血管内皮生长因子的研究进展

在某些生理过程，如胚胎发育、卵巢周期、伤口愈合和缺血组织的修复，可出现新生血管的形成；而在某些病理过程，血管生成也是必不可少的环节，如类风湿性关节炎、银屑病糖尿病性视网膜病以及实体瘤的生长和转移[1].以往认为，出生后的血管生成（angiogenesis）与胚胎发育过程中的血管发生（vasculogenesis）是两个互相区别的过程：前者是通过分化完全的血管内皮细胞从业已存在的血管中增殖、迁徙和重塑而成；后者是指由中心包含造血于细胞、周边分布成血管细胞（angioblast）的血岛发育而成[1]。但近来的研究发现：出生后的血管生成（包括…     

大鼠心肌缺血后心肌血管内皮生长因子的表达变化

冠心病的基本病理改变为心肌缺血,而怎样改善心肌缺血是治疗冠心病的重点和难点。近年来随着介入技术的发展,冠心病的治疗有了质的突破。但PTCA术及支架术后再狭窄率达20%以上,且再狭窄后难以治疗。因此寻找促进冠状动脉侧支循环的建立,进而改善心肌缺血的方法已成为治疗冠心病的研究热点。血管内皮生长因子(vascular endothe- lial growth factor,VEGF)是内皮特异性的促有丝分裂原,可以促进血管的生长,对心肌缺血具有治疗作用,它为改善心肌缺血后的血液循环开辟了新的途径。本研究通过制作大鼠心肌缺血模型观察VEGF的表达,旨在探讨心肌缺血与VEGF表达的关系,为临床应用VEGF促进血管新生,治疗心肌缺血提供证据。     

自发性高血压大鼠心肌间质胶原的扫描电镜观察

目的 探讨自发性高血压大鼠(SHR)心肌间质胶原的形态变化及对心功能的影响。方法 取左心室壁，经四氧化锇细胞浸渍和氢氧化钠细胞浸渍方法处理，在扫描电镜下观察。结果 正常大鼠(WKY)心肌细胞周围主要存在有粗细两种胶原纤维并互相交织成网。在自发性高血压大鼠，粗纤维呈腱样增宽增厚，在心肌细胞周围排列呈栅栏状；胶原网变得致密，在血管周围呈毡片样增厚。结论 高血压心肌肥厚时，心肌胶原粗纤维的变化可能是心壁僵硬度改变的主要原因，胶原网的形态变化可能影响心肌细胞功能。     

血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜癌中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体fms样酪氨酸受体-1 (flt-1)和含插入区的激酶受体(KDR)在子宫内膜癌血管生成中的作用及其与内膜癌分化程度的关系.方法采用免疫组织化学及原位杂交方法对23例子宫内膜癌及6例正常绝经期子宫内膜中VEGF、flt-1、KDR蛋白质及其mRNA进行检测,并对少数病例行Western印迹分析,以检测VEGF亚型在内膜癌组织的分布,用内皮细胞标志Ⅷ因子标记内膜癌组织中的微血管密度.结果 VEGF、flt-1、KDR蛋白质及其mRNA主要分布在子宫内膜癌组织血管内皮细胞及癌细胞胞质内.VEGF蛋白质在中分化(G2)、低分化(G3)内膜癌血管内皮细胞及癌细胞上的表达高于高分化内膜癌(G1)及正常绝经期子宫内膜(P<0.05), VEGF mRNA在不同分化程度内膜癌组织的表达差异无显著性意义(P>0.05),但均大于正常绝经期子宫内膜(P<0.05);flt-1蛋白质及flt-1mRNA在G3内膜癌血管内皮细胞的表达高于G1、G2及正常绝经期子宫内膜(P<0.05),在癌细胞的表达差异无显著性意义(P>0.05) ,但均高于正常绝经期子宫内膜(P<0.05);KDR蛋白质在子宫内膜癌组织血管内皮细胞及癌细胞上的表达较强,但不随分化程度发生变化,其mRNA在中分化(G2)、低分化(G3)内膜癌血管内皮细胞及癌细胞上的表达高于正常绝经期子宫内膜(P<0.05).G3子宫内膜癌组织的血管密度(48个±12个)高于G1(27个±14个)、G2(26个±16个)及正常绝经期子宫内膜(26个±11个,P<0.05).结论 VEGF、flt-1、KDR及mRNA在子宫内膜癌中的表达形式提示其与癌组织血管生成及血管通透性相关,VEGF及其受体是与子宫内膜癌旺盛生长相关的因子之一.     

葛根素对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响及其机制

 目的：观察葛根素对自发性高血压大鼠（SHR）心肌局部血管紧张素II (Ang II)、巨噬细胞及心肌组织形态学的影响,探讨其保护心肌的可能机制。方法：35只12周龄SHR随机分为葛根素高、中、低剂量组（100 mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg,腹腔注射）、卡托普利组（30 mg/kg灌胃）和SHR对照组（生理盐水腹腔注射）。另设WKY空白对照组（生理盐水腹腔注射）。每组7只,给药6周。给药6周后麻醉下迅速处死取出心脏,称量左心室湿重后,备做Masson染色、组织匀浆和RT-PCR。结果：与WKY大鼠相比,SHR左室质量指数增高（P<0.01）,心肌组织Ang II含量上升（P<0.01）,单核细胞趋化蛋白1 （MCP-1）和蛋白酶激活受体2（PAR2） mRNA表达增加（P<0.01）,巨噬细胞浸润明显（P<0.01）,间质纤维化严重（P<0.01）。高剂量葛根素和卡托普利明显降低左室质量指数（P<0.01）,降低心肌Ang II含量（P<0.01）,下调MCP-1和PAR2 mRNA表达（P<0.01）,减少巨噬细胞浸润（P<0.01或P<0.05）,减轻心肌间质纤维化（P<0.01）。结论:葛根素具有治疗自发性高血压大鼠心肌纤维化作用,其机制可能与降低心肌局部Ang II含量、下调MCP-1和PAR-2 mRNA表达及减少巨噬细胞浸润有关。     

牛磺酸对自发性高血压大鼠心肌,血管组织肾素血管紧张素系…

本实验在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）观察了牛磺酸对血压、心肌和主动脉组织肾素血管紧张素系统（ＲＡＳ）的影响。结果表明，ＳＨＲ心肌、主动脉血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）含量和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性均显著升高，牛磺酸能明显降低ＳＨＲ心肌、主动脉ＡＴⅡ含量和ＡＣＥ活性，并显著降低大鼠血压。提示，牛碘酸抑制心血管组织局部ＲＡＳ功能可能是其发挥降压作用的主要机制。     

自发性高血压大鼠的微血管改变及其与血管内皮细胞损伤的关系

目的：探讨自发性高血压大鼠（SHR）的微血管改变与血管内皮细胞（VEC）损伤的关系。方法：以10只成年Wistar－Kyoto大鼠（WKY）为正常对照组（WKY组）。观察、计数10只成年SHR的肠壁微动脉管径和分支数，同时测定血浆亚硝酸根（NO2－）和内皮素（ET）并与WKY组对照。结果：SHR组的肠壁各级微动脉管径较WKY组变细（P＜0．01～0．001）、各级微动脉总条数较WKY组减少（P＜0．001～0．0001）；SHR组的血浆NO2-水平和K值［10g（NO2－／ET）」较WKY组低（P＜0．05～0．001），而ET较WKY组高（P＜0．05）。血压和K值分别与肠壁微动脉管径和条数呈负相关和正相关（P＜0．005～0．001）。结论：高血压的微血管结构异常与VEC损伤有密切的关系。     

血管内皮生长因子在风湿病中的研究进展

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)又叫血管渗透因子(vascular permeability factor,VPF)是一种特异性的促进血管内皮细胞增殖、维持血管内皮细胞分化状态、提高微血管通透性的细胞因子。作为血管新生需要诱导剂的VEGF,其与风湿病的关系近年来备受关注。本就VEGF生物学特性及其与风湿病的研究进展作一综述。     

牛磺酸对自发性高血压大鼠心肌、血管组织肾素血管紧张素系统的影响

本实验在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）观察了牛磺酸对血压、心肌和主动脉组织肾素血管紧张素系统（ＲＡＳ）的影响。结果表明，ＳＨＲ心肌、主动脉血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）含量和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性均显著升高，牛磺酸能明显降低ＳＨＲ心肌、主动脉ＡＴⅡ含量和ＡＣＥ活性，并显著降低大鼠血压。提示，牛磺酸抑制心血管组织局部ＲＡＳ功能可能是其发挥降压作用的主要机制。     

缺血低氧对大鼠心肌产生血管内皮生长因子的影响及其意义

目的:了解缺血低氧刺激与大鼠心肌血管内皮生长因子(VEGF)产生的关系、意义及其可能机制。方法:1.建立Wistar大鼠急性心肌梗塞模型,将28只大鼠随机分为4组,每组7只:A组正常对照;B组急性心肌梗塞1d;C组急性心肌梗塞3d;D组急性心肌梗塞7d。心肌冰冻切片,免疫组化探测VEGF。2.原代培养大鼠心肌细胞随机分组:单纯缺氧组,A:缺氧培养0h;B:缺氧培养6h;C:缺氧培养12h;D:缺氧培养24h;蛋白激酶C(PKC)激动剂波佛酯(PMA)组,A:加入PMA0ng/mL;B:加入PMA10ng/mL;C:加入PMA100ng/mL;D:加入PMA1000ng/mL;均缺氧培养24h;PKC抑制剂chelerythrine(CT)组,A:加入CT0nmol/L;B:加入CT10nmol/L;均缺氧培养24h。免疫组化测定培养心肌细胞中血管内皮生长因子(VEGF),经计算机扫描,图像分析定量。结果:随缺血低氧时间延长,心肌产生VEGF增加,与对照组比较各组均有显著差异,缺血低氧时间与VEGF产生量呈正相关。不同剂量PMA与chelerythrine分别增强及减弱VEGF在缺氧心肌细胞中的表达。结论:缺血低氧强烈刺激心肌产生血管内皮生长因子,缺血心肌通过分泌VEGF对自身具有重要的保护意义。其信号转导途径部分是通过PKC通路实现的。     

血管内皮生长因子在尾悬吊模拟失重大鼠肺组织中表达的研究

目的：研究尾悬吊模拟失重大鼠肺组织血管内皮生长因子的变化。方法：采用尾悬吊模拟失重，分为悬吊7 d和21 d及相应对照4组，每组10只健康雄性SD大鼠，共40只大鼠。并采用免疫组织化学技术检测肺组织的血管内皮生长因子表达情况。结果：7 d尾悬吊模拟失重大鼠肺组织血管内皮生长因子的表达水平明显高于正常对照组（P<0.05），且21 d悬吊组模拟失重大鼠肺组织血管内皮生长因子的表达水平仍较高（P<0.05），但增高程度已明显低于7 d悬吊组。结论：在模拟失重条件下肺组织血管内皮生长因子的表达水平增高，并且随着时间延长增高程度会有所降低.     

急性心肌梗死大鼠血清血管内皮生长因子含量的变化

目的和方法 :探讨急性心肌梗死大鼠模型血清血管内皮生长因子 (VEGF)含量的变化及其意义。 88只雄性SD大鼠 ,其中 80只结扎左冠状动脉导致心肌梗死 ,8只开胸但不结扎冠状动脉作对照组。于心肌梗死后 1h ,3h ,6h ,12h ,2 4h和 2d ,3d ,5d ,7d ,14d分别从右心房抽取血样品 (n =8)。用敏感、特异的酶连接免疫吸附测定法测定血清样品中的VEGF含量。结果 :8只假手术对照鼠的血清VEGF浓度为 (6 6 99± 17 83)pg/mL。心肌梗死后 6h组血清VEGF水平达到 (12 5 6 8± 2 8 0 7)pg/mL(与对照组比P <0 0 1) ,结扎后 2 4h组达高峰 (2 40 6 1± 70 6 3pg/mL ,与对照组比P <0 0 1) ,然后逐渐下降 ,但术后 14d组仍显著高于对照组 (10 7 6 4±30 13pg/mL ,P <0 0 1)。结论 :心肌梗死大鼠血清VEGF水平持续显著升高 ,可能对心肌梗死后的血管生成起重要作用     

NK4基因在人胰腺癌细胞中的表达及其对血管内皮生长的影响

目的:构建NK4基因真核表达载体并进行转染研究。方法:对重组质粒pcDNA3/hNK4进行酶切,将目的基因NK4克隆到较强的真核表达载体pRC/CMV2中,应用脂质体将NK4基因转染到胰腺癌细胞株SW1990中,G418筛选获得稳定表达克隆,采用RT-PCR及Western blot鉴定及筛选出高转录和高表达的细胞克隆。以MTT法检测转染重组质粒pRC/CMV2-hNK4的细胞克隆表达产物对血管内皮细胞生长的影响。结果:在转染NK4基因的SW1990细胞克隆中,RT-PCR能扩增出NK4 mRNA预期的453bp片段,但强弱不同,Western blot显示均有约50 kD的NK4蛋白的表达。其上清可显著抑制血管内皮细胞的生长。结论:重组质粒pRC／CMV2-hNK4是一种高效真核表达载体,并且能够在SW1990细胞中高表达;NK4能够抑制血管内皮细胞的生长,提示其在肿瘤基因治疗中可能具有重要意义。     

不同年龄高血压大鼠血管平滑肌中ERK和MKP-1的表达

目的：研究不同年龄的自发性高血压大鼠（SHR）和Wistar Kyoto大鼠（WKY）主动脉平滑肌中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）及其磷酸酶（MKP-1）的表达及其与高血压的关系。 方法： 用tail-cuff测量大鼠尾动脉血压；分别用Western blotting法和RT-PCR法半定量测定血管平滑肌中磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）和MKP-1的蛋白表达以及MKP-1 mRNA的含量。 结果： （1）SHR的血压自8周龄起明显高于WKY（P<0.01），且随年龄增长而升高（P<0.05）至14周以后趋于稳定；（2）SHR主动脉平滑肌中的p-ERK表达明显高于同年龄的WKY（P<0.01），随年龄增长而递增（P<0.05），与血压呈正相关；（3）SHR主动脉平滑肌中MKP-1蛋白明显高于同龄WKY，而mRNA的表达在5周龄时明显高于WKY，之后均随年龄的增长而递减（P<0.05），与血压和ERK呈负相关，而WKY下降不明显。 结论： MKP-1在高血压的发生和发展过程中起重要作用，其表达逐渐下降可能是导致ERK激活增加，从而导致血管平滑肌细胞增殖、血压升高的重要原因。     

血管内皮生长因子拮抗H2O2诱导的血管内皮细胞凋亡

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）预防血管成形术后再狭窄的机制。方法：构件含人VEGF₁₆₅基因的重组腺病毒载体并感染体外培养的血管平滑肌细胞，72 h后收集含VEGF的条件培养液，将对数生长期的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分成对照组、H₂O₂处理组和H₂O₂+VEGF处理组，12 h后采用原位末端标记法和流式细胞术检测各组细胞的凋亡发生情况。结果：H₂O₂处理组细胞凋亡明显多于对照组和H₂O₂+VEGF处理组（P<0.01）。结论：H₂O₂能诱导HUVEC凋亡，而VEGF能部分拮抗上述作用。     

Vascular endothelial growth factor gene polymorphisms in spontaneously aborted fetuses

Citation Jeon YJ, Kim JH, Rah HC, Kim SY, Yoon TK, Choi DH, Cha SH, Shim SH, Kim NK. Vascular endothelial growth factor gene polymorphisms in spontaneously aborted fetuses. Am J Reprod Immunol 2011; 66: 544–553 Problems The VEGF?1154G>A polymorphism has been reported to be a genetic risk factor for recurrent spontaneous abortion in various studies; however, these studies have focused on genetic analyses of pregnant women rather than aborted fetuses. To evaluate and confirm the association between the VEGF?1154G>A polymorphism and spontaneous abortion, we focused on the relationship between four polymorphisms in the VEGF gene (?2578C>A, ?1154G>A, ?634G>C, and 936C>T) and spontaneously aborted fetuses (SAFs). Method of study The subjects included 118 SAFs at <20 weeks gestation and 380 normal controls consisting of children and adults. The polymorphisms were genotyped by polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism analysis. Results Spontaneously aborted fetuses exhibited significantly different frequencies of the ?2578CA+AA/?634CC and ?1154GA+AA/?634CC combined genotypes compared with control subjects. The frequency of the ?2578A/?1154A/?634C/936C haplotype was significantly higher in SAFs. Conclusions VEGF genes ?2578CA+AA/?634CC and ?1154GA+AA/?634CC in the fetus are possible risk factors for spontaneous abortion.     

血浆VEGF水平在维吾尔族妇女子宫内膜癌中表达及意义

目的探索血浆血管内皮生长因子（VEGF）在子宫内膜癌中的表达。方法收集新疆地区50例维吾尔族子宫内膜样腺癌患者血浆,收集40例健康维吾尔族妇女血浆为正常对照。用酶联免疫法测血浆VEGF含量,分析子宫内膜癌同血管内皮生长因子的相关性。分析子宫内膜癌各临床分期及分化程度血浆VEGF的变化状况。结果子宫内膜样腺癌血浆VEGF水平同正常对照血浆相比差异有统计学意义（P〈0．01）;晚期（Ⅲ期、Ⅳ期）子宫内膜样腺癌血浆VEGF增高的水平与早期（Ⅰ期、Ⅱ期）子宫内膜样腺癌相比差异有统计学意义（P〈0．01）,在不同分化程度的子宫内膜样腺癌中,随着分化程度的加重,血浆VEGF水平增高,各组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论子宫内膜癌与血浆VEGF水平增高相关,血浆VEGF水平与临床分期、分化程度相关,临床分期晚的和分化程度低的血浆VEGF水平增高更加明显。     

胰岛素对自发型高血压大鼠血管平滑肌细胞TGF β及其受体的调节作用

目的:从细胞增生、转化生长因子β₁和受体表达等方面,探讨胰岛素对自发型高血压大鼠血管平滑肌细胞(SHR VSMC)和正常血压Wista-Kyoto大鼠血管平滑肌细胞(WKY VSMC)的影响异同。方法:采用组织移植法培养SHR和WKY大鼠胸主动脉VSMC|用细胞计数仪和流式细胞仪分别检测细胞增生情况|TGF β及其受体的mRNA水平利用定量RT-PCR技术进行检测。结果:(1)胰岛素加强SHR VSMC的增生,而不影响WKY VSMC的增生。胰岛素加强SHR VSMC的增生,且呈剂量依赖方式(2)以20%小牛血清培养基培养VSMC, SHR VSMC的S期百分率为31.44%,而WKY VSMC的S期百分率仅为19.86%|以2%小牛血清培养基培养VSMC,SHR VSMC的G₀／G₁和S期百分率分别为73.23%和9.35%,加入胰岛素后,SHR VSMC的G₀／G₁降低为67.58%,S期百分率则增加到15.64%。但是,加入胰岛素前后,WKY VSMC各期百分率无明显变化|(3)RT-PCR分析结果表明,生长静止的SHR VSMC和WKY VSMC均有TGF β₁、Ⅰ型和Ⅱ型TGF β受体的表达,但SHR VSMC的TGFβ₁、Ⅰ型TGF β受体的表达量高于WKY VSMC的TGF β₁、Ⅰ型TGF β受体的表达量,胰岛素加强了WKY VSMC的TGF β₁、Ⅰ型TGF β受体的表达(P＜0.01和P＜0.05),而削弱了SHR VSMC相应分子的表达(P＜0.01和P＜0.05),胰岛素不影响二株系大鼠VSMC Ⅱ型TGF β受体的表达(P＜0.05)。结论:胰岛素对SHR VSMC和WKY VSMC的TGF β和它的受体表达具有不同的调节作用,这种异常调节作用可能和胰岛素加强SHR VSMC的增生密切相关。     

大鼠压力负荷性肥大心肌中TNF-α mRNA表达变化

目的：探讨大鼠压力负荷性肥大心肌中TNF-α mRNA表达的变化及卡托普利（captopril）对其的影响。方法：采用腹主动脉缩窄法复制压力超负荷心肌肥大模型，于术后42 d采血、摘取心脏，测定心肌肥大指数并采用酶联免疫法测定血清及左心室肌TNF-α含量；应用心肌原位杂交法结合图像分析系统检测心肌组织中TNF-α mRNA表达的变化，并观测TNF-α mRNA在心肌组织中的定位。结果：术后42 d心肌明显肥大，以左心室为主；主动脉缩窄（aorta-constriction, AC）组心室肌TNF-α含量比假手术（sham-operation, SO）组高98%（P<0.01）；卡托普利干预使心室肌TNF-α含量比AC组低64.14%（P<0.01），但未达到对照水平；心肌组织原位杂交显示TNF-α mRNA表达主要在心肌间质部位，假手术组心肌TNF-α mRNA表达水平极低，明显低于AC术后（P<0.01），captopril干预虽明显抑制AC术后心肌组织中TNF-α mRNA表达，但并未使其达到SO组水平。结论：心肌组织内源性TNF-α的表达增加在压力负荷性心肌肥大中具有重要的调控作用，其过表达可能与RAS激活促心肌间质TNF-α mRNA表达上调有关。