黄芪改善脑出血大鼠血脑屏障损伤及TNF—α机制的研究

目的 研究大鼠脑出血后血脑屏障(BBB)通透性与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系及黄芪的干预作用.方法 采用自体动脉血注入尾状核法制成大鼠脑出血模型,免疫组化法观察TNF-α的表达,伊文思蓝法测BBB的通透性,干湿重法计算脑舍水量表示脑水肿.结果 与对照组相比,模型组及黄芪组BBB通透性均在出血后6 h开始升高.1 d～3 d最高,黄芪组明显低于模型组(P<0.05).两组的TNF-α也于6 h开始升高.1 d～3 d达到高峰,黄芪组明显低于模型组(P<0.05).BBB通透性与TNF-α表达呈显著正相关(r=0.604,P<0.05),与脑水肿变化趋势一致.结论 脑出血后产生的TNF-α可能通过炎症反应的启动,增加BBB通透性,参与脑水肿形成和发展,黄芪可改善此过程.     

Toll受体4在急性胰腺炎引起的血-脑脊液屏障通透性增高中的作用

目的 研究Toll受体4(toll receptor-4,TLR-4)在急性胰腺炎(AP)合并中枢神经系统(CNS)损伤中的作用.方法 将64只SD大鼠分为8组:对照组;急性水肿性胰腺炎(AEP)2、6 h组;急性坏死性胰腺炎(ANP)2、6、12、24、48 h组,每组8只.测定血-脑脊液屏障(BBB)通透性、胰腺病理损伤程度、组织TLR-4的表达,并分析其相互关系.结果 对照组,AEP2、6 h组,ANP 2、6、12、24、48 h组的BBB通透性分别为1.55±0.29、1.64±0.17、1.69±0.24、1.89±0.12、2.66±0.32、2.91.4±0.29、2.89±0.69和1.84±0.07;胰腺病理分值分别为0、2.38±0.92、3.13±0.64、8.50±1.07、9.75±0.71、10.25±1.28、1 1.13±1.25和10.13±1.13.AEP组与对照组无显著筹异,ANP各组较AEP组显著升高(P＜0.05或P＜0.01).BBB通透性与胰腺损伤呈正相关(r=0.626,P＜0.01).对照组和AEP组无TLR-4mRNA和蛋白表达,而ANP各组明显表达,其表达水平与BBB通透性水平呈正相关(r=0.208,P=0.027).结论 ANP时存在BBB通透性的升高,CNS内TLR-4信号途径的激活可能参与了ANP所引起的血-脑脊液屏障通透性的升高.     

闭合蛋白在脑缺血中的作用

血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)损伤是缺血性卒中的重要病理学改变.闭合蛋白是构成BBB紧密连接的主要组成部分,在维持BBB完整性中发挥着重要作用.脑缺血通过诱导炎性介质、活性氧和基质金属蛋白酶的激活,启动闭合蛋白降解,并使紧密连接-细胞骨架蛋白相互作用发生改变,导致BBB完整性破坏,通透性增高.文章主要阐述了闭合蛋白与BBB、脑水肿和出血性转化之间的关系以及闭合蛋白作为缺血性卒中干预靶点的可能性.     

血脑屏障完整性与脑小血管病

脑小血管病(cerebral small vessel disease,CSVD)是一组累及小动脉、微动脉、小静脉、微静脉及毛细血管的小血管病变,影像学表现为腔隙性梗死、脑微出血、脑白质病变、血管周围间隙扩大等.近年来,CSVD发病率日益增高,给家庭和社会带来不同程度的经济负担,成为目前的研究热点.血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性改变是CSVD发病的主要原因,文章对BBB完整性与CSVD的关系进行综述.     

脑微环境与Alzheimer病关系研究进展

脑微环境是神经元正常结构与功能活动赖以维持的基础,而血-脑屏障(Blood-brain barrier,BBB)是维持脑微环境的主要结构.BBB最基本的结构是由脑微血管内皮细胞(Brain microvascular endothelial cells,BMECs)、胶质细胞、基膜及相邻神经元等共同构成的神经血管单元(Neurovascular unit,NVU)[1],NVU各成分及相互作用通过改变BBB的稳定性及通透性,从而影响脑微环境.     

单核细胞趋化蛋白-1在重症急性胰腺炎血脑屏障通透性升高中的作用

胰性脑病是急性胰腺炎的重要并发症,发病率为3%～27%,病死率超过40%.目前认为血脑屏障(BBB)损伤和通透性的升高是多种中枢神经系统(CNS)炎症及病变的前提,其在急性胰腺炎中的变化研究尚较少.     

大鼠实验性脑出血后血脑屏障通透性与水通道蛋白4的关系及水蛭素的作用研究

目的研究大鼠脑出血后血脑屏障(BBB)通透性与水通道蛋白4(AQP4)的关系及水蛭素的干预作用。方法采用自体动脉血注入尾状核法制成大鼠脑出血模型,RT-PCR法观察AQP4mRNA的表达,伊文思兰法测量BBB通透性,干湿重法计算脑含水量表示脑水肿。结果与对照组相比,脑出血组及水蛭素组BBB通透性均在出血后6h开始升高〔(0·5955±0·0956)和(0·3594±0·0712)〕,1~3d最高〔(0·8889±0·0968)、(0·7914±0·0520)和(0·5937±0·0505)、(0·5275±0·0492)〕,水蛭素组明显低于脑出血组(P<0·05);两组AQP4mRNA表达也于6h即开始升高〔(1·06±0·12)和(0·83±0·08)〕,3d时达到高峰〔(1·34±0·14)和(1·03±0·05)〕,水蛭素组明显低于脑出血组(P<0·05);BBB通透性与AQP4mRNA表达呈显著正相关(R=0·686,P<0·01),与脑水肿变化趋势一致。结论脑出血后产生的凝血酶可能通过上调APQ4mRNA表达,增加BBB通透性,参与脑水肿形成和发展;水蛭素可抑制此过程。     

rt-PA静脉溶栓对脑缺血大鼠血脑屏障通透性及MMP-2、MMP-9活性和表达的影响

目的 探讨重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓对脑缺血大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2和MMP-9活性及表达的影响.方法 46只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=10)、大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组(n=18)和rt-PA溶栓组(n=18).采用自体血栓栓塞法制作MCAO模型.假手术组不注入血栓栓子,MCAO组仅制作MCAO,rt-PA溶栓组在MCAO后3h给予rt-PA静脉溶栓.2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色法检测脑梗死体积.伊文思蓝渗出法检测BBB通透性.分别采用明胶酶谱法和蛋白质印迹法检测脑组织MMP-2和MMP-9活性和表达.对各组神经功能评分、脑梗死体积、出血评分、BBB通透性以及MMP-2和MMP-9活性和表达情况进行比较.结果 rt-PA溶栓组神经功能较MCAO组显著改善,脑梗死体积也显著缩小(t=7.365,P=0.005),但出血评分(t=-3.286,P=0.017)和BBB通透性(t=-3.947,P=0.029)均显著增加.假手术组MMP-2和MMP-9活性和表达水平均较低,MCAO组MMP-2(t=-45.121,P=0.000;t=-11.624,P=0.000)和MMP-9(t=-71.849,P=0.000;t=-8.992,P=0.000)活性和表达均显著性增高和上调,而rt-PA溶栓组MMP-2(p-28.792,P=0.000;t=-3.809,P=0.013)和MMP-9(t=-53.506,P=0.000;t=-2.640,P=0.046)活性和表达较MCAO组显著性增高和上调.结论 rt-PA静脉溶栓治疗后BBB通透性增加,MMP-2和MMP-9活性和表达增高和上调.MMP-2和MMP-9可能参与了BBB通透性增加,从而诱发脑缺血大鼠rt-PA静脉溶栓治疗后的出血性转化.     

尿激酶溶栓对大脑中动脉血栓栓塞模型大鼠MMP-9、血脑屏障通透性和脑出血的影响

目的 观察栓塞性脑缺血后及应用尿激酶(urokinase,UK)溶栓后基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及对脑出血量和血脑屏障通透性的影响,探讨MMP-9与血脑屏障通透性和溶栓后脑出血之间的关系.方法 通过颈动脉内注射自体血制作大鼠血栓栓塞性大脑中动脉闭摩模型,缺血6h后静脉应用UK,24 h后分别采用免疫组化法检测脑组织MMP-9表达、伊文思蓝渗出法检测血脑屏障通透性、TTC染色法检测脑梗死体积、分光光度法检测脑出血量.结果 脑缺血组MMP-9表达显著高于假手术组(P＜0.01),UK溶栓组显著高于脑缺血组(P＜0.01).脑缺血组伊文思蓝含量为(5774.00±1659.70)ng/g,显著高于假手术组的(643.33±151.34)ng/g(P＜0.01),UK溶柃组为(6283.83±1099.28)ng/g,有高于脑缺血组的趋势.UK溶柃组和脑缺血组脑出血量分别为(3.16±8.84)μl(中位数±四分位数)和(0.00±1.48)μl,脑出血发生率分别为25.00%和4.17%.结论 UK溶栓可能上调 MMP-9表达,MMP-9表达与BBB通透性增加与溶栓后脑出血有关.     

芒柄花黄素对阿尔茨海默病小鼠血脑屏障通透性和海马闭锁小带蛋白-1表达的影响

目的探讨芒柄花黄素(FMN)对阿尔茨海默病(AD)小鼠血脑屏障(BBB)通透性和海马闭锁小带蛋白(ZO)-1表达的影响。方法将雄性小鼠随机分成对照组、模型组、多奈哌齐组(1 mg/kg)、FMN高、中、低剂量组(30.0、15.0、7.5 mg/kg)。采用小鼠双侧海马注射Aβ1～42和腹腔注射D-半乳糖诱导AD小鼠。FMN连续治疗35 d后取材,检测小鼠脑含水量和伊文思蓝(EB)含量,采用免疫组化、实时定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹检测海马ZO-1表达。结果与对照组比较,模型组BBB通透性明显增加(P0.05),海马ZO-1表达明显降低(P0.05)。与模型组比较,FMN高、中剂量组BBB通透性明显降低(P0.05),海马ZO-1表达明显增加(P0.05)。结论 FMN通过上调海马ZO-1表达来降低AD小鼠BBB通透性。     

肿瘤坏死因子α刺激基因6因子对脑梗死大鼠血脑屏障的保护作用

目的探讨肿瘤坏死因子α刺激基因6因子(TSG-6)对脑梗死大鼠血脑屏障(BBB)通透性及紧密连接蛋白ZO-1和Claudin5表达的影响。方法将42只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组6只、溶剂治疗组18只和TSG-6治疗组18只,后2组按再灌注时间分为再灌注1d组、3d组、5d组,每个亚组6只。线栓法制备大鼠大脑中动脉脑栓塞模型。TTC染色评价脑梗死体积;荧光分光光度法测定缺血侧脑组织伊文蓝(EB)含量评价BBB的通透性;神经功能损害评分(mNSS)评价神经功能改善情况;Western blot法检测脑组织ZO-1和Claudin5蛋白的表达。结果与溶剂治疗组比较,TSG-6治疗组大鼠缺血再灌注3d组和5d组mNSS评分、脑梗死体积和伊文蓝含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),TSG-6治疗组3d组和5d组脑梗死侧的ZO-1和Claudin5蛋白含量明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TSG-6能够有效的抑制脑梗死大鼠BBB紧密连接蛋白ZO-1和Claudin5表达的丢失,促进BBB修复,减轻脑水肿,加快神经功能恢复。     

人参三七配伍对脑缺血再灌注损伤小鼠血脑屏障通透性及脑组织炎症反应的影响

目的观察人参和三七配伍提取物对脑缺血再灌注损伤(CIRI)小鼠血脑屏障(BBB)通透性及脑组织炎症反应的影响。方法通过结扎小鼠双侧颈总动脉制备CIRI模型。用红四氮唑(TTC)染色测定CIRI小鼠脑梗死比和脑组织含水量,通过测定渗出脑血管外的伊文思蓝含量,分析人参三七配伍对CIRI小鼠BBB通透性的影响;光学显微镜下观察CIRI小鼠脑组织病理形态,采用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠脑组织中白细胞介素(IL)-1β、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平。结果人参和三七配伍的提取物可明显减少CIRI小鼠脑梗死比及脑组织含水量、降低小鼠脑组织中伊文思蓝含量、改善BBB通透性和脑组织病理状态、降低脑组织IL-1β和TNF-α的表达水平、增加脑组织IL-10的表达水平。结论人参和三七配伍提取物对CIRI小鼠具有显著保护作用,其机制与降低CIRI小鼠BBB通透性及脑组织炎症反应有关。     

中性粒细胞弹性蛋白酶在颅脑损伤大鼠脑组织中的动态变化

目的 探讨颅脑损伤(TBI)大鼠脑组织中的中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)动态变化和血脑屏障通透性及脑含水率的关系.方法 SD大鼠48只,随机分为对照组和TBI组(包括伤后6、24、48、72、168 h),复制大鼠液压打击模型,测定脑组织NE的含量、脑含水量及血脑屏障通透性.结果 TBI组大鼠脑组织NE含量和血脑屏障通透性呈同步性变化,从6h开始升高,48 h达最高峰,72 h逐渐下降,168 h仍高于对照组;TBI大鼠脑组织含水率72 h达最高峰;TBI组大鼠脑组织NE含量、血脑屏障通透性和脑组织含水率在各时间点均高于对照组(P＜0.05).结论 TBI大鼠脑组织内NE含量升高与大鼠伤后血脑屏障开放、脑组织水肿密切相关,NE增加可能是脑创伤后引起血脑屏障开放、脑水肿形成的重要原因之一.     

动态对比增强磁共振对急性脑梗死患者血脑屏障通透性的研究

目的通过动态对比增强(dynamic contrast-enhanced,DCE)MRI定量评估血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的通透性,探讨急性缺血性脑卒中患者BBB通透性的变化及相关影响因素。方法将50例急性缺血性脑卒中患者根据不同治疗方案,分为常规药物组12例,静脉溶栓组19例和取栓组19例,患者在发病72 h内完成DCEMRI(基线时),8例患者发病14 d复查影像检查,发病3个月随访时行改良的Rankin量表(mRS)评分,将mRS评分0~2分为预后良好。使用T1DCE-MRI Extend模型计算BBB通透性指标容积转运常数(Ktrans)值,并计算脑梗死侧与脑梗死对侧Ktrans值的比值(Ki/c)。比较所有患者脑梗死侧与脑梗死对侧、发病14 d复查与基线时、3组Ktrans值和Ki/c值差异,用多因素线性回归分析lg(Ki/c)值的相关影响因素。结果所有患者脑梗死侧Ktrans值较脑梗死对侧明显增高[0.0047(0.0019,0.0087)/min vs 0.0011(0.0003,0.0016)/min,P=0.000];发病14 d复查Ki/c值较基线时明显增高[70.77(13.43,399.43)vs 5.31(3.58,12.64),P=0.012]。常规药物组lg(Ki/c)值为0.42±0.49,静脉溶栓组lg(Ki/c)值为0.77±0.32,取栓组lg(Ki/c)值为0.85±0.41,静脉溶栓组和取栓组lg(Ki/c)值较常规药物组明显升高(P=0.021,P=0.005),静脉溶栓组与取栓组lg(Ki/c)值比较,差异无统计学意义(P=0.534)。常规药物组、静脉溶栓组和取栓组发病3个月预后良好比例比较,差异无统计学意义(66.7%vs 52.6%vs 52.6%,P=0.695)。多因素线性回归分析显示,lg(Ki/c)值与治疗方案(P=0.017)和脑梗死病史(P=0.030)有关。结论急性缺血性脑卒中患者BBB通透性与不同治疗方法、既往脑梗死病史有关,并且发病14 d BBB通透性较72 h内明显增高。     

大脑前部和后部皮质萎缩患者认知功能变化及神经心理学特点

目的了解前部及后部皮质脑萎缩对认知功能的影响,探讨前后部皮质脑萎缩患者神经心理学特点。方法收集头颅磁共振成像(MRI)检查表现为大脑前部皮质萎缩组11例、大脑后部皮质萎缩组12例,选用简易智能精神状态评估(MMSE)量表、蒙特利尔认知评估(Mo CA)量表、日常生活活动能力(ADL)量表及韦氏智力量表中的图画填充测验、木块图测验、数字广度测验对受试者的认知功能进行测试,评估不同大脑皮质区域萎缩后认知功能损害的特点。结果大脑后部皮质萎缩组Mo CA、MMSE总分均显著低于大脑前部皮质萎缩组(P0.05),大脑后部皮质萎缩组ADL总分略高于前部皮质萎缩组,但差异无统计学意义(P0.05)。大脑后部皮质萎缩组视空间测试中的评分显著低于大脑前部皮质萎缩组(P0.05);而注意力、计算力测试中的评分则显著高于大脑前部皮质萎缩组(P0.05)。在图画填充测试中大脑后部皮质萎缩组评分显著低于大脑前部皮质萎缩组(P0.05)。结论大脑前部皮质萎缩以注意力和计算力损害较为突出。大脑后部皮质萎缩以突出的视觉空间损害为特征,此外还合并有短时记忆、注意、定向、知觉及抽象思维等方面的认知功能损害。     

脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注血-脑脊液屏障损伤的保护作用

目的研究脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注（1／R）血-脑脊液屏障（BBB）损伤的保护作用。方法采用线栓法复制局灶性脑缺血模型，分为假手术组、模型组、脑脉通组、尼莫地平组，后3组又分为脑缺血（I）3h和I／R6、12、24h,3、6d时间点。观察脑组织含水量、病理变化、免疫球蛋白（IgG）表达。结果模型组脑组织含水量升高，IgG漏出增加，BBB通透性增加。脑脉通降低脑组织含水量（I／R24h、3d）、减少IgG漏出（I／R24h～6d）、降低BBB通透性。结论脑脉通改善I／R脑损伤作用显著，其机制可能与改善BBB通透性、降低脑水肿有关。     

电针百会透曲鬓穴对急性脑出血大鼠蛋白酶激活受体-1表达的影响

目的探讨电针百会透曲鬓穴对急性脑出血大鼠模型的神经功能缺损及血脑屏障(BBB)通透性的影响及其机制。方法将SD雄性大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、电针组,每组根据6 h、1 d、3 d、7 d不同时间点分为4个亚组。尾状核内注射Ⅶ型胶原酶制作脑出血模型。脑出血术后各时间点进行神经功能缺损评分;通过测量脑组织伊文思蓝(EB)含量来测量BBB通透性;免疫组化和荧光实时定量PCR方法检测蛋白酶激活受体-1(PAR-1)表达变化。结果电针治疗可显著改善模大鼠在脑出血后6 h、1 d、3 d、7 d各时间点神经功能缺损评分和脑组织EB含量,电针治疗组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);免疫组化及荧光实时定量PCR检测显示脑出血后PAR-1的表达,电针治疗组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论电针百会透曲鬓穴可改善急性脑出血神经功能缺损症状,降低BBB通透性,其作用机制可能与减少出血灶周脑组织PAR-1的表达有关。     

常规心电图呈一度房室阻滞并一侧束支阻滞的动态心电图观察

目的 观察常规心电图一度房室阻滞(AVB)并一侧束支阻滞(BBB)的动态心电图(DCC)变化.方法 对29例资料完整者的DCG进行分析.结果 16例常规心电图与DCG诊断无变化;3例除本身心电图特征外,合并极度窦性心动过缓;6例出现二度AVB并一侧BBB;3例出现间歇性左、右束支交替传导;1例出现不全性三支阻滞.结论 对年龄较大同时合并有器质性心脏病者,当心电图上出现一度AVB并一侧BBB时,有潜在发生重症心律失常的风险,必须引起高度重视.     

老年大鼠大脑组织一氧化氮、一氧化氮合酶的变化及神经细胞凋亡研究

目的研究一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)在老年大鼠大脑中的变化及其与神经细胞凋亡的关系. 方法选用5月龄大鼠和30月龄大鼠,利用Griess反应和高压液相技术间接测量大脑NO水平和NOS活性;免疫组化和原位杂交技术分别检测神经元NOS(nNOS)蛋白质水平和nNOS、bcl-2基因水平;末端转移酶标记法原位检测大脑神经细胞凋亡状况. 结果老年大鼠大脑组织NO水平和nNOS活性分别是(2.61±0.10)μmol*L-1和(398.22±21.62)fmol*mg-1*min-1,显著高于青年大鼠的(1.54±0.15)μmol*L-1和(234.38±16.24)fmol*mg-1*min-1.老年大鼠大脑nNOS的基因水平和蛋白表达水平均升高,抗凋亡基因bcl-2水平降低.在老年大鼠大脑质皮检测到散在的凋亡细胞. 结论老年大鼠大脑组织NO水平升高是由于nNOS活性升高所致.nNOS活性的增高部分是由其基因和蛋白水平来决定的.老年大鼠大脑组织NO异常升高可能是导致神经组织损伤进而凋亡的原因之一.     

职业紧张对血糖、血脂影响的研究

目的探讨职业紧张与血糖、血脂之间的关系.方法应用职业紧张测量表(OSI)于2002年对福州铁路系统及福州某工厂共289名男性职工进行职业紧张与血脂、血糖关系的人群调查,并进行LSD检验及叉生分析.结果在控制了非职业紧张因素的条件下,职业紧张与血糖升高(RR=2.46)、血脂升高(RR=1.23)都有独立的相关关系,并且与常见的主要危险因素有协同作用.结论职业紧张是引起男性职工血糖、血脂升高的重要危险因素之一.