剪切应力作用下血小板活化时钙离子浓度的变化

[目的]探讨剪切应力在血栓性疾病中诱导血小板活化的机制.[方法]采用Fura-2/AM法检测不同剪切应力下的血小板内钙离子浓度,观察其变化.[结果]未受剪切应力作用时血小板内钙离子浓度为(29.88±8.89)nmol/L,在低及高剪切应力作用后钙离子浓度分别上升为(57.32±18.32)nmol/L 及(128.28±56.28)nmol/L,与未受剪切应力作用前相比较均有显著性差异.[结论]剪切应力诱导的血小板聚集与血小板内钙离子浓度的变化有相关性.     

脑安滴丸抗大鼠血栓形成及抑制血小板聚集作用

目的 :观察脑安滴丸 ( NDP)抗血栓形成及抗血小板聚集作用。方法 :利用实验性体内血栓形成测定仪、体外血栓形成测定仪、血小板聚集仪等测定血栓形成时间、血栓干重及湿重、血小板最大聚集率。结果 :NDP高、低剂量组均能延缓体内血栓的形成 ,减少体外血栓的形成量 ,并可明显抑制血小板聚集。上述 3项指标与生理盐水对照组相比差异有显著性。结论 :NDP具有较好的抗血栓形成及抑制血小板聚集作用     

血小板、内皮细胞及白细胞在血栓形成中的相互作用

血栓形成是一个较为复杂的过程,其中血小板、内皮细胞及白细胞的相互作用起着重要的作用,对血栓形成过程中血小板、内皮细胞及白细胞3种细胞之间相互作用的病理、生理变化过程及机理进行综述,旨在探讨3种细胞与血栓形成的关系,为临床血栓性疾病的防治和抗血栓药物的研制提供理论依据。     

灯盏乙素对血栓形成及血小板聚集的影响

目的研究灯盏乙素对血栓形成及血小板聚集的影响.方法采用电刺激大鼠颈动脉血栓模型评价灯盏乙素对血栓形成的影响;应用Born比浊法测定灯盏乙素体内外对兔血小板聚集功能的影响.结果灯盏乙素对电刺激大鼠颈动脉引起的血栓形成具有明显的对抗作用;灯盏乙素体外显著抑制AA和ADP和PAF诱导的兔血小板聚集,其半数抑制浓度(m ed ium inh ib itory concentration,IC50)分别为70.5、39.8和97.7mg/L;灯盏乙素静脉注射也能明显降低AA和ADP、PAF诱导的兔血小板聚集率,且呈剂量-效应关系.结论灯盏乙素有明显的抗血栓形成作用,其机制与其抗血小板聚集作用密切相关.     

纤维连接蛋白在止血及血栓形成中的作用

纤维连接蛋白(FN)是细胞外基质和体液的主要组成成分之一。具有多种生物活性，其作为一种重要的黏性分子与细胞表面的整合素受体结合，参与细胞的黏附、移行、分化和胞外基质的装配、伤口愈合、胚胎发育、免疫与炎症反应等多种生理和病理过程。在血液方面，FN主要参与血小板的黏附与聚集及血栓的形成。本文仅就此作一综述。     

姜黄素对大鼠血小板聚集和血栓形成的影响

姜黄素（Ｃｕｒｃｕｍｉｎ）是从植物姜黄（Ｃｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａ）根茎中提取分离得到的一种酚类色素成分。作者研究了姜黄素对大鼠血小板的聚集和血栓形成的抑制作用。结果表明，姜黄素在体外具有明显的抗血小板聚集作用，ＩＣ５０＝６２．５６μｍｏｌ／Ｌ。整体给药（腹腔注射５０ｍｇ／ｋｇ，１／ｄ，共７ｄ）亦可见大鼠血小板聚集率明显下降，与对照组比较，姜黄素可使血小板聚集率下降３７．６２％（Ｐ＜０．０１）。对于整体血栓形成也有明显的抑制作用，给药后可使血栓湿重较对照组降低６０．３１％（Ｐ＜０．０１）。结果提示，姜黄素在体内和体外均有良好的抑制大鼠血小板聚集和血栓形成的作用，其在防治血栓栓塞性疾病中的应用价值有待进一步研究。     

血竭总黄酮对血小板聚集、血栓形成及心肌缺血的影响

目的：观察血竭总黄酮对大鼠及兔血小板聚集，血栓形成及心肌缺血的影响。方法：采用体外血小板聚集，大鼠体内深静脉血栓形成及结扎冠状动脉所致急性心肌缺血实验模型，结果：血竭总黄酮对体外ADP放导的大鼠血小板聚集及PAF诱导的兔血小板聚集有一定的抑制作用，可明显抑制大鼠实验性深静脉血栓形成及结扎冠状动脉所致急性心肌缺血面积。结论：血竭总黄酮具有一定的活血化瘀和抗血小板，抗血栓形成作用。     

山茶花总黄酮对血小板聚集和实验性血栓形成的影响

目的研究山茶花总黄酮(TFC)对血小板聚集和实验性血栓形成的影响.方法采用体外血小板聚集实验法观察TFC对血小板聚集的影响;采用大鼠动静脉血栓旁路法观察TFC对实验性血栓形成的影响.结果 TFC 1.0、0.5、0.25 g/L能明显对抗胶原诱导的血小板聚集;TFC 60、 30 mg/kg能明显减轻大鼠血栓的湿重.结论 TFC具有明显的抗血小板聚集、抑制血栓形成的作用.     

剪切力作用对血小板膜糖蛋白分子表达的影响

目的　探讨剪切力活化血小板的作用机制。方法　用改制的锥板黏度计对健康人的全血标本分别施加 10 0、15 0、10 0 0、30 0 0s-1的剪切力作用后 ,以血小板膜糖蛋白 (GP)的荧光标记抗体、单色或三色荧光法染色血小板 ,用流式细胞术检测血小板膜PAC 1(活化的GPIIb/IIIa)、CD6 2P(P 选择素 )、GPIb/IX和GPIIb/IIIa的水平。结果　PAC 1、CD6 2P在静止的血小板表面表达很低 ,阳性率分别为 1 7%± 1 1% (n =5 )和 0 9%± 0 5 % (n =5 ) ;受到高剪切力作用后表达水平增加 ,以PAC 1增加更为迅速、明显 ,于 30 0 0s-1剪切力作用 0 5min时达峰值 (73 6 %± 7 4 % ) ,之后很快开始下降 ,CD6 2P的表达相对较缓慢 ,但在观察时间内呈持续上升趋势 ,30 0 0s-1剪切力作用 7min时 ,阳性率为2 6 4 %± 3 5 %。GPIb/IX、GPIIb/IIIa存在于 96 5 %～ 99 4 %的静止血小板表面。血小板膜GPIb/IX水平在低剪切力作用下无明显变化 ,高剪切力作用 1min内有不同程度增加 ,但随后开始下降 ,30 0 0s-1作用 7min时 ,平均荧光强度由静止时的 72 4± 6 7降低到 4 4 9± 4 9(n =5 )。GPIIb/IIIa水平在高剪切力作用下迅速增加 ,30 0 0s-1作用 7min时 ,平均荧光强度由静止时的 98 5± 12 1增高到 15 9 5±2 3 6 (n =5 )。结论　高     

流体剪切力影响成骨细胞生物学功能及分化机制的研究

摘　要：目的　 探讨流体剪切力（FSS）作用下成骨细胞生物学功能及分化机制。方法 4 组大鼠成骨细胞分别施 加 0、30、60 和 120 min FSS（12 dyn/cm2 ）刺激,免疫荧光染色后观察FSS刺激成骨细胞不同时间后的细胞骨架变化,采 用Image J软件计算细胞分形维数,比较细胞内部复杂程度;使用Ca2+试剂盒检测钙响应,碱性磷酸酶（ALP）测试盒检 测ALP活性;Real-time PCR检测FSS刺激不同时间后成骨细胞的BMP2、Runx2、Osterix（Osx）基因表达;Western blot 检测FSS刺激不同时间后成骨细胞的BMP2、Runx2、Osx蛋白表达水平,采用Quantity one进行光密度分析。结果 12 dyn/cm2 FSS刺激成骨细胞可引起细胞骨架形态、微丝丰富度及细胞复杂程度的变化,以 60 min最明显。与 0 min组相比, 细胞Ca2+浓度在FSS刺激 30 min后明显升高,延续至 60 min为高峰平台期（P<0.05）,120 min 后Ca2+浓度回落;60 min 组的BMP2、Runx2、Osx基因和蛋白表达水平均明显上调（P<0.01）;ALP活性升高,在刺激 60 min时最为明显（P<0.05）。 结论 12 dyn/cm2 FSS刺激能改善成骨细胞生物学功能,促进BMP2、Runx2、Osx基因及其蛋白表达上调;能通过改变成 骨细胞骨架促进Ca2+浓度升高,进而激活与分化高度相关的BMP2-Runx2-Osx信号通路,提高成骨细胞分化标志物ALP 活性。     

血流剪切应力诱导人脐带内皮细胞HIAP-2的表达

目的生理水平的血流剪切应力有抑制内皮细胞的凋亡等作用进而发挥抗动脉粥样硬化作用,本研究目的是阐明血流剪切应力抑制血管内皮细胞凋亡的分子机制.方法人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养于DMEM,当细胞融合时将细胞暴露于20 dyne/cm2的剪切应力,分别用Northern blot及Westem blot法检测human inhibitor of apoptosis protein-2(HIAP-2)mRNA及蛋白的表达.结果 HUVECs在静止状态下表达少量mAP-2mRNA及蛋白,在20 dyne/cm2的剪切应力2～6 h刺激下可诱导HUVECs产生HIAP-2 mR-NA,且量明显增加.HIAP-2蛋白在20 dyne/cm2剪切应力4～24 h刺激下表达明显增加.结论本研究证实生理水平剪切应力能够明显诱导内皮细胞产生HIAP-2 mRNA和蛋白的表达,这可能是剪切应力抑制内皮细胞凋亡发挥抗动脉粥样硬化作用的机制之一.     

切应力诱导大鼠颈动脉内皮细胞组织因子表达的检测与分析

目的在体研究切应力诱导内皮细胞TF基因表达变化规律及其机制。方法54只SD大鼠随机分为对照组和颈动脉狭窄组,狭窄组有又分为0.5、1、3、6、12 h、1、3、7 d 8个时相点,套扎法建立左颈总动脉狭窄模型,术后不同时相点用原位杂交和免疫组化法检测TF、Egr、Sp-1的mRNA和蛋白,用图像分析系统测定内膜平均灰度,进行统计学分析。结果正常对照组内皮细胞TF、Egr-1、Sp-1的mRNA和蛋白弱表达,狭窄30 m in后,内皮细胞胞浆组织因子基因mRNA转录和蛋白合成升高,与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。内皮细胞胞核和胞浆的Sp-1和Egr-1基因mRNA转录和蛋白合成均有显著性增加(P<0.05),但以Egr-1增加更显著(P<0.05),其变化趋势与组织因子基因mRNA转录、组织因子基因蛋白合成的变化趋势相同。TF mRNA和蛋白6 h达到峰值,Egr-1 mRNA和蛋白3 h达到峰值,Sp-1 mRNA和蛋白1 h达到峰值,与邻近组比较差异显著(P<0.05)。结论切应力是内皮细胞组织因子基因表达上调的触发因素之一,切应力激活TF与转录因子Egr-1和Sp-1介导有关。     

锌指蛋白ZFP580在低剪切应力诱导的动脉粥样硬化斑块中的表达

[目的]通过观察由低血流剪切应力诱导的小鼠颈总动脉粥样硬化斑块中锌指蛋白ZFP580的表达,探讨其在动脉粥样硬化病变中的作用.[方法]建立颈总动脉局部狭窄动物模型,HE染色观察局部狭窄血管远心端的形态学改变,RT-PCR方法检测动脉组织中ZFP580mRNA的表达,免疫组织化学染色观察锌指蛋白ZFP580在病变处的表达.[结果]小鼠左颈总动脉局部狭窄2周后,远心端血管内膜增厚(P＜0.05),且随处理时间的延长内膜增厚愈加明显(P＜0.01),处理3周后,可见明显的动脉粥样硬化斑块.BT-PCR及免疫组织化学染色发现病变动脉中ZFP580的表达较未处理侧明显升高(P＜0.01),且ZFP580阳性细胞多集中在内膜层.[结论]ZFP580可能在低剪切应力诱导的动脉粥样硬化斑块的形成及发展中发挥重要的调控作用.     

蒲黄抑制大鼠血栓形成的实验研究

目的:观察蒲黄对大鼠血栓形成的影响。方法:Wistar大白鼠35只随机分为5组,制作大鼠动静脉血栓模型,实验组予以蒲黄灌胃,阳性对照组予以阿司匹林灌胃,空白对照组予以生理盐水灌胃,比较实验组和对照组血栓湿重及血流变参数。结果:蒲黄可抑制大鼠动静脉环路血栓的形成,使血栓湿重降低,血栓抑制率达15%~43%;同时蒲黄还可有效改善血流变参数。结论:蒲黄具有明显抗血栓作用。     

Intravenous injection of nicardipine changed the distribution of coronary artery endothelial shear stress and fluid dynamics in patients with unstable angina

Background  Coronary endothelial shear stress (ESS) triggered the development of atherosclerosis. However, the effect of calcium channel antagonist on the distribution of ESS remained unclear.

Methods  Twenty consecutive patients with acute coronary syndrome (ACS) 48 hours after maximal medication with single left anterior descending artery stenosis <50% were studied. Nicardipine was intravenously injected at 1 µg/kg after a bolus of 10 mg in order to achieve mean blood pressure (MBP) reduced by 10% or more, or the heart rate increased by 10–15 beats/min. Hemodynamic variables and angiogram at baseline and during injection of nicardipine were recorded, respectively. Coronary artery 3-D reconstruction was used for the analysis of ESS.

Results  Distal reference-vessel-diameter and minimal lumen diameter decreased significantly from (2.42±0.41) mm and (1.47±0.49) mm at baseline to (2.22±0.35) mm and (1.35±0.49) mm at maximal drug-dosage (P=0.018 and 0.020, respectively). Nicardipine did not change blood velocity. Lowest mean shear stress at segments 2-mm distal to plaque increased significantly from (0.034±0.519) Pa at baseline to (0.603±0.728) Pa (P=0.013) at peak effect of drug.

Conclusions  Nicardipine was associated with the constriction of diseased vessel segment that adapted to the reduction of blood pressure, without dynamic change of blood velocity at each stage of whole cardiac cycle. Increased ESS value at segments distal to plaque reflected the cardioprotection by nicardipine (ChiCTR-TRC-10000964).

     

脉动低切应力致兔颈总动脉粥样硬化的炎性反应机制

目的:研究在体脉动低切应力致实验兔颈总动脉粥样硬化(AS)的炎性反应机制.方法:结扎成年雄性新西兰白兔(体质量2.5～3.0 kg)的左颈外动脉获得左颈总动脉脉动低切应力;然后用高脂(含2%胆固醇)或普通饲料(100 g/d)养兔至2、4、8、12周,取下两侧颈总动脉;用原位杂交技术检测C-反应蛋白(CRP)mRNA和单核趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA,免疫组化方法检测NF-κB、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、PDGF-A、B等蛋白的表达.结果:建立了两类脉动低切应力-AS模型;不论是否喂高脂饲料,脉动低切应力侧(左)颈总动脉均有AS斑块形成,其炎症标志因子CRP、MCP-1、NF-κB、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、PDGF-A、B等的mRNA和蛋白表达比假手术正常切应力对照侧(右颈总动脉)均明显增高.结论:从组织、细胞、分子多个层次和炎症反应多个环节证明了脉动低切应力致AS的炎症机制.为用生物医学工程方法和抗炎药物防治AS提供了依据.     

光量子疗法治疗脑血栓形成70例临床分析

对７０例脑血栓形成作光量子治疗，与对照组作血脂、血液流变学及临床治疗效果等方面比较。血脂、血液流变学等治疗后有较大改善，两组临床治疗效果比较，差异有高度显著性（Ｐ＜Ｏ．０１）。此疗法疗程短，是脑血管病的一种有效新疗法。