α链单抗（Ｍ１７／４．４．１１．９）或ＩＣＡＭ－１单抗（ＹＮ１／１．７．４）均不能引起脾淋巴细胞的增殖，但在加入ＣｏｎＡ诱导脾淋巴细胞增殖反应的最初８小时内加入ＬＦＡ－１单抗可以剂量依赖性地抑制ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞增殖反应及脾淋巴细胞分泌ＩＬ－２、ＩＰＮ－γ，而加入ＩＣＡＭ－１单抗却无此效应。说明ＬＰＡ－１在ＣｏｎＡ诱导的Ｔ细胞活化过程中起着重要的共刺激作用，ＬＰＡ－１通过与除ＩＣＡＭ－１以外的其它配体分子（如ＩＣＡＭ－３）相互识别，提供Ｔ细胞活化所必需的共刺激信号。     

CTLA-4及其在T细胞活化中的作用

细胞毒性Ｔ淋巴细胞相关分子－４（ＣＴＬＡ－４）和ＣＤ２８的结构相似，在转录水平和蛋白的亚细胞运输水平对其表达进行调控，和Ｂ７－１、Ｂ７－２的亲和力极高，主要与Ｂ７－１分子形成受体／配体对，相互作用可以抑制Ｔ细胞的增殖、活化，是机体维持淋巴细胞稳态平衡的关键环节。被磷酸化的ＣＴＬＡ－４和Ｓｙｐ磷酸酯酶的ＳＨ２功能区结合，可导致Ｔ细胞活化的Ｒａｓ途径关闭，此可能为ＣＴＬＡ－４发挥抑制作用的信号传导机制。ＣＴＬＡ－４也为肿瘤和自身免疫性疾病的免疫治疗研究开辟了新的路径。     

淋巴因子对PMA活化的扁桃体B淋巴细胞CD23分子表达的影响

研究了人淋巴因子ｒｈＩＬ－４、ｒｈＩＬ－２、ｒｈＩＦＮ－γ对ＰＭＡ活化的扁桃体Ｂ淋巴细胞ＣＤ２３分子表达的调节作用。实验结果表明：１．ｒｈＩＬ－４能够显著增加ＰＭＡ作用下的Ｂ细胞ＣＤ２３表达，呈剂量依赖性反应；ｒｈＩＦＮ－γ对活化后Ｂ细胞ＣＤ２３表达呈明显抑制作用；ｒｈＩＬ－２对ＣＤ２３表达的抑制作用微弱。２．在ＰＭＡ单独刺激下Ｂ淋巴细胞ＣＤ２３的表达在第３天达高峰，而ＰＭＡ与ＩＬ－４共同作用下ＩＬ－４能够持续促进ＰＭＡ作用下的扁桃体Ｂ细胞ＣＤ２３的高表达，在作用的第５天ＣＤ２３阳性率可高达７５．４％。由此可见Ｂ细胞ＣＤ２３分子的表达受到Ｔ细胞源性淋巴因子的调控，这种调控对于免疫应答的调节可能具有重要意义。此外对Ｂ淋巴细胞经ＰＭＡ及淋巴因子活化后，反映细胞分裂状态的￣３Ｈ－ＴｄＲ、￣３Ｈ－ＵＲ掺入ｃｐｍ值与ＣＤ２３表达的相关性进行探索。发现两者无明显相关性。     

LFA—1／ICAM—1单抗对ConA诱导脾淋巴细胞增殖及分…

通过研究ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１单抗对Ｃｏｎ Ａ诱导的脾淋巴细胞活化增殖及其分泌细胞因子的影响，探讨了ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１分子在Ｔ细胞活化过程中所起的共刺激作用。结果表明，单独应用ＬＦＡ－１α链单抗（Ｍ１７／４．４．１１．９）或ＩＣＡＭ－１单抗（ＹＮ１／１．７．４）均不能引起脾淋巴细胞的增殖，但在加入ＣｏｎＡ诱导脾淋巴细胞增殖反应的最初８小时内加入ＬＦＡ－１单抗可以剂量依赖性地抑制ＣｏｎＡ诱导     

抗APO-1单抗促进SEB活化的淋巴细胞凋亡及其与胞内游离Ca2+浓度相关性研究

为探讨抗ＡＰＯ－１单抗处理的金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）活化的淋巴细胞胞浆中游离Ｃａ２＋浓度的变化，用形态学观察、流式细胞光度术观测了鼠抗人ＡＰＯ－１单克隆抗体对ＳＥＢ活化不同天数的人外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用，同时采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针检测了ＡＰＯ－１单抗处理的淋巴细胞胞浆内游离Ｃａ２＋浓度。结果表明，抗ＡＰＯ－１单抗对ＳＥＢ活化１ｄ和对照组淋巴细胞无明显的促凋亡作用，但对ＳＥＢ活化５ｄ的淋巴细胞不仅可明显促进其凋亡，而且可使其胞浆游离Ｃａ２＋浓度升高，而Ｚｎ２＋则抑制了抗ＡＰＯ－１单抗的凋亡诱导作用。由此可见，抗ＡＰＯ－１单抗与其特异性抗体结合后可能是通过使胞浆中游离Ｃａ２＋浓度升高，激活了Ｃａ２＋／Ｍｇ２＋依赖的内源性核酸内切酶而导致ＳＥＢ活化的淋巴细胞凋亡。     

蜂毒多肽BVI-2对T细胞及THP-1细胞功能的影响

目的：探讨蜂毒多肽ＢＶＩ中有效的抗炎成份及其作用机制。方法：观察蜂毒多肽对小鼠脾淋巴细胞转化、ＩＬ－１合成及ＴＨＰ－１细胞合成ＴＮＦα的影响。结果：蜂毒多肽ＢＶ、ＢＶＩ、ＢＶＩ－２可抑制ＣｏｎＡ（２．５μｇ／ｍｌ）诱导的小鼠脾淋巴细胞转化、ＩＬ－１合成及ＰＭＡ（１００ｎｇ／ｍｌ）诱导的ＴＨＰ－１细胞合成ＴＮＦα。结论：利用高效液相色谱相分离得到的蜂毒多肽ＢＶＩ－２具有一定的抗炎作用。     

抗APO—1单抗促进SEB活化的淋巴细胞凋亡及其与胞内游离Ca^ …

为探讨ＡＰＯ－１单抗处理的金黄色葡萄球菌肠毒菌Ｂ活化的淋巴细胞胞浆中游离Ｃａ６２＋浓度的变化，用形态学观察，流式细胞光度术观测了鼠抗人ＡＰＯ－１单克隆抗体对ＳＥＢ活化不同天数的人外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用，同时采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针检测ＡＰＯ－１单抗处理的淋巴细胞浆内游离Ｃａ＾２＋浓度。     

活化淋巴细胞核抗原发生性质和量的变化

为什么活化淋巴细胞核能诱导ＡＮＡ生成 ?推测活化时细胞发生两方面的变化 :一是核抗原性质改变 ,即变成免疫原性 ;二是核抗原量的增加。一、活性ＤＮＡ是自身免疫原我们从ＣｏｎＡ活化的小鼠脾细胞和正常小鼠脾细胞中提取ＤＮＡ ,分别免疫同系小鼠。结果活性ＤＮＡ能诱导抗ＤＮＡ抗体生成 ,同时伴有抗组蛋白、抗ＳＳ -Ａ、抗ＳＳ -Ｂ等多种ＡＮＡ产生及肾损伤等多种病理变化 ,而未活化的ＤＮＡ不能诱导ＡＮＡ生成。二、活性组蛋白也是自身免疫原我们从ＣｏｎＡ活化的小鼠脾细胞中提取组蛋白 ,也具有免疫原性 ,能诱导抗组蛋白抗体及抗ＤＮＡ…     

活化的扁桃体淋巴细胞上CD23分子的表达

本文报道观察扁桃体单个核细胞、Ｔ淋巴细胞、Ｂ淋巴细胞经淋巴细胞活化剂ＰＭＡ、ＰＨＡ刺激４８小时后细胞膜表面ＣＤ２３分子的表达情况。实验表明上述细胞经活化后ＣＤ２３分子的表达均有不同程度的增高，以ＰＭＡ活化后的Ｂ淋巴细胞增高表达最明显，ＣＤ２３阳性率由活化前的２８．７６±３．１９％增高为３５．３４±２．３４％。Ｔ细胞经ＰＨＡ、ＰＭＡ活化后，ＣＤ２３表达也有微弱增高。     

人B7—1分子对小鼠淋巴细胞活化的辅助刺激作用

本文用脂质体法将人Ｂ７－１基因导入小鼠前胃癌细系ＦＣ及人白血病细胞系ＨＬ６０，获得了稳定高效表达Ｂ７－１分子的ＭＦＣ和ＨＬ６０克隆（分别命名为Ｂ７和ＨＬ６０－Ｂ７）。在ＭＦＣ－Ｂ７及ＨＬ６０－Ｂ７刺激鼠脾淋巴细胞的增殖实验中，野生型肿瘤细胞中只能引起微弱的增殖反应，而转染Ｂ７－１分子的肿瘤细胞能非常显著刺激脾细胞的增殖（Ｐ＜０．００１）。这种效应能被抗Ｂ７－１单抗所阻断。结果表明人Ｂ７－１分子能为鼠淋巴细胞的活化增殖提供辅助刺激信号。     

小鼠胸腺基质细胞单抗对胸腺细胞及脾细胞增殖的抑制作用

试验两种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞（ＭＴＳＣ）ＭｃＡｂｓＰｆ１８－３、Ｒｓ２１－Ｃ６的生物作用。Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ识别分子表达于胸腺细胞、脾脏Ｔ及Ｂ细胞；Ｒｓ２１－Ｃ６只表达于ＭＴＳＣ。加Ｐｆ１８－３或Ｒｓ２１－Ｃ６于ＭＴＥＣＩ与胸腺细胞或脾细胞的体外培养中，在ＣｏｎＡ存在及不存在下，均可抑制ＭＴＥＣ１诱导胸腺细胞及脾细胞的增殖作用。ＣｏｎＡ活化下，其对胸腺细胞增殖的抑制率Ｐｆ１８－３为９６％；Ｒｓ２１－Ｃ６为９１％。对脾细胞的抑制率Ｐｆ１８－３为７５％；Ｒｓ２１－Ｃ６为５１％。Ｐｆ１８－３对单纯ＣｏｎＡ活化的胸腺细胞增殖也有显著的抑制作用，而Ｒｓ２１－Ｃ６无此作用。包被于平皿的固相Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ，对胸腺细胞、脾细胞均有轻度但显著的促增殖作用。故Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ识别的抗原分子（及其配基）参与Ｔ细胞的活化过程。鉴于Ｐｆ１８－３＋细胞的分布有其特异性，分析此抗原分子的功能有重要的意义。     

CD226在猴睾丸分布的免疫组织化学研究

１９８５年, Ｂｕｒｎｓ等［１］以活化的 Ｔ细胞为免疫原,制备了抗活化Ｔ细胞表面抗原的单克隆抗体（ｍＡｂ）,并将其中 １株ｍＡｂ Ｌｅｏ－Ａ１识别的抗原命名为人Ｔ细胞谱系特异性活化抗原 １（Ｔ ｌｉｎ－ｅａｇｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｔｉｇｅｎ１, ＴＬｉＳＡ１）。 ｍＡｂＬｅｏ－Ａ１在混合淋巴细胞反应中,可抑制细胞毒Ｔ细胞（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ, ＣＴＬ）分化。随后Ｓｃｏｔｔ等［２］发现, ＴＬｉＳＡ１也高表达于血小板表面,可刺激血小板的活化和凝集,遂将此抗原…     

AC－cAMP－PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动剂，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成为研究手段，探讨了ＡＣ－ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义。研究结果表明ＡＣ、ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激的反应中起着重要作用。在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下。活化ＡＣ、升高细胞内ｃＡＭＰ水平可显著降低ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成，而ＰＫＩ却能在一定程度上促进淋巴细胞活化增殖。     

人源化IL—2免疫毒素的构建和鉴定

利用基因工程技术在大肠杆菌表达成功人白细胞介素２（ＩＬ－２）和人血管生成素（Ａｎｇｉｏｇｅｎｉｎ）的融合蛋白（ＩＬ－２－Ａｎｇ）。活性检测证明，它具有ＩＬ－２免疫毒素的作用，在体外可以杀伤ＩＬ－２依赖性ＣＴＬＬ细胞株和经ＣｏｎＡ活化的小鼠脾脏ＩＬ－２Ｒ阳性细胞。在双相混合淋巴细胞培养试验中，ＩＬ－２－Ａｎｇ可抑制淋巴细胞的增殖。在体内实验中，ＩＬ－２－Ａｎｇ注射小鼠可使其抗原活化的脾细胞数量减少。由于ＩＬ－２和Ａｎｇ均为正常人体成分，ＩＬ－２－Ａｎｇ融合分子作为人源化免疫毒素可望具有更好的应用前景。     

抗B-CLL Id x抗CD3双特异性抗体的制备及其特性研究

应用无筛选标记细胞株杂交瘤·杂交瘤细胞直接融合法制备了２株分泌抗慢性Ｂ淋巴细胞白血病（Ｂ－ＣＬＬ）Ｉｄｘ抗ＣＤ３双特异性抗体（ＢｓＡｂ）的四价体瘤细胞株。采用间接ＥＬＩＳＡ试验与间接免疫荧光试验证明了该ＢｓＡｂ能分别与Ｂ－ＣＬＬ患者血清及带ＣＤ３标记的细胞特异性结合,经细胞结合试验证明该ＢｓＡｂ同时具备与Ｉｄ及ＣＤ３两种抗原结合能力,经酶桥联法证明该ＢｓＡｂ亚类为ＩｇＧ１×ＩｇＧ２ａ,用ＭＴＴ法证实ＢｓＡｂ能诱导Ｔ细胞活化增殖     

复合性颌骨畸形病人整复手术前、后的免疫状况

对４１例复合性颌骨畸形病人施行整复手术，手术前、后进行免疫学检查。手术前和健康人相比较，９１－７％的病人Ｔ淋巴细胞减少，活化的Ｔ细胞减少，Ｔ辅助细胞减少，Ｔ抑制细胞／Ｔ辅助细胞比值增高。５５－５％的病人Ｂ淋巴细胞减少，６１－６％的病人ＩｇＡ水平降低，７５％的病人ＩｇＧ水平增高，９１－７％的病人ＩｇＭ水平降低，６６－６％的病人中性白细胞吞噬活动增高。手术后和手术前相比较，①３７－５％的病人出现免疫抑制：Ｔ淋巴细胞减少，主要是Ｔ辅助细胞减少；Ｂ淋巴细胞减少，Ｎ细胞（无标记细胞）增多，ＩｇＡ和ＩｇＧ水…     

抗核抗体启动原新观点的学术意义

新近 ,我们根据本室近十年的研究结果 ,提出了活化淋巴细胞核抗原量和性质的改变是诱导抗核抗体生成的启动原的新观点 ,其主要依据是 :①ＳＬＥ患者外周血Ｂ细胞、Ｔ细胞和单核细胞已被活化[1,2 ] ;②空肠弯曲菌 (ＣＪ Ｓ131)活化的Ｔ细胞接种 (ＴＣＶ)不仅不能预防和治疗由ＣＪ Ｓ131所引起的ＳＬＥ样反应 ,反而可引起抗核抗体 (ＡＮＡ)生成[3 ] ;③不同原因活化的Ｔ细胞、Ｂ细胞和ＬＡＫ细胞均能诱导ＡＮＡ生成[4] ;④活化淋巴细胞核、染色质以及ｄｓＤＮＡ和组蛋白均具有免疫原性[5 7] ;⑤活化淋巴细胞的核抗原如ＳｍＢ Ｂ’表达明显增高…     

枸杞对T,B淋巴细胞增殖和T细胞亚群变化的调节作用

本文报告了中药枸杞子（Ｌｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍ，ＬＢ）对Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖和Ｔ细胞亚群的调节作用。实验结果指出，枸杞对未经活化的淋巴细胞没有诱导增殖作用，对于分别经ＰＨＡ和ＰＭＡ活化的淋巴细胞增殖有显著的促进作用（Ｐ〈０．０５），这表明枸杞对活化的Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖有促进作用。选择最大促进效应浓度的ＬＢ对ＰＨＡ活化的Ｔ淋巴细胞亚群的变化进行双标记检测。结果指出，和ＰＨＡ活化后的情况相比，ＬＢ的