高原鼠兔心电图观测研究

为探讨高原鼠兔作为实验性心电观察的应用前景,描记了30例成年高原鼠兔心电图。结果表明,高原鼠兔心电图基本波形与人类相似,均为窦性心律。其心率较快,359.6±28.3次/min;P波通常出现在T波的降支上;其Q—T间期,K值较大鼠、小鼠和长爪沙鼠大;心电轴为59.5±43.6度;有S—T段的个体出现率为73％。高原鼠兔较大鼠、小鼠和长爪沙鼠的心电图更接近于人,提示它更适于做临床心电图的实验研究。     

正常与脑缺血大鼠脑皮质线粒体的比较蛋白质组学研究

目的 采用比较蛋白质组学方法观察正常与脑缺血大鼠脑皮质线粒体蛋白表达差异.方法 SD大鼠按随机数字表法分为正常组和缺血组,采用改进的栓线法制备大脑中动脉栓塞(middle cerebral antery occlusion,MCAO)模型,分离大鼠缺血及正常大脑皮层,纯化线粒体蛋白进行二维电泳和凝胶图像分析,对差异蛋白质用HPLC-Chip/MS纳流液质联用技术进行序列分析,经Spectrum Mill搜索NCBInr数据库后鉴定蛋白质.结果 正常与脑缺血大鼠脑皮层线粒体蛋白表达存在显著差异,这些差异蛋白经鉴定,主要为TUC-4b、肌酸激酶同工酶、HS1结合蛋白、线粒体核糖体蛋白S27、异柠檬酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、二氢硫辛酸脱氢酶、泛醌-细胞色素C还原酶、琥珀酸辅酶A还原酶、细胞色素氧化酶、F1-ATP beta链、热休克蛋白70、热休克蛋白60、脂酰辅酶A脱氧酶等差异线粒体蛋白.结论 脑缺血可以导致皮层线粒体相关蛋白表达改变,提示其作用可能与线粒体能量代谢、凋亡有关.     

高原鼠兔和高原灰尾野兔红细胞扫描电镜形态计量研究

应用扫描电镜形态计量研究方法，对生活在果洛大武地区的高原鼠兔、高原发尾野兔的红细胞形态、大小进行研究，并与平原对照组家兔以及移居高原实验家兔的同类数据相比较结果表明；这两种世居高原的土著啮齿动物的红细胞直径（X）和内凹区直经（X）与平原对照组接近，但明显低于高原实验组（P＜0．01）。由此，认为高原土著动物对高原低氧环境的适应主要是通过维持较高水平的红细胞数目，减小红细胞体积，从而增加红细胞膜对氧扩散的总表面积，降低血浆粘滞度，加速血液氧的运输来实现。     

高原鼠兔解剖学特征之初探

对成年高原鼠兔进行了解剖学观测,发现其骨骼数(尤其肋、籽骨数)较兔多。盲肠十分发达(螺旋瓣数多达45～53个)。心、肝、脾、肺、肾等多数脏器的绝对重量为雌性略低于雄性,但无统计学意义。而雌性的脏器系数则显著高于雄性(P<0.01)。胸腺的绝对重量为雌性高于雄性(P<0.05),且随体重增加减小。从解剖学上看,高原鼠兔的身体各部形态结构与其习性、活动及健康状况密切相关。     

高原鼠兔主要脏器重量

对４２只（♂２２只，♀２０只）第５代封闭群高原鼠兔（Ｏｃｈｏｔｏｎａｃｕｒｚｏｎｉａｅ）的主要脏器作了解剖观察和重量测定。发现雌、雄鼠兔间各脏器重量均无明显差异。与其它实验动物脏器重量的比较分析表明，高原鼠兔的心、肺相对重量并没有表现出明显增加。这提示，高原鼠兔对高原环境的适应方式不是通过心、肺的增大，可能是通过其它途径。高原鼠兔有发达的肠道系统和盲肠旋脊，这是高原鼠兔对其生活环境的一种适应。     

高原鼠兔的血液生化正常值测定

报道驯化的高原鼠兔部分血液生化指标,并与实验家兔、大鼠和人的相应指标作了比较。可为科研人员选择实验动物提供参考。     

高原鼠兔营养成分的需求分析

高原鼠兔是新开发的兔形目实验动物。本文在分析高原鼠兔胃肠道特征及天然喜食植物营养成分的基础上，根据饲喂实验，初步确定高原鼠兔饲料的营养成分标准为粗蛋白１４．９０％；粗脂肪３．２４％；粗纤维２５．７９％。通过比较，高原鼠兔对低质饲料的利用率和对植物纤维的需求明显高于家兔。     

线粒体蛋白质组学在肿瘤研究中的进展

线粒体DNA的突变和蛋白表达谱的异常,将严重影响细胞的凋亡和能量代谢过程,这一变化可能是恶性肿瘤细胞代谢及功能异常的重要组成部分。蛋白质组学技术可以分析肿瘤细胞或组织在某一时间点内全蛋白的表达情况及活性,而基于亚细胞水平研究的线粒体蛋白质组学较传统蛋白质组学研究有更高的分辨率。线粒体蛋白质组的改变与多种肿瘤相关,随着亚细胞分离技术和蛋白质鉴定技术的发展,线粒体蛋白质组学在寻找新的肿瘤相关特性蛋白研究中显示出越来越重要的意义。     

低氧调节大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体非协同性表达

目的观察慢性低氧时大鼠线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白表达变化并讨论其病理生理学意义。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为慢性低氧(4500m,30d)组和对照组,取双侧腓肠肌,分离线粒体,用Clark氧电极法检测线粒体Ⅲ态呼吸(state3,ST3)、Ⅳ态呼吸(state4,ST4)和呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR),用Western blot检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白的表达。结果慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体ST3和RCR显著低于对照组(P<0.05)。慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体复合体Ⅰ30×103亚基、复合体Ⅱ70×103亚基、复合体Ⅴα亚基蛋白表达量显著低对照组(P<0.05)。2组线粒体ST4和复合体Ⅲ核心亚基2蛋白表达无显著性差异(P>0.05)。结论低氧可调节大鼠骨骼机线粒体复合体蛋白非协同性表达,导致线粒体氧化磷酸化功能下降。     

正常与慢性脑缺血大鼠海马比较蛋白质组学研究

目的: 通过研究正常大鼠和慢性脑缺血大鼠海马蛋白质表达的差异,探讨慢性脑缺血后脑损伤的发病机制。方法: 采用双侧颈总动脉结扎的方法建立慢性脑缺血模型,20只大鼠随机分为模型组(n=10)和假手术组(n=10),4周后对各组大鼠海马进行双向凝胶电泳分析,并通过质谱技术鉴定差异蛋白质。结果: 模型组与假手术组相比共有4种蛋白质上调,2种蛋白质下调,经质谱鉴定得到6种蛋白质的具体信息,包括泛素羧基末端水解酶L1;动力蛋白1;雄激素受体辅助活化因子;ATP合酶;rCG50513, isoform CRA_a和expressed sequence AU016693, isoform CRA_b。结论: 建立了分辨率较高且重复性较好的慢性脑缺血双向电泳图谱,并发现了6种可能与脑缺血后神经损伤相关的蛋白质。     

Comparative proteomic analysis of rat juvenile and adult dura

Background It has been widely observed that infants and young children can reossify large calvarial defects when they are younger than 2 years of age; afterwards, they lose this regenerative potential. Previous studies have implicated that the dura mater serves as a key regulator of calvarial regeneration. However, the molecular mechanism of calvarial reossification remains elusive. Methods In order to identify the proteins that may participate in this process, we performed a proteome-wide comparison of the protein expression levels of immature and mature dura using 2D electrophoresis and MALDI-TOF mass spectrometry. The Western blotting was used to verify the results of the 2D electrophoresis/MALDI-TOF mass spectrometry. Results Eleven proteins were found to express with significant differences in the immature and the mature dura. Among them, the emergence of vimentin, tropomyosin, 13-actin and y-actin were further confirmed by the Western blotting analysis. Conclusion The proteins and proteomic profiles provide a better understanding of the molecular mechanism of calvarial regeneration.     

慢性缺氧对大鼠骨骼肌胰岛素受体的影响及其在增强葡萄糖摄取能力中的作用

目的从组织胰岛素受体变化及其对组织葡萄糖摄取能力的影响方面探讨缺氧习服的机制.方法将大鼠置模拟海拔5 000 m低压舱内,30 d后取动脉血,测定血气、血浆胰岛素、血糖等,取双后肢骨骼肌测定在有或无胰岛素刺激下的葡萄糖摄取率,通过Scatchard分析胰岛素受体结合位点密度数及其亲和力.以平原大鼠为对照.结果缺氧组大鼠血糖、血胰岛素以及骨骼肌中胰岛素受体高、低亲和力两种结合位点的密度,均显著高于对照组(P＜0.05).有或无胰岛素刺激时的葡萄糖摄取率及其增量值,在缺氧组均非常显著地高于对照组(P＜0.01).胰岛素受体的解离常数在缺氧与对照组之间没有显著性差异.结论经30 d低压缺氧后,大鼠骨骼肌胰岛素受体密度显著增加,对胰岛素反应能力增强,是组织葡萄糖摄取方面对胰岛素信号反应能力增强的机制之一.     

双向电泳结合质谱法分析双相情感障碍患者血浆差异表达蛋白

目的 应用比较蛋白质组学分析静息相双相情感障碍(bipolar disorder,BD)患者和健康对照血浆的差异表达蛋白质,以期找到与情感发作无关但和疾病发生相关的蛋白质.方法 收集BD静息相患者(n=12)和健康对照者(n=20)空腹血浆,MARS柱去除7种高丰度蛋白质,运用2-DE分离血浆蛋白,PD-Quest分析后MALDI-TOF/TOF鉴定差异表达的蛋白点,MetaCore软件进行生物信息学分析,Western blot验证部分差异蛋白结果.结果 经2-DE分析在静息相BD患者血浆中找到45个差异蛋白点,质谱鉴定出27个非冗余蛋白质,生物信息学分析显示差异蛋白主要与免疫调节相关,Apo A1和A2M经Western blot验证差异与2-DE结果一致且有统计学意义(P＜0.05).结论 与健康对照相比,BD静息相患者存在蛋白质谱的异常表达.差异表达蛋白提示BD静息相患者存在免疫功能异常及脂质代谢紊乱.     

低压缺氧大鼠脑线粒体内腺苷酸含量及能荷的变化

目的　对比研究急性和慢性缺氧暴露后脑线粒体内的能量储备和ATP生成能力 ,探讨急性缺氧致脑功能障碍和慢性缺氧适应的能量代谢机制。方法　Wistar大鼠分为对照组、急性缺氧组和慢性缺氧组。后两组分别于模拟海拔40 0 0m高原低压舱内连续缺氧暴露 3d和 3 0d ,每天 2 3 5h。缺氧组和对照组动物分别在模拟高原条件和平原条件断头处死 ,取脑组织分离线粒体。高压液相色谱分离并测量线粒体内腺苷酸库 (pool)含量 ,并计算能荷 ;以琥珀酸为氧化底物检测线粒体的ATP生成速率。结果　急性和慢性低压缺氧暴露后大鼠脑线粒体内的总腺苷酸库变化不明显 (P >0 0 5 ) ,但慢性缺氧组高于急性组 (P <0 0 5 ) ;线粒体内的ATP含量在急性和慢性缺氧时分别降低 65 1%和 3 3 5 %,慢性缺氧可部分恢复 ,但仍低于对照组 (P <0 0 5 ) ;ATP在总腺苷酸库中所占比例在急、慢性缺氧时分别是对照的 41 5 %和 42 5 %;急、慢性缺氧对线粒体内能荷均无显著影响 (P >0 0 5 ) ;急性缺氧可使以琥珀酸为底物的线粒体ATP生成速率降低 41 8%,而慢性缺氧则与对照组无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　急性缺氧暴露可显著降低脑线粒体内的能量储备 ,而线粒体ATP生成能力降低是其原因之一 ;慢性缺氧暴露则可使其能量储备部分恢复 ,提示“线粒     

Comparative proteomic analysis of differentially expressed proteins between K562 and K562/ADM cells

Background Multidrug resistance to chemotherapeutic agents is an important clinical problem during the treatment of leukemia. The resistance process is multifactorial. To realize the total factors involved in multidrug resistance, we analyzed the differentially expressed proteins of K562 and K562/ADM cells and we investigated one of the up-regulated proteins （CRKL） using siRNA to determine its role in K562/ADM cells. Methods Altered protein expressions between K562/S （K562 ADM-sensitive cell line） and K562/ADM （K562 multidrug resistant cell line induced by adriamycin） were identified by 2D-DIGE coupled with mass spectrometry. Meanwhile, we confirmed the differential expression of CRKL and Stathmin in both K562 and K562/ADM cells by Western blot analysis. Furthermore, we used RNA interference to silence the CRKL gene expression. Results Among the 9 differentially expressed proteins, 3 were up-regulated in K562/ADM cells, while 6 were down-regulated in the K562/ADM cells compared with its parent cell line. The expression of CRKL was up-regulated significantly in K562/ADM cells, and it can be decreased by recombinant lentivirus. Moreover, the multidrug resistance of K562/ADM cells was efficiently reversed by silence of CRKL gene expression. Conclusions The data provided the differentially expressed proteins in K562 and its resistant cell line and highlights the power of 2D-DIGE for the discovery of resistance markers in cancer. We found CRKL may be a new protein involved in the multidrug resistanse of leukaemia cells.     

啤酒酵母Ubr1野生型和缺失型菌株的比较蛋白组学分析

目的寻找并验证Ubr1泛素化底物蛋白大规模筛选方法的可行性。方法通过对啤酒酵母RJD347（ 野生型）和AVY26（ 缺失型）的差异蛋白质组学比较,分析酵母中可能存在的Ubr1直接或间接作用的底物蛋白。进一步通过外源表达实验验证差异蛋白与Ubr1之间的相关性。结果组学研究得到249 个差异表达蛋白,其中145 个蛋白在AVY26（ Ubr1缺失型）中表达上调。选取其中40 个并外源表达验证5 个差异蛋白MLC2、SCD6、ARG1、HOG1 及RTF1 与Ubr1具有相关性,受泛素连接酶Ubr1的泛素化调控。结论建立Ubr1 泛素化底物候选蛋白库,同时验证出5 个潜在Ubr1泛素化底物蛋白。