脂联素受体1基因在大鼠脂肪组织中的表达及其与肥胖易感性的关系

目的 探讨高脂高能量饮食（HFHCD）诱导下肥胖易感（OP）大鼠与肥胖抗性（OR）大鼠腹膜后脂肪组织脂联素受体1（AdipoR1）基因mRNA表达的差异及其与肥胖易感性的关系。方法 雄性SD大鼠18只，以高脂高能量鼠料饲养2周后，按体质量增值大小分组，增重最多的6只为OP组，增重最少的6只为OR组。OP、OR大鼠继续饲以4周后，观察各大鼠体质量变化和腹膜后脂肪组织湿重，采用RT-PCR技术检测脂肪组织AdipoRl基因mRNA表达水平。结果 1．HFHCD诱导下，OP组大鼠体质量、腹膜后脂肪组织湿重均明显高于OR组（t＇=4．48P〈0．01）；2．OP组大鼠腹膜后脂肪组织中AdipoR1 mRNA表达水平低于OR组，但两者差异无统计学意义（t=2．23P〉0．05）；3．大鼠腹膜后脂肪组织湿重与AdipoR1 mRNA的表达水平存在显著负相关（r=0．735P〈0．05）。结论 AdipoR1表达于脂肪组织。相同饮食条件下，个体发生肥胖的易感性是影响AdipoR1水平的重要因素。     

高脂饮食诱导下肥胖易感大鼠与肥胖抗性大鼠间部分生理学指标差异的研究

目的：探讨高脂饮食诱导下肥胖易感（OP）大鼠与肥胖抗性（OR）大鼠在体重、食量、Lee′s指数、脂肪湿重、血脂及脂肪组织蛋白脂酶（LPL）基因表达等方面的生理学差异。方法：48只大鼠，以高脂饲料饲养1周后，按体重增殖从大到小百分排序，取第75百分位以上 OP组，第25百分位以下为OR组，继续高脂饲养4周；观察各大鼠体重变化、摄食量、Lee′s指数、脂肪湿重、血脂等，采用Northern Blot分析脂肪组织中LPL基因的mRNA表达水平。结果：1.OP大鼠的体重增殖、热能摄入、Lee′s指数及腹腔脂肪湿重均显著高于OR大鼠，但血脂水平两组间无差异；2.高脂饲养1周、5周时OP大鼠体重增值分别是OP大鼠的6.54、4.25倍，热能摄入仅为OR大鼠的1.13、1.15倍；3.OP大鼠脂肪组织中LPL基因的mRNA表达水平显著高于OR大鼠。结论：OP与OR大鼠间存在生理学差异，其原因除OP大鼠热能摄入较多因素外，OP大鼠体内较高的能量效能是其肥胖易感性较高的重要因素，而能量效能与脂肪组织LPL基因的表达水平可能存在密切关系。     

脂肪酸合成酶在高脂饮食诱导的肥胖易感和肥胖抗性大鼠白色脂肪组织中的表达差异

目的 探讨高脂饮食诱导下肥胖易感（obesity-prone,OP）与肥胖抗性（obesity-resistant,OR）大鼠白色脂肪组织（white adipose tissue,WAT）中脂肪酸合成酶（fatty acid synthase,FAS）的表达差异。方法 72只SD大鼠．随机选取12只为标准对照组。基础饲料饲养7周,余60只基础饲料饲养1周后,按体重增值分为0P组、OR组和高脂组．分组后改用高脂饲料继续饲养6周。观察各大鼠体重变化、Lee’B指数、脂肪湿重等;用RT-PCR技术分析WAT中FAS基因mRNA表达水平,Western blolting检测WAT中FAS的蛋白表达差异。结果 OP组体重增值、Lee’B指数及脂肪湿重均高于OR组（P〈0．05）;OP组FAS基因mRNA表达水平高于0R组（P〈0．05）;Op组FAS蛋白表达显著高于0R组（P〈0．001）。结论 OP与OR大鼠的白色脂肪组织中存在FAS基因表达差异。其差异与大鼠发生肥胖的局感程度有关。     

高脂饮食大鼠血清抵抗素水平及下丘脑细胞因子信号转导抑制因子-3 基因表达的变化

目的观察高脂饮食大鼠血清抵抗素水平及下丘脑细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)基因表达变化及其关系,探讨高脂饮食引发肥胖的发生机制。方法雄性6周龄SD大鼠16只。体质量80～100 g。随机分为基础饮食组和高脂饮食组,每组8只。单笼饲养,自由饮食饮水,明暗周期12 h,环境温度21～23℃,每周称体质量、测体长和尾长1次。大鼠饲养9周后,以乌拉坦(0.4 g/kg)深度麻醉,取心脏全血离心,采用ELISA法检测其血清抵抗素水平,葡萄糖氧化酶法检测其血清葡萄糖水平。取其下丘脑组织100～120 mg,用Trizol一步法提取总mRNA,经电泳显示28、18、5 S清晰条带,测定A260/A280>1.8。应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其SOCS-3 mRNA表达水平。PCR产物经18 g/L琼脂糖凝胶电泳后,利用凝胶图像分析系统测定电泳条带密度值,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参照,计算SOCS-3 mRNA相对水平,结果以SOCS-3条带占GAPDH条带密度百分率(%)表示。结果1.高脂饮食组大鼠体质量、体长、尾长及Lee′s指数明显高于基础饮食组(Pa<0.001);2.高脂饮食组大鼠血清血糖及抵抗素水平明显升高,与基础饮食组比较均有显著性差异(Pa<0.01);3.高脂饮食组大鼠下丘脑SOCS-3 mRNA表达水平显著高于基础饮食组(P<0.05);4.二组大鼠血清抵抗素水平与下丘脑SOCS-3 mRNA表达水平无明显相关性(Pa>0.05)。结论高脂饮食可导致大鼠血清抵抗素水平升高,进而诱导SOCS-3基因表达,在肥胖、抵抗素所致的胰岛素抵抗过程中SOCS-3可能发挥了重要的介质作用。     

宫内生长迟缓大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子αmRNA表达与胰岛素抵抗关系的研究

目的探讨内脏脂肪组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达与宫内生长迟缓(IUGR)大鼠成年后胰岛素抵抗(IR)发生的关系,以及生后早期不同的营养模式的远期影响.方法用母鼠全程饥饿法建立IUGR动物模型.32只IUGR新生雌鼠随机分为4组IUGR模型组(S/N组)给予常规饮食,IUGR高热能饮食组(A组),IUGR高蛋白高热能饮食组(B组),IUGR高蛋白质等热能饮食组(C组).各组幼鼠在3周哺乳期间母鼠分别摄取上述饲料.第4周起各组幼鼠断乳后全部改为自由进食常规饮食至实验结束.另以正常母鼠所生正常新生雌鼠8只为正常对照组(C/N组)生后给予常规饮食喂养至实验结束.各组大鼠在48周(中老年期)时分别测定体重、肾周脂肪重量、脂肪组织TNF-αmRNA表达,计算ISI(胰岛素敏感指数)并分析其与TNF-αmRNA表达量及肾周脂重、脂重/体重的相关性.结果IUGR模型组及IUGRA、B组胰岛素敏感性下降,并且脂肪组织TNF-αmRNA表达及肾周脂重、脂重/体重显著高于正常对照组(P<0.05或0.01);IUGR的C组胰岛素敏感性及TNF-αmRNA表达量、脂重/体重与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05).脂肪组织TNF-αmRNA水平与肾周脂肪重量、脂重/体重量呈正相关,与ISI呈负相关.脂重/体重与ISI呈负相关.结论IUGR大鼠成年后发生胰岛素抵抗可能经由中心性肥胖的途径,与腹脂增多、脂肪细胞过度表达TNF-α有关,脂源性TNF-α可能是IUGR胰岛素抵抗的重要协病因素.高蛋白的早期营养模式可能通过实现IUGR个体的骨骼肌的生长追赶而非脂肪追赶避免了中心性肥胖和胰岛素抵抗的发生,是较合理的早期营养饮食模式.     

孕前和孕期高脂饮食对新生仔鼠体格生长及胰岛素样生长因子-1的影响

目的 利用高脂饮食建立动物模型,观察孕前和孕期高脂饮食对新生仔鼠体格生长及胰岛素样生长因子1(IGF-1)的影响.方法 40只雌性SD大鼠采用简单随机抽样方法分为高脂组和对照组,分别喂养35％高脂饲料和普通饲料.喂养8周后,高脂组和对照组各取8只观察母鼠肝脏组织病理;其余与普通饲料喂养的雄性大鼠交配,孕期分别继续给予高脂饲料或普通饲料喂养.新生仔鼠出生24 h内检测各项指标:测量出生体质量和体长(鼻尾长度);酶联免疫吸附试验测定其血清IGF-1水平;生化分析仪检测血生化指标;光镜下观察肝脏组织病理;Western blot检测肝脏IGF-1蛋白的表达.结果 1.高脂组仔鼠的出生体质量和体长均较对照组显著降低(P均＜0.05).2.高脂组仔鼠血清IGF-1水平较对照组下降20.1％,但差异无统计学意义(P＞0.05).3.高脂组仔鼠的天冬氨酸转氨酶(AST)显著高于对照组(P＜0.05),其余各项血生化指标差异无统计学意义(P均＞0.05).4.高脂组母鼠及仔鼠肝组织可见脂肪变,而对照组肝脏病理形态正常.5.高脂组仔鼠肝脏IGF-1蛋白的表达高于对照组(P＜0.05).结论 母亲孕前和孕期高脂饮食会影响胎鼠在宫内的体格生长,可能与IGF-1的下降有关,但导致血清IGF-1下降的病因以及宫内体格生长迟缓的确切病理机制尚有待进一步阐明.     

抵抗素在肥胖大鼠白色脂肪组织中的表达

目的 观察抵抗素mRNA及蛋白在肥胖大鼠白色脂肪组织中的表达,探讨抵抗素与肥胖、胰岛素抵抗发生的相关性.方法 SD雄性大鼠30只,随机分为对照组(15只)和高脂组(15只).对照组大鼠给予普通饲料;高脂组大鼠予高脂肪和高能量型的大鼠饲料喂养,诱导肥胖伴胰岛素抵抗大鼠模型.11周后应用葡萄糖耐量试验检测其0、30、60、90、120 min时血糖值,采用双抗体放射免疫分析法检测其血浆胰岛素水平.全自动生化分析仪测定其血浆游离脂肪酸水平.取附睾周围及肾脏周围脂肪组织,采用RT-PCR半定量法及Western blot 技术检测脂肪组织中抵抗素mRNA和蛋白的表达.采用SPSS 11.5软件进行统计学分析.结果 高脂组大鼠高脂饮食11周,体质量明显增加,出现高胰岛素血症、高脂血症,同时胰岛素的抵抗指数升高、糖耐量出现异常,白色脂肪组织内抵抗素mRNA及蛋白的表达均显著高于对照组大鼠(Pa<0.05).结论 高脂饮食诱导大鼠产生了胰岛素抵抗,胰岛素抵抗的形成可能与高胰岛素状态下较高的抵抗素水平有关.抵抗素可能在肥胖引起胰岛素抵抗中发挥了作用,进而引起2型糖尿病.     

肥胖大鼠血清脂联素水平与血管内皮NF-κB、VCAM-1、ICAM-1关系的研究

目的 建立肥胖大鼠模型,观察肥胖大鼠血清脂联素的变化及动脉血管内皮核因子(NF)-κB、血管内皮细胞黏附分子(VCAM)-1、细胞间黏附分子(ICAM)-1的表达,探讨其在血管病变发生发展中的作用机制.方法 4周龄雄性健康SD大鼠48只,随机分为对照组(18只)和高脂组(30只),给予高脂饲料制备肥胖大鼠模型.8周后,以高脂组大鼠的体质量超过对照组大鼠平均体质量的20%作为肥胖组大鼠.用酶联免疫法检测血清脂联素含量,应用免疫组化技术测定NF-κB、VCAM-1、ICAM-1在血管内皮的表达.结果 高脂组大鼠平均体质量明显高于对照组,(446.82 ± 10.05)g比(365.21 ± 13.20)g,P ＜ 0.01;高脂组中有22只大鼠体质量超过对照组平均体质量20%,作为实验用肥胖大鼠(肥胖组).肥胖组大鼠血清脂联素水平明显低于对照组,(0.61 ± 0.13)ng/ml比(1.00 ± 0.17)ng/ml,P ＜ 0.01,动脉血管内皮NF-κB、VCAM-1、ICAM-1阳性表达显著高于对照组,且肥胖组大鼠血清脂联素水平与血管内皮NF-κB、VCAM-1、ICAM-1表达均呈明显负相关(r ＝ -0.938 ～ -0.891,P均 ＜ 0.001).结论 高脂饮食引起的肥胖可使血清脂联素水平降低,使脂联素对NF-κB的抑制减弱,导致肥胖大鼠血管内皮VCAM-1、ICAM-1表达的增加,从而使动脉血管内膜增厚,血管结构发生改变导致血管疾病的发生.     

有氧运动对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织内脂素表达的影响

目的 在高脂饮食诱导胰岛素抵抗(IR)的基础上,观察有氧运动对大鼠脂肪组织内脂素表达的影响.方法 选取雄性SD大鼠30只,随机分为对照组10只,予基础饲料;模型组20只,予高脂饲料.模型组大鼠予高脂喂养6周,随机分为2个亚组:IR组,继续高脂饮食;有氧运动组,予高脂饲料同时进行有氧运动干预.干预6周后,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测3组大鼠内脏脂肪中内脂素表达的差异.结果 高脂饮食成功诱导了IR,有氧运动显著改善了IR,高脂饮食组大鼠内脏脂肪中内脂素表达水平显著高于对照组,但显著低于运动组.结论 有氧运动可明显改善IR,内脂素在其中起一定的作用.     

高脂饮食对小鼠呼吸道和背根神经节瞬时感受器电位阳离子通道香草酸-1的影响

目的探讨高脂饮食对瞬时感受器电位阳离子通道香草酸-1(TRPV1)在小鼠呼吸系统和背根神经节(DRG)上的表达变化,并研究其对感觉神经元兴奋性的影响。方法将C57BL/6小鼠20只随机分成普通饲料组和高脂饲料组,每组10只。分别喂养相应饲料并监测体重。喂养7周后取两组小鼠肺叶、支气管组织,以及胸3~4段DRG行免疫组化染色检测TRPV1表达水平,并用膜片钳测量DRG动作电位和TRPV1电流。结果经7周饲养后,高脂饲料组平均增重(6.4±2.6 g)显著大于普通饲料组(2.3±0.5 g)(P0.001)。高脂饲料组支气管、肺泡和DRG上TRPV1的阳性表达均明显高于普通饲料组(P0.05)。高脂饲料组DRG上TRPV1电流强度和动作电位激发数目较普通饲料组均明显升高(P0.05)。结论高脂饮食引起小鼠体重明显增加,导致小鼠呼吸系统和外周感觉神经元中TRPV1呈现高表达和易激惹高兴奋性,提示TRPV1可能是导致支气管超高反应病理生理机制中的一个重要因子。