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诊断前列腺癌沿用的方法为直肠指检。近几年研究的结果表明,应用PSA(前列腺特异抗原)诊断前列腺癌是一个十分有用的检测手段。为此,笔者从1993年5月~12月应用放射免疫法对55例前列腺疾患患者进行了PSA测定,并就临床应用价值作初步探讨,现报告如下。 相似文献
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目的 建立快速检测人血清中游离前列腺特异抗原(f-PSA)的 ELISA 方法。 方法 利用抗 f-PSA 的单克隆抗体(单抗)杂交瘤细胞株,一株单抗 2D1 用于固相包被,另一株单抗2E4进行辣根过氧化物酶标记,采用二步法,建立定量测定人血清 f-PSA 的双抗体夹心ELISA法。对该法的敏感度、精密度、准确性、特异性进行了分析。应用该法与瑞典 CanAg 公司的f-PSA ELISA 试剂盒同时检测了 18 例前列腺癌和 25 例前列腺增生患者血清标本的 f-PSA 含量,进行了两种方法检测结果的相关性分析。 结果 以双抗体夹心 ELISA 法检测 f-PSA,在 f-PSA 0 ~ 20 μg/L 范围内线性良好;敏感度为 0.025 μg/L;批内变异系数为 4.5% ~ 6.2%,批间变异系数为 3.9% ~ 7.2%;回收率为 94.3% ~ 111.1%;与 α1 抗糜蛋白酶结合的结合型PSA 交叉率为 0.7 %;检测 43 份临床标本 f-PSA 含量的结果与瑞典 CanAg 公司 f-PSA 试剂盒检测结果的相关系数为 0.995。
结论 所建立的双抗体夹心 ELISA 方法是一种特异、敏感、简便实用的 f-PSA 快速检测方法,有助于在 PSA 低水平升高的重叠范围内(4 ~ 10 μg/L)鉴别前列腺增生与前列腺癌。 相似文献
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目的通过评估不同条件下血清中p2PSA的稳定性,为实验室检测分析前过程提供准确可靠的依据。方法随机挑选60名健康体检男性,将所有的新鲜血用化学发光法检测其血清中的p2PSA作为基线值,60例样本再随机分为6组,即在不同的条件下存储并按不同的时间节点进行检测,对各个样本的检测值进行偏倚的计算,以偏倚超过10%为单个样本不稳定的判断标准,以80%样本合格率来判断整个条件下p2PSA的稳定性。结果血清p2PSA水平有随着时间的延长而升高的趋势,全血常温放置时的p2PSA升高得最为显著,将血清样本分离并保存于4℃、-20℃或-70℃,血清p2PSA随时间变化的幅度减小,冻融循环2次不会影响p2PSA的稳定性。结论要保证p2PSA结果的准确性,在抽取血液后应在2 h内及时离心,3 h内完成检测,4℃保存时于6 h内完成检测;若将血清单独分离出来的情况下,4℃保存可稳定24 h,-20℃或-70℃条件下保存可稳定半年。 相似文献
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本文所介绍的T4-BA-ELISA及T3-BA-ELISA分析,其灵敏度已达到甚至超过了放射免疫分析的灵敏度,标准曲线范围与放射免疫分析相同。标准曲线的线性良好,血清稀释曲线、回收率及批内、批间变异系数均符合免疫分析的质量控制要求。操作简便、快速,保存期长,避免RIA使用放射性同位素及保存期短的缺点。分别检测123例及114例正常人血清的总T4及总T3值,与有关文献报导的T4-RIA、T3-RIA的结果基本相符。用本方法测定甲亢及甲低病人血清总T4及总T3浓度,升高和降低与临床诊断相符合。 相似文献
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采用从人精浆中纯化的前列腺特异性抗原(PSA),经免疫、融合、筛选,得到两株抗PSA抗原的单克隆抗体1H7和2D1,并通过免疫组化法鉴定了抗体的特异性。将其配对建立的定量测定血清PSA的双抗体夹心ELISA法最低检出量为0.5μg/L,孔间平均变异系数为4.4%,批内平均变异系数为5.8%。35例正常男性血清PSA的范围(x±s)为(1.45±1.24)μg/L;11例前列腺癌患者血清PSA的范围(x±s)为(26±27.2)μg/L。与进口PSA-ELISA试剂盒检测的总符合率为83%。 相似文献
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左立新 《标记免疫分析与临床》2016,23(7):787-789
目的 利用化学发光免疫法定量检测前列腺特异性抗原(PSA),分析其在临床诊断前列腺癌中的应用情况.方法 将60例前列腺癌患者设为A组,60例良性前列腺增生患者设为B组,60例健康体检者设为C组,对三组受试者血清中总前列腺特异性抗原(tPSA),游离前列腺特异性抗原(fPSA)进行化学发光免疫法检测,并分析其水平差异.结果 经检测,A组和B组的tPSA含量显著高于C组,而且A组tPSA含量显著高于B组,差异显著,存在统计学意义(P<0.05);另外A组fPSA/tPSA比值低于B组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 对PSA进行化学发光免疫法检测,具有较高的临床诊断价值,可为前列腺癌临床诊断提供可靠的参考依据. 相似文献
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目的建立前列腺特异性膜抗原(PSMA)膜外区多肽杂交瘤细胞株,并对其分泌的PSMA单克隆抗体进行初步鉴定,为PSMA的功能研究和人源化抗体的制备奠定基础,以求进一步用于前列腺癌的诊断和治疗。方法使用人工合成多肽免疫BABL/c小鼠,采用PEG融合技术建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体。通过免疫荧光法、酶联免疫吸附法及斑点金标法确定单克隆抗体的交叉反应性、亲和力及免疫球蛋白的类型和亚类。结果获得两株可稳定分泌PSMA单克隆抗体的杂交瘤细胞,4F4为IsG1类,1F1为IgC3类。两株单抗均能识别LNCap细胞表达的PSMA蛋白,与不表达PSMA的PC-3、SP2/0等细胞无交叉反应。杂交瘤细胞株1F1培养上清效价为1:40。腹水效价为1:6400;而杂交瘤细胞株4F4培养上清效价为1:80。腹水效价为1:8000。结论成功地制备出两株抗PSMA单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立免疫分析方法。进行PSMA相关研究奠定了基础。 相似文献
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表达前列腺特异性膜抗原的DNA疫苗对肿瘤细胞的抑制作用 总被引:3,自引:0,他引:3
目的构建表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)的DNA疫苗,观察其在体外对肿瘤细胞的免疫攻击和在体内对肿瘤细胞攻击的免疫保护作用。方法通过稳定转染构建表达PSMA的小鼠黑色素瘤细胞系B16-PSMA,将DNA疫苗pCDNA3.1-PSMA通过肌肉注射导入C57BL/6小鼠体内,分离小鼠脾细胞,检测细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)反应。以B16-PSMA细胞攻击免骺小鼠,观察免疫动物的无瘤生存期和肿瘤体积增长情况,评价DNA疫苗的抗肿瘤作用。结果DNA疫苗可诱导小鼠脾淋巴细胞CTL活性,经过免疫后的小鼠成瘤率降低,无瘤生存期延长,肿瘤生长缓慢,肿瘤组织内有较多淋巴细胞浸润,表明产生较强的抗肿瘤反应。结论表达PSMA的DNA疫苗能够诱导小鼠产生特异性免疫反应,对表达PSMA的肿瘤细胞的攻击产生免疫保护作用,为前列腺癌的预防和免疫治疗提供了新的思路。 相似文献
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Ⅰ型登革病毒NS1抗原捕获ELISA的建立和初步临床诊断应用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的以登革病毒特异性非结构蛋白1(NS1)单克隆抗体为基础建立Ⅰ型登革病毒(DEN1)抗原检测的酶联免疫吸附(ELISA)法,并探索从病人早期血清样品中检测DEN1-NS1的可行性。方法利用已制备的抗DEN1-NS1单克隆抗体(单抗),进行多种抗体组合配对优化模式的分析,建立双抗体夹心抗原捕获ELISA,以469份健康人血清样品确定cut off值,检测DEN1感染患者急性期血清样品。结果对多种抗体组合反复筛选,最终确立了最佳的包被单抗和酶标测定单抗,建立了抗体夹心捕获DEN1-NS1抗原的酶联免疫测定方法,能特异检测DEN1,与其他血清型登革病毒不发生交叉反应。检测16例临床确诊DEN1感染病人急性期血清样品,15例呈特异的抗原反应阳性。结论成功建立了DEN1-NS1抗原捕获ELISA并应用于临床血清样品的检测,为登革热的早期实验室诊断提供技术方法。 相似文献
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目的 探讨移行带前列腺特异性抗原密度(TZPSAD)在前列腺特异性抗原(PSA)4.0~10.0 μg/L 和 10.1~20.0 μg/L时诊断前列腺癌的意义.方法 回顾性分析1999年11月至2009年8月在本院行前列腺穿刺活检的患者资料,以PSA 4.0~20.0 μg/L且有经直肠B超测量前列腺移行带资料的1 89例患者为研究对象,用接受者操作特性(ROC)曲线计算评估PSA和TZPSAD诊断前列腺癌的意义.分析PSA和TZ PSAD不同临界点在PSA 4.0~10.0 μg/L和10.1~20.0 μg/L范围内对前列腺癌的诊断效力.结果 40例(21.2%)诊断为前列腺癌,PSA 4.0~10.0μ/L时前列腺癌的阳性率为20.5%(16/78),PSA 10.1~20.0 μg/L时前列腺癌的阳性率为21.6%(24/111),两者差异无统计学意义(P=0.854).PSA4.0~10.0 μg/L时,PSA和TZPSAD预测前列腺癌ROC曲线下面积(AUC)分别为0.569和0.702;PSA10.1~20.0 μgL时,PSA和TZ PSAD预测前列腺癌AUC分别为0.463和0.730.TZPSAD 0.370和0.500 ng·ml-1·ml-1分别在PSA4.0~10.0和10.1~20.0 μg/L的诊断效力最大,其敏感性分别为68.8%和70.8%,特异性分别为72.6%和70.1%,结论 TZPSAD在PSA 4.0~ 10.0和10.1~20.0μg/L时诊断前列腺癌的效力均明显优于PSA,可明显提高PSA诊断前列腺癌的阳性率,减少不必要的前列腺穿刺活检. 相似文献
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在自制的8株烯醇化酶(NSE)McAb中,经方阵排列滴定筛选出无交叉反应且效价较高的2株McAb,用辣根过氧化物酶(HRP)为标记物,建立了NSE-McAb双位点夹心ELISA。经直线回归方程、取代试验、阻断试验检验,该标准曲线近似直线关系,可测定标本中NSE的范围为5~50μg/L。对23例小细胞肺癌(SCLC)(Ⅰ和Ⅱ期4例、Ⅲ期7例、Ⅳ期12例).32例非小细胞肺癌(NSCLC),22例肺良性疾病(BPD)和36例健康体检者血清NSE进行了测定,SCLC的阳性率为82.6%(19/23),其中Ⅰ和Ⅱ期为50%(2/4);Ⅲ期为85.7%(6/7),Ⅳ期为91.7%(11/12);NSCLC的阳性率为3.1%(1/32),BPD阳性率为4.5%(1/22)。SCLC的显著高于NSCLC和BPD(P<0.01);SCLC的Ⅳ和Ⅲ期显著高于Ⅰ和Ⅱ期(P<0.01)。23例SCLC经综合治疗后,完全缓解组和部份缓解组血清NSE水平非常显著低于进展组和无改变组(P<0.01)。本文研究结果证明,NSEMcAb双位点夹心ELISA具有灵敏、特异和简便快速的特点,对SCLC的血清学诊断有较高的灵敏度和特异性,对SC 相似文献
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应用ELISA和滴金免疫测定法检测血清肌红蛋白 总被引:1,自引:0,他引:1
从人心肌提取肌红蛋白(myoglobin,Mb)抗原,制备抗Mb血清和单克隆抗体,在此基础上建立了检测血清Mb的ELISA和滴金免疫测定法(dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA)。ELISA法检测范围25~800ng/ml。批内CV<5%,批间CV<7%。健康男、女献血员各32例和74例老年人,血清Mb测定结果,参考值上限分别为55.40、50.67和65.75ng/ml。15例急性心肌梗塞(AMI)患者血清Mb含量均大于130ng/ml.滴金免疫测定法可在5min内完成检测,Mb含量>100ng/ml为阳性。7例AMI患者检测结果均为阳性。两种方法结合应用对AMI的早期诊断及疗效观察极有价值。 相似文献
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人促甲状腺激素(hTSH)ELISA的建立 总被引:2,自引:2,他引:2
采用抗hTSH单抗8E7包被聚苯乙烯40孔板作为固相抗体,另用高滴度的兔抗hTSH多抗作液相抗体,以辣根过氧化物酶标羊抗兔IgG作为标记第二抗体为反应的显示系统,以邻苯二胺作底物,450nM吸收值计算hTSH浓度,建立了高灵敏度的hTSH酶免吸附测定法(ELISA)。灵敏度为0.03mIU/L。批内CV1.4~6.7%平均5.4%(n=20)批间CV为7.0%。方法特异性鉴定显示与其他糖蛋白激素无明显的交叉反应性。添加回收及稀释度试验鉴定均表明方法重复性、准确性、线性相关都符合临床应用标准。应用本法与瑞士Serono公司出品的酶免磁颗粒分离药盒同时测定130例,相关系数为0.93。 相似文献
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血清中丙型肝炎NS3抗原ELISA检测方法的建立和初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 评价血清中丙型肝炎病毒(HCV)游离NS3抗原的酶联免疫吸附(ELISA)检测方法的特异性和灵敏度,初步探讨该方法在临床应用中的意义.方法 对77例正常人血清标本,173例抗-HCV阳性标本和3708例抗-HCV阴性的其他类型肝炎血清标本检测HCV游离NS3抗原;对部分HCV NS3抗原阳性标本进行验证,包括HCV RNA测定、中和试验和免疫斑点试验;对11例患者的25份系列血清标本进行了HCV游离NS3抗原、HCV RNA和HCV抗体的联合检测,并结合临床资料综合分析.结果 3708例抗-HCV阴性的其他类型肝炎血清标本中有48例为HCV NS3抗原阳性,其中3030例单纯乙型肝炎和445例其他类型肝炎血清标本中分别有44例和4例为HCV NS3抗原阳性;173例HCV抗体阳性标本中有42例为HCV NS3抗原阳性;77例正常人血清标本的HCV NS3抗原检测结果均为阴性;15例HCV NS3抗原阳性标本中有9例为HCV RNA阳性;23例HCV NS3抗原阳性标本的中和率和免疫斑点试验的阳性率分别为87.0%和69.6%;25份系列血清标本的检测结果显示其HCV NS3抗原的吸光度值与时间呈负相关,并有2例HCV NS3抗原阳性标本随着血清中HCV NS3抗原的吸光度值下降,其HCV抗体转阳.结论 血清中HCV游离NS3抗原的ELISA检测方法有较好的特异性和敏感度,在发展中国家应用此方法进行HCV感染的早期诊断有一定的临床意义和推广价值. 相似文献
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建立的前列腺特异抗原(PSA)化学发光免疫分析(CLIA)使用2株抗PSAMcAb,一株McAb包被微孔板,另一株McAb与HRP连接。底物是鲁米诺/H2O2/对碘苯酚系统的双抗体夹心一步法,测定范围0.5~64ng/mL,最低检出值为0.13ng/mL,平均回收率为100.6%,批内和批间CV分别小于8.3%和11.5%,正常参考值小于3.5ng/mL。1000份血清临床考核,与参比试剂盒临床符合率一致,具有同等的临床诊断价值。 相似文献