BMP-7对TGF-β_1诱导人肾小管上皮细胞外基质表达的影响

目的观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对TGF-β1诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2)细胞外基质(ECM)成分表达的影响,以探讨其延缓肾间质纤维化病变的作用机制。方法将体外培养的HK-2细胞分为空白对照组,3μg.L-1TGF-β1组,BMP-7组,TGF-β1加不同浓度BMP-7组。免疫荧光检测FN的表达;RT-PCR和Western blot分别检测FN、ColⅠα1mRNA及蛋白的表达。结果免疫荧光检测结果显示,3μg.L-1TGF-β1刺激HK-2细胞48h后,FN表达明显增强;加入200μg.L-1BMP-7干预后荧光明显减弱。RT-PCR和Western blot结果显示,TGF-β1刺激HK-2细胞48h后,FN、ColⅠα1mRNA及蛋白表达均明显高于对照组(P<0.01);BMP-7(100～400μg.L-1)可在mRNA及蛋白水平呈剂量依赖性下调TGF-β1诱导的FN、ColⅠα1的表达。结论BMP-7能抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞FN、ColⅠα1的合成。表明BMP-7抑制肾小管间质纤维化的进展、改善肾功能的作用,部分是通过抑制肾小管上皮细胞分泌细胞外基质实现的。     

丹酚酸B对肾小管上皮细胞转分化的影响及机制

目的:用转化生长因子(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化,观察丹酚酸B(SA-B)对HK-2细胞转分化过程的干预作用并初步探讨其机制。方法:TGF-β1(5 ng.mL-1)刺激HK-2细胞,用丹酚酸B(SA-B)(10μmol.L-1)干预;用免疫荧光法检测各组HK-2细胞黏着斑激酶(FAK)、整合素β1(β1-integrin)的表达。结果:TGF-β1成功诱导HK-2转分化;相比空白对照组,SA-B可抑制HK-2转分化,且SA-B可有效降低HK-2细胞FAK及β1-integrin蛋白的表达(P均小于0.05)。结论:SA-B可有效调节人肾小管上皮细胞转分化过程,其机制可能与其能调控HK-2细胞FAK及β1-integrin蛋白的表达有关。     

海参虫草复剂对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制的研究

目的研究海参虫草复剂(AC)对链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏保护作用机制。方法采用一次性腹腔注射STZ的方法建立糖尿病大鼠模型,经过长期高血糖环境下饲养造成肾脏损伤。灌胃AC8周后,分别检测大鼠空腹血糖、肾脏指数、24h尿微量白蛋白排泄率(UAER)及肾脏的氧化应激水平;采用RT-PCR法测定肾脏中转化生长因子β1(TGF-β1)及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达。Western blot方法检测肾脏中TGF-β1蛋白表达,免疫组化法检测肾脏中Ⅳ型胶原蛋白表达。结果 AC能降低糖尿病大鼠空腹血糖、肾脏指数和UAER(P<0.05,P<0.01),提高肾脏抗氧化能力,下调TGF-β1、TGFβRⅡ和CTGF的mRNA表达(P<0.05,P<0.01),降低TGF-β1及Ⅳ型胶原的蛋白表达水平(P<0.01)。结论 AC可通过改善糖尿病大鼠肾脏氧化应激状态,抑制TGF-β1、TβRⅡ和CTGF基因表达,以减少尿蛋白排泄及阻止肾脏肥大,从而达到保护肾脏的作用。     

普罗布考对甲基胍诱导纤维化相关因子在HK-2细胞表达的影响

目的研究降脂药普罗布考对小分子尿毒素甲基胍诱导纤维化相关因子在人肾小管上皮细胞表达的影响。方法 HK-2细胞分3组培养,A组（正常对照,不加干预因素）;B组培养基中加入0.5mmol.L-1甲基胍;C组培养基中加入0.5mmol.L-1甲基胍和20μmol.L-1普罗布考。各组细胞培养48h后用免疫细胞化学、RT-PCR检测TGF-β1、CTGF和FN,并用流式细胞仪对以上因子作定量检测,以观察其在HK-2细胞中的表达。结果在甲基胍刺激后,细胞免疫化学染色,HK-2细胞质中着色,显示TGF-β1、CTGF和FN均有表达。正常对照组HK-2细胞质中无着色。测定结果显示甲基胍组TGF-β1、CTGF和FN显著高于正常对照组（P〈0.01）,加入普罗布考后,表达显著下降（P〈0.01）。结论甲基胍能促进纤维化相关因子在肾小管上皮细胞中表达;普罗布考能抑制甲基胍诱导纤维化相关因子在肾小管上皮细胞的表达。     

沉默调节蛋白1过表达通过抑制结缔组织生长因子改善转化生长因子-β_1诱导人肾小管上皮细胞株的凋亡

目的观察沉默调节蛋白1(Sirt1)过表达对转化生长因子(TGF)-β1诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制研究。方法将体外培养人肾小管上皮细胞分为正常对照组、TGF-β1刺激组及TGF-β1+Sirt1过表达组。采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;流式细胞术及hoechst33258染色法分别检测细胞凋亡百分比;蛋白质印迹法检测Sirt1、结缔组织生长因子(CTGF)、Bax、Bcl-2的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(Real time-PCR)检测Sirt1、CTGF、Bax、Bcl-2m RNA水平;活性比色法检测Sirt1活性;免疫细胞化学方法检测Sirt1表达。结果与正常对照组相比,TGF-β1刺激组肾小管上皮细胞Sirt1表达及活性均显著下降,同时CTGFm RNA及蛋白水平显著上升,细胞凋亡百分比明显增加(P<0.01),Bax/Bcl-2比率明显升高(P<0.05)。Sirt1过表达能够显著抑制TGF-β1诱导的CTGF水平升高,降低肾小管上皮细胞凋亡百分比,减少Bax/Bcl-2比率(P<0.05)。结论 Sirt1过表达能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞凋亡,并且该作用的实现可能是部分通过抑制CTGF实现的。     

法舒地尔对高糖培养的肾小管上皮细胞转分化的抑制作用

目的探讨法舒地尔对高糖培养人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响及可能作用机制。方法人肾小管上皮细胞同时加入葡萄糖60 mmol·L-1和法舒地尔20μmol·L-1。配体结合沉淀法检测葡萄糖60mmol·L-1作用0～24 h后细胞Rho A活性,免疫细胞化学技术检测上皮钙黏素表达,Western印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,ELISA法检测细胞培养上清液转化生长因子β1(TGF-β1)的含量。结果在一定时间范围内,高糖能刺激细胞Rho A分子活化;与正常对照组比较,葡萄糖60 mmol·L-1培养HK-2细胞72 h后上皮钙黏素表达明显减少(P<0.01),α-SMA表达明显增多(P<0.01),TGF-β1分泌增多(P<0.01),而葡萄糖5.5 mmol·L-1+甘露醇54.5 mmol·L-1高张组无明显差异。法舒地尔20μmol·L-1同步干预后,与高糖组比较,细胞上皮钙黏素表达明显增多〔(0.03±0.01)vs(0.08±0.02),P<0.05〕,α-SMA表达下降(P<0.05),48 h时TGF-β1分泌明显减少〔(128±11)vs(49±5)μg.g-1(P<0.05)〕。结论法舒地尔能抑制高糖培养的肾小管上皮细胞转分化,可能部分通过减少TGF-β1的分泌发挥作用。     

大黄素对 TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞上皮间质转分化及 Mfn2表达的影响

目的 探讨大黄素（EM）对转化生长因子 β1（TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）上皮间质转分化及线粒体融合蛋白 2（Mfn2）的影响。方法 采用 CCK-8法检测不同浓度 EM对 HK-2细胞增殖的影响;实验分空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+EM（10、20、40 μmol/L）组,EM干预组予以不同浓度的大黄素处理 HK-2细胞 30 min后,TGF-β1组和 EM干预组同时给予浓度为 10 μg/L的 TGF-β1刺激 48 h收集细胞,Western blot法检测 α-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、结缔组织生长因子（CTGF）及 Mfn2蛋白的表达。结果 CCK-8结果提示 0、10、20、40、80、160 μmol/L 浓度的 EM 处理组的 HK-2 细胞存活率（%）分别为 100.00±0.00、90.89±2.17、88.52±1.67、87.72±2.00、63.46±1.73、52.19±2.60 ,呈逐渐降低趋势（P＜0.01）;Western blot结果表明,与空白对照组比较,TGF-β1刺激后,HK-2细胞中 α-SMA、CTGF及 Mfn2蛋白水平升高,E-cadherin蛋白表达降低（P＜0.05）,与 TGF-β1组比较,给予不同浓度大黄素干预后,α-SMA、CTGF及 Mfn2蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高（P＜0.05）,且呈一定剂量依赖性。结论 大黄素缓解了 TGF-β1诱导的 HK-2细胞上皮间质转分化,可能通过减少 TGF-β1诱导的 Mfn2的表达来减缓肾脏纤维化。     

氟伐他汀对转化生长因子β_1诱导的系膜细胞结缔组织生长因子和Ⅳ型胶原表达的影响

目的探讨氟伐他汀对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖和结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的影响。方法选择对数生长期的MCs,分成对照组、TGF-β1诱导组、TGF-β1加不同浓度氟伐他汀(Flu)诱导组,采用MTT法检测MCs增殖,RT-PCR和Westernblot方法检测MCsCTGF表达,ELISA法检测ColⅣ表达。结果5μg.L-1TGF-β1能明显促进MCs的增殖及CTGF和ColⅣ的表达。Flu可呈浓度依赖性地抑制TGF-β1诱导下的系膜细胞增殖和CTGF及ColⅣ的表达:1μmol.L-1Flu即能明显抑制MCs的增殖及CTGFmRNA和ColⅣ蛋白的表达,10μmol.L-1Flu即能明显抑制MCsCTGF蛋白的表达。同时,还观察到外源性CTGF呈浓度依赖性地促进MCsColⅣ的表达,2.5μg.L-1CTGF即可明显促进ColⅣ蛋白的表达。结论氟伐他汀可抑制MCs增殖和CTGF介导的ColⅣ表达。     

α-酮戊二酸钠对转化生长因子β_1诱导的HK-2细胞上皮-间充质转分化的影响

目的探讨α-酮戊二酸钠对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的HK-2细胞上皮-间充质转分化(EMT)的影响。方法 TGF-β10.5,2和5μg.L-1分别作用于葡萄糖5和30 mmol.L-1培养的HK-2细胞72 h,通过RT-PCR法检测EMT标志物E-钙黏着糖蛋白和波形蛋白mRNA表达的变化,以选择EMT病变模型的最佳诱导条件。在此基础上,观察α-酮戊二酸钠10,100和500μmol.L-1对HK-2细胞EMT病变及G蛋白偶联受体80(GPR80)mRNA表达的影响。结果①在葡萄糖5和30 mmol.L-1条件下,当TGF-β1为5μg.L-1时,与对照组比较,E-钙黏着糖蛋白mRNA的降低和波形蛋白mRNA的升高最明显(P<0.01),表明HK-2细胞发生了典型的EMT病变;②选择TGF-β15μg.L-1和葡萄糖30 mmol.L-1制备EMT病变模型,同时加入α-酮戊二酸钠100和500μmol.L-1作用72 h,与模型组比较,E-钙黏着糖蛋白mRNA明显升高,波形蛋白mRNA明显降低,GPR80 mRNA表达增加(P<0.01),表明α-酮戊二酸钠可逆转HK-2细胞EMT的发生。结论在葡萄糖5和30 mmol.L-1培养条件下,TGF-β15μg.L-1作用72 h,HK-2细胞可出现典型的EMT病变;α-酮戊二酸钠对该病变具有抑制作用。     

小檗碱调控NLRP3炎症小体对TGF-β1诱导HK-2细胞转分化的影响

摘要：目的:探讨小檗碱（BBR）调控NLRP3炎症小体对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导人肾小管上皮细胞（HK-2）转分化的影响。方法:计算机分子对接预测BBR与NLRP3炎症小体的结合情况;采用CCK8法检测不同浓度的BBR对HK-2细胞增殖的影响;将HK-2细胞分为正常组、模型组和小檗碱低、中、高剂量组(10,25,50μmol·L-1),小檗碱预孵18 h后加入TGF-β1刺激48 h,镜下观察各组细胞形态;采用Western blotting法检测E-钙粘蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（caspase-1）的表达; caspase-1活性检测试剂盒检测caspase-1的酶活力;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞上清液中白细胞介素-1β（IL-1β）的含量。结果:分子对接显示BBR与NLRP3、pro-caspase-1存在结合,可靠性较高。与正常组比较,BBR对HK-2细胞的增殖呈浓度和时间依赖性抑制（P<0.05）。与模型组比较,BBR(10,25,50μmol·L-1)可改善HK-2细胞形态,使其趋向椭圆形;上调E-cadherin蛋白和下调α-SMA、NLRP3及caspase-1蛋白的表达（P<0.05）;并可降低caspase-1的酶活力、减少IL-1β的分泌（P<0.05）。结论:BBR能改善TGF-β1诱导HK-2细胞的转分化,可能与抑制NLRP3炎症小体活化有关。     

人工虫草对间质纤维化大鼠转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨人工发酵虫草对肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法雄性SD大鼠30只随机分为3组(正常对照假手术组、造模组及造模灌胃组),每组10只。运用单侧输尿管结扎法(UUO)制造肾间质纤维化模型,于第5周处死大鼠,切片做Masson染色观察肾小管及间质的病理变化;应用免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、CTGF的蛋白质表达。结果与对照组比较,5周时肾小管间质损伤指数升高(P<0.01);肾组织内TGF-β1、CTGF的蛋白质表达均显著上调(P<0.05)。虫草干预后,上述上调指标均被显著抑制(P<0.05)。结论虫草可通过抑制TGF-β1和CTGF的过度表达,从而改善间质纤维化。     

TGF-β1、CTGF基因的过表达与早期糖尿病肾病关系的研究

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1、结缔组织生长因子(CTGF)在早期糖尿病肾病(DN)中的作用。方法:建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组(NC)和糖尿病组(DM)。每周测量体质量,每2周测定血糖,于实验第8周末处死大鼠后测定相关的生化指标及肾功能指标,同时留取肾皮质液氮冻存,应用实时定量PCR方法检测肾皮质TGF-β1、CTGF的mRNA水平,用免疫组化法检测肾小球中TGF-β1和CTGF的蛋白表达情况,并进行半定量分析。结果:与NC组相比,DM组血尿素氮、24h尿量及尿微量蛋白、肾脏肥大指数明显升高(P<0.01),但血肌酐明显下降(P<0.01)。实时定量PCR及免疫组化结果显示,DM组较NC组TGF-β1、CTGFmRNA及蛋白表达量均明显增高。结论:TGF-β1与CTGF在肾病早期表达明显升高,对于评价DN进程具有重要意义。     

热休克蛋白47对转化生长因子β_1诱导肾小管上皮细胞合成细胞外基质的影响

目的探讨热休克蛋白47(HSP47)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的肾小管上皮细胞(HK-2)合成细胞外基质(ECM)的影响。方法以10ng/mL TGF-β1刺激HK-2细胞0、12、24、48h,蛋白印迹法检测HSP47的表达,蛋白印迹法及Real-time聚合酶链反应(PCR)法检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)的表达。然后转染HSP47小干扰RNA(siRNA)及阴性对照,后采用蛋白印迹法检测HSP47的表达,蛋白印迹法及Real-time PCR法检测ColⅠ和ColⅣ的表达。结果 TGF-β1作用于HK-2细胞后,HSP47蛋白呈时间依赖性表达上调(P<0.05),同时ColⅠ和ColⅣ蛋白及mRNA呈时间依赖性表达上调(P<0.05),转染HSP47siRNA后,蛋白印迹法显示与对照组比,TGF-β1组HSP47表达增强(P<0.01),与TGF-β1组比,HSP47siRNA组HSP47表达降低(P<0.01),对照组无明显变化(P>0.05),蛋白印记及Real-time PCR结果显示,与对照组相比,TGF-β1组ColⅠ和ColⅣ表达明显上调(P<0.01);与TGF-β1组相比,HSP47siRNA组ColⅠ和ColⅣ表达明显下调(P<0.05和P<0.01);而HSP47siRNA(-)组无明显的变化(P>0.05)。结论HSP47可促进HK-2细胞ECM合成,抑制HSP47可延缓肾间质纤维化疾病进展。     

转化生长因子-β_1对气道上皮细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对气道上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法原代培养新西兰兔气道上皮细胞,采用免疫细胞化学法检测TGF-β1作用下气道上皮细胞CTGF蛋白的表达水平。结果①TGF-β1不同处理时间各组气道上皮细胞CTGF蛋白表达均较对照组显著增强,差异有统计学意义(P均<0.01);②TGF-β15ng/mL处理组、10ng/mL处理组气道上皮细胞CTGF蛋白表达均较对照组显著增强,差异有统计学意义(P均<0.01)。结论 TGF-β1可上调气道上皮细胞CTGF蛋白的表达水平,从而引起气道重塑。     

Ang Ⅱ及缬沙坦对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子的影响

目的:研究血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及Ang Ⅱ1型受体拮抗药缬沙坦(Val)对人肾小管上皮细胞(HK-2)结缔组织生长因子(CTGF)基因表达的影响。方法:将培养的HK-2分别用AngⅡ及Val刺激,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CTGFmRNA的表达。结果:Ang Ⅱ使HK-2细胞CTGF的表达增加分别是空白对照组的(1.2893±0.0233)、(1.4517±0.0353)、(1.6998±0.0969)倍(P<0.01);先用Val刺激后再加入Ang Ⅱ刺激HK-2细胞,其CTGF的表达是空白对照组的(1.2140±0.0832)倍(P>0.05)。结论:Val能够抑制Ang Ⅱ引起的人肾小管上皮细胞CTGFmRNA的表达。     

罗格列酮对高糖状态下人肾小管上皮细胞转化生长因子β_1表达的影响

目的研究罗格列酮对高糖状态下人肾小管上皮细胞转化生长因子β1(TGF-β1)表达及细胞活力的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),首先观察高糖状态下HK-2细胞TGF-β1表达情况,然后用不同浓度的罗格列酮刺激48h及使用相同浓度的罗格列酮刺激不同时间,利用Westernblotting法观察各实验组细胞TGF-β1蛋白表达情况,使用ELISA法观察各实验组培养液中Ⅳ型胶原表达的变化。结果罗格列酮可呈时间和浓度依赖性抑制高糖状态下人肾小管上皮细胞TGF-β1、Ⅳ型胶原酶的表达(P<0.05)。结论罗格列酮可以保护高糖状态下肾小管上皮细胞,部分机制是通过抑制TGF-β1、Ⅳ型胶原酶的表达。     

槲皮素对糖尿病大鼠氧化应激及TGF-β1/CTGF的影响

目的:探讨槲皮素(QE)对糖尿病肾病(DN)大鼠氧化应激及转化生长因子-β1(TGF-β1)/结缔组织生长因子(CTGF)信号通路的影响。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,模型成功后随机分为3组:糖尿病肾病组(DN组),槲皮素治疗组(QE组,100 mg·kg-1·d-1),卡托普利阳性对照组(CAP组,10 mg·kg-1·d-1)。另设正常对照组(NS组)。治疗12周,观察治疗期间及治疗后大鼠一般状况、血糖、24 h尿白蛋白、肾脏指数、肌酐、尿素氮,测定血清中总抗氧能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)的水平;免疫组化方法观察肾皮质中CTGF的表达水平;RT-PCR方法检测肾皮质中TGF-β1mRNA的相对含量;透射电镜观察肾脏超微结构的变化。结果:造模3组均出现糖尿病及肾脏损害,与DN组相比,槲皮素组大鼠血糖、尿白蛋白、肌酐和尿素氮水平明显降低(P<0.01);T-AOC,T-SOD,GSH活性显著提高、MDA水平明显降低(P<0.05,P<0.01);肾皮质CTGF的表达明显减少(P<0.01);肾皮质中TGF-β1mRNA的相对含量明显降低(P<0.01);电镜显示:与DN相比,槲皮素组大鼠系膜细胞增生程度减轻,基底膜厚度均匀,足突融合减轻。结论:槲皮素可提高DN大鼠的抗氧化水平、抑制肾皮质TGF-β1/CTGF的表达,对DN具有防治作用。     

肾母细胞瘤过度表达基因对肾小管转分化机制的影响

目的 通过肾母细胞瘤过度表达基因(CCN3)对体外培养转化生长因子β1(TGF-β1)参与人肾小管上皮细胞株(HK-2)转分化机制的影响,探讨CCN3的作用及可能途径.方法 利用体外细胞培养技术培养HK-2,并将其分为3组,正常对照组,TGF-β1组、10μg/L,CCN3组、50μg/L.利用细胞免疫技术,检测3组的上皮细胞标志性蛋白钙黏蛋白E-cadherin的表达,激光共聚焦显微镜下观察并扫描成像.利用IMS图像分析系统对扫描图像进行分析.结果 TGF-β1组E-cadherin的表达明显低于正常对照组(P＜0.05),CCN3组的肾小管上皮细胞在加入CCN3及TGF-β1后,E-cadherin的表达明显高于TGF-31组(P＜0.05).结论 TGF-β1加速肾小管转分化机制,CCN3能延缓TGF-β1所致的肾小管转分化进程.     

曲格列酮对转化生长因子-β_1诱导的HK-2细胞纤连蛋白和胶原Ⅰ型基因表达的影响

目的观察曲格列酮对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)细胞外基质纤连蛋白和胶原Ⅰ型的影响,探讨曲格列酮抗肾间质纤维化的潜在作用。方法将曲格列酮0,0.25,0.5,1,2.5,5和10μmol.L-1预处理HK-2细胞2h,随后加入TGF-β15mg.L-1作用24h,利用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测曲格列酮对HK-2细胞的毒性作用;曲格列酮0,1,2.5,5和10μmol.L-1预处理HK-2细胞2h,再加入TGF-β15mg.L-1作用24h,通过实时荧光定量PCR检测HK-2细胞外基质主要成分胶原Ⅰ型mRNA和纤连蛋白mRNA表达。结果曲格列酮0.25～5μmol.L-1对HK-2细胞膜完整性无影响,LDH的释放与正常对照组无明显差异,曲格列酮10μmol.L-1组LDH释放率为(10.7±5.3)%,明显高于正常对照组(P<0.01)。与正常对照组相比,曲格列酮1,2.5,5和10μmol.L-1单独作用并没有增加HK-2细胞外基质中胶原Ⅰ型纤维和纤连蛋白的表达,而TGF-β1刺激下胶原Ⅰ型纤维和纤连蛋白表达明显上调,曲格列酮提前干预下纤连蛋白mRNA及胶原Ⅰ型mRNA表达下降,曲格列酮2.5,5和10μmo.lL-1可显著下调纤连蛋白mRNA表达(P<0.05,P<0.01);曲格列酮5和10μmol.L-1可显著下调胶原Ⅰ型mRNA表达(P<0.05)。结论曲格列酮可能具有拮抗肾间质纤维化的潜在作用,其作用机制可能与抑制HK-2细胞纤连蛋白和胶原Ⅰ型纤维的增加有关。     

人工虫草对间质纤维化大鼠转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的 探讨人工发酵虫草对肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 雄性SD大鼠30只随机分为3组(正常对照假手术组、造模组及造模灌胃组),每组10只.运用单侧输尿管结扎法(UUO)制造肾间质纤维化模型,于第5周处死大鼠,切片做Masson染色观察肾小管及间质的病理变化;应用免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、CTGF的蛋白质表达.结果 与对照组比较,5周时肾小管间质损伤指数升高(P＜0.01);肾组织内TGF-β1、CTGF的蛋白质表达均显著上调(P＜0.05).虫草干预后,上述上调指标均被显著抑制(P＜0.05).结论 虫草可通过抑制TGF-β1和CTGF的过度表达,从而改善间质纤维化.